纳升级液相色谱论文-张冬梅,马慧萍,贾正平

纳升级液相色谱论文-张冬梅,马慧萍,贾正平

导读:本文包含了纳升级液相色谱论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:海马,蛋白表达谱,蛋白质组,生物信息学

纳升级液相色谱论文文献综述

张冬梅,马慧萍,贾正平[1](2018)在《纳升级反相液相色谱串联质谱法分析海马蛋白质组》一文中研究指出目的:为了全面了解海龙的蛋白质成分,对其蛋白表达谱进行蛋白质组学分析。方法:应用叁氯乙酸/丙酮沉淀法提取海马药材的蛋白质,经聚丙烯酰胺凝胶电泳分离分析,将聚丙烯酰胺凝胶电泳条带切下进行胶内酶解处理后,应用纳升级反相液相色谱串联质谱(nano RPLC-MS/MS)法系统分析海马提取蛋白质胶内酶解产物,并进行数据库检索鉴定蛋白质。结果:共鉴定到海马蛋白192种,等电点范围为4.06~12.18,相对分子质量范围为3.06×10~3~3.52×10~6,多肽10 680个;通过生物信息学方法分析了海马提取蛋白质的分子功能。得到海马提取物中的蛋白质具有结合、酶催化、肌动、ATP酶等功能活性,其中结合活性的蛋白质占的比例较大。结论:本研究建立了海马的蛋白质表达谱,可为海马药材中蛋白质的深入研究奠定基础,对海马药材有效成分的分析和海马药材鉴别具有重要意义。(本文来源于《药物分析杂志》期刊2018年01期)

沈丽欢[2](2016)在《纳升级高效液相色谱与电感耦合等离子体质谱联用在砷、汞形态分析中的应用》一文中研究指出砷、汞均是人体致癌元素,且毒性具有形态依赖性,因此研究砷、汞在生物体内的致毒机理是十分必要的。在生物化学分析中,多数条件下得到的样品是非常有限的,有时只能得到10-50 nL。纳升级高效液相色谱法(nanoHPLC)具有高色谱分辨率和低溶剂消耗的特点,将其与具有高灵敏度和多元素同时测定等优点的等离子体质谱(ICP-MS)联用,是实现纳升样品中砷、汞形态分析的理想方法之一。然而实现nanoHPLC与ICP-MS的联用存在流速不匹配问题,这需要研制一款纳流雾化器来作为两者联用的无鞘流接口。本论文在结合微量试样中砷、汞形态分析的研究现状、纳升级高效液相色谱与电感耦合等离子体质谱联用技术以及用于等离子体质谱的纳流雾化系统等方面的研究背景,以实现nanoHPLC与ICP-MS联用为研究目的,进行了以下研究:首先,研制一款低成本的可拆卸式纳流雾化器,它由雾化器器体、进样毛细管和雾化器适配器组装而成。该纳流雾化器的进样毛细管的尖端采用砂纸打磨技术,使其形成外壁厚约5μm,内径为20 μm的锥状喷嘴。实验结果表明:该纳流雾化器在500 nL/min样品提升量下,分析性能可达到甚至超过先前的微流量雾化器和纳流雾化器。随后,以自制纳流雾化器作为nanoHPLC-ICP-MS联用的无鞘流接口,分别研究了反相毛细管色谱和阴离子交换毛细管色谱在砷形态分离方面的应用。在反相毛细管色谱体系中,选用自制的150 μm内径(i.d.) × 450 μm外径(o.d.) × 15 cm规格色谱柱,以2.0mmol/L的四丁基氢氧化铵(TBAH)水溶液(pH 6.58)为流动相,在16min内成功实现了50 nL砷标准溶液中四种砷形态的分离。在阴离子交换毛细管色谱体系中,采用自制100 μm i.d. × 360 μm o.d. × 25 cm的色谱柱,以10.0mmol/L的酒石酸-酒石酸钠缓冲溶液(pH 6.90)为流动相,在流速为620 nL/min的条件下获得了比反相毛细管色谱体系更好更快的分离效果和更高的检测灵敏度。最后,以自制纳流雾化器作为无鞘流接口,建立反相毛细管色谱与ICP-MS联用进行汞形态分离的方法。以150 μm i.d. × 450 μm o.d.×15 cm的自制反相色谱柱,采用10.0 mmol/L的L-半胱氨酸水溶液(pH 5.00)为流动相,在13min之内实现了汞形态的分离检测。本文的创新点:本论文首次研制出一种低成本的可拆卸式纳流雾化器,在保证雾化器的死体积、自吸率更低,所产生的气溶胶粒径分布更窄,分析物的传输效率更高的同时,实现了ICP-MS在纳流样品提升量下的100%耐有机溶剂性。此外,以自制的可拆卸式纳流雾化器作为nanoHPLC-ICP-MS联用的无鞘流接口,使纳升级样品的砷形态分析灵敏度提高了2-3倍,并首次实现纳升级样品的汞形态分析检测且具有溶剂消耗低的特点。(本文来源于《浙江大学》期刊2016-01-01)

李正义,贾俊涛,姜英辉,王骏,罗继[3](2015)在《纳升级反相液相色谱-串联质谱法分析麦氏弧菌蛋白质组》一文中研究指出[目的]较系统地研究分析麦氏弧菌提取蛋白质。[方法]利用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和纳升级反相液相色谱-串联质谱(nano-RPLC-MS/MS)法系统分析了来源于美国龙虾的一株麦氏弧菌F5-1提取总蛋白和总蛋白直接酶解产物,并进行数据库检索鉴定蛋白质。纳升级反相液相色谱分析条件为:上样量为5μl,经C18预柱(200μm×0.5 mm,3μm,120)脱盐10 min,再经过Chrom XP C_(18)-CL毛细管柱(75μm×15 cm,3μm,120)分析,2%乙腈(0.1%甲酸)-98%乙腈(0.1%甲酸)梯度洗脱90 min,采用ESI-Q-TOF MS,在IDA采集模式下分析鉴定麦氏弧菌提取总蛋白酶解产物。[结果]直接酶解鉴定到1 538种蛋白质,通过Gene Ontology分析了麦氏弧菌F5-1提取总蛋白的分子功能、生物进程和细胞组分。提取的麦氏弧菌蛋白具有催化、结合、结构分子、转录调节因子等功能活性,其中催化活性的蛋白比例较大,且多为参与代谢进程的相关酶类。[结论]研究可为麦氏弧菌蛋白质组学的深入研究奠定基础。(本文来源于《安徽农业科学》期刊2015年33期)

陈廷玉[4](2014)在《应用核素标记结合纳升级反相液相色谱—串联质谱技术筛选鉴定胰腺癌血清诊断标志物》一文中研究指出目的:胰腺癌是一种常见的恶性消化道肿瘤,病情隐匿,且快速发展,在疾病早期难以得到确诊。胰腺癌恶性程度高,其五年生存率不到6%,因此只有早期诊断,才有望得到较好的治疗效果。然而,现有的胰腺癌肿瘤标记物尚不能满足临床需求,寻找理想的用于早期诊断或判断预后的胰腺肿瘤标志物,具有非常重要的意义。其次,外科手术是现有治疗胰腺癌的一种有效方法,对其进行根治性切除手术有可能达到治愈效果,改善胰腺癌的预后。胰腺癌的早期诊断不仅可以提高预后,还可以为术前可切除性评估提供可靠参考。研究表明:人血清中的蛋白质成份会在疾病早期阶段有一定变化,分析血清蛋白成份变化对寻找相关疾病的生物标识物有较大帮助,本研究应用蛋白组学相关方法对16例胰腺癌患者、16例良性胰腺疾病患者和16正常健康人的外周血进行检测分析,筛选并鉴定可能存在的胰腺癌血清中特异的早期诊断标记物。方法:同位素标记相对和绝对量技术(isobaric tags for relative and absolute quantitation,iTRAQ)是目前应用非常广泛的蛋白质组相对定量方法,基于iTRAQ技术的蛋白质组学研究具有样品要求量低、灵敏度和准确度高、可观察蛋白质动态变化的显着优点。使用核素标记相对和绝对定量(iTRAQ)技术结合纳升级反相液相色谱-串联质谱法(nanoflow Reversed-phase Liquid Chromatography-tandem MassSpectrometry, nanoRPLC-MS/MS),对2012年3月-2013年11月入院的16例胰腺癌患者、16例良性胰腺疾病患者(包括:慢性胰腺炎8例,胰腺浆液性囊腺瘤2例,胰腺粘液性囊腺瘤1例,胰腺假性囊肿3例,急性胰腺炎治疗后2例)和16例正常健康人的血清进行差异蛋白组学分析,筛选特异性的血清肿瘤标志物。结果:通过比较分析胰腺癌组,胰腺良性疾病组,正常健康人组的血清,质谱鉴定结果显示,胰腺癌和胰腺良性对照组中共筛选和鉴定出469种蛋白,其中45个差异表达的蛋白,有19种蛋白在胰腺癌组较良性胰腺疾病组表达升高,降低的蛋白有26种;胰腺良性疾病同正常对照组中共筛选和鉴定出473种蛋白,其中有差异表达的蛋白46种,胰腺良性疾病较正常升高的蛋白有25种,降低的蛋白有21种。同胰腺良性疾病组比较,我们筛选并成功鉴定出17种差异蛋白,分别为Seprease、α-1B糖蛋白(Alpha-1B-glycoprotein)、角蛋白I型细胞骨架14(Keratin, typeI cytoskeletal14)、Ficolin-3、过氧化氢酶(Catalase)、基膜聚糖(Lumican)、聚免疫球蛋白受体(Polymeric immunoglobulin receptor, PIGR)、载脂蛋白A-II(ApolipoproteinA-II,ApoA-II)、血清淀粉样蛋白A-4蛋白(Serumamyloid A-4protein,SAA4)、血小板活化因子乙酰水解酶(Platelet-activatingfactor acetylhydrolase,PAFA)、巨噬细胞集落刺激因子1受体(Macrophagecolony-stimulating factor1receptor,MCSFR-1)、胰岛素样生长因子结合蛋白-2(Insulin-like growth factor-binding protein-2,IGFBP-2)、腱生蛋白-X(Tenascin-X)、α-2-HS-糖蛋白、组织蛋白酶D(Cathepsin D)、泛酰巯基乙胺酶(Pantetheinase)。其中有6种在胰腺癌组表达显着降低,其差异具有统计学意义(p<0.05),分别为Seprease、 α-1B糖蛋白(Alpha-1B-glycoprotein)、角蛋白I型细胞骨架14(Keratin, type Icytoskeletal14)、Ficolin-3、过氧化氢酶(Catalase)、基膜聚糖(Lumican),但上述6种蛋白在胰腺良性疾病组却呈高表达;11种在胰腺癌组血清中高表达,分别是聚免疫球蛋白受体(Polymeric immunoglobulin receptor,PIGR)、载脂蛋白A-II (Apolipoprotein A-II,ApoA-II)、血清淀粉样蛋白A-4蛋白(Serum amyloid A-4protein,SAA4)、血小板活化因子乙酰水解酶(Platelet-activating factor acetylhydrolase,PAFA)、巨噬细胞集落刺激因子1受体(Macrophage colony-stimulating factor1receptor,MCSFR-1)、胰岛素样生长因子结合蛋白-2(Insulin-like growth factor-binding protein-2,IGFBP-2)、腱生蛋白-X(Tenascin-X)、α-2-HS-糖蛋白、组织蛋白酶D(Cathepsin D)、泛酰巯基乙胺酶(Pantetheinase)。分析胰腺癌患者组、良性胰腺疾病患者组和正常健康人群组血清中筛选出的蛋白,我们发现:IGFBP-2、腱生蛋白-X、AHSG、PIGR、ApoA-II、SAA4和Cathepsin D,上述7种蛋白表达在胰腺癌组的患者血清中显着升高,但在胰腺良性疾病组和正常健康人组中呈低表达,其差异具有统计学意义(p<0.05)。结论:同正常健康人以及胰腺良性疾病的患者的血清比较,胰腺癌组的患者血清中存在较多表达差异的蛋白,利用iTRAQ技术结合nanoRPLC-MS/MS法可较好筛选并鉴定出与胰腺癌发生发展相关的血清肿瘤标志物。(本文来源于《泸州医学院》期刊2014-05-01)

[5](2014)在《沃特世推出涵盖纳升级至微升级的超高效液相色谱系统——ACQUITY UPLC M-Class》一文中研究指出2014年1月28日,沃特世公司推出了新型的Waters ACQUITY UPLC M-Class系统,这是业内首台涵盖纳升级至微升级的Ultra Performance LC(UPLC)超高效液相色谱系统,系统耐压高达15000 psi。将此系统与沃特世质谱仪联用,能够对复杂样品体系中含量极低的分子进行鉴定和定量,提供前所未有的高灵敏度。ACQUITY UPLC M-Class系统可用于蛋白质组学、代谢分析、代谢物鉴定和药代动力学研究等各个领域。同时,全新设计的可耐受15000 psi压力的亚2μm色谱柱,提供更快的分离速度、更高的峰容量和灵敏度。(本文来源于《分析化学》期刊2014年03期)

[6](2014)在《沃特世推出涵盖纳升级至微升级的超高效液相色谱系统——ACQUITY UPLC M-Class》一文中研究指出沃特世公司推出了新型的WatersACQUITY UPLCM-Class系统,这是首台涵盖纳升级至微升级的UltraPerformance LC(UPLC)超高效液相色谱系统,系统耐压高达15000 psi.将此系统与沃特世质谱仪联用,能够对复杂样品体系中含量极低的分子进行鉴定和定量,提供前所未有的高灵敏度.ACQUITY UPLC M-Class系统可用于蛋白质组学、代谢分析、代谢物鉴定和药代动力学研究等各个领域.同时,全新设计的可耐受15000 psi压力的亚2μm色谱柱,提供更快的分离速度、更高的峰容量和灵敏度.(本文来源于《环境化学》期刊2014年03期)

陈霞,文红梅,刘睿,朱栋,李伟[7](2014)在《纳升级反相液相色谱-串联质谱法分析蜈蚣提取蛋白质》一文中研究指出结合聚丙烯酰胺凝胶电泳和纳升级反相液相色谱-串联质谱(nanoRPLC-MS/MS)法系统分析了蜈蚣提取蛋白质胶内酶解和直接酶解产物,并进行数据库检索鉴定蛋白质。建立的nanoLC分析条件为:上样8μL,经Chrom XP-C18毛细管柱(350μm×0.5 mm,3μm),2%乙腈(0.1%甲酸)-98%乙腈(0.1%甲酸)梯度洗脱90 min;采用ESI-Q-TOF MS,并在IDA采集模式下分析鉴定蜈蚣提取蛋白质。胶内酶解鉴定到72种蛋白质,直接酶解鉴定到97种蛋白质,二者含26种相同的蛋白质。通过数据库比对,分析了蜈蚣提取蛋白质的生物进程、细胞组分以及功能活性。得到蜈蚣蛋白质具有结合、酶催化、肌动等功能活性,其中结合活性的蛋白质占的比例较大,且多为能量代谢进程中的相关酶类。(本文来源于《分析化学》期刊2014年02期)

孟雯[8](2014)在《沃特世推出涵盖纳升级至微升级的超高效液相色谱系统ACQUITY UPLC M-Class》一文中研究指出本刊讯1月28日,沃特世公司推出了新型WatersACQUITY UPLCM-Class系统,这是业内首台涵盖纳升级至微升级的UltraPerformance LC(UPLC)超高效液相色谱系统,系统耐压高达15000psi。纳升级至微升级LC是指介于200nL/min至100μL/min的流速范围,使用小于1.0mm内径色谱柱的LC系统,其优点包括节省样品和溶剂、更高的分析灵敏度以及更好的电喷雾离子化质谱(ESI MS)分析灵敏度。同时发布的还有沃特世专门开发的用于蛋白质"在线酶切"(本文来源于《食品安全导刊》期刊2014年05期)

[9](2014)在《沃特世推出涵盖纳升级至微升级的超高效液相色谱系统——ACQUITY UPLC M-Class》一文中研究指出沃特世公司近日推出了新型Waters ACQUITY UPLC M-Class系统,这是业内首台涵盖纳升级至微升级的UltraPerformance LC (UPLC)超高效液相色谱系统,系统耐压高达15,000psi。该系统与沃特世质谱仪联用,能够对复杂样品体系中含量极低的分子进行鉴定和定量,提供极高的灵敏度。ACQUITY UPLC M-Class系统可用于(本文来源于《中国生物工程杂志》期刊2014年02期)

严兴科,刘安国,于璐,陈程,崔海福[10](2013)在《基于纳升级二维液相色谱技术的过敏性哮喘大鼠血清差异蛋白质谱表达》一文中研究指出目的研究过敏性哮喘大鼠血清差异蛋白质谱表达。方法将24只Wistar大鼠随机分为空白对照组、捆绑组和哮喘模型组,应用纳升级二维液查色谱技术研究哮喘大鼠血清差异蛋白质谱表达。结果哮喘模型组血清多肽谱峰与捆绑组比较,新出现特异性峰1个,为13号峰(94.731 min);特异性消失的峰3个,为1号峰(77.489 min)、2号峰(78.418 min)和5号峰(80.533 min),可能与哮喘发病有关;捆绑组血清多肽谱峰与空白对照组比较,新出现特异性峰4个,为2号峰(78.418 min)、4号峰(79.398 min)、5号峰(80.533 min)和7号峰(81.824 min),特异性峰消失1个,可能与捆绑应激刺激有关。结论过敏性哮喘的发病机制与蛋白异常表达密切相关,但动物实验需要注意区分应激因素导致的相关蛋白表达干扰。(本文来源于《兰州大学学报(医学版)》期刊2013年04期)

纳升级液相色谱论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

砷、汞均是人体致癌元素,且毒性具有形态依赖性,因此研究砷、汞在生物体内的致毒机理是十分必要的。在生物化学分析中,多数条件下得到的样品是非常有限的,有时只能得到10-50 nL。纳升级高效液相色谱法(nanoHPLC)具有高色谱分辨率和低溶剂消耗的特点,将其与具有高灵敏度和多元素同时测定等优点的等离子体质谱(ICP-MS)联用,是实现纳升样品中砷、汞形态分析的理想方法之一。然而实现nanoHPLC与ICP-MS的联用存在流速不匹配问题,这需要研制一款纳流雾化器来作为两者联用的无鞘流接口。本论文在结合微量试样中砷、汞形态分析的研究现状、纳升级高效液相色谱与电感耦合等离子体质谱联用技术以及用于等离子体质谱的纳流雾化系统等方面的研究背景,以实现nanoHPLC与ICP-MS联用为研究目的,进行了以下研究:首先,研制一款低成本的可拆卸式纳流雾化器,它由雾化器器体、进样毛细管和雾化器适配器组装而成。该纳流雾化器的进样毛细管的尖端采用砂纸打磨技术,使其形成外壁厚约5μm,内径为20 μm的锥状喷嘴。实验结果表明:该纳流雾化器在500 nL/min样品提升量下,分析性能可达到甚至超过先前的微流量雾化器和纳流雾化器。随后,以自制纳流雾化器作为nanoHPLC-ICP-MS联用的无鞘流接口,分别研究了反相毛细管色谱和阴离子交换毛细管色谱在砷形态分离方面的应用。在反相毛细管色谱体系中,选用自制的150 μm内径(i.d.) × 450 μm外径(o.d.) × 15 cm规格色谱柱,以2.0mmol/L的四丁基氢氧化铵(TBAH)水溶液(pH 6.58)为流动相,在16min内成功实现了50 nL砷标准溶液中四种砷形态的分离。在阴离子交换毛细管色谱体系中,采用自制100 μm i.d. × 360 μm o.d. × 25 cm的色谱柱,以10.0mmol/L的酒石酸-酒石酸钠缓冲溶液(pH 6.90)为流动相,在流速为620 nL/min的条件下获得了比反相毛细管色谱体系更好更快的分离效果和更高的检测灵敏度。最后,以自制纳流雾化器作为无鞘流接口,建立反相毛细管色谱与ICP-MS联用进行汞形态分离的方法。以150 μm i.d. × 450 μm o.d.×15 cm的自制反相色谱柱,采用10.0 mmol/L的L-半胱氨酸水溶液(pH 5.00)为流动相,在13min之内实现了汞形态的分离检测。本文的创新点:本论文首次研制出一种低成本的可拆卸式纳流雾化器,在保证雾化器的死体积、自吸率更低,所产生的气溶胶粒径分布更窄,分析物的传输效率更高的同时,实现了ICP-MS在纳流样品提升量下的100%耐有机溶剂性。此外,以自制的可拆卸式纳流雾化器作为nanoHPLC-ICP-MS联用的无鞘流接口,使纳升级样品的砷形态分析灵敏度提高了2-3倍,并首次实现纳升级样品的汞形态分析检测且具有溶剂消耗低的特点。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

纳升级液相色谱论文参考文献

[1].张冬梅,马慧萍,贾正平.纳升级反相液相色谱串联质谱法分析海马蛋白质组[J].药物分析杂志.2018

[2].沈丽欢.纳升级高效液相色谱与电感耦合等离子体质谱联用在砷、汞形态分析中的应用[D].浙江大学.2016

[3].李正义,贾俊涛,姜英辉,王骏,罗继.纳升级反相液相色谱-串联质谱法分析麦氏弧菌蛋白质组[J].安徽农业科学.2015

[4].陈廷玉.应用核素标记结合纳升级反相液相色谱—串联质谱技术筛选鉴定胰腺癌血清诊断标志物[D].泸州医学院.2014

[5]..沃特世推出涵盖纳升级至微升级的超高效液相色谱系统——ACQUITYUPLCM-Class[J].分析化学.2014

[6]..沃特世推出涵盖纳升级至微升级的超高效液相色谱系统——ACQUITYUPLCM-Class[J].环境化学.2014

[7].陈霞,文红梅,刘睿,朱栋,李伟.纳升级反相液相色谱-串联质谱法分析蜈蚣提取蛋白质[J].分析化学.2014

[8].孟雯.沃特世推出涵盖纳升级至微升级的超高效液相色谱系统ACQUITYUPLCM-Class[J].食品安全导刊.2014

[9]..沃特世推出涵盖纳升级至微升级的超高效液相色谱系统——ACQUITYUPLCM-Class[J].中国生物工程杂志.2014

[10].严兴科,刘安国,于璐,陈程,崔海福.基于纳升级二维液相色谱技术的过敏性哮喘大鼠血清差异蛋白质谱表达[J].兰州大学学报(医学版).2013

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