导读:本文包含了生茸区骨膜论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:鹿茸生茸区骨膜,发育,蛋白质组,14-3-3蛋白
生茸区骨膜论文文献综述
刘慧[1](2017)在《雄激素刺激母鹿生茸区骨膜发育前后的差异蛋白筛选与分析》一文中研究指出鹿茸是雄性鹿科动物(驯鹿除外)的第二性征,是唯一可以完全再生的哺乳动物附属器官。鹿茸发生是指雄性仔鹿进入青春期后角柄和初角茸的形成过程。鹿额外脊上的生茸区骨膜(Antlerogenic Periosteum,AP)是鹿茸发生的组织基础。AP包含了鹿茸器官发育的蓝图。雄激素在鹿茸发生中起到重要作用,AP只有受到雄激素刺激以后才能发育形成角柄和初角茸。Li.C等研究发现仔公鹿去势则导致鹿茸发生失败,如果注射外源性雄激素则会使去势仔鹿的AP重新发育形成角柄进而成为鹿茸;同时雌鹿也有AP发育为角柄的潜力,但雌鹿因没有足够的雄性激素刺激而无法表达这一性状。雄激素是刺激鹿茸发生的先决条件,AP发育生长为鹿茸这一过程具有雄激素浓度的依赖性。AP发育形成鹿茸角柄是由体内雄激素水平的增加引起的,AP发育与睾酮浓度的变化密切相关。为探索鹿茸生长过程中有无雄激素刺激AP蛋白表达的差异,利用2D DIGE技术筛选生茸区骨膜发育前后的差异蛋白。深入研究鹿茸生茸区骨膜发育蛋白质组学,将为揭示鹿茸发生的分子机制提供基本根据。1.雄激素诱导雌性梅花鹿生茸区骨膜发育选取两头健康一岁龄幼母鹿,试验组雌鹿注射外源性雄激素(十一酸睾酮),对照组注射用于溶解雄激素的茶树油,二者皆为每隔一周注射,持续一个月后,利用角柄发生检测器检测鹿茸角柄是否发育,采集生茸区骨膜进行HE染色。结果显示试验组雌鹿鹿茸生茸区骨膜发育,发育的AP细胞层明显增厚。对照组生茸区骨膜未见发育,梅花鹿母鹿同公鹿一样具有生发角柄和鹿茸的组织学基础,雄激素是调控鹿茸生长的关键因子,人工诱导母鹿生茸区骨膜发育是研究鹿茸生长调控机制的优良模型。2.鹿茸生茸区骨膜发育前后差异表达蛋白的蛋白质组学分析提取梅花鹿母鹿生茸区骨膜发育前后样品骨膜组织总蛋白,2D DIGE试验和质谱鉴定;总结质谱鉴定结果数据,对差异表达的组织蛋白进行生物信息学分析。通过生茸区骨膜组织总蛋白的2D DIGE分析,具有统计学意义(p<0.05,差异倍比≥1.5)的差异蛋白质点318个,其中有163个蛋白在发育后的生茸区骨膜蛋白中上调表达,155个蛋白在发育后的生茸区骨膜中下调表达。最终鉴定出17个可用的组织差异蛋白,按功能分类主要有结合相关蛋白,酶调活性相关蛋白,结构分子活性相关蛋白,催化活性相关蛋白,抗氧化活性相关蛋白。获得部分差异明显的生茸区骨膜发育前后骨膜组织蛋白组表达谱,与未发育生茸区骨膜相比,在发育后的生茸区骨膜蛋白中有10个骨膜蛋白下调表达,有7个骨膜蛋白上调表达,这些蛋白很有可能参与了生茸区骨膜的发育过程,是触发鹿茸形成的关键蛋白,发现14-3-3ε、GSN、COL6A2、ERBBFI1等蛋白与鹿茸发生过程密切相关3.生茸区骨膜发育相关蛋白14-3-3ε蛋白基因的克隆及生物信息学分析梅花鹿YWHAE基因编码区核苷酸全长768 bp,编码255个氨基酸,氨基酸水平上与牛相似性高达99.6%;氨基酸序列分析表明鹿YWHAE基因编码的14-3-3ε蛋白相对分子量为29163.86Da,主要定位在细胞质内,属于可溶性蛋白;预测鹿14-3-3ε蛋白氨基酸含有19个磷酸化位点、无糖基化位点;其二级结构以螺旋为主,叁级结构呈弯曲螺旋状态。14-3-3ε为重点蛋白,通过细胞迁移和细胞稳定性来调控鹿茸生长;采用PCR方法扩增梅花鹿14-3-3ε蛋白基因并进行测序分析,试验确定梅花鹿YWHAE基因表达的14-3-3蛋白具有高度保守性。(本文来源于《中国农业科学院》期刊2017-06-01)
邵帅,郭倩倩,齐晓妍,李春义[2](2015)在《鹿生茸区骨膜不同部位生茸潜力的研究进展》一文中研究指出鹿茸是雄鹿的第二性征,是由雄鹿头部额外脊处的骨膜组织所形成的,这部分骨膜被称为"生茸区骨膜"。生茸区骨膜具有巨大的生茸潜力,将生茸骨区膜移植到鹿体的其它部位,能诱导异位鹿茸的发生;一片直径约2cm的生茸区骨膜组能够在约60d的内再生出约10kg左右的鹿茸组织。研究发现,生茸区骨膜不同区域具有不同的生茸潜力,分别负责形成鹿茸的不同分枝和主干;生茸区骨膜细胞为干细胞。鹿茸干细胞的发现,为研究鹿茸生物学特性和揭示鹿茸完全再生机制开辟了一条新的通路。(本文来源于《特产研究》期刊2015年02期)
鲁晓萍,褚文辉,孙红梅,王大涛,刘琳玲[3](2013)在《梅花鹿生茸区骨膜细胞裂解液抗血清的制备》一文中研究指出为了制备高质量的兔抗梅花鹿生茸区骨膜细胞裂解液血清,用于免疫学筛选cDNA表达文库,试验采用淋巴结注射和背部皮下注射的方法制备了兔抗梅花鹿生茸区骨膜细胞裂解液血清。结果表明:制备的抗血清效价是1∶128,质量较高。(本文来源于《黑龙江畜牧兽医》期刊2013年11期)
秦欣欣[4](2013)在《梅花鹿生茸区骨膜干细胞Galectin-1基因RNAi重组慢病毒载体的构建》一文中研究指出当代,随着养鹿产业的快速发展,鹿肉在欧洲很多国家已成为一种餐桌食品,但在一些东南亚国家例如中国、日本等,人们更注重的是鹿茸的价值。鹿茸在中医药学中具有提高机体免疫力、抗衰老、促进创伤愈合和骨质修复等作用,被广泛的用于治疗或滋补。鹿茸是哺乳动物中唯一能周期性完全再生的附属器官,是研究哺乳动物器官修复及再生的绝佳生物模型。鹿茸的再生源于生茸干细胞,最快生长速度可以达到1~2cm/d,媲美癌细胞,但高速的生长并未使鹿茸发生癌变,这为癌症的研究提供了新的医学模型。Galectin-1(半乳糖凝集素1)分子量约为14kDa,是一种糖结合蛋白,动物凝集素家族的成员之一。Galectin-1(Gal-1)与神经修复、血管再生、软骨形成等多个生物过程相关,现阶段对它的研究主要集中在癌变过程中,也有其在胚胎发育过程中的研究报道。鹿茸的再生过程涉及了神经、血管、软骨、皮肤等的生长,研究表明,Gal-1在生茸干细胞中的表达量与普通细胞中的不同,在两种生茸干细胞之中的表达量也不相同。令人感兴趣的是,Gal-1在生茸干细胞中的大量表达并未引起鹿茸的癌变,也就是说,研究Gal-1在鹿茸再生机制中的作用十分重要的。本实验采用慢病毒载体介导的RNAi(RNA interference)技术,以生茸区骨膜干细胞为研究对象,为后期在离体条件下探讨Gal-1在鹿茸血管、神经、软骨形成中的作用及活体研究打下基础。总体实验设计如下:利用在线设计软件、通用设计法则及文献报道进行RNAi高分靶位点的筛选,使用NCBI中的Blast工具除去脱靶效应(offtarget)情况。根据实验室经验设计shRNA(短发夹RNA)寡核苷酸链,进行化学合成。将化学合成的shRNA正义链和反义链进行体外退火,使其形成双链,并插入经过酶切的载体质粒进行重组连接。对重组质粒进行PCR初步鉴定,测序进一步鉴定;将重组成功的载体质粒pLVTHM及包装质粒psPAX2和包膜质粒pMD2.G,进行无内毒素的大量提取,使用罗氏转染试剂,共转染293t细胞,分别在24h和48h时收集、浓缩病毒。将采集的生茸区骨膜进行细胞原代培养,利用浓缩病毒液感染生茸区骨膜干细胞,并在72h后利用倒置荧光显微镜观察感染效果。结果:首先,成功筛选出2条针对梅花鹿Gal-1基因的RNAi高分靶位点,成功将化学合成的shRNA正义链与反义链进行体外退火形成双链核苷酸链;其次,根据实验需要成功重组了载体质粒pLVTHM;然后,利用慢病毒叁质粒系统成功转染了293t细胞,获得了大量的重组慢病毒粒子;同时,成功对生茸区骨膜干细胞进行了原代培养,并获得感染成功的生茸区骨膜干细胞。结论:本实验成功构建出针对梅花鹿Gal-1基因的慢病毒载体,获得大量的浓缩病毒液且成功感染鹿生茸区骨膜干细胞,获得了能够遗传的,Gal-1有效沉默的生茸区骨膜干细胞系,为Gal-1基因的功能研究打下了基础。(本文来源于《江苏科技大学》期刊2013-05-02)
鲁晓萍,孙红梅,褚文辉,王大涛,赵海平[5](2013)在《梅花鹿生茸区骨膜细胞基因片段测序分析》一文中研究指出在已经构建的梅花鹿生茸区骨膜细胞cDNA表达文库的基础上对文库中的噬菌斑进行随机挑取筛选,对筛选出来的噬菌斑进行质粒亚克隆、鉴定及表达序列标签序列测定和生物信息学分析。通过随机筛选及生物信息学分析的方法发现,在梅花鹿生茸区骨膜细胞中有特殊意义的基因或者基因片段。随机挑选表达频率比较高的11个基因片段中有6个基因片段具有重要意义,对这6个基因片段进行了生物信息学分析,为进一步的鹿茸生物学研究打下了基础。(本文来源于《特产研究》期刊2013年01期)
魏明立[6](2012)在《梅花鹿生茸区骨膜细胞S100A4基因RNAi重组慢病毒载体的构建》一文中研究指出近年来,在世界上养鹿业发展迅猛,诸如中国、新西兰、加拿大、俄罗斯等国家。在欧美国家,人们以消费鹿肉为主。而中国、韩国、日本等东南亚国家在食用鹿肉的同时,还将鹿茸作为一种重要的中药材用于治疗或滋补。鹿茸年复一年进行周期性更新,是哺乳动物中唯一能够完全再生的器官。鹿茸的生长速度可达到1~2cm/d,肿瘤细胞的生长速度也很快。但是,鹿茸并没有发生癌变的迹象。综上所述,鹿茸可以作为一个良好的生物医学研究模型以供研究。S100A4蛋白是一个由101个氨基酸组成的小分子多肽,其在正常的组织中不表达,而在癌组织中高度表达。目前已有报道证实,鹿茸的再生是一个基于干细胞的过程,且其干细胞为生茸区骨膜细胞和角柄骨膜细胞。通过凝胶双向电泳和Western Blot实验发现,S100A4基因在生茸区骨膜细胞中表达,而在角柄骨膜细胞中不表达。角柄骨膜是由生茸区骨膜衍生而来。角柄形成以后,生茸区骨膜就无法分辨出来了。因此,深入研究S100A4的功能,有益于我们进一步了解鹿茸再生的内在机制与调控模式,对再生医学和癌症的控制与治疗有一定的积极意义。本实验根据文献报道提出的siRNA筛选法则针对东北梅花鹿S100A4基因筛选出RNAi高分靶位点,并利用NCBI中的BLAST工具去除脱靶情况。然后,设计出shRNA寡核苷酸链,交由生物公司进行化学合成。合成后,将shRNA正义链与反义链进行退火连接。在T4连接酶的作用下,将其与经由ClaⅠ和MluⅠ酶切的载体质粒pLVTHM进行连接,并通过PCR鉴定及测序筛选出阳性质粒。无内毒素大量提取pLVTHM阳性重组质粒与包膜质粒pMD2.G及包装质粒pCMV-dr8.91。采用脂质体转染法将叁种质粒共转染到293T细胞中。24h后,在倒置荧光显微镜下观察转染效果并收集浓缩病毒。使用慢病毒浓缩液感染生茸区骨膜细胞。48h后,在倒置荧光显微镜下观察感染效果。本实验成功筛选出2条针对梅花鹿S100A4基因的RNAi高分靶位点。化学合成的shRNA正义链与反义链退火连接形成小片段双链核苷酸链。将其插入到载体质粒pLVTHM酶切产物中。由PCR鉴定初步判断重组质粒连接成功。通过测序最终确认shRNA正确插入到载体质粒中。无内毒素的叁质粒共转染293T细胞24h后,在倒置荧光显微镜下观察到大量的绿色荧光。慢病毒浓缩液感染生茸区骨膜细胞96h后,也可在倒置荧光显微镜下观察到大量的绿色荧光。结果表明,本实验成功构建出针对梅花鹿S100A4基因的慢病毒载体并获得大量高效的浓缩病毒液。为下一步RNA沉默S100A4基因活体实验打下了基础。(本文来源于《中国农业科学院》期刊2012-06-01)
于淼[7](2012)在《梅花鹿生茸区骨膜细胞培养及其染色体核型分析》一文中研究指出梅花鹿是我国重要的特种经济动物,而鹿茸是其最为重要的经济产品。作为雄鹿的重要第二性征,鹿茸具有周期性脱落和快速再生的特点,在快速生长期时鹿茸每天可生长1-3cm,其细胞分化速度达到了癌细胞的30倍以上,这些特点使得鹿茸不仅具有医疗价值,同时也成为了一个具有特殊意义的生物医学模型。鹿生茸区骨膜细胞是产生鹿茸的干细胞,是鹿茸发育和再生的发起点,通过对这种组织细胞的研究,可以帮助人们更好的理解鹿茸发生及再生的机制,而对鹿生茸区骨膜细胞体外培养的研究则是开展鹿茸快速再生机制研究的基础和前提,同时为研究人类断肢再生和细胞增长调控提供借鉴。针对鹿茸骨膜干细胞研究的重要意义,本论文开展了两个部分试验内容,梅花鹿生茸区骨膜干细胞培养体系的优化和梅花鹿生茸区骨膜干细胞染色体稳定性的判定,试验方法和结果如下:本实验以中国农业科学院特产研究所鹿场的梅花鹿生茸区骨膜细胞为对象,经原代培养、传代、冻存和复苏几个步骤后,对其体外培养的各种条件和方法进行了探讨。结果说明,在加有10%FBS的DMEM培养基中,梅花鹿生茸区骨膜细胞可以旺盛生长,传代间隔时间为2-3d,冻存时DMSO加入比为10%,细胞经复苏后,生长良好。为判断其是否具有稳定的细胞系遗传性,研究了经传代15代的鹿生茸区骨膜细胞的染色体,显示了其核型,绘制了核型分析图,并对骨膜细胞体外培养传代和染色体制备进行了探讨。结果显示,观察的80个细胞中,有67个细胞染色体数2n=66,占细胞总数的84%,说明二倍体占据主体,确认了在体外培养15代的骨膜细胞染色体没有发生异常,仍具有稳定的生物学特性。(本文来源于《中国农业科学院》期刊2012-06-01)
鲁晓萍,赵海平,杨福合,秀梅,李春义[8](2010)在《梅花鹿生茸区骨膜干细胞cDNA表达文库的构建》一文中研究指出本研究提取鹿生茸区骨膜干细胞RNA,进而纯化mRNA,利用Oligo(dT)引物反转录合成双链cDNA,然后在其两端加EcoRⅠ/HindⅢ定向接头并酶切,将cDNA分子定向连接到具有EcoRⅠ/HindⅢ粘性末端的λSCREEN载体中,经过柱分级分离后,体外包装成初级文库,进行文库库容量测定和扩增,初级文库库容量约为1.5×10~6pfu/毫升。PCR检测cDNA文库的质量表明,插入片段均分布在300bp以上。因此,我们认为我们已在鹿茸的研究史上成功地构建了梅花鹿鹿生茸区骨膜干细胞的cDNA文库,为进一步开展鹿茸发育的分子生物学研究奠定了基础。(本文来源于《2010中国鹿业进展》期刊2010-08-28)
鲁晓萍,赵海平,杨福合,邢秀梅,李春义[9](2009)在《梅花鹿生茸区骨膜干细胞cDNA表达文库的构建》一文中研究指出鹿茸是雄鹿额部生长出来的尚未骨化的嫩角,是雄鹿的第二性征,具有较高的药用价值。鹿茸是唯一的失去后还能完全再生的器官,它每天能生长1~2 cm,是生长最快的组织。鹿茸不会出现癌变特征,可以作为很好的器官再生研究模型。搞清楚鹿茸再生机制将为动物组织器官再生提(本文来源于《黑龙江畜牧兽医》期刊2009年19期)
高志光[10](2009)在《梅花鹿生茸区骨膜及角柄骨膜在鹿茸生长发育中作用的研究》一文中研究指出鹿茸不仅具有重要的医疗保健价值,而且,鹿茸角每年周期性脱落和再生,生长过程中锯断或损伤也能再生,这种再生现象是哺乳动物中绝无仅有的。因此,鹿茸的发生、发育及再生的机理一直是养鹿界和生物医学界的重要研究内容。关于鹿茸发生和再生机理,有大脑中枢控制的“鹿茸生长中心”论;有角柄真皮层细胞分裂繁殖理论;有鹿茸再生干细胞理论;关于鹿茸发生和再生的基础组织至今尚未完全定论;鹿茸形态由什么所控制,至今尚未见报导;IGF1是鹿茸生长发育的重要调控因子,它是通过与受体(IGF1R)结合才发挥对鹿茸生长作用的,然而生茸区骨膜是否存在IGF1尚未见报导,通过本研究可以基本阐明鹿茸发生、发育和再生机理,完善鹿茸生长发育理论。在养鹿业的生产实践中,可以利用它调控鹿茸的生长发育,提高鹿茸的产量和质量;在生物医学方面,也是研究哺乳动物乃至人类组织器官再生及创伤修复的理想模型。由此可见,本研究不仅有深远的理论意义,还要重要的实际意义。以梅花鹿(Cervus nippon)为对象,通过4个试验对鹿茸发生和再生进行了系统研究。试验一:通过完整生茸区骨膜切除和移植,根据原位和异位角柄及鹿茸发生和发育情况,阐明鹿茸角柄和鹿茸发生的组织基础;试验二:通过部分生茸区骨膜切除和移植,根据原位和异位鹿茸发育情况,探讨生茸区骨膜不同部位对鹿茸形态发育的作用;试验叁:通过插入不透膜,阻断角柄皮肤和骨膜间的相互作用,根据鹿茸的再生情况,阐明鹿茸再生的组织来源;试验四:通过蛋白质印迹方法检测生茸区骨膜及不同部位IGF1R,旨在通过生茸区骨膜是否含有IGF1R以及不同部位IGF1R含量的高低,从分子水平证明生茸区骨膜在鹿茸发生中的地位和作用。试验一结果:被完全切除骨膜的生茸区不能发生角柄和鹿茸;被移植的部位发生了异位的角柄和鹿茸。这些鹿茸正常脱盘,并形成了完整的二杠和叁杈茸。试验二结果:切除半片骨膜的生茸区仍能发生角柄和鹿茸。这些鹿茸能够正常脱盘和再生,但是鹿茸的形态发育受到影响,按前后划分,基本是前半片决定眉枝发育,后半片影响较小;按内外划分是内半片决定侧枝(包括眉枝和第二侧枝),外半片影响较小。被移植的半片生茸区骨膜在异位能发生角柄和鹿茸,并能正常骨化和脱盘,但是形态不完整。试验叁结果:被不透膜阻隔了皮肤的角柄仍能再生出鹿茸,但是这些鹿茸没有皮肤覆盖,即形成了没有茸皮的鹿茸,并且表现出发生侧枝的迹象,而茸皮没能再生。试验四结果:根据电泳图谱显示的结果,生茸区骨膜中存在IGF1R,而且在前、后、内、外都存在。其中前半片比后半片含量略高;内半片比外半片略高。根据本研究的4个试验结果,得出如下结论:生茸区骨膜是鹿茸发生的组织基础,它决定了角柄和鹿茸的发生及鹿茸的的形态发育,它的中央区域是由鹿茸干细胞构成的“鹿茸发生中心”;角柄及相关组织对鹿茸生长发育有辅助作用;生茸区骨膜不同部位对鹿茸形态有区别控制的作用,前半区控制眉枝,内半区控制侧枝;生茸区骨膜能发生角柄和鹿茸,但是不能发生和再生茸皮,茸皮来源于头皮,对鹿茸生长发育有重要的辅助作用;鹿茸再生是源于角柄骨膜及鹿茸骨膜,其根源是生茸区骨膜;生茸区骨膜中存在IGF1R,证明了生茸区骨膜的重要地位及IGF1的重要作用。(本文来源于《中国农业科学院》期刊2009-05-01)
生茸区骨膜论文开题报告
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
鹿茸是雄鹿的第二性征,是由雄鹿头部额外脊处的骨膜组织所形成的,这部分骨膜被称为"生茸区骨膜"。生茸区骨膜具有巨大的生茸潜力,将生茸骨区膜移植到鹿体的其它部位,能诱导异位鹿茸的发生;一片直径约2cm的生茸区骨膜组能够在约60d的内再生出约10kg左右的鹿茸组织。研究发现,生茸区骨膜不同区域具有不同的生茸潜力,分别负责形成鹿茸的不同分枝和主干;生茸区骨膜细胞为干细胞。鹿茸干细胞的发现,为研究鹿茸生物学特性和揭示鹿茸完全再生机制开辟了一条新的通路。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
生茸区骨膜论文参考文献
[1].刘慧.雄激素刺激母鹿生茸区骨膜发育前后的差异蛋白筛选与分析[D].中国农业科学院.2017
[2].邵帅,郭倩倩,齐晓妍,李春义.鹿生茸区骨膜不同部位生茸潜力的研究进展[J].特产研究.2015
[3].鲁晓萍,褚文辉,孙红梅,王大涛,刘琳玲.梅花鹿生茸区骨膜细胞裂解液抗血清的制备[J].黑龙江畜牧兽医.2013
[4].秦欣欣.梅花鹿生茸区骨膜干细胞Galectin-1基因RNAi重组慢病毒载体的构建[D].江苏科技大学.2013
[5].鲁晓萍,孙红梅,褚文辉,王大涛,赵海平.梅花鹿生茸区骨膜细胞基因片段测序分析[J].特产研究.2013
[6].魏明立.梅花鹿生茸区骨膜细胞S100A4基因RNAi重组慢病毒载体的构建[D].中国农业科学院.2012
[7].于淼.梅花鹿生茸区骨膜细胞培养及其染色体核型分析[D].中国农业科学院.2012
[8].鲁晓萍,赵海平,杨福合,秀梅,李春义.梅花鹿生茸区骨膜干细胞cDNA表达文库的构建[C].2010中国鹿业进展.2010
[9].鲁晓萍,赵海平,杨福合,邢秀梅,李春义.梅花鹿生茸区骨膜干细胞cDNA表达文库的构建[J].黑龙江畜牧兽医.2009
[10].高志光.梅花鹿生茸区骨膜及角柄骨膜在鹿茸生长发育中作用的研究[D].中国农业科学院.2009