导读:本文包含了皂苷糖苷酶型论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:人参皂苷,糖苷酶,稀有人参皂苷
皂苷糖苷酶型论文文献综述
刘文山,李振伟,傅荣昭[1]（2019）在《糖苷酶在人参皂苷转化中的应用》一文中研究指出人参皂苷是人参中的主要活性成分。人参皂苷中含量较高的主要成分如Rb1、Rb2、Rc、Rd、Rg1和Re均是在人参皂苷的苷元原人参二醇(APPD)或苷元原人参叁醇(APPT)上加上不同数量的葡萄糖基、阿拉伯糖基、木糖基或鼠李糖基等糖基形成的。这些主要人参皂苷脱去部分或全部的糖基的产物具有更强的生物活性及更好的人体吸收率。去除糖基的产物如Rg3、Rh2、化合物K(C-K)、F2、Rh1、Rg1、APPD、APPT在天然人参中不存在或含量极低,因此也被称为稀有人参皂苷。稀有人参皂苷可以通过糖苷酶水解主要人参皂苷获得。已报道的具备人参皂苷水解活力的糖苷酶有β-葡萄糖苷酶、α-L-阿拉伯吡喃糖苷酶、α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶、β-半乳糖苷酶及β-木糖苷酶。我们简要综述近5年来糖苷酶用于制备稀有人参皂苷的研究进展。(本文来源于《生物技术通讯》期刊2019年04期）
王维娜[2]（2016）在《黑曲霉848糖苷酶的分离纯化及刺五加皂苷的酶催化转化》一文中研究指出刺五加是我国传统的中药材之一,具有较为广泛的药理作用及临床应用价值,其根茎在医学上有悠久的药用历史。近年来,由于刺五加叶含有皂苷、多糖和黄酮等与根茎相同的活性成分,已作为刺五加根茎的代用品得到了广泛应用,尤其是刺五加叶中含有的皂苷类物质具有诸多生理活性引起了广泛的研究与开发,本文着重对其中一种单体皂苷进行探究。首先针对黑曲霉液态发酵所产糖苷酶的分离纯化工艺及其酶学性质进行研究。将黑曲霉液态发酵所产酶液,依次通过30%~70%硫酸铵盐析、膜透析和DEAE-Sepharose FF阴离子交换层析后得到高纯度糖苷酶。经SDS-PAGE凝胶电泳仅得到一条清晰条带,分子量约为65 kDa。经检测,纯化获得的糖苷酶比酶活力可达6932.54 U/mg,纯化倍数和酶活力回收率分别为13.82倍和13.30%。进一步研究发现,该酶的最适p H为4.5,最适温度为50 oC,且在20 oC~50 oC及pH 3.0~6.0范围内有良好的稳定性。同时,在一定浓度下,K+、Ca~(2+)和Na+对糖苷酶活性有促进作用,而Fe~(3+)、SDS和EDTA-Na2对其活性有明显的抑制作用。采用层析法对刺五加皂苷B及其酶解产物进行分析,结果表明,经纯化的糖苷酶对刺五加皂苷B的酶解转化效果显着,得到Rf值为0.32的产物;通过红外光谱、质谱手段对底物及产物的结构进行分析,根据结果推测,刺五加皂苷B经酶解作用可能水解掉C-28位糖链末端连接的α-1,4键的鼠李糖基,生成一种次生皂苷。对刺五加皂苷B及其酶解产物进行抗氧化活性分析,采用DPPH法和Fenton法进行测定,结果表明,酶解产生的次生皂苷与刺五加皂苷B相比,活性得到了一定的提高,可能与其结构发生改变有关。(本文来源于《大连工业大学》期刊2016-06-01）
林迪,金凤燮,鱼红闪[3]（2015）在《白头翁皂苷H3糖苷酶的分离纯化及酶性质》一文中研究指出对Absidiasp.P39r所产白头翁皂苷H3糖苷酶进行了分离纯化,得到了电泳纯的酶蛋白,并对其性质做了进一步研究。结果表明,该酶分子质量约为40ku;最适反应温度为40℃,最适反应pH为5.0;在pH 4.0~7.0,温度低于40℃条件下具有相对稳定的酶活力;金属离子Na+、K+、Mg2+对酶反应无显着影响,而Fe3+、Cu2+、Zn2+对其有较强的抑制作用;米氏常数为17.01mmol/L,最大反应速度为0.38mmol/(L·min)。(本文来源于《大连工业大学学报》期刊2015年06期）
靳晓明,尤玲玲,冯超,葛怀娜,刘金福[4]（2014）在《苦瓜皂苷提取物微胶囊化缓释性能及体外对糖苷酶活性影响研究》一文中研究指出以壳聚糖和海藻酸钠为壁材,采用锐孔凝固浴法制备苦瓜皂苷提取物微胶囊,并对其进行了缓释性能及在模拟胃肠酸碱环境中对α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶活性影响的研究。结果显示,微胶囊在体外模拟胃肠液中具有良好的缓释性能,在模拟胃液中苦瓜皂苷1h释放率为31.19%,2h累积释放率为52.14%,转至肠液中10h累积释放率达到81.20%;在模拟胃肠液中微胶囊对α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶均有一定的抑制作用,抑制率随着苦瓜皂苷释放量的增加有上升趋势。表明苦瓜皂苷经微胶囊化后能够保护其活性,缓解副作用和延长对糖苷酶的作用时间。(本文来源于《食品工业科技》期刊2014年16期）
梁朝宁,熊丹丹,张道军,金建明,唐双焱[5]（2013）在《改造β-糖苷酶合成稀有人参皂苷》一文中研究指出来自硫磺矿硫化叶菌(Sulfolobus solfataricus)的热稳性β-糖苷酶LacS属于糖苷水解酶家族GH1。其具有较宽泛的底物特异性,可水解β-半乳糖苷、葡萄糖苷、果糖苷等。近年有报道称该β-糖苷酶能够水解原人参二醇型皂苷Rb_1和Rb_2叁萜骨架上的糖基,生成稀有人参皂苷Compound K,但这种水解活性很低。人参皂苷是名贵中药材人参、叁七和西洋参等的主要活性成分。研究证明人参皂苷Compound K是原人参二醇型皂苷(如人参皂苷Rb_1,Rb_2,Rd等)经肠道菌群的降解作用后产生的在体内真正发挥药效作(本文来源于《第九届中国酶工程学术研讨会论文摘要集》期刊2013-11-14）
孙晓雨[6]（2013）在《糖苷酶转化人参皂苷研究进展》一文中研究指出人参皂苷为人参主要的药理活性组成部分,通过水解二醇系人参皂苷的糖苷配基是制备稀有人参皂的常用方法。酶法转化因其底物高度专一、条件温和、副产物少等潜在优势而被作为结构修饰和生理研究的主要技术手段。本文主要对糖苷酶转化人参皂苷研究进展进行了综述,为其工业化生产高活性皂苷提供理论依据。(本文来源于《生物技术世界》期刊2013年09期）
窦芳,汤海峰,奚苗苗,文爱东[7]（2013）在《13种太白楤木皂苷单体对α-葡糖苷酶和α-淀粉酶活性的影响》一文中研究指出目的:研究13种太白楤木皂苷单体对α-葡糖苷酶和α-淀粉酶的抑制作用。方法:通过体外模型试验测定13种太白楤木皂苷单体对α-葡糖苷酶和α-淀粉酶的抑制率。结果:皂苷单体4、12对α-葡糖苷酶的抑制作用较强,其半数抑制浓度(IC50)分别为(0.83±0.05)、(1.07±0.04)μmol/L;皂苷单体12对α-淀粉酶的抑制作用较强,其IC50为(1.02±0.03)μmol/L。结论:皂苷单体4、12对α-葡糖苷酶,皂苷单体12对α-淀粉酶均具有较好的抑制作用,可为后期试验提供一定参考。(本文来源于《中国药房》期刊2013年23期）
窦芳,汤海峰,奚苗苗,文爱东[8]（2013）在《11种中药总皂苷对α-葡糖苷酶和α-淀粉酶的抑制作用研究》一文中研究指出目的:研究11种常用于治疗2型糖尿病中药的总皂苷对α-葡糖苷酶和α-淀粉酶的抑制作用。方法:通过体外模型试验分别测定11种抗2型糖尿病中药总皂苷对α-葡糖苷酶和α-淀粉酶的抑制率,比较其抑制作用。结果:11种抗2型糖尿病中药总皂苷中,除太子参总皂苷、知母总皂苷对α-葡糖苷酶有活化作用,麦冬总皂苷对α-葡糖苷酶和α-淀粉酶均有活化作用外,其余中药总皂苷均对2种酶有抑制作用,且太白楤木总皂苷具有较强的α-葡糖苷酶和α-淀粉酶抑制作用,其抑制率分别为(67.86±0.62)%和(55.31±1.23)%。结论:太白楤木总皂苷对α-葡糖苷酶和α-淀粉酶具有良好的抑制作用。(本文来源于《中国药房》期刊2013年19期）
许晓冬[9]（2013）在《薯蓣皂苷糖苷酶蛋白翻译后修饰的研究》一文中研究指出本论文通过培养微生物得到糖基水解酶-薯蓣皂苷糖苷酶,用葡聚糖凝胶柱,离子交换柱将目的酶蛋白提纯,用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和高效液相色谱法对提纯的蛋白进行纯度检测和分子量鉴定,并对其酶性质和反应特异性做了研究;鉴定了其蛋白翻译后修饰形式为糖基化,并确定了薯蓣皂苷糖苷酶的糖基化修饰形式,最后分析了其糖基化位点,进一步为深入研究该酶的特异性水解机制提供理论基础。首先,利用 Sephadex G-75、DEAE-Cellulose DE52 柱对微生物Absidia sp.D00d 菌发酵产生的薯蓣皂苷糖苷酶进行分离提纯,用HPLC法和SDS-PAGE法对该酶进行了纯度检测,并测定了蛋白分子量为55kDa。其次对该酶的性质研究表明:其最适反应pH是5.0,pH稳定范围是3.0-7.0;最适反应温度是50℃,温度稳定范围为20-60℃。K+、Na+、Mg2+、Ca2+四种金属离子对薯蓣皂苷糖苷酶的酶活力均无影响;而Zn2+对薯蓣皂苷糖苷酶有一定的抑制作用,且随着离子浓度的增大,其抑制作用也增大;Cu2+和Fe3+离子则对薯蓣皂苷糖苷酶有明显的抑制作用,几乎完全抑制酶活力。最大反应速度 Vmax 为 3.49mmol/L·h,米氏常数 Km 为 4.13mmol/L。利用化学法,叁氟甲磺酸确定了薯蓣皂苷糖苷酶蛋白翻译后修饰形式为糖基化。采用生物法,利用肽N-糖苷酶F确定了其糖基化修饰形式为N-糖基化。通过电喷雾-四级杆-飞行时间串联质谱法检测表明,确定了其糖基化位点所在肽段,并采用串联质谱进一步分析其糖基化位点,结果表明其糖基化位点为N1EWYDWVGSLVSN2YSIDGLR中的N2。(本文来源于《大连工业大学》期刊2013-03-01）
刘廷强[10]（2013）在《原薯蓣皂苷糖苷酶-1型的特性及其基因的克隆与表达》一文中研究指出薯蓣属植物中的主要活性成分是甾体皂苷,但天然的甾体皂苷常常以低活性的多糖基形式存在,不易被人体吸收。为制备高活性的、易吸收的低糖基甾体皂苷,本文采用微生物酶法转化穿龙薯蓣中的甾体皂苷,并研究了其特异性的甾体皂苷糖苷酶的分离纯化、酶性质以及基因的克隆和表达。本研究首先采用乙醇浸提法对穿龙薯蓣植物中总皂苷进行提取,并对提取物进行脱脂、脱糖处理。从4kg穿龙薯蓣植物干燥根中共提取得到了250g的总皂苷,得率为6.3%。通过硅胶柱层析法和制备色谱法,从总皂苷中分离纯化得到了两种主要甾体皂苷,结构经鉴定分别为：26-0-p-D-吡喃葡萄糖基25(R)-22-羟基-呋甾-/△5(6)-烯-3β,26-二羟基-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)]-β-D-吡喃葡萄糖苷(原薯蓣皂苷),薯蓣皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)]-β-D-吡喃葡萄糖苷(薯蓣皂苷)。研究了甾体皂苷酶的生产菌,筛选获得了转化穿龙薯蓣总皂苷效果较好的米曲霉(DLFCC-38),其粗酶液几乎完全转化穿龙薯蓣总皂苷,主要生成薯蓣次皂苷A、纤细皂苷,以及一定量的薯蓣皂苷元。以薯蓣次皂苷A的产量为目标,对微生物发酵产酶的条件进行了优化,最佳条件为：最佳诱导物为穿龙薯蓣提取物,最佳诱导物浓度为2%(v/v),在30℃条件下发酵72h。其次,对酶转化的反应条件进行了优化,最佳酶反应条件为：反应温度为50℃,反应体系pH5.0,反应时间9h,反应体系中底物最终浓度20mg/ml。在此基础之上,米曲霉(DLFCC-38)大量发酵制备粗酶液,批量定向酶解制备低糖基甾体皂苷。总皂苷160g经酶转化后共制备得到产物粗品117g,产物经硅胶柱层析法分离纯化,得到3种单体皂苷成分,分别为：60.3g的薯蓣次皂苷A,得率为51.5%；纤细皂苷11.54g,得率为9.86%；3.01g的薯蓣皂苷元,得率为2.57%。采用分子筛层析法和离子交换层析法,对米曲霉(DLFCC-38)诱导产粗酶液进行分离纯化。经叁次柱法层析,分离得到了原薯蓣皂苷糖苷酶的纯酶。经SDS-PAGE法测定,该酶的分子量约为55kDa。酶反应的最适温度和pH分别为50℃和5.0,酶活力在60℃以下,pH为3.0-8.0范围内相对稳定。K+、Na+、Mg2+、Ca2+四种金属离子对酶活力几乎没有影响；Zn2+对酶活力具有一定的抑制作用；而低浓度的Cu2+和Fe3+对酶活力都有明显的抑制作用。纯化得到的原薯蓣甾体皂苷糖苷酶,能水解原薯蓣皂苷上的26-O-β-D-葡萄糖基生成薯蓣皂苷,然后进一步水解薯蓣皂苷的3-O-α-L-(1→4)-鼠李糖基生成薯蓣次皂苷A。该酶水解原薯蓣皂苷葡萄糖基的Km=4.59mM,Vmax=3.86mM/h,水解薯蓣皂苷鼠李糖基的Km=42.6mM,Vmax=0.15mM/h。此外,该酶还能水解对硝基苯基-α-D-半乳糖苷(pNP-α-D-Ga1)、对硝基苯基-β-D-葡萄糖苷(pNP-β-D-Glc)和对硝基苯基-β-D-半乳糖苷(pNP-β-D-Gal)。该酶呈现出新的水解特性,不同于国际酶学委员会公布的184种糖苷酶(一种糖苷酶只能水解一种糖苷键),也不同于其他已报道过的甾体皂苷糖苷酶,是一种新酶,将其命名为原薯蓣皂苷糖苷酶-1型(protodioscin-Glycosidase-1, PGase-1)。采用RT-PCR技术以及RACE技术,对原薯蓣皂苷酶-1型的基因全长序列进行调取。该酶基因全长为1725bp,包含一个1497bp的开放阅读框(ORF),编码498个氨基酸,N端前20个氨基酸序列为信号肽序列。通过亚克隆技术,将原薯蓣皂苷糖苷酶-1型基因重组至真核表达载体pPIC9K,并电转化至巴斯德毕赤酵母GS115。重组酵母菌诱导表达的酶液具有原薯蓣皂苷糖苷酶-1型的酶活力,且最佳诱导培养时间为144h、甲醇的最终浓度为0.5%。经SDS-PAGE分析,诱导表达酶的分子量约为55kDa,与野生型原薯蓣皂苷糖苷酶-1型的分子量55kDa相近。这说明原薯蓣皂苷糖苷酶-1型基因在毕赤酵母中成功的进行了异源表达。经序列相似性比较,发现原薯蓣皂苷糖苷酶-1型的基因与α-淀粉酶的基因序列有很高的相似性。基于两者序列的相似性,原薯蓣皂苷糖苷酶-1型应分在糖苷水解酶家族GH13(Glycoside Hydrolase Family13)中；但是两者具有完全不同的水解特性。因此,酶蛋白的基因序列不能完全代表酶的特性。(本文来源于《延边大学》期刊2013-02-25）
皂苷糖苷酶型论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
刺五加是我国传统的中药材之一,具有较为广泛的药理作用及临床应用价值,其根茎在医学上有悠久的药用历史。近年来,由于刺五加叶含有皂苷、多糖和黄酮等与根茎相同的活性成分,已作为刺五加根茎的代用品得到了广泛应用,尤其是刺五加叶中含有的皂苷类物质具有诸多生理活性引起了广泛的研究与开发,本文着重对其中一种单体皂苷进行探究。首先针对黑曲霉液态发酵所产糖苷酶的分离纯化工艺及其酶学性质进行研究。将黑曲霉液态发酵所产酶液,依次通过30%~70%硫酸铵盐析、膜透析和DEAE-Sepharose FF阴离子交换层析后得到高纯度糖苷酶。经SDS-PAGE凝胶电泳仅得到一条清晰条带,分子量约为65 kDa。经检测,纯化获得的糖苷酶比酶活力可达6932.54 U/mg,纯化倍数和酶活力回收率分别为13.82倍和13.30%。进一步研究发现,该酶的最适p H为4.5,最适温度为50 oC,且在20 oC~50 oC及pH 3.0~6.0范围内有良好的稳定性。同时,在一定浓度下,K+、Ca~(2+)和Na+对糖苷酶活性有促进作用,而Fe~(3+)、SDS和EDTA-Na2对其活性有明显的抑制作用。采用层析法对刺五加皂苷B及其酶解产物进行分析,结果表明,经纯化的糖苷酶对刺五加皂苷B的酶解转化效果显着,得到Rf值为0.32的产物;通过红外光谱、质谱手段对底物及产物的结构进行分析,根据结果推测,刺五加皂苷B经酶解作用可能水解掉C-28位糖链末端连接的α-1,4键的鼠李糖基,生成一种次生皂苷。对刺五加皂苷B及其酶解产物进行抗氧化活性分析,采用DPPH法和Fenton法进行测定,结果表明,酶解产生的次生皂苷与刺五加皂苷B相比,活性得到了一定的提高,可能与其结构发生改变有关。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
皂苷糖苷酶型论文参考文献
[1].刘文山,李振伟,傅荣昭.糖苷酶在人参皂苷转化中的应用[J].生物技术通讯.2019
[2].王维娜.黑曲霉848糖苷酶的分离纯化及刺五加皂苷的酶催化转化[D].大连工业大学.2016
[3].林迪,金凤燮,鱼红闪.白头翁皂苷H3糖苷酶的分离纯化及酶性质[J].大连工业大学学报.2015
[4].靳晓明,尤玲玲,冯超,葛怀娜,刘金福.苦瓜皂苷提取物微胶囊化缓释性能及体外对糖苷酶活性影响研究[J].食品工业科技.2014
[5].梁朝宁,熊丹丹,张道军,金建明,唐双焱.改造β-糖苷酶合成稀有人参皂苷[C].第九届中国酶工程学术研讨会论文摘要集.2013
[6].孙晓雨.糖苷酶转化人参皂苷研究进展[J].生物技术世界.2013
[7].窦芳,汤海峰,奚苗苗,文爱东.13种太白楤木皂苷单体对α-葡糖苷酶和α-淀粉酶活性的影响[J].中国药房.2013
[8].窦芳,汤海峰,奚苗苗,文爱东.11种中药总皂苷对α-葡糖苷酶和α-淀粉酶的抑制作用研究[J].中国药房.2013
[9].许晓冬.薯蓣皂苷糖苷酶蛋白翻译后修饰的研究[D].大连工业大学.2013
[10].刘廷强.原薯蓣皂苷糖苷酶-1型的特性及其基因的克隆与表达[D].延边大学.2013