导读:本文包含了桃拉综合症病毒论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:microRNA,凡纳滨对虾,桃拉综合症病毒
桃拉综合症病毒论文文献综述
马宁,曾地刚,黎铭,王建平,杨琼[1]（2015）在《桃拉综合症病毒感染诱导的凡纳滨对虾microRNA表达差异的研究》一文中研究指出microRNAs(miRNAs)在调节动物的获得性和先天性免疫中发挥重要作用。为研究病毒感染对凡纳滨对虾miRNA表达的影响,构建了桃拉综合症病毒感染和对照的凡纳滨对虾的小RNA文库,利用Solexa高通量测序技术对小RNA文库进行测序,分别得到61854276和65320117条小RNA序列,其中有2864337条序列被注释为保守的miRNA,对应87种已知的miRNA。对高表达量的miRNA进行表达差异分析,得到了22个差异表达miRNA,其中8个上调表达,14个下调表达。对差异表达miRNA的靶基因进行了预测,其中预测得分最高的靶基因大多数涉及到动物的免疫或细胞凋亡功能,说明miRNA在对虾的免疫机制中起着非常重要的作用。研究结果提供了凡纳滨对虾miRNA响应病毒感染的表达谱的基础资料,这将有助于揭示miRNA在对虾的抗病毒免疫机制中的作用。(本文来源于《西南农业学报》期刊2015年05期）
杨倩[2]（2012）在《桃拉综合症病毒和草鱼呼肠孤病毒外壳蛋白抗体的制备与分析》一文中研究指出水产动物病毒性疾病给水产养殖业带来了严重危害。桃拉综合症病毒（Taurasyndrome virus，TSV）和草鱼呼肠孤病毒（Grass carp reovirus，GCRV）分别是感染南美白对虾和草鱼的主要病原，严重影响了其养殖业的健康发展，因此展开对这两种水产动物病毒结构蛋白的研究显得尤为必要。TSV隶属双顺反子病毒科（Dicistroviridae），蜜蜂麻痹病毒属（Aparavirus）；其基因组大小约为10kb，包含两个开放性阅读框架（ORF），ORF1编码非结构蛋白，ORF2编码叁种结构蛋白：VP1，VP2，VP3。GCRV隶属呼肠孤病毒科，水生呼肠孤病毒属（Aquareovirus），其基因组共编码7种结构蛋白和5种非结构蛋白。其中VP7是一种结构蛋白，由S10基因组片段编码，与VP5蛋白形成异源二聚体进而形成外壳蛋白层；VP7蛋白可以结合dsRNA，与病毒的细胞吸附有关。本研究对TSV结构蛋白基因vp2、vp3进行了克隆表达，并对结构蛋白VP2、VP3及GCRV病毒外壳蛋白VP7进行了表达纯化、相应的多克隆及单克隆抗体的抗体制备，主要内容如下：1．桃拉综合症病毒结构蛋白基因vp2、vp3的克隆表达及抗体制备根据GeneBank中桃拉综合症病毒的全基因组序列，分别设计该病毒的主要结构蛋白基因vp2、vp3的对应引物，提取感染TSV的南美白对虾中的总RNA并以此为模板，利用RT-PCR技术对目的基因进行了扩增;将目的基因vp2和vp3分别克隆到表达载体pET-16b-1和pGEX-4t-3质粒中，并转化入Escherichia coli BL2（1DE3）和DH5α中。经IPTG诱导和SDS-PAGE分析后，分别获得大小分别为42kDa和48kDa的重组蛋白VP2和VP3，且两种目的蛋白均以包涵体形式存在。将蛋白胶上目的蛋白条带割胶纯化并作为多抗制备的免疫原获得抗VP2血清（P-vp2）和抗VP3血清（P-vp3）。单克隆抗体的制备以合成的VP2及VP3多肽为免疫原，经BALB/c小鼠免疫、细胞融合及克隆亚克隆筛选获得杂交瘤细胞，对培养上清液纯化后获得抗VP2单克隆抗体（M-vp2）和抗VP3单克隆抗体（M-vp3）。Western blot分析显示四种均可与体外表达的蛋白发生特异性免疫反应，且与大肠杆菌中其他蛋白无交叉反应。Immunodot-blot结果显示两种多抗血清与两种单克隆抗体均可以从TSV感染的对虾中检测到VP2蛋白和VP3蛋白；同时，单克隆抗体对TSV结构蛋白的特异性较多抗血清高；单克隆抗体M-vp2的效价较单克隆抗体M-vp3略高。该结果为TSV的免疫检测方法的建立提供了技术基础，为实现TSV的免疫学防控提供了可能。2．草鱼呼肠孤病毒外壳蛋白VP7的表达及单克隆抗体的制备将体外构建的VP7表达质粒转化至Escherichia coli DH5α感受态细胞中，经IPTG诱导后，获得重组蛋白VP7，对诱导产物进行SDS-PAGE分析。SDS-PAGE结果显示VP7蛋白以包涵体形式存在。将蛋白胶上目的蛋白条带割胶纯化并作为多抗制备的免疫原获得抗VP7血清。采用体外微量中和实验分析该多抗血清的中和能力。无菌取免疫小鼠脾细胞与SP2/0瘤细胞融合，经两次筛选及再克隆得到12株分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞。通过ELISA及Western blot方法筛选出最佳单抗株，获得GCRV病毒外壳蛋白VP7单抗株，制备单克隆抗体。采用辛酸饱和硫酸铵法对小鼠腹水及细胞培养上清液进行纯化并鉴定该单克隆抗体的亚型。微量中和实验及病毒滴度实验结果证明该多抗血清能够特异性中和GCRV粒子，并且能够有效的阻止GCRV病毒的感染。ELISA及Western blot分析显示单克隆抗体对50TCID50GCRV病毒的最低检测浓度为0.737μg/ml，且对GST标签蛋白无交叉反应。抗体亚型鉴定结果显示该单克隆抗体的亚型为IgG2b。采用该抗体分别对采自不同地区的草鱼病样进行ELISA检测，以RT-PCR检测法作为对照。对采集的草鱼出血病样品的ELISA结果显示：样品检出阳性率与RT-PCR结果一致，该单抗对GCRV病原具有高度特异性和灵敏性，可用于GCRV的检测和结构蛋白分析。本研究制备的草鱼呼肠孤病毒单克隆抗体具有较好的特异性以及灵敏性，可用于草鱼呼肠孤病毒临床的免疫学检测，为GCRV的免疫检测技术研发提供了资料。同时，为以后对GCRV病毒与宿主之间的免疫反应以及对现有GCRV疫苗的评价提供了基础资料。(本文来源于《上海海洋大学》期刊2012-04-06）
王建平,余晓巍,顾建明,吴雄飞[3]（2009）在《宁波地区南美白对虾桃拉综合症病毒(TSV)的检测与分析》一文中研究指出桃拉综合症病毒(Taura Syndrome Virus,TSV)是对虾养殖业危害较严重的病毒之一。应用RT-PCR技术,对2004～2008年在宁波地区收集的1201份南美白对虾样品进行TSV检测,旨在调查了解该地区TSV的流行情况,为科学防控该病的发生提供参考。结果表明,被检样品中,44份样品呈现阳性结果,总阳性率为3.66%,且2004～2008年南美白对虾TSV阳性检出率呈逐年降低的趋势。可见,宁波地区南美白对虾桃拉综合症已得到有效防制。(本文来源于《广西农业科学》期刊2009年09期）
黎铭,陈晓汉[4]（2008）在《对虾桃拉综合症病毒(TSV)的分子生物学研究进展》一文中研究指出对虾桃拉综合症病毒(Taura syndrome virus,TSV)是危害对虾养殖的一个重要病原,开展该病毒的分子生物学研究具有重要的应用价值。文章综述了近年来国内外在TSV的病毒分离与鉴别、TSV检测方法的建立与改善、TSV与宿主感染后相互作用机理等方面的研究进展,提出今后应加强对TSV的病毒分离和保存技术、TSV的纯化和攻毒技术、抗TSV相关基因和抗TSV药物等方面的研究,以提高对TSV的预防和控制水平。(本文来源于《广西农业科学》期刊2008年06期）
孙静秋,许燕,李晓英[5]（2008）在《感染桃拉综合症病毒的凡纳滨对虾体内4种同工酶酶谱的变化》一文中研究指出采用聚丙烯酰胺凝胶垂直平板电泳法,对凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)成体的复眼、肝脏、心脏、鳃和肌肉等5种组织中的酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)、酯酶(EST)和过氧化物酶(POD)4种同工酶进行研究,并将健康虾与感染桃拉综合症病毒(TSV)病虾的同工酶酶谱进行比较。结果表明,这4种同工酶在凡纳滨对虾体内的不同组织均有分布,但在酶活性和条带数量上存在不同程度的组织特异性,其中4种同工酶均在肝脏组织中表达最强,ACP和POD在肌肉中、EST在复眼中表达最弱,AKP在复眼中不表达。感染TSV后,病虾的ACP和AKP均出现酶带数量减少和酶活性降低,如病虾的ACP酶谱在肝脏、心脏和鳃中缺失的酶带数分别为2、1和1条,酶活性也呈现下降;AKP酶谱在肝脏、心脏和肌肉中缺失的酶带数分别为3、4和3条,且酶活性均明显降低;而病虾的EST和POD表达的酶带数和酶活性却均有明显增加,尤其是在肝脏和心脏中,EST分别新增3条和5条酶带,POD各新增1条酶带。总之这4种同工酶的表型在健康虾和病虾之间存在着明显的差异,尤其是在肝脏中的变化最为明显,说明肝脏中这4种同工酶的特异性变化可以作为研究凡纳滨对虾桃拉综合症的生理生化指标。(本文来源于《中国水产科学》期刊2008年01期）
唐红日,唐新民,江辉[6]（2007）在《使用戊二醛对桃拉病毒综合症的治疗报告》一文中研究指出2007年8月,江门市新会区某养殖场发生了"身体变红、甲壳上长有黑斑"等症状的疾病,经现场调查和症状观察确诊为桃拉病毒综合症即红体病。我们用5%戊二醛等药物进行及时综合治疗发现:效果显着,病情迅速得到有效控制,对虾表现正常。现将有关情况报告如下:(本文来源于《渔业致富指南》期刊2007年21期）
张聪[7]（2007）在《传染性皮下及造血组织坏死病毒（IHHNV）和桃拉综合症病毒（TSV）的分子流行病学研究》一文中研究指出南美白对虾是中国对虾养殖的一个重要品种。传染性皮下及造血组织坏死病毒(Infectious Hypodermal and Hematopoietic Necrosis Virus，IHHNV)和桃拉综合症病毒(Taura Syndrome Virus，TSV)是对虾疾病的两种主要的病毒病原，给对虾养殖业带来了严重的经济损失。我们采集了来自中国七个不同地区的214份南美白对虾样品，采用PCR或RT-PCR的方法分别检测了IHHNV和TSV。检测结果表明样品中IHHNV阳性率为65.42％，而TSV为3.27％。并且有少数样品能同时被这两种病毒感染，揭示这两种病毒能共存于同一只宿主中。随后，我们选取七个地区的IHHNV阳性样品进行基因组片段的扩增，扩增片段长3065个核苷酸，包含病毒非结构蛋白基因和衣壳蛋白基因。与IHHNV原始参考毒株夏威夷株的基因组序列比对结果表明，这七株序列的变异率很低，与夏威夷株核苷酸相似性可达99.3％到99.9％，并且衣壳蛋白基因的核苷酸突变率(1.92％)高于非结构蛋白基因(1.00％)。突变位点在整个病毒基因组上呈现无规则的散状分布。同样的，我们选取了叁个地区TSV阳性样品进行了结构蛋白基因片段扩增和测序。结合GenBank公布的序列，利用病毒的结构蛋白基因进行了聚类分析，结果显示TSV能明显分为两组(亚洲组和美洲组)，显示出显着的地域差别。另外，与IHHNV不同的是，TSV结构蛋白基因的变异位点集中于VP1区，且变异位点呈现明显规律性，可作为基因分型的依据。(本文来源于《中国科学院研究生院（武汉病毒研究所）》期刊2007-05-01）
陈晓汉,曾地刚,彭敏,雷爱莹,李咏梅[8]（2006）在《一步二温式RT-PCR检测南美白对虾桃拉综合症病毒》一文中研究指出建立一种一步法和二温式的逆转录聚合酶链式反应,用于扩增南美白对虾桃拉综合症病毒231bp的特异基因片断,对300份南美白对虾临床样品的检测结果表明,这是一种快速和敏感的桃拉综合症病毒诊断方法。(本文来源于《广西水产研究所论文集（2001—2005）》期刊2006-10-01）
陈晓汉,曾地刚,彭敏,雷爱莹,李咏梅[9]（2005）在《一步二温式RT-PCR检测南美白对虾桃拉综合症病毒》一文中研究指出建立一种一步法和二温式的逆转录聚合酶链式反应,用于扩增南美白对虾桃拉综合症病毒231bp的特异基因片断,对300份南美白对虾临床样品的检测结果表明,这是一种快速和敏感的桃拉综合症病毒诊断方法。(本文来源于《西南农业学报》期刊2005年03期）
RobertA.Bullis,廖国璋[10]（2002）在《加温对降低南美白对虾感染桃拉病毒综合症的效果》一文中研究指出首次发现桃拉病毒综合症(Taura SyndromeVirus)是在厄瓜多尔的 Guyaquil 湾桃拉(Taura)河口养殖的虾类种群内(Jiminez,1992)这种病毒被发现以后的5年内,引起南美洲、中美洲、北美洲,以及夏威夷养殖的南美白对虾(Litopenaeusvannamei)灾难性的大量死亡。1998年以后,在台湾亦发现这种病毒引发南美白对虾的死亡(Tu等1999)。感染桃拉病毒传染病的病虾呈现叁种明显(本文来源于《水产科技》期刊2002年06期）
桃拉综合症病毒论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
水产动物病毒性疾病给水产养殖业带来了严重危害。桃拉综合症病毒（Taurasyndrome virus，TSV）和草鱼呼肠孤病毒（Grass carp reovirus，GCRV）分别是感染南美白对虾和草鱼的主要病原，严重影响了其养殖业的健康发展，因此展开对这两种水产动物病毒结构蛋白的研究显得尤为必要。TSV隶属双顺反子病毒科（Dicistroviridae），蜜蜂麻痹病毒属（Aparavirus）；其基因组大小约为10kb，包含两个开放性阅读框架（ORF），ORF1编码非结构蛋白，ORF2编码叁种结构蛋白：VP1，VP2，VP3。GCRV隶属呼肠孤病毒科，水生呼肠孤病毒属（Aquareovirus），其基因组共编码7种结构蛋白和5种非结构蛋白。其中VP7是一种结构蛋白，由S10基因组片段编码，与VP5蛋白形成异源二聚体进而形成外壳蛋白层；VP7蛋白可以结合dsRNA，与病毒的细胞吸附有关。本研究对TSV结构蛋白基因vp2、vp3进行了克隆表达，并对结构蛋白VP2、VP3及GCRV病毒外壳蛋白VP7进行了表达纯化、相应的多克隆及单克隆抗体的抗体制备，主要内容如下：1．桃拉综合症病毒结构蛋白基因vp2、vp3的克隆表达及抗体制备根据GeneBank中桃拉综合症病毒的全基因组序列，分别设计该病毒的主要结构蛋白基因vp2、vp3的对应引物，提取感染TSV的南美白对虾中的总RNA并以此为模板，利用RT-PCR技术对目的基因进行了扩增;将目的基因vp2和vp3分别克隆到表达载体pET-16b-1和pGEX-4t-3质粒中，并转化入Escherichia coli BL2（1DE3）和DH5α中。经IPTG诱导和SDS-PAGE分析后，分别获得大小分别为42kDa和48kDa的重组蛋白VP2和VP3，且两种目的蛋白均以包涵体形式存在。将蛋白胶上目的蛋白条带割胶纯化并作为多抗制备的免疫原获得抗VP2血清（P-vp2）和抗VP3血清（P-vp3）。单克隆抗体的制备以合成的VP2及VP3多肽为免疫原，经BALB/c小鼠免疫、细胞融合及克隆亚克隆筛选获得杂交瘤细胞，对培养上清液纯化后获得抗VP2单克隆抗体（M-vp2）和抗VP3单克隆抗体（M-vp3）。Western blot分析显示四种均可与体外表达的蛋白发生特异性免疫反应，且与大肠杆菌中其他蛋白无交叉反应。Immunodot-blot结果显示两种多抗血清与两种单克隆抗体均可以从TSV感染的对虾中检测到VP2蛋白和VP3蛋白；同时，单克隆抗体对TSV结构蛋白的特异性较多抗血清高；单克隆抗体M-vp2的效价较单克隆抗体M-vp3略高。该结果为TSV的免疫检测方法的建立提供了技术基础，为实现TSV的免疫学防控提供了可能。2．草鱼呼肠孤病毒外壳蛋白VP7的表达及单克隆抗体的制备将体外构建的VP7表达质粒转化至Escherichia coli DH5α感受态细胞中，经IPTG诱导后，获得重组蛋白VP7，对诱导产物进行SDS-PAGE分析。SDS-PAGE结果显示VP7蛋白以包涵体形式存在。将蛋白胶上目的蛋白条带割胶纯化并作为多抗制备的免疫原获得抗VP7血清。采用体外微量中和实验分析该多抗血清的中和能力。无菌取免疫小鼠脾细胞与SP2/0瘤细胞融合，经两次筛选及再克隆得到12株分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞。通过ELISA及Western blot方法筛选出最佳单抗株，获得GCRV病毒外壳蛋白VP7单抗株，制备单克隆抗体。采用辛酸饱和硫酸铵法对小鼠腹水及细胞培养上清液进行纯化并鉴定该单克隆抗体的亚型。微量中和实验及病毒滴度实验结果证明该多抗血清能够特异性中和GCRV粒子，并且能够有效的阻止GCRV病毒的感染。ELISA及Western blot分析显示单克隆抗体对50TCID50GCRV病毒的最低检测浓度为0.737μg/ml，且对GST标签蛋白无交叉反应。抗体亚型鉴定结果显示该单克隆抗体的亚型为IgG2b。采用该抗体分别对采自不同地区的草鱼病样进行ELISA检测，以RT-PCR检测法作为对照。对采集的草鱼出血病样品的ELISA结果显示：样品检出阳性率与RT-PCR结果一致，该单抗对GCRV病原具有高度特异性和灵敏性，可用于GCRV的检测和结构蛋白分析。本研究制备的草鱼呼肠孤病毒单克隆抗体具有较好的特异性以及灵敏性，可用于草鱼呼肠孤病毒临床的免疫学检测，为GCRV的免疫检测技术研发提供了资料。同时，为以后对GCRV病毒与宿主之间的免疫反应以及对现有GCRV疫苗的评价提供了基础资料。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
桃拉综合症病毒论文参考文献
[1].马宁,曾地刚,黎铭,王建平,杨琼.桃拉综合症病毒感染诱导的凡纳滨对虾microRNA表达差异的研究[J].西南农业学报.2015
[2].杨倩.桃拉综合症病毒和草鱼呼肠孤病毒外壳蛋白抗体的制备与分析[D].上海海洋大学.2012
[3].王建平,余晓巍,顾建明,吴雄飞.宁波地区南美白对虾桃拉综合症病毒(TSV)的检测与分析[J].广西农业科学.2009
[4].黎铭,陈晓汉.对虾桃拉综合症病毒(TSV)的分子生物学研究进展[J].广西农业科学.2008
[5].孙静秋,许燕,李晓英.感染桃拉综合症病毒的凡纳滨对虾体内4种同工酶酶谱的变化[J].中国水产科学.2008
[6].唐红日,唐新民,江辉.使用戊二醛对桃拉病毒综合症的治疗报告[J].渔业致富指南.2007
[7].张聪.传染性皮下及造血组织坏死病毒（IHHNV）和桃拉综合症病毒（TSV）的分子流行病学研究[D].中国科学院研究生院（武汉病毒研究所）.2007
[8].陈晓汉,曾地刚,彭敏,雷爱莹,李咏梅.一步二温式RT-PCR检测南美白对虾桃拉综合症病毒[C].广西水产研究所论文集（2001—2005）.2006
[9].陈晓汉,曾地刚,彭敏,雷爱莹,李咏梅.一步二温式RT-PCR检测南美白对虾桃拉综合症病毒[J].西南农业学报.2005
[10].RobertA.Bullis,廖国璋.加温对降低南美白对虾感染桃拉病毒综合症的效果[J].水产科技.2002