卵泡微环境论文-罗晓强,蒲静,邱意开,刘心蕊,王国平

卵泡微环境论文-罗晓强,蒲静,邱意开,刘心蕊,王国平

导读:本文包含了卵泡微环境论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:人羊水干细胞,卵泡液,分化,雌性生殖细胞

卵泡微环境论文文献综述

罗晓强,蒲静,邱意开,刘心蕊,王国平[1](2019)在《卵泡液微环境对人羊水干细胞体外分化为雌性生殖细胞的影响》一文中研究指出目的观察不同直径猪卵泡内卵泡液诱导人羊水干细胞(human amniotic fluid stem cells,hAFSCs)-070607株向雌性生殖细胞分化的效果。探讨卵泡内微环境对体外雌性生殖细胞形成的影响。方法选取不同直径猪卵泡内的卵泡液(S组:直径<3 mm、M组:直径3~6 mm、L组:直径>6 mm),检测卵泡液内雌二醇(E2)和卵泡刺激素(FSH)的含量及骨形态发生蛋白15(BMP15)的表达。将不同分组卵泡液添加到雌性生殖细胞分化体系中,经过5 d的体外诱导培养,观察生殖细胞基因OCT4、FIGLα、GDF9、FSHR和甲基化基因DNMT3B的表达变化。继续用M组卵泡液诱导hAFSCs-070607,观察基因及蛋白表达的变化。结果通过基因、蛋白和叁胚层分化的检测,确定hAFSCs-070607具有良好的多能性及分化潜能。3组不同直径的卵泡液内都含有FSH,但不含E2;BMP15的未成熟蛋白在M组中的含量略高于S、L组。M组添加到诱导分化培养基后,E2的产量较高,生殖相关标记基因检测结果发现,OCT4、FIGLα、GDF9、FSHR和DNMT3B基因的表达依次按照大、中、小卵泡组上升。继续用M组卵泡液诱导hAFSCs-070607,诱导10d后,有卵母细胞样细胞(oocyte-like cells,OLCs)和卵泡样结构的出现,经EGFP-BMP15转染后,这些结构显示EGFP表达阳性,表明有OLCs的产生。荧光定量PCR结果证实,生殖细胞形成相关基因OCT4、FIGLα、GDF9、FSHR和表观学基因DNMT3B的表达逐渐呈上升的趋势。经细胞免疫荧光技术检测发现,生殖相关蛋白OCT4、FRAGILIS和SCP3呈阳性表达。结论hAFSCs-070607株人羊水干细胞具有良好的多能性和体外分化潜能,经猪卵泡液体外诱导分化后,可分化为雌性生殖细胞,且M组卵泡液诱导后细胞分泌的E2高于S组和L组。长时间诱导后,生殖细胞相关基因和蛋白上调,并能形成卵泡样结构。(本文来源于《宁夏医科大学学报》期刊2019年06期)

胡頲[2](2019)在《卵泡微环境中外泌体对体外受精-胚胎移植(IVF-ET)妊娠结局的影响》一文中研究指出目的研究卵泡微环境中外泌体对体外受精-胚胎移植(IVF-ET)妊娠结局的的影响,明确卵泡微环境中外泌体的来源。方法选取200例就诊于宁夏医科大学生殖中心仅因输卵管因素行IVF的卵巢功能正常的年轻不孕患者,根据患者的妊娠结局分为两组,即妊娠组和未妊娠组。收集临床、实验室数据,比较两组之间的AMH、FSH、FSH/LH、AFC、MⅡ卵率、受精率和优胚率,并收集两组患者的卵泡液,通过ExoQuick试剂盒分离出外泌体,在透射电镜和扫描电镜下观察其形态,采用Nanosight LM 10(Malvern)检测卵泡液中外泌体的浓度,利用2,2-联喹啉-4,4-二甲酸二钠(BCA)法检测外泌体的蛋白浓度;采用Western blot检测外泌体表面标志物CD9、CD63和CD81;通过PCR检测外泌体GDF9、BMP15的表达,从而明确外泌体的来源。采用多变量偏相关分析及logistic回归分析评估AMH、FSH、FSH/LH、AFC、获卵数及外泌体浓度对优胚率及妊娠结局的预测价值。结果病历资料分析结果显示,两组研究对象的血清AMH、FSH、LH、FSH/LH、AFC水平在统计学意义上没有差异(P>0.05);妊娠组的MⅡ卵率、受精率和优胚率高于未妊娠组(P<0.05);在电镜下观察到两组研究对象的外泌体呈圆形或椭圆形膜性囊泡结构;Nanosight LM 10(Malvern)检测结果显示:未妊娠组外泌体平均颗粒浓度为2.93±1.55×10~(10)颗粒/mL,妊娠组为4.09±2.11×10~(10)颗粒/mL。两组患者卵泡液中外泌体颗粒浓度差异有统计学意义(P<0.05);BCA法显示妊娠组外泌体样本的蛋白表达强度高于未妊娠组(P<0.05),Western blot结果显示两组患者的外泌体均表达其表面特异性标志物CD9、CD63和CD81,且含同浓度蛋白的情况下,妊娠组的外泌体CD9、CD63和CD81表达明显高于未妊娠组。PCR表明两组研究对象的外泌体均表达卵子的标志物GDF9、BMP15。基础FSH(r=0.17,P=0.017)及卵泡液中外泌体浓度(r=0.881,P=0.00)是影响优胚率的独立因素,基础AFC(B=0.107 P=0.033)及卵泡液中外泌体的浓度(B=0.419 P=0.00)是影响妊娠结局的独立因素。结论:卵泡液中外泌体浓度是影响妊娠结局的独立因素;发育后期卵泡中的外泌体可能来源于卵细胞。(本文来源于《宁夏医科大学》期刊2019-03-01)

杨柳红[3](2018)在《卵巢旁脂肪组织移除后卵巢微环境改变对卵泡发育及成熟的影响》一文中研究指出脂肪组织是人体储存能量的终末器官,也是一种重要的内分泌器官,其可分泌一系列与机体重要的生理和病理过程相联系的激素和因子,参与调控机体的能量代谢﹑免疫﹑炎症反应以及生殖等过程。卵巢旁脂肪组织作为毗邻卵巢的脂肪组织,对卵巢的生理功能也具有重要的意义。本研究中,我们对21日龄KM小鼠进行单侧卵巢旁脂肪移除手术,在手术恢复2周或3周后通过比较同一只小鼠脂肪移除侧与假手术侧卵巢重量﹑卵泡发育及成熟差异确定单侧卵巢旁脂肪组织移除对卵泡发育及成熟的影响,并结合免疫组化﹑免疫荧光﹑Western blot及荧光定量PCR技术分析卵巢旁脂肪移除后对卵巢微环境内类固醇合成相关酶﹑卵巢内脂肪因子含量﹑脂质积累﹑脉管系统以及细胞凋亡的影响。结果发现,小鼠卵巢旁脂肪移除术后恢复2周后卵巢旁脂肪组织基本上没有恢复生长;术后恢复3周后,卵巢旁有少量脂肪组织长出。与假手术侧对比,术后恢复2周和3周后,移除侧卵巢重量显着减轻,MⅡ卵母细胞数显着减少,但成二细胞率没有明显变化。卵泡计数显示移除侧卵巢中次级卵泡和闭锁卵泡的数量及比率都显着高于假手术侧,而窦状卵泡的数量及比率都显着低于假手术侧。卵巢旁脂肪组织移除后移除侧的部分卵泡的超微结构发生改变,颗粒细胞连接破坏,线粒体空泡化。免疫组化检测发现在术后恢复2周脂肪移除侧卵巢中芳香化酶含量明显降低。Q-PCR检测发现术后恢复2周移除侧卵巢组织中Star的表达与假手术侧相比没有明显的变化,但Cyp11a1﹑Cyp17﹑3β-Hsd及Cyp19的表达显着下调。Western blot检测显示移除侧卵巢内的脂联素(ADPN)﹑瘦素(Leptin)及脂质运载蛋白2(LCN2)水平显着低于假手术侧。油红O染色显示术后恢复2周脂肪移除侧卵巢内脂质积累明显少于假手术侧,Western blot显示术后恢复2周移除侧卵巢组织中的乙酰辅酶A羧化酶(ACC)和脂肪酸合成酶(FASN)的表达量均上调趋势,但差异未达到显着水平,而卵巢内与能量代谢相关的AMPK的磷酸化没有明显改变。采用血管内皮标记CD31及淋巴管标记LYVE-1对卵巢内的脉管网络进行免疫荧光检测,发现术后恢复2周移除侧卵巢中大血管无明显变化,而淋巴管密度有增加趋势。TUNEL检测发现术后恢复2周脂肪移除侧较假手术侧卵巢凋亡信号有增加趋势。Western blot检测卵巢旁脂肪移除对卵巢内细胞凋亡相关蛋白的影响,发现术后恢复2周卵巢内总Caspase 3﹑Caspase 8和Caspase 9均显着降低,且活化的Caspase 3显着增加。Western blot检测卵巢旁脂肪移除对卵巢内细胞生长的影响,发现术后恢复2周移除侧比假手术侧卵巢内PTEN的表达显着上升,p-AKT和p-mTOR表达显着下调,p-YAP表达显着增加,YAP表达显着下降。本论文在排除小鼠中枢神经内分泌调控影响的前提下,研究因卵巢旁脂肪组织移除造成的卵巢内微环境改变对卵泡发育及成熟的影响,我们发现卵巢旁脂肪组织的移除可影响卵巢内雌激素合成﹑脂质积累以及卵巢微环境中脂肪因子的含量变化。卵巢旁脂肪移除所造成的卵巢微环境的改变直接影响了卵巢内细胞凋亡及细胞生长潜力。本研究明确证明了由于卵巢旁脂肪移除造成的卵巢微环境改变对卵泡发育的影响,对其机制进行深入研究将为临床上卵巢早衰等疾病的治疗提供思路。(本文来源于《暨南大学》期刊2018-06-27)

李婷婷,张晓莉,黄睿[4](2018)在《轻微型和控制型卵巢刺激对卵巢低反应患者卵泡液微环境的不同影响》一文中研究指出【目的】比较卵巢低反应患者进行卵巢轻微刺激和控制性卵巢刺激体外受精-胚胎移植(IVF-ET)周期中卵泡液内激素水平、细胞因子的差异及其与获卵数、胚胎数等的关系。【方法】本研究为观察性研究。招募符合博洛尼亚标准的卵巢低反应患者,随机分为实验组(组2)和对照组(组1)。实验组采用来曲唑及低剂量外源性促卵泡生成素(Gn)进行卵巢轻微刺激,对照组采用常规控制性卵巢刺激(黄体期GnRH激动剂修饰长方案)进行卵巢刺激。于取卵日收集成熟卵泡(>16 mm)的卵泡液,其中实验组共23例,对照组共28例,测量卵泡液中促卵泡生成素(FSH)、促黄体生成素(LH)、雌激素(E2)、孕激素(P)、睾酮(T)和抗苗勒管激素(AMH)水平,以及抑制素(inhibin)、生长分化因子9(GDF9)和骨形成蛋白家族(BMP)水平。统计分析卵泡液中各激素、因子水平与获卵数、可利用胚胎数及优质胚胎数的相关性。【结果】实验组和对照组患者基本情况各指标之间:年龄、不孕年限、基础FSH、和窦卵泡数(AFC)差异均无显着性意义(P>0.05)。与对照组相比,实验组Gn用量更少,但两组的获卵数,可利用胚胎数及优质胚胎数差异均无统计学意义(P>0.05)。与对照组相比,实验组卵泡液中LH水平、睾酮水平和inhibin B水平明显增高,而FSH水平、inhibin A水平、BMP8B和GDF9水平明显降低。其他几种激素水平,包括E2、P、AMH和BMP2、6、8B、15水平,两组间差异无显着性意义(P>0.05)。相关分析显示,卵泡液中各激素和细胞因子水平均与获卵数、可移植胚胎数及优质胚胎数无相关性。【结论】POR患者使用不同的轻微刺激和常规控制性卵巢刺激,卵泡微环境不同。但未发现这些变化与获卵数、可利用胚胎数、优质胚胎数存在相关性。(本文来源于《中山大学学报(医学版)》期刊2018年05期)

叶朝阳,金志春,彭文苗,刘敏,吴艳婷[5](2016)在《卵泡液微环境与体外受精-胚胎移植妊娠结局相关性研究进展》一文中研究指出卵泡液由血浆渗出物和卵巢分泌物组成,供给卵母细胞和颗粒细胞适宜的生存环境,对卵泡的发育、卵母细胞的成熟起重要作用[1],其作为生物学窗口反映了排卵前卵母细胞代谢变化的整个过程。卵泡液微环境是十分复杂的生物学微环境,其内含有大量细胞因子、众多激素、氧化/抗氧化系统及各种代谢产物,对卵泡的发育、卵母细胞的成熟、胚胎的质量及体(本文来源于《中西医结合研究》期刊2016年03期)

邢蕊[6](2016)在《两种控制性卵巢刺激方案对PCOS患者IVF/ICSI-ET的助孕结局及卵泡内微环境的影响》一文中研究指出目的:比较卵泡期长效促性腺激素释放激素激动剂长方案(超长方案,Ultra-long protocol)和促性腺激素释放激素拮抗剂方案(Gn RH antagonist protocol)在多囊卵巢综合征(PCOS)患者行体外受精/单精子细胞内注射-胚胎移植(IVF/ICSI-ET)的疗效及卵泡内微环境的影响,从而为PCOS患者控制性卵巢刺激方案(Control Ovary stimulating,COS)的选择提供临床依据。材料与方法:本研究分为两部分:回顾性研究和前瞻性队列研究。回顾性研究中选择2012年1月~2015年5月于河北医科大学第二医院生殖中心行IVF/ICSI助孕的PCOS患者:(1)年龄≤35岁(2)无子宫畸形、子宫内膜异位症、输卵管积液、内分泌疾病史、子宫及卵巢手术史。根据其COS方案不同分为超长方案组(N=156人)、拮抗剂方案组(N=55人)。比较两组患者的一般情况、促排卵过程中的相关指标、实验室相关数据及助孕结局等。前瞻性队列研究选择2015年10月~2016年1月于河北医科大学第二医院生殖医学中心行IVF/ICSI助孕的PCOS患者42例,分为超长方案组(n=22)、拮抗剂组(n=20)。于人绒毛膜促性腺激素(Human Chorionic Gonadotrophin,HCG)注射日留取患者静脉血液3 ml,取卵日留取卵泡液,均经3000rpm离心10min,将上清液置于1.5 ml EP管内,置于-80℃冰箱保存,集中检测其BMP15及GDF9含量。比较两组一般情况、促排卵过程中的相关指标、实验室相关数据、助孕结局、BMP15及GDF9含量。应用SPSS13.0统计学软件进行数据分析,P<0.05表示差异有统计学意义。结果:回顾性研究两组的平均年龄、不孕年限、BMI等一般条件均衡可比(P>0.05)。超长方案组的基础LH水平(8.6±5.2m IU/ml vs6.6±5.0 m IU/ml)、基础T水平(1.0±0.8 ng/ml vs 0.69±0.4 ng/ml)较拮抗剂方案组上升,差异有统计学意义(P<0.05)。超长方案组所需Gn时间(12.45±3.67vs 10.69±3.50)及Gn剂量(2824.63±1067.81IUvs 2139.81±1242.62IU)较拮抗剂方案组增加,差异有统计学意义(P<0.05)。超长方案组HCG日血清LH水平(0.93±0.66m IU/ml vs4.32±4.67m IU/ml)、P水平(1.17±0.69 ng/ml vs 1.91±3.09 ng/ml)及P×1000/E的值(0.30±0.19 vs 0.46±0.62)较拮抗剂方案组降低,差异有统计学意义(P<0.05)。超长方案组HCG日内膜厚度(11.03±1.96mm vs9.87±1.95mm)较拮抗剂方案组上升,差异有统计学意义(P<0.05)。两组的获卵数、可移植胚胎数、移植胚胎数、中重度OHSS发生率、宫外孕率、流产率及活产率均无统计学差异(P>0.05)。超长方案组受精率(84.4%vs 78.6%)、卵裂率(99.00%vs 97.9%)、周期取消率(50.6%vs 30.9%)、种植率(55.3%vs 32.2%)、临床妊娠率(72.7%vs 50.0%)均较拮抗剂方案组明显上升,差异有统计学意义(P<0.05)。前瞻性队列研究两组患者的年龄、BMI、不孕年限等一般条件均衡可比(P>0.05)。超长方案组所需Gn时间(13.09±2.49 vs 12.00±4.68)及Gn剂量(2470.45±839.22IU vs 1853.00±690.26IU)明显大于拮抗剂方案组,差异有统计学意义(P<0.05)。超长方案组HCG日血清P水平较拮抗剂组呈下降趋势,子宫内膜厚度均较拮抗剂方案组呈上升趋势,但无统计学差异(P>0.05)。超长方案组HCG日血清LH水平(1.26±0.35m IU/ml vs 3.08±2.13m IU/ml)及P×1000/E的值(0.30±0.13 vs 0.39±0.12)明显低于拮抗剂组,差异有统计学意义(P<0.05)。超长方案组受精率(91.7%vs 85.5%)明显高于拮抗剂方案组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组的获卵数、可移植胚胎数、移植胚胎数、周期取消率、卵裂率、种植率、临床妊娠率、中、重度OHSS发生率均无明显差异(P>0.05),可能与样本量偏少有关。超长方案组患者血清及卵泡液中的BMP15含量较拮抗剂方案组显着上升(3.87±5.61ng/ml vs 0.93±0.22 ng/ml;6.27±5.58ng/ml vs1.05±0.32ng/ml),差异有统计学意义(P<0.05)。超长方案组患者血清及卵泡液中GDF9含量较拮抗剂方案组有上升趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论:拮抗剂方案较超长方案Gn时间短、Gn用量较少,OHSS发生倾向降低。有一定的经济实用性和安全性。超长方案血清及卵泡液中BMP15的水平明显高于拮抗剂方案,且种植率及临床妊娠率也优于拮抗剂方案,原因可能是改善了PCOS患者内膜环境,一定程度上提高了卵子质量。超长方案及拮抗剂方案均为PCOS患者行COH的有效手段,各有利弊。(本文来源于《河北医科大学》期刊2016-03-01)

李安吉,俞超芹[7](2016)在《子宫内膜异位症患者卵泡液微环境与不孕症发生相关性研究进展》一文中研究指出子宫内膜异位症是一种常见的妇科疾病,往往引起育龄期妇女不孕症的发生。子宫内膜异位症不孕患者促排卵后获卵率较低,可能与卵泡发育障碍、卵母细胞质量受损等因素相关。卵母细胞在整个成熟过程中始终与卵泡液密切接触,卵泡液微环境的改变势必影响卵母细胞质量。本文从氧化应激、细胞因子、炎症介质等方面综述子宫内膜异位症卵泡液微环境改变导致卵母细胞质量受损、不孕症发生的研究进展。(本文来源于《生殖医学杂志》期刊2016年01期)

杨星,黄睿,梁晓燕[8](2015)在《PCOS患者卵泡液微环境中的亚急性炎症反应》一文中研究指出目的:回顾性分析多囊卵巢综合征(PCOS)患者及对照者卵泡液微环境中局部脂代谢紊乱及炎症反应状态及其形成机制。方法:比较2组患者外周血清脂代谢指标、性激素、炎症细胞及炎症介质水平差异;测定卵泡液中炎症介质及载脂蛋白含量;分析卵巢颗粒细胞中炎症介质及载脂蛋白基因表达。结果:PCOS患者具备典型肥胖、高脂血症及高雄激素血症,外周血中炎症细胞及各类炎症介质水平显着增加;卵泡液中同样具有显着增加的炎症细胞因子浸润,颗粒细胞内炎症介质及载脂蛋白基因表达增加。结论:PCOS组患者卵泡液内所含高水平载脂蛋白表明卵泡液内可能存在高脂蛋白状态。循环中的高脂血症及亚急性炎症各类因子可能通过血清-卵泡液屏障主动渗透。颗粒细胞通过主动摄取(例如载脂蛋白A)抑或自主合成(如炎症因子IL-1、IL-6及TNF-α等)等多种方式进行卵泡液局部微环境的稳态调节。卵子发育生理性卵泡液微环境的脂质代谢紊乱、炎症细胞浸润、高雄激素血症等均可能影响到卵母细胞和胚胎的正常发育。(本文来源于《中国病理生理杂志》期刊2015年09期)

杨芳,杨蕴洁,潘家坪,滕晓明,杨健之[9](2014)在《卵泡微环境改变对多囊卵巢综合征患者体外受精-胚胎移植的影响》一文中研究指出目的研究在体外授精(in vitro fertilization,IVF)治疗过程中多囊卵巢综合征患者(polycystic ovarian syndrome,PCOS)与非多囊卵巢综合征患者的对照组促排卵后内分泌的差别,胚胎质量和妊娠结局的差异,探讨内分泌情况以及卵泡微环境对PCOS患者在IVF治疗中卵泡发育以及妊娠结局的影响。方法将自2011年12月—2013年3月在上海市第一妇婴保健院生殖中心行IVF助孕的患者分成对照组和PCOS组。比较两组的一般情况,内分泌以及卵泡液中激素水平改变,以及胚胎质量和IVF妊娠结局等。结果两组一般情况无明显区别,PCOS的获卵率明显低于对照组,而受精数,卵裂数,妊娠率等无明显差别。PCOS组中卵泡液睾酮(T)水平高于对照组。结论 PCOS患者内分泌紊乱尤其是高水平的卵泡液睾酮会影响卵子发育成熟,降低成熟卵子的获得率,但是卵子及胚胎质量并未受到影响,临床在促排卵前应注重改善PCOS微环境,提高成熟卵子获得率。(本文来源于《同济大学学报(医学版)》期刊2014年06期)

应诗家[10](2012)在《黄体期不同饲喂量对湖羊卵泡发育、血液理化指标和卵泡内微环境的影响》一文中研究指出本文研究了在同一生殖和营养生理状态下湖羊黄体期不同发育阶段卵泡内代谢产物和激素含量的变化关系,探讨了黄体期不同饲喂量对湖羊卵泡发育、血液和卵泡内代谢产物和激素浓度、卵泡和黄体细胞类固醇调节基因表达的影响,旨在揭示黄体期不同饲喂量影响卵泡发育的机制,为规模化羊场空怀母羊的科学饲养以及进一步研究营养影响绵羊繁殖性能的精细信号通路提供一定的参考。试验共分5个部分:试验一、湖羊不同发育阶段卵泡内代谢产物和激素含量的比较研究选择体重40kg左右的湖羊11头,同期发情结束后第12天屠宰,按不同大小卵泡分离卵泡液。试验结果显示,与≤2.5mm卵泡相比,>2.5mm卵泡内葡萄糖浓度显着提高(P<0.05),胰高血糖素浓度显着降低(P<0.05),乳酸脱氢酶活性和睾酮浓度极显着降低(P<0.01),雌二醇浓度极显着提高(P<0.01),血氨、游离脂肪酸、尿素、胰岛素和孕酮浓度差异不显着。雌二醇浓度与LDH活性极显着负相关(P<0.01),与葡萄糖浓度显着正相关(P<0.05),与胰高血糖素浓度显着负相关(P<0.05),与睾酮浓度极显着负相关(P<0.01),与孕酮浓度接近正相关(P=0.051)。试验结果表明,卵泡内代谢产物和激素共同参与调节卵泡发育。试验二、黄体期不同饲喂量对湖羊卵泡发育的影响选择体重40kg左右,3-4岁的经产健康母羊28头,随机分叁组:R组(n=11),C组(n=6)和S组(n=11),同期发情结束后第6天分别按0.5倍体重维持需要量(0.5×M),1×M和1.5×M饲喂,第12天每组屠宰6只,分离不小于1.0mm的卵泡,分别计算每头羊卵泡直径为1.0-2.0mm,2.0-2.5mm,2.5-3.5mm和≥3.5mm卵泡数和卵泡体积,剩下的湖羊用于观察发情。分别在放栓、拆栓、不同饲喂量处理和屠宰时称重和评定体况。试验结果显示,整个试验过程中体重和体况无显着性差异。随着饲喂水平提高,≥3.5mm卵泡数显着增加(P<0.05),2.5-3.5mm卵泡数显着降低(P<0.05),平均发情周期缩短(P<0.05),>2.5mm卵泡平均体积显着增大(P<0.05)。试验结果表明,黄体溶解前限饲6天抑制卵泡发育。试验叁、黄体期不同饲喂量对湖羊血液理化指标的影响发情周期第12天屠宰后,测量器官重量,在不同饲喂量处理期每天采血。试验结果显示,随着饲喂水平降低,血液尿素,胆固醇,低密度脂蛋白、游离脂肪酸、FSH、雌二醇和孕酮含量及孕酮与雌二醇比值和胰岛素和胰高血糖素比值显着升高(P<0.05),葡萄糖、甘油叁酯、叁碘甲状原氨酸、胰岛素和胰高血糖素含量显着降低(P<0.05);血液尿酸,血氨,高密度脂蛋白和谷草转氨酶和谷丙转氨酶活性差异不显着(P>0.05),但尿酸、血氨、低密度脂蛋白含量和谷草转氨酶活性具有时间效应(P<0.05)。R组亮氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、酪氨酸、丝氨酸、乙醇胺、必须氨基酸、必须氨基酸衍生物、氨基酸代谢物和总氨基酸在饲喂期间低于S组,而牛磺酸、瓜氨酸和氨能代谢产物与总氨基酸比值高于S组。与S组相比,R组脾脏重,脾脏与体重比值显着升高(P<0.05),肝脏重、小肠重、肝脏与体重比和胃重与体重比显着降低(P<0.05)。试验结果表明,绵羊黄体期不同生理阶段具有不同的营养需求和代谢特点;黄体期限饲抑制卵泡发育与能量负平衡引起蛋白质和脂类合成降低,分解增强以及氨基酸代谢和内分泌激素分泌模式改变相关。试验四、黄体期不同饲喂量对湖羊卵泡液微环境的影响发情周期第12天屠宰后,取每头羊卵巢,分离1.0-2.0mm组,2.0-2.5mm组和单个>2.5mm卵泡卵泡液。试验结果显示,与S组相比,R组增加了卵泡内雌二醇、磷酸乙醇胺、尿素(P<0.05)和δ-羟赖氨酸浓度(P=0.085),减少了鸟氨酸浓度、必须氨基酸与必须氨基酸衍生物比值(P<0.05)和氨能代谢产物与总氨基酸比值(P=0.075)。限饲和补饲组卵泡内胰岛素水平相似,但高于对照组(P<0.05)。不同大小卵泡显着影响卵泡液葡萄糖、雌二醇、睾酮、胰岛素、胰高血糖素和乳酸脱氢酶水平(P<0.05),但仅在R组茎2.5mm卵泡液和>2.5mm卵泡液乳酸脱氢酶活性和睾酮浓度差异不显着。试验结果表明,黄体期限饲影响了发育后期卵泡内氨基酸代谢,增加雌二醇和睾酮浓度以及乳酸脱氢酶的活性,抑制了卵泡发育。试验五、黄体期不同饲喂量对湖羊卵泡细胞类固醇调节基因表达的影响发情周期第12天屠宰后,取每头羊卵巢,分离1.0-2.0mm组,2.0-2.5mm组和单个>2.5mm卵泡细胞以及黄体细胞。试验结果显示,不同饲喂量仅影响ESR1、CYP17A1和CYP19A1mRNA表达水平(P<0.05)。对>2.5mm卵泡细胞,R和C组CYP17A1mRNA表达水平显着低于S组(P<0.05),R组CYP19A1mRNA表达水平显着高于S组(P<0.05),ESR1mRNA表达水平显着低于C和S组(P<0.05)。不同大小卵泡显着影响VLDLR、ESR2、FSHR (P<0.05)、CYP17A1和CYP19A1(P <0.01) mRNA表达水平,在S组>2.5mm卵泡细胞ESR2mRNA表达水平显着低于≤2.5mm卵泡细胞。试验结果表明,黄体期限饲抑制卵泡发育的机制可能是限饲影响发育后期卵泡内CYP17A1、CYP19A1和ESR1mRNA表达水平。(本文来源于《南京农业大学》期刊2012-05-01)

卵泡微环境论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

目的研究卵泡微环境中外泌体对体外受精-胚胎移植(IVF-ET)妊娠结局的的影响,明确卵泡微环境中外泌体的来源。方法选取200例就诊于宁夏医科大学生殖中心仅因输卵管因素行IVF的卵巢功能正常的年轻不孕患者,根据患者的妊娠结局分为两组,即妊娠组和未妊娠组。收集临床、实验室数据,比较两组之间的AMH、FSH、FSH/LH、AFC、MⅡ卵率、受精率和优胚率,并收集两组患者的卵泡液,通过ExoQuick试剂盒分离出外泌体,在透射电镜和扫描电镜下观察其形态,采用Nanosight LM 10(Malvern)检测卵泡液中外泌体的浓度,利用2,2-联喹啉-4,4-二甲酸二钠(BCA)法检测外泌体的蛋白浓度;采用Western blot检测外泌体表面标志物CD9、CD63和CD81;通过PCR检测外泌体GDF9、BMP15的表达,从而明确外泌体的来源。采用多变量偏相关分析及logistic回归分析评估AMH、FSH、FSH/LH、AFC、获卵数及外泌体浓度对优胚率及妊娠结局的预测价值。结果病历资料分析结果显示,两组研究对象的血清AMH、FSH、LH、FSH/LH、AFC水平在统计学意义上没有差异(P>0.05);妊娠组的MⅡ卵率、受精率和优胚率高于未妊娠组(P<0.05);在电镜下观察到两组研究对象的外泌体呈圆形或椭圆形膜性囊泡结构;Nanosight LM 10(Malvern)检测结果显示:未妊娠组外泌体平均颗粒浓度为2.93±1.55×10~(10)颗粒/mL,妊娠组为4.09±2.11×10~(10)颗粒/mL。两组患者卵泡液中外泌体颗粒浓度差异有统计学意义(P<0.05);BCA法显示妊娠组外泌体样本的蛋白表达强度高于未妊娠组(P<0.05),Western blot结果显示两组患者的外泌体均表达其表面特异性标志物CD9、CD63和CD81,且含同浓度蛋白的情况下,妊娠组的外泌体CD9、CD63和CD81表达明显高于未妊娠组。PCR表明两组研究对象的外泌体均表达卵子的标志物GDF9、BMP15。基础FSH(r=0.17,P=0.017)及卵泡液中外泌体浓度(r=0.881,P=0.00)是影响优胚率的独立因素,基础AFC(B=0.107 P=0.033)及卵泡液中外泌体的浓度(B=0.419 P=0.00)是影响妊娠结局的独立因素。结论:卵泡液中外泌体浓度是影响妊娠结局的独立因素;发育后期卵泡中的外泌体可能来源于卵细胞。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

卵泡微环境论文参考文献

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