导读:本文包含了齐口裂腹鱼生长激素论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:齐口裂腹鱼,生长激素基因,克隆
齐口裂腹鱼生长激素论文文献综述
林涛,吴蓉,龚文波,颜其贵,秦道国[1](2009)在《齐口裂腹鱼生长激素基因cDNA克隆与序列分析》一文中研究指出鱼类生长激素是一种单一肽链蛋白激素,主要作用是促进机体的生长。采用RT-PCR方法,首次从齐口裂腹鱼(Schizothorax prenanti)脑垂体总RNA中克隆出生长激素(growth hormone,GH)cDNA的开放阅读框ORF(open reading frame)序列,全长633bp。经DNA Star软件分析,该基因编码210个氨基酸,分子量为23.55kD,等电点为5.46,含有1个疏水区和1个N-糖基化位点。空间结构含有4个α螺旋和4个β折叠,形成2个二硫键。序列比较发现,齐口裂腹鱼GH与草鱼、鲤的GH同源性分别为99.8%、99.4%;与黄鳝、花鲈和大黄鱼的GH同源性分别为57.4%、63.5%和64.2%。(本文来源于《水生态学杂志》期刊2009年04期)
林涛[2](2008)在《齐口裂腹鱼生长激素基因的克隆、原核表达及生物活性初步研究》一文中研究指出本研究选用齐口裂腹鱼(Schizothorax prenanti)作为实验材料,从齐口裂腹鱼脑垂体中提取总RNA。设计合成了一对齐口裂腹鱼生长激素基因的特异性引物,上游引物加入EcoRⅠ酶切位点;下游引物加入XholⅠ酶切位点。应用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术克隆得到编码齐口裂腹鱼生长激素(SGH)基因的cDNA,并定向克隆到pMD18-T载体上。正反向测序结果分析表明:克隆的齐口裂腹鱼生长激素基因cDNA全长633bp,包含完整的开放阅读框(ORF),编码210个氨基酸。生物信息学分析结果表明其分子量为23.55KD,等电点为5.46;疏水氨基酸占36.7%,亲水氨基酸占28.57%,碱性氨基酸占10.47%,酸性氨基酸占12.38%。将得到的序列在GenBank和EMBL数据库中进行了同源比较,结果显示:本研究克隆到的齐口裂腹鱼GH基因与GenBank中登记的其他鲤科鱼类的生长激素基因的同源性在92%-97%之间,影响蛋白质高级结构的保守二硫键为2个。将齐口裂腹鱼生长激素成熟肽(mSGH)基因片段定向插入融合表达载体pET-32a(+)质粒中,转化大肠杆菌BL21,用PCR方法筛选阳性克隆;以XholⅠ和EcoRⅠ酶切鉴定重组质粒。以IPTG诱导融合蛋白表达,SDS-PAGE分析表明mSGH以融合蛋白的形式得到了表达,分子量约为41KD,与预期的大小一致。融合蛋白表达量占菌体总蛋白量的42.6%。证明所构建的齐口裂腹鱼GH的重组质粒能高效表达,命名为pET-mSGH。通过投喂齐口裂腹鱼幼鱼实验结果表明:实验组幼鱼食量明显增强,体重和体长的增长率分别比对照组高20.82%和17.35%,证明该蛋白具有生物活性。为进一步开展齐口裂腹鱼生长激素的应用、真核表达研究及研制新型调节鱼类生长的基因制剂的应用奠定了的基础。(本文来源于《四川农业大学》期刊2008-06-01)
林涛,颜其贵,冯迎春,冯婷[3](2008)在《齐口裂腹鱼生长激素成熟肽基因的克隆和原核表达研究》一文中研究指出运用 RT-PCR 技术,首次从齐口裂腹鱼(Schizthorax prenanti)脑垂体扩增出生长激素(growth hormone,GH)完整开放阅读框(ORF),共633 bp,编码210 aa。分子进化分析表明其与草鱼和鲤鱼 GH 的进化关系较近,而与人类的 GH 基因进化距离较远。运用 PCR 技术从含齐口裂腹鱼 GH 开放阅读框序列质粒中扩增其成熟蛋白编码基因,共564 bp。将其定向克隆于原核表达载体 pET-32a(+) 后在 E.coli BL21中诱导表达,SDS-PAGE 结果显示表达的融合蛋白约为41 kD,重组蛋白以包涵体形式表达,表达产物约占菌体总蛋白的42.6%。齐口裂腹鱼 GH 成熟肽成功在体外获得高效表达,为齐口裂腹鱼的保护积累了一定理论依据。(本文来源于《第四届第九次全国学术研讨会暨饲料和动物源食品安全战略论坛论文集(下册)》期刊2008-04-01)
齐口裂腹鱼生长激素论文开题报告
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
本研究选用齐口裂腹鱼(Schizothorax prenanti)作为实验材料,从齐口裂腹鱼脑垂体中提取总RNA。设计合成了一对齐口裂腹鱼生长激素基因的特异性引物,上游引物加入EcoRⅠ酶切位点;下游引物加入XholⅠ酶切位点。应用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术克隆得到编码齐口裂腹鱼生长激素(SGH)基因的cDNA,并定向克隆到pMD18-T载体上。正反向测序结果分析表明:克隆的齐口裂腹鱼生长激素基因cDNA全长633bp,包含完整的开放阅读框(ORF),编码210个氨基酸。生物信息学分析结果表明其分子量为23.55KD,等电点为5.46;疏水氨基酸占36.7%,亲水氨基酸占28.57%,碱性氨基酸占10.47%,酸性氨基酸占12.38%。将得到的序列在GenBank和EMBL数据库中进行了同源比较,结果显示:本研究克隆到的齐口裂腹鱼GH基因与GenBank中登记的其他鲤科鱼类的生长激素基因的同源性在92%-97%之间,影响蛋白质高级结构的保守二硫键为2个。将齐口裂腹鱼生长激素成熟肽(mSGH)基因片段定向插入融合表达载体pET-32a(+)质粒中,转化大肠杆菌BL21,用PCR方法筛选阳性克隆;以XholⅠ和EcoRⅠ酶切鉴定重组质粒。以IPTG诱导融合蛋白表达,SDS-PAGE分析表明mSGH以融合蛋白的形式得到了表达,分子量约为41KD,与预期的大小一致。融合蛋白表达量占菌体总蛋白量的42.6%。证明所构建的齐口裂腹鱼GH的重组质粒能高效表达,命名为pET-mSGH。通过投喂齐口裂腹鱼幼鱼实验结果表明:实验组幼鱼食量明显增强,体重和体长的增长率分别比对照组高20.82%和17.35%,证明该蛋白具有生物活性。为进一步开展齐口裂腹鱼生长激素的应用、真核表达研究及研制新型调节鱼类生长的基因制剂的应用奠定了的基础。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
齐口裂腹鱼生长激素论文参考文献
[1].林涛,吴蓉,龚文波,颜其贵,秦道国.齐口裂腹鱼生长激素基因cDNA克隆与序列分析[J].水生态学杂志.2009
[2].林涛.齐口裂腹鱼生长激素基因的克隆、原核表达及生物活性初步研究[D].四川农业大学.2008
[3].林涛,颜其贵,冯迎春,冯婷.齐口裂腹鱼生长激素成熟肽基因的克隆和原核表达研究[C].第四届第九次全国学术研讨会暨饲料和动物源食品安全战略论坛论文集(下册).2008