导读:本文包含了正常态雪旺细胞论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:DNA甲基化,大鼠,Wistar,轴突
正常态雪旺细胞论文文献综述
林伟[1]（2017）在《正常态和激活态雪旺细胞与轴突再生相关基因甲基化差异的实验研究》一文中研究指出【目的】雪旺细胞(Schwann cells,SCs)是周围神经系统中最重要的细胞之一。成熟的SCs包裹神经元的轴突形成髓鞘,此时的SCs称为正常态雪旺细胞(Normal Schwann cells,NSCs)。周围神经损伤后,损伤远端神经纤维的轴突和髓鞘均被破坏,继而完全崩解,这种现象被称之为华勒变性。神经损伤后SCs即表现出高生物活性,此时的SCs称之为激活态雪旺细胞(Activated Schwann cells,ASCs),ASCs的高生物活性对轴突再生有良好的促进作用。然而,目前的研究绝大部分都集中在蛋白质水平和miRNA水平,并且大量的研究已经证实:ASCs和NSCs在蛋白质水平和miRNA水平存在显着差异,但是两种状态SCs存在差异的根本原因尚不清楚。近些年随着基因工程技术的逐渐成熟,DNA甲基化的研究越来越受到研究者重视,并且研究发现:周围神经系统损伤后,可使部分基因(如Shh和Olig1)发生甲基化状态改变,这些基因的甲基化改变对轴突再生起到关键作用。然而,目前还没有全基因组的比较ASCs和NSCs与轴突再生相关基因甲基化差异的实验研究。本课题通过DNA甲基化免疫共沉淀测序(Methylated DNA immunoprecipitation sequencing,MeDIP-Seq)技术检测Wistar大鼠ASCs和NSCs全基因组的甲基化差异,筛选轴突再生相关基因,并做功能分析。【方法】健康成年Wistar大鼠(约150±5克)3只,坐骨神经预损伤,臂丛神经仅做分离。饲养7天后,脱颈处死Wistar大鼠,提取坐骨神经损伤远端和臂丛神经各1.5厘米,采用低浓度胰蛋白酶消化法从坐骨神经组织提取ASCs、从臂丛神经提取NSCs。分别培养ASCs和NSCs至第3代,S-100抗体免疫荧光染色鉴定细胞,并计算细胞纯度。CCK8法测定细胞增殖,并绘制ASCs和NSCs的增值曲线。收集第3代ASCs和NSCs,使用EDTA方法提取DNA。运用MeDIP-Seq技术筛选出ASCs和NSCs的差异性甲基化区域;使用KOBAS软件对差异甲基化区域注释和统计分析,筛选出轴突再生相关差异甲基化基因,使用InterProScan软件分析差异基因的染色体分布情况、基因本体(GO)分析以及信号通路分析。【结果】本研究获得纯度为95%以上的ASCs和NSCs,两者S-100免疫荧光染色均表达阳性。在相同培养条件下,ASCs生长速度和贴壁速度更快。MeDIP-Seq共发现177176个差异性甲基化区域,其中位于启动子(≤1 kb)内1 097个、启动子(1~2 kb)内1 136个,CpG岛内567个。基因注释分类后,共获得214个与轴突再生相关的差异甲基化基因。这些基因分布于各个染色体上,以12号染色体上最多(22个),M染色体最少(2个)。GO分析结果显示差异甲基化基因涉及轴突生长、轴突形成、轴突延伸和轴突导向等过程;并且与MAPK、细胞黏附分子和Ras等信号通路有关。【结论】ASCs和NSCs的甲基化水平存在明显的差异,214个甲基化差异基因与轴突再生有关,分布于各个染色体上;涉及轴突生长、轴突形成、轴突延伸和轴突导向等过程,并且与MAPK、细胞黏附分子和Ras等主要信号通路有关。(本文来源于《天津医科大学》期刊2017-05-01）
黄蔚,王琳,惠延年,马吉献[2]（2002）在《雪旺细胞源性神经营养活性物质对培养视网膜节细胞正常及缺气损伤环境中存活及生长的作用》一文中研究指出目的:探讨雪旺细胞(Schwann cells,SC)源营养神经活性物质(SC derived neurotrophic activity,SCNA)对体外培养视网膜节细胞正常及缺气损伤环境中存活及生长相关蛋白(GAP)_(43)表达的作用。方法:培养乳鼠SC,制备不同蛋白浓度的SCNA,加入原代培养的视网膜细胞中,MTT法检测SCNA活性培养荧光金逆行标记的新生3d的SD乳鼠视网膜细胞,接种于24孔板中。培养第2d时SCNA作用组培养液中加入300mg/l。SCNA,对照组不加;培养第5d缺气损伤组在培养液表面加入液体石蜡造成缺气损伤。12h后去除液体石蜡,观察细胞形态和计数荧光金逆行标记的视网膜节细胞(retinal ganglion cell,RGC)。Western Blot法分析SCNA对视网膜细胞GAP_(43)表达的影响。结果:SCNA能促进培养视网膜细胞的存活,并有蛋白浓度依赖关系。加SCNA后,视网膜细胞生长明显旺盛,悬浮的死细胞较少,RGC数量明显多于视网膜细胞单纯培养组(F=62.89,P<0.01)。缺气损伤组视网膜细胞出现肿胀改变,加有SCNA缺气损伤组细胞形态大致正常,RGC数与对照组相比有显着性差异(F=49.27,P<0.01)。GAP_(43)的表达在视网膜细胞正常及缺气损伤SCNA作用组上调。结论:SCNA对培养RGC具有明显营养作用,并上调GAP_(43)的表达。在培养液中加入SCNA,可以减轻“缺气”造成的损伤,提高体外培?(本文来源于《眼科学报》期刊2002年04期）
赵虬,郭世绂,王沛,金宇,雪原[3]（1999）在《雪旺细胞悬液植入成鼠正常脊髓》一文中研究指出目的：了解雪旺细胞（ＳＣ）促进脊髓受损轴索再生作用。方法：将Ｗｉｓｔａｒ大鼠２０只随机分为两组，各１０只，实验组将自成鼠坐骨神经培养获取的雪旺细胞悬液（ＳＣＳ）采用显微注射植入成鼠正常胸段（Ｔ７）脊髓，对照组以相同量的Ｄｕｌｂｅｃｃｏ改良细胞培养液（ＤＭＥＭ）植入。移植术后２周、６周通过组织学及免疫组织化学检查，观察移植物的存活及促进轴索再生能力。结果：实验组宿主中ＳＣ形态正常，束状排列，轴索可长入移植物中。束状排列的ＳＣ间有髓鞘碱性蛋白（ＭＢＰ）阳性纤维存在，相伴随的ＳＣ胞质亦呈ＭＢＰ阳性。对照组无再生轴索长入。结论：ＳＣ植入成鼠正常脊髓后，与宿主融合好，可存活，促进宿主再生轴索越过宿主－移植物交界面长入移植物，并形成髓鞘。(本文来源于《中国脊柱脊髓杂志》期刊1999年02期）
正常态雪旺细胞论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:探讨雪旺细胞(Schwann cells,SC)源营养神经活性物质(SC derived neurotrophic activity,SCNA)对体外培养视网膜节细胞正常及缺气损伤环境中存活及生长相关蛋白(GAP)_(43)表达的作用。方法:培养乳鼠SC,制备不同蛋白浓度的SCNA,加入原代培养的视网膜细胞中,MTT法检测SCNA活性培养荧光金逆行标记的新生3d的SD乳鼠视网膜细胞,接种于24孔板中。培养第2d时SCNA作用组培养液中加入300mg/l。SCNA,对照组不加;培养第5d缺气损伤组在培养液表面加入液体石蜡造成缺气损伤。12h后去除液体石蜡,观察细胞形态和计数荧光金逆行标记的视网膜节细胞(retinal ganglion cell,RGC)。Western Blot法分析SCNA对视网膜细胞GAP_(43)表达的影响。结果:SCNA能促进培养视网膜细胞的存活,并有蛋白浓度依赖关系。加SCNA后,视网膜细胞生长明显旺盛,悬浮的死细胞较少,RGC数量明显多于视网膜细胞单纯培养组(F=62.89,P<0.01)。缺气损伤组视网膜细胞出现肿胀改变,加有SCNA缺气损伤组细胞形态大致正常,RGC数与对照组相比有显着性差异(F=49.27,P<0.01)。GAP_(43)的表达在视网膜细胞正常及缺气损伤SCNA作用组上调。结论:SCNA对培养RGC具有明显营养作用,并上调GAP_(43)的表达。在培养液中加入SCNA,可以减轻“缺气”造成的损伤,提高体外培?
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
正常态雪旺细胞论文参考文献
[1].林伟.正常态和激活态雪旺细胞与轴突再生相关基因甲基化差异的实验研究[D].天津医科大学.2017
[2].黄蔚,王琳,惠延年,马吉献.雪旺细胞源性神经营养活性物质对培养视网膜节细胞正常及缺气损伤环境中存活及生长的作用[J].眼科学报.2002
[3].赵虬,郭世绂,王沛,金宇,雪原.雪旺细胞悬液植入成鼠正常脊髓[J].中国脊柱脊髓杂志.1999