彭国瑞:腐败梭菌α毒素和产气荚膜梭菌ε毒素的共表达及其免疫效力评价论文

彭国瑞:腐败梭菌α毒素和产气荚膜梭菌ε毒素的共表达及其免疫效力评价论文

本文主要研究内容

作者彭国瑞,彭小兵,李旭妮,董令赢,蒋玉文(2019)在《腐败梭菌α毒素和产气荚膜梭菌ε毒素的共表达及其免疫效力评价》一文中研究指出:为获得腐败梭菌α毒素和D型产气荚膜梭菌ε毒素的共表达产物,并鉴定其致死活性和反应原性,评价其免疫保护效力,利用PCR扩增腐败梭菌α毒素和产气荚膜梭菌ε毒素基因Gcsa和Gcpe并克隆至pETDuet-1质粒,转化E.coli BL21(DE3),自诱导培养基诱导这2段基因共表达;用SDS-PAGE和Western-blot以及小鼠毒性试验、抗毒素血清中和试验对表达产物进行鉴定;将诱导后的大肠杆菌灭活,制成铝佐剂疫苗1 m L/只皮下注射免疫家兔2次,测定免疫血清中和抗体效价,用1 MLD的腐败梭菌毒素和D型产气荚膜梭菌毒素分别攻击。结果显示,所构建的E.coli BL21(pETDuet-Gcsa-Gcpe)可以同时表达Gcsa和Gcpe,表达产物能够与腐败梭菌和D型产气荚膜抗毒素血清反应;且具有小鼠致死毒性,只有用2种抗毒素一同作用,才能将其毒性中和;制成灭活疫苗免疫家兔,免疫血清对腐败梭菌毒素的中和抗体效价为2 MLD/0.1 m L,对D型产气荚膜梭菌毒素的中和抗体效价≥50 MLD/0.1 m L;用2种毒素攻击,免疫组家兔全部保护,对照组全部死亡,达到《中华人民共和国兽药典》(2015版)效力检验标准。结果表明,所构建的表达载体可以实现α毒素和ε毒素的活性共表达,本研究为腐败梭菌和产气荚膜梭菌的多联基因工程灭活疫苗的研究提供了实验基础。

Abstract

wei huo de fu bai suo jun αdu su he Dxing chan qi jia mo suo jun εdu su de gong biao da chan wu ,bing jian ding ji zhi si huo xing he fan ying yuan xing ,ping jia ji mian yi bao hu xiao li ,li yong PCRkuo zeng fu bai suo jun αdu su he chan qi jia mo suo jun εdu su ji yin Gcsahe Gcpebing ke long zhi pETDuet-1zhi li ,zhuai hua E.coli BL21(DE3),zi you dao pei yang ji you dao zhe 2duan ji yin gong biao da ;yong SDS-PAGEhe Western-blotyi ji xiao shu du xing shi yan 、kang du su xie qing zhong he shi yan dui biao da chan wu jin hang jian ding ;jiang you dao hou de da chang gan jun mie huo ,zhi cheng lv zuo ji yi miao 1 m L/zhi pi xia zhu she mian yi jia tu 2ci ,ce ding mian yi xie qing zhong he kang ti xiao jia ,yong 1 MLDde fu bai suo jun du su he Dxing chan qi jia mo suo jun du su fen bie gong ji 。jie guo xian shi ,suo gou jian de E.coli BL21(pETDuet-Gcsa-Gcpe)ke yi tong shi biao da Gcsahe Gcpe,biao da chan wu neng gou yu fu bai suo jun he Dxing chan qi jia mo kang du su xie qing fan ying ;ju ju you xiao shu zhi si du xing ,zhi you yong 2chong kang du su yi tong zuo yong ,cai neng jiang ji du xing zhong he ;zhi cheng mie huo yi miao mian yi jia tu ,mian yi xie qing dui fu bai suo jun du su de zhong he kang ti xiao jia wei 2 MLD/0.1 m L,dui Dxing chan qi jia mo suo jun du su de zhong he kang ti xiao jia ≥50 MLD/0.1 m L;yong 2chong du su gong ji ,mian yi zu jia tu quan bu bao hu ,dui zhao zu quan bu si wang ,da dao 《zhong hua ren min gong he guo shou yao dian 》(2015ban )xiao li jian yan biao zhun 。jie guo biao ming ,suo gou jian de biao da zai ti ke yi shi xian αdu su he εdu su de huo xing gong biao da ,ben yan jiu wei fu bai suo jun he chan qi jia mo suo jun de duo lian ji yin gong cheng mie huo yi miao de yan jiu di gong le shi yan ji chu 。

论文参考文献

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  • 论文详细介绍

    论文作者分别是来自中国兽药杂志的彭国瑞,彭小兵,李旭妮,董令赢,蒋玉文,发表于刊物中国兽药杂志2019年02期论文,是一篇关于腐败梭菌论文,产气荚膜梭菌论文,毒素论文,毒素论文,共表达论文,免疫论文,疫苗论文,中国兽药杂志2019年02期论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自中国兽药杂志2019年02期论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。

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