导读:本文包含了单因子血清论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:猪流感病毒,H1亚型,H3亚型,单因子血清
单因子血清论文文献综述
翁少亭,曹建科,常艳凯,张素梅[1]（2016）在《H1和H3亚型猪流感病毒血凝素单因子血清的制备》一文中研究指出为了优化H1和H3亚型猪流感病毒(Swine Influenza Viruse,SIV)血清学检测方法,更准确了解猪流感病毒在中国猪群中的流行与分布情况,本试验制备了欧洲禽源猪H1N1病毒和人源猪H3N2病毒的血凝素特异性单因子血清。将人工合成的2种HA基因与p CAGGS真核表达载体做连接,构建HA基因的真核表达重组质粒。经酶切鉴定及体外瞬时表达检测证实重组质粒结构正确,能正常表达目的蛋白。大量提取纯化重组质粒,以每只鸡200μg的剂量肌肉接种SPF鸡,叁免后收获鸡血清。通过血凝抑制试验检测HA单因子血清效价。试验结果显示,HA单因子血清抗体水平达到4log_2~6log_2。交叉HI试验结果显示,2个亚型血清间无交叉反应现象,特异性强。(本文来源于《河南农业大学学报》期刊2016年05期）
孙鹏,陈孜孟,赵国梁,崔宁,祖铭[2]（2016）在《K亚群禽白血病病毒gp85单因子血清的制备及其特异性鉴定》一文中研究指出为了制备一种快速特异性识别K亚群禽白血病病毒(ALV-K)的单因子血清,本试验将ALV-K接种DF1细胞,提取感染细胞DNA作为模板,PCR扩增1 005bp ALV-K-gp85和510bp ALV-K-gp85(fragment)基因。将其正确的阅读框插入表达载体pET-28a(+)中,转化大肠杆菌BL21(Rosetta)菌株中表达。将表达蛋白常规免疫昆明白小鼠制备抗血清。结果表明成功获得39.85和22.01ku的重组融合蛋白,且具有良好的免疫原性。间接免疫荧光试验(IFA)结果表明两血清均可与ALV-K反应,而不与ALV-A、ALV-B和ALV-J反应。本试验首次研制获得能特异性识别ALV-K的单因子血清,为K亚群禽白血病的快速检测奠定了基础。(本文来源于《中国畜牧兽医》期刊2016年02期）
陈俊霞,孙鹏,许书珍,李思菲,苏帅[3]（2015）在《H9N2亚型禽流感病毒HA基因的表达及其单因子血清的制备》一文中研究指出为了制备特异性识别H9N2亚型禽流感病毒(AIV)的单因子血清,本试验提取H9N2亚型AIV RNA,RT-PCR后,分别扩增上段HA1、中段HA2和下段HA3 3段基因。将他们插入原核表达载体pET-32a(+)中,转化BL21(Rosetta)菌株中表达。将表达的蛋白常规免疫昆明白小鼠,以制备抗血清。结果显示,成功获得3段重组融合蛋白,且均具有良好的免疫原性。间接免疫荧光试验(IFA)结果显示,上段HA1、中段HA2制备的单因子血清均可与H9N2亚型AIV反应,而下段HA3则不能。重组马立克氏病病毒(MDV)MZC12 HA/NA同样证明HA1、HA2两段制备的单因子血清能识别HA基因的表达。本试验成功制备了识别H9N2亚型AIV HA的单因子血清,为H9N2亚型AIV的鉴别诊断及研究奠定了基础。(本文来源于《中国畜牧兽医》期刊2015年11期）
杨佳运,李旭勇,贾艳娥,郭晶,翁少亭[4]（2015）在《H4和H6亚型禽流感病毒血凝素蛋白特异性单因子血清的制备》一文中研究指出为制备H4和H6亚型禽流感病毒血凝素蛋白特异性单因子血清,以便快速鉴定H4以及H6亚型禽流感病毒,根据GenBank中A/Duck/Hunan/S11090/2012(H4N6)和A/Chicken/Guangdong/S1312/2010(H6N2)的血凝素基因序列,人工合成并进行密码子优化后插入真核表达载体pCAGGs,通过双酶切鉴定以及测序确定重组质粒构建成功。给每只SPF鸡注射免疫200μg重组质粒,免疫周期为30d,第3次免疫后第10天,通过心脏采血收获单因子血清。间接免疫荧光试验和Western-blot试验的结果表明,重组质粒中HA基因均被成功表达。利用H4和H6亚型禽流感病毒抗原进行血凝抑制试验,结果显示抗体效价均在64至128之间,表明制备的单因子血清抗体效价较高,敏感性强。使用其他亚型的禽流感病毒以及新城疫病毒为抗原进行血凝抑制试验发现结果均为阴性,表明制备的单因子血清与其他亚型禽流感病毒及新城疫病毒无交叉反应。(本文来源于《中国兽医科学》期刊2015年10期）
林中青,王俊勇,李小阳,刘彬,郭建宏[5]（2014）在《H7N9亚型禽流感病毒血凝素和神经氨酸酶单因子血清的制备》一文中研究指出为获得特异性H7N9亚型禽流感病毒(AIV)血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)单因子血清,根据GenBank中A/Chicken/Zhejiang/SD007/2013毒株的序列人工合成了HA基因和NA基因,然后将其分别克隆至真核表达载体pCAGGS,构建了重组真核表达质粒pCAGGS-HA和pCAGGS-NA,经酶切和测序鉴定后将阳性重组质粒转染COS-7细胞,利用H7N9AIV鸡血清进行Western-blot分析。结果显示,重组质粒中的目的基因均能够成功表达。将重组质粒以每只200μg的剂量免疫4周龄SPF鸡,二免后第14天采集血清并用间接免疫荧光试验和Western-blot检测抗体。结果显示,免疫鸡产生的血清均能与对应质粒经COS-7细胞表达的蛋白发生特异性反应。结果表明,成功制备的H7N9AIV HA蛋白和NA蛋白单因子血清具有良好的反应原性,为提高H7N9AIV的血清学检测方法的准确性提供了一定技术支撑。(本文来源于《中国兽医科学》期刊2014年07期）
路明华,王雪敏,李淑芳,路迎迎,张培君[6]（2014）在《副猪嗜血杆菌单因子血清的制备》一文中研究指出利用副猪嗜血杆菌(Hps)的15个血清型的参考菌株分别制备相应的兔抗血清,然后对抗血清进行交叉吸收试验,得到15个血清型的单因子血清,不同血清型的单因子血清不与其他血清型抗原发生反应。应用这15种单因子血清对临床分离到的9株副猪嗜血杆菌进行血清型的鉴定,结果表明,其中6株为5型,2株为4型,1株为7型。(本文来源于《动物医学进展》期刊2014年07期）
郭翠平[7]（2014）在《鸭星状病毒1型WF1202株全基因组序列的测定与单因子血清的制备》一文中研究指出鸭病毒性肝炎(Duck viral hepatitis, DVH)是雏鸭的一种传播迅速、高度致死的病毒性传染病，由鸭甲肝病毒(Duck hepatitis A virus, DHAV)和鸭星状病毒(Duck astrovirus,DAstV)引起，主要感染3周龄以内的雏鸭。根据2009年的国际病毒分类委员第十次分类报告，将DHV分为鸭甲肝病毒(DHAV)，鸭星状病毒1型(DAstV-1)，鸭星状病毒2型(DAstV-2)叁个血清型。DHAV-1一直是我国流行的优势血清型，但近年来在我国关于DHAV-3的流行和DHAV-1与DHAV-3共流行的的报道越来越来，涉及的地区也越来越多，特别是DAstV-1在我国的出现又进一步增加了鸭病毒性肝炎的防治难度。为深入了解DAstV-1基因组变异情况，本研究对1株DAstV-1山东分离株WF1202进行了全基因组序列测定分析与单因子血清的制备。1、鸭星状病毒WF1202株的分离鉴定及全基因组测序与分析本研究应用RT-PCR方法扩增了Dastv-1中国山东潍坊分离株WF1202的不同核酸片段，并对其进行了全基因组序列测定与分析。测序结果表明，该株毒具有星状病毒基因的典型特征：在RF1a和ORF1b的重迭区存在一个7碱基滑动序列AAAAAAC，其下游存在一个可配对形成颈环结构的序列。序列分析结果表明该毒株与山东潍坊WF1201株的亲缘关系较近，全基因组核苷酸具有99.4%的同源性。2、单因子血清的制备与特异性检测本研究根据DAstV-1的GenBank已知序列信息，设计了1对特异性引物，通过RT-PCR方法扩增DAstV-1WF1202株ORF2全长基因片段，并将ORF2定向克隆到原核表达载体pET-32a(+)中，得到的重组质粒转化进大肠杆菌Rosetta(DE3)PLys中，利用IPTG诱导表达得到大小为102KD的融合蛋白；Western blot分析发现该重组蛋白能与抗Dastv-1阳性血清进行反应，具有良好的免疫学活性。用纯化的重组蛋白作为抗原免疫昆明鼠，获得抗DAstV-1ORF2蛋白的鼠源单因子血清，并进一步验证其鸭星状病毒是否具有特异性中和作用，为鸭星状病毒的防治及该病毒蛋白功的能研究、ELISA检测方法的建立和病毒在鸭组织上的定位奠定了基础。(本文来源于《山东农业大学》期刊2014-05-04）
刘雪美,秦建如,李育豪,曹伟胜[8]（2013）在《Ⅱ群禽腺病毒五邻体蛋白单因子血清的制备》一文中研究指出通过PCR方法扩增得到Ⅱ群禽腺病毒火鸡出血性肠炎病毒(HEV)的五邻体(penton)基因,并构建了原核表达载体pET-32a-penton,将其转化至E.coil BL21中,通过诱导表达,以切胶回收的方式纯化蛋白,获得约70ku的重组融合蛋白,Western blotting检测纯化后的重组蛋白具有较好的抗原性。将纯化后的重组蛋白免疫新西兰大白兔,制备了五邻体蛋白单因子血清,间接ELISA检测结果显示所制备的抗血清效价大于1∶40000。本试验获得的高效单因子血清,为Ⅱ群禽腺病毒特异性检测方法的研究奠定了基础。(本文来源于《中国畜牧兽医》期刊2013年10期）
张瑶瑶[9]（2013）在《H9N2亚型禽流感病毒HA基因真核和原核表达及其单因子血清的制备》一文中研究指出近年来，禽流感的暴发与流行给养禽业的发展和公共卫生安全造成了严重的危害。2003年12月9日，香港发生H9N2亚型禽流感疫情，H9N2亚型为低致病性禽流感病毒，但是因为它传播广泛，而且同样可引起人和动物致病，甚至引起疫病的暴发和流行，其危害不容忽视，做好禽流感的诊断与监测显得尤为重要。更为重要的是禽流感病毒亚型众多且变异性强，给检测带来了很大困难。禽流感病毒蛋白质含有5种多肽，即血凝素、神经氨酸酶、基质蛋白、核蛋白和多聚酶。血凝素是流感病毒的主要表面糖蛋白，具有凝集多种动物红细胞的性质，借助HA对细胞受体的作用，使病毒粘附于细胞，在穿膜过程中起关键作用。HA的变异性很强，是病毒发生抗原变异的主要原因。HA具有诱生中和抗体的能力，产生免疫保护作用，因此血凝素在禽流感的诊断和防治中起重要作用，成为禽流感的研究热点。本课题起初是以禽流感HA基因为靶点构建真核表达质粒。我们首先通过RT-PCR方法扩增了H9N2亚型禽流感病毒的HA基因并克隆插入到真核质粒pcDNA3.1-A中，构建了真核表达质粒pcDNA3.1-A-HA。将构建的真核表达质粒通过脂质体转染CEF，鉴定其在CEF上的表达。同时通过设计不同引物构建了叁种PET-32a(+)/HA原核表达载体，并在大肠杆菌BL21中通过IPTG诱导表达，然后用HA蛋白和真核表达质粒pcDNA3.1-A-HA联合以及HA蛋白单独免疫小鼠，制备了抗HA蛋白的单因子血清，并通过间接免疫荧光方法检测了此单因子血清的特异性。比较两种不同方法得到的抗HA蛋白的单因子血清，结果显示，这两种抗体都具有具有很好的免疫反应性，并且单因子血清IFA效价接近。本研究为进一步研发禽流感病毒疫苗及诊断试剂提供了重要的实验材料及有价值的数据。(本文来源于《山东农业大学》期刊2013-06-13）
王一新,陈浩,赵鹏,李建亮,崔治中[10]（2013）在《用单因子血清识别急性致瘤性ALV诱发肿瘤组织中的fps肿瘤抗原》一文中研究指出【目的】制备鼠抗fps单因子血清,检测急性致瘤性ALV诱发肉瘤组织中的fps肿瘤抗原。【方法】以J亚群相关禽白血病/肉瘤病毒Fu-J株RNA为模板,分两段扩增v-fps肿瘤基因,利用大肠杆菌表达系统表达这两段蛋白,纯化后将两种蛋白同时免疫小鼠,获得抗血清,间接免疫荧光试验检测肉瘤组织滤过液感染的CEF和肿瘤细胞中的fps抗原,免疫组织化学方法检测肿瘤组织中的fps抗原。【结果】该单因子血清具有较好特异性,不与经典ALV-J发生交叉反应。被感染的CEF细胞、肿瘤细胞及纤维肉瘤组织切片均显示阳性。【结论】该实验制备了鼠抗fps单因子血清,建立了fps肿瘤抗原的检测方法,为进一步研究该病毒的生物学特性及其致瘤机制奠定了基础。(本文来源于《微生物学报》期刊2013年03期）
单因子血清论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
为了制备一种快速特异性识别K亚群禽白血病病毒(ALV-K)的单因子血清,本试验将ALV-K接种DF1细胞,提取感染细胞DNA作为模板,PCR扩增1 005bp ALV-K-gp85和510bp ALV-K-gp85(fragment)基因。将其正确的阅读框插入表达载体pET-28a(+)中,转化大肠杆菌BL21(Rosetta)菌株中表达。将表达蛋白常规免疫昆明白小鼠制备抗血清。结果表明成功获得39.85和22.01ku的重组融合蛋白,且具有良好的免疫原性。间接免疫荧光试验(IFA)结果表明两血清均可与ALV-K反应,而不与ALV-A、ALV-B和ALV-J反应。本试验首次研制获得能特异性识别ALV-K的单因子血清,为K亚群禽白血病的快速检测奠定了基础。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
单因子血清论文参考文献
[1].翁少亭,曹建科,常艳凯,张素梅.H1和H3亚型猪流感病毒血凝素单因子血清的制备[J].河南农业大学学报.2016
[2].孙鹏,陈孜孟,赵国梁,崔宁,祖铭.K亚群禽白血病病毒gp85单因子血清的制备及其特异性鉴定[J].中国畜牧兽医.2016
[3].陈俊霞,孙鹏,许书珍,李思菲,苏帅.H9N2亚型禽流感病毒HA基因的表达及其单因子血清的制备[J].中国畜牧兽医.2015
[4].杨佳运,李旭勇,贾艳娥,郭晶,翁少亭.H4和H6亚型禽流感病毒血凝素蛋白特异性单因子血清的制备[J].中国兽医科学.2015
[5].林中青,王俊勇,李小阳,刘彬,郭建宏.H7N9亚型禽流感病毒血凝素和神经氨酸酶单因子血清的制备[J].中国兽医科学.2014
[6].路明华,王雪敏,李淑芳,路迎迎,张培君.副猪嗜血杆菌单因子血清的制备[J].动物医学进展.2014
[7].郭翠平.鸭星状病毒1型WF1202株全基因组序列的测定与单因子血清的制备[D].山东农业大学.2014
[8].刘雪美,秦建如,李育豪,曹伟胜.Ⅱ群禽腺病毒五邻体蛋白单因子血清的制备[J].中国畜牧兽医.2013
[9].张瑶瑶.H9N2亚型禽流感病毒HA基因真核和原核表达及其单因子血清的制备[D].山东农业大学.2013
[10].王一新,陈浩,赵鹏,李建亮,崔治中.用单因子血清识别急性致瘤性ALV诱发肿瘤组织中的fps肿瘤抗原[J].微生物学报.2013