导读:本文包含了滑膜间充质干细胞论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:滑膜,间充质基质细胞,软骨,细胞分化
滑膜间充质干细胞论文文献综述
孙玉波,齐志明,李晋,张爽,李作洪[1]（2019）在《人滑膜间充质干细胞向软骨诱导分化的基础研究》一文中研究指出目的探讨人滑膜间充质干细胞(SMSCs)向软骨诱导分化的条件及分子机制,为半月板组织工程修复提供基础。方法选取膝关节创伤患者5例,关节镜下取滑膜组织4～8片,每片约1 mm×3 mm×1 mm,加入含10%胎牛血清的低糖培养基进行原代及传代培养,以单克隆培养法获得纯化的滑膜间充质干细胞系,后采用流式细胞仪进行干细胞表型鉴定,并向完全培养基加转化生长因子-β1(TGF-β1)、地塞米松(DEX)、维生素C(VC)进行软骨诱导分化,采用免疫组化法检测诱导后Ⅱ型胶原(COLⅡ)的表达情况。结果含10%胎牛血清的低糖DMEM培养基最有利于细胞生长,采用单克隆培养法可获得纯化较高的细胞;流式鉴定细胞表型:细胞表达CD44、CD90,不表达CD34、CD45;免疫组化法检测未经诱导的细胞形态基本保持梭形,而诱导14 d后逐渐由小梭形变为多角形,可见大量棕色颗粒,COLⅡ阳性表达。结论人SMSCs优化生长条件:含10%胎牛血清的低糖DMEM培养基最有利于细胞生长,采用单克隆培养法可获得纯化较高细胞,且分离纯化的细胞免疫原性较低,适用于同种异基因体之间移植,可作为半月板组织工程修复的种子细胞。(本文来源于《中国医师杂志》期刊2019年09期）
杨业静,李兴艳,李林,梁红锁,黄家志[2]（2019）在《滑膜间充质干细胞-小肠黏膜下层复合体修复兔膝半月板损伤研究》一文中研究指出目的探讨滑膜间充质干细胞-小肠黏膜下层软骨诱导化复合体(SMSCs-SIS)修复兔膝关节半月板损伤的潜能及可行性。方法选取58只健康体质新西兰大白兔为研究对象,作膝关节半月板损伤造模后将其随机分为实验组(n=29)和对照组(n=29);实验组同时于半月板损伤处植入软骨诱导化SMSCs-SIS复合体;对照组仅植入小肠黏膜下层支架。后分别单笼饲养,两组大白兔均于术后第4周处死并取材,采用大体形态学观察、生物力学及阿尔新蓝比色法检测糖胺多糖(GAG)含量作为评估指标评价半月板损伤修复情况。结果大体及形态学观察结果显示实验组所有半月板裂口均愈合良好;对照组半月板损伤处裂口较前稍增宽,仅见少许再生组织填充,裂口周围组织萎缩。生物力学结果显示实验组半月板组织弹性模量为(42.71±2.02)Mpa,对照组为(10.01±1.52)Mpa,两组间损伤修复半月板组织弹性模量差异比较有统计学意义(P<0.05)。阿尔新蓝比色法GAG含量测定结果显示实验组为(4.14±1.02) ug/mL,对照组为(1.31±1.02)ug/mL,两组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论滑膜间充质干细胞-小肠黏膜下层软骨诱导化复合体材料(SMSCs-SIS)移植可有效促进兔膝半月板局部损伤的修复,是修复兔膝半月板损伤的有效方法之一。(本文来源于《世界最新医学信息文摘》期刊2019年63期）
陈子秋,刘顺贵,刘义,龚泰芳[3]（2019）在《微骨折术结合自体滑膜间充质干细胞移植修复关节软骨损伤的临床效果》一文中研究指出目的探讨微骨折术结合滑膜间充质干细胞(synovium-derived mesenchymal stem cells,SMSC移植对关节软骨损伤的修复效果。方法对我院自2016年1月至2017年6月收治的78例关节软骨损伤患者,根据治疗方法不同分为结合组(32例)和微骨折术组(46例),研究组采用微骨折术结合SMSC移植进行治疗,对照组采用微骨折术治疗,统计分析两组治疗前后的视觉模拟评分(visual analogue scale,VAS)、膝关节功能HSS评分、膝关节运动功能Tegner评分、再次手术及术后不良反应的发生情况。结果结合组治疗后VAS评分为(1.33±0.31)分,明显低于微骨折术组(1.74±0.42)分,两组相比差异有统计学意义(P=0.000)。结合组治疗后关节功能HSS评分为(80.85±6.37)分、膝关节运动功能Tegner评分为(7.25±0.74)分,均明显高于微骨折术组[(71.13±5.82)分,(6.17±0.62)分],两组相比差异有统计学意义(P=0.000;P=0.000)。研究组再次手术(0.00%)、白细胞减少(0.00%)、贫血(0.00%)、感染的发生率(3.13%)均低于微骨折术组(6.52%;15.22%;13.04%;6.52%),两组的白细胞减少及贫血发生率相比差异有统计学意义(P=0.021;P=0.034)。结论微骨折术结合SMSC移植对关节软骨损伤具有良好的修复效果,术后不良反应发生率较低。(本文来源于《中国骨与关节杂志》期刊2019年07期）
杨格[4]（2019）在《人脐带间充质干细胞微泡对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞组蛋白乙酰化水平影响的研究》一文中研究指出背景:表观遗传学异常所致的免疫调控紊乱参与类风湿关节炎(Rheumatoid Arthritis,RA)的发生、发展。组蛋白乙酰化修饰是一种在组蛋白赖氨酸残基上进行修饰的可逆的表观遗传学方式,通过组蛋白去乙酰化酶1(histone deacetylase1,HDAC1)和HDAC2从多方面调控并参与RA发病。本课题组前期研究发现人脐带间充质干细胞来源的微泡(human umbilical cord mesenchymal stem cells derived microvesicles,hUCMSC-MVs)可改善胶原诱导关节炎(Collagen-induced arthritis,CIA)大鼠关节症状及影像学表现,抑制滑膜增生,下调促炎因子及趋化因子水平,且作用不弱于母体细胞。滑膜成纤维细胞(fibroblast-like synoviocytes,FLSs)作为RA病理过程中的核心靶细胞,对RA的关节炎症及骨破坏起着关键作用。hUCMSC-MVs对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞(Rheumatoid Arthritis fibroblast-like synoviocytes,RA FLSs)功能的影响及作用机制尚不明确。目的:通过hUCMSC-MVs与RA FLSs体外共培养,探讨hUCMSC-MVs对RA FLSs增殖、凋亡、迁移功能及HDAC1、HDAC2表达的影响,阐明hUCMSC-MVs对RA FLSs的作用及可能的机制,从表观遗传学组蛋白乙酰化角度为hUCMSC-MVs治疗RA提供实验基础。方法:1.hUCMSC-MVs的分离、鉴定:复苏hUCMSCs,培养传代后取P3-P7代,“饥饿”培养24小时,采用差速超速离心法提取上清液,获得hUCMSC-MVs,透射电镜观察其形态,并采用免疫印迹法(Western Blot)鉴定其表面分子标志物。2.OA FLSs的分离、培养和鉴定:采用胰酶消化法体外分离、培养OA FLSs,倒置显微镜下观察其形态,并通过流式细胞术测定其表面抗原CD90、CD14、CD45。3.hUCMSC-MVs与RA FLSs共培养:观察其对RA FLSs增殖、凋亡、迁移功能及HDAC1、HDAC2蛋白表达的影响。(1)实验分组:共4组,分别是OA FLSs组、RA FLSs组、曲古抑菌素A(TrichostatinA,TSA)组、hUCMSC-MVs组。(2)检测指标:⑴CCK8法检测细胞增殖率,流式细胞术检测细胞凋亡率,划痕实验检测细胞迁移率;⑵Western Blot法测定hUCMSC-MVs干预前后RA FLSs中HDAC1、HDAC2表达的变化。结果:1.hUCMSC-MVs的分离和鉴定:透射电镜观察显示离心所得产物为一类直径介于40nm-300nm之间大小不一的囊泡状结构,Western Blot鉴定分子表面标志物,CD63、HSP70表达阳性。2.OA FLSs的分离、鉴定:倒置显微镜下观察细胞呈涡旋状分布,为长梭形、纺锤样外观。流式细胞术鉴定分子表面标志物,CD90阳性表达,CD14、CD45阴性表达。3.hUCMSC-MVs与RA FLSs体外共培养:(1)hUCMSC-MVs对RA FLSs增殖功能的影响:hUCMSC-MVs组浓度分为10ug/ml、50ug/ml、100ug/ml、150ug/ml、200ug/ml。1)与RA空白对照组比较,浓度为10ug/ml、50ug/ml、100ug/ml的hUCMSC-MVs组RA FLSs增殖率升高,浓度为150ug/ml、200ug/ml的hUCMSC-MVs组及TSA组RA FLSs增殖率下降,差异有统计学意义(P<0.001)。2)150ug/ml hUCMSC-MVs组与200ug/ml hUCMSC-MVs组FLSs增殖率无显着差异(P>0.05)。3)与TSA组相比,150ug/ml hUCMSC-MVs组、200ug/ml hUCMSC-MVs组RA FLSs增殖率升高,但无显着差异(P>0.05)。(2)hUCMSC-MVs对RA FLSs凋亡的影响:150 ug/ml hUCMSC-MVs组及TSA组FLSs凋亡率高于RA空白对照组,差异具有显着性(P<0.05)。与TSA组相比,hUCMSC-MVs组RA FLSs凋亡率升高,但无显着差异(P>0.05)。(3)hUCMSC-MVs对RA FLSs迁移功能的影响:在12h、24h时,150 ug/ml hUCMSC-MVs干预组及TSA组RA FLSs迁移率低于RA空白对照组,差异具有显着性(P<0.05)。hUCMSC-MVs组RA FLSs迁移率高于TSA组,但无显着差异(P>0.05)。(4)hUCMSC-MVs对RA FLSs中HDAC1、HDAC2蛋白表达的影响:RA FLSs组HDAC1、HDAC2蛋白表达均高于OA FLSs组,差异具有显着性(P<0.05);与RA FLSs组相比,hUCMSC-MVs组HDAC1蛋白表达下降(P<0.05),且作用不弱于TSA组。结论:hUCMSC-MVs可抑制RA FLSs的增殖、迁移能力,促进其凋亡;HDAC1和HDAC2参与RA的发病;hUCMSC-MVs可下调RA FLSs中HDAC1的表达,从组蛋白乙酰化角度抑制RA的发病。(本文来源于《山西医科大学》期刊2019-06-04）
苏雅珍[5]（2019）在《人脐带间充质干细胞微泡对类风湿关节炎患者滑膜成纤维细胞功能及Shh信号通路影响的研究》一文中研究指出背景:类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种以滑膜组织慢性炎症、软骨与骨渐进性破坏,最终导致关节畸形的自身免疫性疾病,滑膜成纤维细胞(fibroblast-like synoviocytes,FLSs)“类瘤样”生长是RA发病的中心环节。研究表明,无论是RA患者还是其动物模型Sonic Hedgehog(Shh)信号通路均处于异常激活状态,并通过促进FLSs过度增殖参与了RA的发病,且Ptch1基因高甲基化可使该通路过度激活,针对Shh信号通路的靶向治疗有望作为RA治疗的新策略。间充质干细胞微泡(mesenchymal stem cell microvesicles,MSC-MVs)是间充质干细胞(MSCs)体外培养基中分离的可溶性生物媒介,其不仅具有促进机体损伤组织的修复、抑制炎症反应和调节免疫反应的功能,还可规避直接体内注射活细胞带来的不利生物学效应。前期研究证实,人脐带间充质干细胞微泡(h UCMSC-MVs)移植可改善RA动物模型---胶原诱导关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)大鼠的关节炎症状、影像学及病理表现,并可以调节RA患者免疫紊乱。但h UCMSC-MVs对RA-FLSs功能的影响以及其作用机制目前尚不明确。目的:探讨h UCMSC-MVs对RA-FLSs增殖、凋亡、迁移能力的影响,进一步深入研究h UCMSC-MVs对RA-FLSs的影响是否通过靶向Shh信号通路,以及h UCMSC-MVs对Shh信号通路的影响是否是通过靶向Ptch1基因甲基化水平实现的。从细胞、蛋白、基因层面研究其分子机制,进一步揭示h UCMSC-MVs治疗RA的机制,为h UCMSC-MVs在RA的临床转化提供理论依据和实验基础。方法:1.h UCMSC-MVs获取及鉴定:购买h UCMSCs细胞系第1代,复苏培养传代至第4-5代用于实验。通过对h UCMSCs进行“饥饿”处理,差速离心条件培养基获取h UCMSC-MVs,从形态学、蛋白浓度及表面分子表达3方面进行鉴定。2.FLSs的获取及鉴定:购买人RA滑膜成纤维细胞系(MH7A)第4代,传代后用于实验。无菌条件下收集骨关节炎(osteoarthritis,OA)患者滑膜组织,将组织剪至乳糜状,胰蛋白酶消化法处理细胞,接种于DMEM培养液中。3-4天换液,细胞贴壁90%左右传代,选取第4-5代用于实验。流式细胞术检测OA-FLSs细胞表面标记分子CD14、CD45、CD90。3.实验分组:(1)检测RA-FLSs功能分组:分为RA空白对照组、Cyclopamine(Shh信号通路抑制剂)干预组、5-Azadc(DNA甲基化抑制剂)干预组、不同浓度h UCMSC-MVs干预组(10μg/μL、50μg/μL、100μg/μL、150μg/μL、200μg/μL);(2)检测Shh信号通路分子表达分组:分为OA组、RA空白对照组、Cyclopamine干预组、5-Azadc干预组、h UCMSC-MVs干预组。4.检测方法:(1)CCK8法检测各组细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡情况,划痕试验比较各组细胞迁移情况;(2)Western blot法检测各组Shh信号通路相关蛋白Shh、Gli1、Ptch1表达情况,Real-time PCR法检测各组相关基因SHH、GLI1、PTCH1m RNA表达情况。结果:1.h UCMSC-MVs获取及鉴定:通过梯度离心法获取h UCMSC-MVs,并成功对其进行鉴定。h UCMSC-MVs直径多数介于40nm-300nm,茶托样,具有脂质双分子层结构,重悬后蛋白质浓度约为2.00μg/μL,Western blot鉴定表面分子表达CD63和Hsp70。符合其鉴定标准,为进一步深入研究提供了依据。2.OA-FLSs的获取及鉴定:本实验成功分离培养OA-FLSs,经流式细胞鉴定其表面分子CD90表达率>90%,CD14和CD45表达率<1%,符合FLSs鉴定标准。3.h UCMSC-MVs对RA-FLSs功能的影响:1)h UCMSC-MVs对RA-FLSs增殖的影响:(1)与RA空白对照组相比,h UCMSC-MVs 10μg/m L、50μg/m L、100μg/m L干预组RA-FLSs增殖率明显升高(P<0.001、P<0.001、P<0.001),150μg/m L和200μg/m L干预组增殖率较RA空白对照组降低(P<0.001、P<0.001),且150μg/m L与200μg/m L干预组之间RA-FLSs增殖率无明显差异(P>0.05);(2)与RA空白对照组相比,Cyclopamine干预组与5-Azadc干预组RA-FLSs增殖率明显降低(P<0.001、P<0.001);h UCMSC-MVs 150μg/m L干预组与Cyclopamine干预组相比,FLSs增殖率下降(P<0.001),同时,h UCMSC-MVs 150μg/m L干预组与5-Azadc干预组FLSs增殖率无明显差异(P>0.05)。选取h UCMSC-MVs 150μg/m L干预组用于后续实验。2)h UCMSC-MVs对RA-FLSs凋亡的影响:与RA空白对照组相比,Cyclopamine干预组、5-Azadc干预组及h UCMSC-MVs干预组RA-FLSs凋亡率明显升高(P<0.01、P<0.01、P<0.01),h UCMSC-MVs干预组与其他各干预组之间凋亡率无明显差异(P>0.05);3)h UCMSC-MVs对RA-FLSs迁移的影响:(1)在干预12h后,与RA空白对照组相比,Cyclopamine干预组、5-Azadc干预组和h UCMSC-MVs干预组RA-FLSs迁移率均减低(P<0.001、P<0.01、P<0.05);Cyclopamine干预组迁移率较5-Azadc干预组和h UCMSC-MVs干预组明显减低(P<0.01、P<0.001),5-Azadc干预组和h UCMSC-MVs干预组之间迁移率无明显差异(P>0.05);(2)在干预24h后,与RA空白对照组相比,Cyclopamine干预组、5-Azadc干预组和h UCMSC-MVs干预组RA-FLSs迁移率均减低(P<0.001、P<0.001、P<0.01);Cyclopamine干预组迁移率较5-Azadc干预组和h UCMSC-MVs干预组明显减低(P<0.001、P<0.001),5-Azadc干预组较h UCMSC-MVs干预组迁移率减低(P<0.001);(3)在干预48h后,与RA空白对照组相比,Cyclopamine干预组、5-Azadc干预组RA-FLSs迁移率减低(P<0.001、P<0.05);h UCMSC-MVs干预组与RA空白对照组相比迁移率无明显差异(P>0.05)。4.h UCMSC-MVs对RA-FLSs Shh信号通路的影响:1)蛋白表达水平:(1)与OA组相比,RA空白对照组Shh、Gli1蛋白表达明显升高(P<0.001、P<0.001),Ptch1蛋白表达水平无明显差异(P>0.05);(2)与RA空白对照组相比,Cyclopamine干预组、5-Azadc干预组和h UCMSC-MVs干预组Shh蛋白表达均减低(P<0.05、P<0.05、P<0.01);各干预组之间Shh蛋白表达无明显差异(P>0.05)(3)与RA空白对照组相比,Cyclopamine干预组、5-Azadc干预组和h UCMSC-MVs干预组Gli1蛋白表达均减低(P<0.05、P<0.05、P<0.001);与Cyclopamine干预组相比h UCMSC-MVs干预组Gli1蛋白表达明显减低(P<0.05);5-Azadc干预组和h UCMSC-MVs干预组之间Gli1蛋白表达无明显差异(P>0.05)(4)各干预组与RA空白对照组相比Ptch1蛋白表达无明显差异(P>0.05);4)m RNA表达变化:(1)与OA组相比,RA空白对照组SHH、GLI1 m RNA表达增加(P<0.05、P<0.05),PTCH1 m RNA表达减低(P<0.05);(2)与RA空白对照组相比,Cyclopamine干预组、5-Azadc干预组和h UCMSC-MVs干预组SHH m RNA表达减低(P<0.001、P<0.01、P<0.01),余各组之间SHH m RNA表达无明显差异(P>0.05)。(3)与RA空白对照组相比,Cyclopamine干预组、5-Azadc干预组和h UCMSC-MVs干预组GLI1 m RNA表达均减低(P<0.05、P<0.05、P<0.05),各干预组间GLI1 m RNA表达无明显差异(P>0.05);(4)与RA空白对照组相比,Cyclopamine干预组、5-Azadc干预组和h UCMSC-MVs干预组PTCH1 m RNA表达均升高(P<0.001、P<0.05、P<0.05);Cyclopamine干预组PTCH1 m RNA表达较5-Azadc干预组和h UCMSC-MVs干预组升高(P<0.001、P<0.001),5-Azadc干预组和h UCMSC-MVs干预组之间PTCH1 m RNA表达无差异(P>0.05);结论:1.本实验所获得的h UCMSC-MVs及OA-FLSs符合其鉴定标准;2.Shh信号通路的异常激活促进RA-FLSs的增殖、迁移,并抑制其凋亡;3.Ptch1甲基化水平升高介导了Shh信号通路的异常激活;4.h UCMSC-MVs可能通过抑制Shh信号通路的激活以及Ptch1基因甲基化影响RA-FLSs的功能。(本文来源于《山西医科大学》期刊2019-06-04）
王洋,宋卓悦,连晓磊,李江南,丁康[6]（2019）在《脂肪和滑膜来源间充质干细胞成软骨分化能力的比较》一文中研究指出目的:比较人膝关节脂肪来源间充质干细胞(ADSCs)和滑膜来源间充质干细胞(SDSCs)的成软骨分化能力,寻找更为合适的种子细胞来治疗骨性关节炎软骨病损。方法:取20例骨性关节炎患者的髌下脂肪垫、滑膜组织和剥离的软骨,分离、培养ADSCs、SDSCs和炎性软骨细胞(ICs),观察增殖和分化情况。收集体外3D培养7、14、21 d的3种细胞培养液上清,应用ELISA检测IL-1、IL-6和IL-10的分泌情况。取3D培养21 d获得的细胞团块,测量其直径并经番红O、阿尔新蓝及Ⅱ型胶原免疫组化染色分析细胞成软骨分化情况。结果:3种细胞均呈现类成纤维细胞形态,其中ICs多为短梭形多分支,而ADSCs和SDSCs多为长梭形。不同时间点ICs分泌的IL-1和IL-6高于SDSCs和ADSCs,ADSCs分泌的IL-10高于SDSCs及ICs(P <0. 05)。3D培养21 d后,SDSCs细胞团块直径大于ICs和ADSCs(P <0. 05)。阿尔新蓝和番红O染色结果发现,SDSCs和ICs的阳性区域面积大于ADSCs(P <0. 05);Ⅱ型胶原免疫组化染色结果发现ICs和SDSCs阳性区域面积均大于ADSCs(P <0. 05)。结论:SDSCs成软骨分化能力较强,ADSCs的抗炎作用较强。(本文来源于《郑州大学学报(医学版)》期刊2019年03期）
张娜[7]（2019）在《人脐带间充质干细胞微泡通过miR-19/TLR2通路对类风湿关节炎患者滑膜成纤维细胞分泌细胞因子的影响》一文中研究指出目的:1.研究hUCMSC-MVs对RA患者FLS增殖的影响;2.研究hUCMSC-MVs是否可通过调控miR-19a/TLR2通路影响RAFLS分泌细胞因子。方法:1.RAFLS的分离培养、鉴定:共收集3例RA患者的滑膜组织,分离培养RAFLS,取第3代RAFLS进行表型鉴定,流式细胞术检测表面抗原CD14、CD68、CD90;2.hUCMSC-MVs的获取及鉴定:本课题组前期通过差速离心已获取hUCMSC-MVs,并经电镜、BCA法已成功鉴定hUCMSC-MVs~([23])。3.实验分组:hUCMSC-MVs在体外与RAFLS混合培养,共分5组,分别是RAFLS对照组、细菌脂蛋白(BLP)组(终浓度0.4ug/ml)、hUCMSC-MVs低浓度组(10μg/ml)、hUCMSC-MVs中浓度组(30μg/ml)、hUCMSC-MVs高浓度组(60μg/ml)。每次实验重复3次。4.处理方法:RAFLS对照组:只加DMEM完全培养液,未予任何刺激;BLP组:终浓度为0.4 ug/ml的BLP溶液干预RAFLS 24h;hUCMSC-MVs低浓度组:在加入hUCMSC-MVs(10ug/ml)干预6h后,加入BLP(0.4 ug/ml)混合培养24h;hUCMSC-MVs中浓度组:在加入hUCMSC-MVs(30ug/ml)干预6h后,加入BLP(0.4 ug/ml)混合培养24h;hUCMSC-MVs高浓度组:在加入hUCMSC-MVs(60ug/ml)干预6h后,加入BLP(0.4 ug/ml)混合培养24h。5.检测指标:(1)CCK-8法检测细胞增殖;(2)RT-PCR检测RAFLS中miR-19a、TLR2、IL-6、MMP-3的mRNA表达水平;(3)ELISA检测细胞培养上清中IL-6、MMP-3的蛋白表达水平;统计分析实验数据。结果:1.RAFLS的分离培养、鉴定取P3代生长状态良好、融合度达80%-90%的RAFLS进行流式细胞术检测,细胞表面CD90阳性率达98%,CD14、CD68(-),符合RAFLS表征;2.hUCMSC-MVs对RAFLS增殖的影响(1)与对照组相比,BLP组促进了RAFLS的增殖,差异有统计学意义(P<0.05);(2)与BLP组相比,各hUCMSC-MVs组均抑制了RAFLS的增殖(P<0.05);(3)在抑制RAFLS增殖方面,hUCMSC-MVs组(10ug/ml)作用优于hUCMSC-MVs组(60ug/ml),差异有统计学意义(P<0.05)。hUCMSC-MVs组(30ug/ml)抑增殖作用略弱于hUCMSC-MVs组(10ug/ml),差异无统计学意义(P>0.05)。3.hUCMSC-MVs通过miR-19a/TLR2通路对RAFLS分泌细胞因子的影响(1)miR-19a基因表达水平的变化:与对照组相比,BLP组下调了miR-19a mRNA的表达水平(P<0.05);与BLP组相比,各hUCMSC-MVs组均上调了miR-19a mRNA表达水平(P<0.05);hUCMSC-MVs(10ug/ml)优于hUCMSC-MVs(30ug/ml)、hUCMSC-MVs(60ug/ml),差异有统计学意义(P<0.05);hUCMSC-MVs(30ug/ml)作用略优于hUCMSC-MVs(60ug/ml),差异无统计学意义(P<0.05)。(2)TLR2基因表达水平的变化:与对照组相比,BLP组TLR2 mRNA表达水平明显上调(P<0.05);与BLP组相比,各hUCMSC-MVs组均可下调TLR2 mRNA的表达,差异具有统计学意义(P<0.05);hUCMSC-MVs(10ug/ml)作用优于hUCMSC-MVs(60ug/ml),差异均具有统计学意义(P<0.05);在下调TLR2方面,hUCMSC-MVs(30ug/ml)略弱于hUCMSC-MVs(10ug/ml),差异无统计学意义(P>0.05)。(3)IL-6基因及蛋白表达水平的变化:与对照组相比,BLP组IL-6的蛋白和基因表达水平明显上调(P<0.05);与BLP组相比,各hUCMSC-MVs组均可下调IL-6mRNA与蛋白的表达,差异具有统计学意义(P<0.05);在下调IL-6mRNA方面,hUCMSC-MVs(10ug/ml)、hUCMSC-MVs(30ug/ml)作用优于hUCMSC-MVs(60ug/ml),差异具有统计学意义(P<0.05);hUCMSC-MVs(30ug/ml)略弱于hUCMSC-MVs(10ug/ml),差异无统计学意义(P>0.05)。在下调IL-6蛋白方面,hUCMSC-MVs(10ug/ml)作用优于hUCMSC-MVs(30ug/ml),差异具有统计学意义(P<0.05);hUCMSC-MVs(30ug/ml)作用优于hUCMSC-MVs(60ug/ml),差异具有统计学意义(P<0.05)。(4)MMP3基因及蛋白表达水平的变化:与对照组相比,BLP组MMP3的蛋白和基因表达水平明显上调(P<0.05);与BLP组相比,各hUCMSC-MVs组均可下调MMP3 mRNA与蛋白的表达,差异具有统计学意义(P<0.05)。在下调MMP3 mRNA方面,hUCMSC-MVs(10ug/ml)作用优于hUCMSC-MVs(30ug/ml)、hUCMSC-MVs(60ug/ml),差异具有统计学意义(P<0.05);在下调MMP3蛋白方面,hUCMSC-MVs(10ug/ml)作用优于hUCMSC-MVs(60ug/ml),差异具有统计学意义(P<0.05)。(5)TLR2与IL-6、MMP3的相关性分析:TLR2 mRNA与IL-6mRNA呈高度正相关(r=0.954,P<0.001),与MMP3 mRNA呈高度正相关(r=0.983,P<0.001),与IL-6蛋白表达水平呈中度正相关(r=0.716,P<0.01),与MMP3蛋白表达水平呈中度正相关(r=0.757,P<0.01)。结论:1.hUCMSC-MVs可能通过抑制RAFLS增殖治疗RA;2.hUCMSC-MVs可能通过调节miR-19a/TLR2通路减轻RA的炎症。(本文来源于《山西医科大学》期刊2019-05-08）
郑慧[8]（2019）在《人脐带间充质干细胞微泡对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞自噬水平影响的研究》一文中研究指出目的:研究hUCMSC-MVs对RA-FLSs的自噬水平是否具有调节作用,探究hUCMSC-MVs作用于RA的机制。方法:购买hUCMSCs细胞系(SM-MSC)和RA-FLSs细胞系(MH7A),培养传代后用于实验。梯度离心法提取hUCMSC-MVs,透射电镜鉴定形态及Western Blot法鉴定其表面抗原表型。实验分为RA-FLSs组(空白对照组)、自噬抑制剂干预RA-FLSs组(3-MA干预组)、hUCMSC-MVs干预RA-FLSs组(hUCMSC-MVs干预组)。实验主要方法包括CCK8法测细胞增殖,流式细胞术测细胞凋亡,划痕实验法测细胞迁移,RT-qPCR法检测自噬相关基因BECN1、MAP1LC3B mRNA表达,Western Blot法检测自噬相关蛋白Beclin1、LC3Ⅱ表达及LC3Ⅱ/Ⅰ比值。结果:1.hUCMSC-MVs对RA-FLSs增殖、凋亡及迁移能力的影响(1)细胞增殖:与空白对照组相比,10μg/mL MVs干预组、50μg/mL MVs干预组、100μg/mL MVs干预组细胞存活率均极显着增加(P<0.001);与空白对照组相比,3-MA干预组、150μg/mL MVs干预组、200μg/mL MVs干预组存活率均极显着降低(P<0.001);150μg/mL MVs干预组与200μg/mL MVs干预组相比无显着差异(P>0.05);150μg/mL MVs干预组存活率与3-MA干预组相比差异不显着(P>0.05)。(2)细胞凋亡:与空白对照组相比,3-MA干预组和hUCMSC-MVs干预组细胞凋亡率极显着增加(P<0.01);hUCMSC-MVs组与3-MA组相比差异不显着(P>0.05)。(3)细胞迁移能力:干预12h和24h后,与空白对照组相比,3-MA干预组、hUCMSC-MVs干预组细胞迁移率极显着降低(P<0.01);hUCMSC-MVs干预组与3-MA干预组迁移率相比差异不显着(P>0.05);干预48h后,与空白对照组相比,3-MA干预组和hUCMSC-MVs干预组均无统计学差异(P>0.05)。2.hUCMSC-MVs对RA-FLSs BECN1、MAP1LC3 mRNA表达的影响(1)BECN1 mRNA表达:与空白对照组相比,3-MA干预组、hUCMSC-MVs干预组BECN1 mRNA表达显着降低(P<0.01,P<0.05);与3-MA干预组相比,hUCMSC-MVs干预组BECN1 mRNA表达显着升高(P<0.05)。(2)MAP1LC3B mRNA表达:与空白对照组相比,3-MA干预组和hUCMSC-MVs干预组MAP1LC3B mRNA表达显着降低(P<0.01,P<0.01);与3-MA干预组相比,hUCMSC-MVs干预组MAP1LC3B mRNA显着升高(P<0.05)。3.hUCMSC-MVs干预对RA-FLSs Beclin1、LC3Ⅱ蛋白及LC3Ⅱ/Ⅰ比值的影响(1)Beclin1蛋白表达:与空白对照组相比,3-MA干预组和hUCMSC-MVs干预组Beclin1蛋白表达显着降低(P<0.05);hUCMSC-MVs干预组与3-MA干预组相比差异不显着(P>0.05)。(2)LC3Ⅱ蛋白表达:与空白对照组相比,3-MA干预组和hUCMSC-MVs干预组LC3Ⅱ蛋白表达显着降低(P<0.01,P<0.05);hUCMSC-MVs干预组与3-MA干预组相比LC3Ⅱ蛋白表达差异不显着(P>0.05).。(3)LC3Ⅱ/Ⅰ比值:与空白对照组相比,3-MA干预组和hUCMSC-MVs干预组LC3Ⅱ/Ⅰ比值显着降低(P<0.001);hUCMSC-MVs干预组与3-MA干预组相比差异不显着(P>0.05)。结论:1.hUCMSC-MVs干预可抑制RA-FLSs增殖和迁移,促进其凋亡;2.RA-FLSs存在自噬异常激活,hUCMSC-MVs通过抑制RA-FLSs自噬对RA发挥作用,为hUCMSC-MVs用于RA临床治疗提供理论基础和依据。(本文来源于《山西医科大学》期刊2019-04-20）
王兆飞,王炳,周渊,宋登新,何小文[9]（2019）在《大鼠滑膜间充质干细胞的鉴定及定向分化》一文中研究指出目的体外分离培养及扩增SD大鼠滑膜间充质干细胞,鉴定其多向分化潜能。方法制作SD大鼠创伤性骨关节炎模型,无菌条件下获取炎性的滑膜组织,Ⅰ型胶原酶消化法分离滑膜间充质干细胞,有限稀释单克隆培养法纯化。体外扩增培养至第3代后,进行生长曲线测定、成脂诱导、成骨诱导和成软骨诱导,Real-time qPCR和Western Blot检测成软骨分化后蛋白聚糖和Ⅱ型胶原的表达含量。结果分离纯化培养大鼠滑膜来源的间充质干细胞,在体外传代后表现出均匀的成纤维细胞样的纺锤形形态。将滑膜间充质干细胞进行成脂诱导、成骨诱导和成软骨诱导并加以鉴定。在炎性因子的作用下,用Real-time qPCR和Western Blot检测成软骨诱导分化后细胞中Ⅱ型胶原和蛋白聚糖mRNA呈阳性表达。结论在炎性环境中大鼠来源的滑膜间充质干细胞具有良好的成软骨能力。(本文来源于《实用医学杂志》期刊2019年03期）
孙祥燚,张雷,陈烁,周利武,赵建宁[10]（2019）在《微小RNA-564基因下调对滑膜间充质干细胞成软骨分化的影响》一文中研究指出目的探究下调微小RNA-564(miR-564)基因对滑膜间充质干细胞成软骨分化的作用。方法取第3代的人滑膜间充质干细胞(SMSCs)作为实验细胞,实验设计为3组:SMSCs空白对照组(空白组); miRNA抑制剂转染SMSCs对照组(对照组); miR-564抑制剂转染SMSCs实验组(实验组)。将3组SMSCs同时成软骨诱导培养,观察诱导后软骨细胞的组织形态,并检测诱导前7 d内的3组细胞增殖曲线,和软骨分化特异性基因和蛋白[Ⅱ型胶原、蛋白聚糖、性别决定区Y框蛋白9(Sox9)、母亲DPP同源物4(Smad4)];本次实验所有数据均采用单因素方差分析(one-way ANOVA)检验。结果甲苯胺蓝染色观察细胞形态与特点基本符合软骨细胞,实验组细胞数量更多,蓝染更明显;细胞增殖曲线表明实验组细胞增殖速度明显快于对照组(F=0. 842,P <0. 01); RT-PCR检测与Western Blotting检测表明实验组软骨细胞分化特异基因和蛋白表达较对照组明显升高(F=2274. 75,F=447. 31,F=30476. 22; P <0. 01),并且实验组TGF-BMP关键基因及蛋白Smad 4有所升高(F=457. 02,P <0. 01)。结论下调miR-564基因的表达可促进滑膜间充质干细胞向软骨细胞增殖与分化,并且有可能是通过作用于TGF-BMP通路实现。(本文来源于《中华关节外科杂志(电子版)》期刊2019年01期）
滑膜间充质干细胞论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的探讨滑膜间充质干细胞-小肠黏膜下层软骨诱导化复合体(SMSCs-SIS)修复兔膝关节半月板损伤的潜能及可行性。方法选取58只健康体质新西兰大白兔为研究对象,作膝关节半月板损伤造模后将其随机分为实验组(n=29)和对照组(n=29);实验组同时于半月板损伤处植入软骨诱导化SMSCs-SIS复合体;对照组仅植入小肠黏膜下层支架。后分别单笼饲养,两组大白兔均于术后第4周处死并取材,采用大体形态学观察、生物力学及阿尔新蓝比色法检测糖胺多糖(GAG)含量作为评估指标评价半月板损伤修复情况。结果大体及形态学观察结果显示实验组所有半月板裂口均愈合良好;对照组半月板损伤处裂口较前稍增宽,仅见少许再生组织填充,裂口周围组织萎缩。生物力学结果显示实验组半月板组织弹性模量为(42.71±2.02)Mpa,对照组为(10.01±1.52)Mpa,两组间损伤修复半月板组织弹性模量差异比较有统计学意义(P<0.05)。阿尔新蓝比色法GAG含量测定结果显示实验组为(4.14±1.02) ug/mL,对照组为(1.31±1.02)ug/mL,两组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论滑膜间充质干细胞-小肠黏膜下层软骨诱导化复合体材料(SMSCs-SIS)移植可有效促进兔膝半月板局部损伤的修复,是修复兔膝半月板损伤的有效方法之一。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
滑膜间充质干细胞论文参考文献
[1].孙玉波,齐志明,李晋,张爽,李作洪.人滑膜间充质干细胞向软骨诱导分化的基础研究[J].中国医师杂志.2019
[2].杨业静,李兴艳,李林,梁红锁,黄家志.滑膜间充质干细胞-小肠黏膜下层复合体修复兔膝半月板损伤研究[J].世界最新医学信息文摘.2019
[3].陈子秋,刘顺贵,刘义,龚泰芳.微骨折术结合自体滑膜间充质干细胞移植修复关节软骨损伤的临床效果[J].中国骨与关节杂志.2019
[4].杨格.人脐带间充质干细胞微泡对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞组蛋白乙酰化水平影响的研究[D].山西医科大学.2019
[5].苏雅珍.人脐带间充质干细胞微泡对类风湿关节炎患者滑膜成纤维细胞功能及Shh信号通路影响的研究[D].山西医科大学.2019
[6].王洋,宋卓悦,连晓磊,李江南,丁康.脂肪和滑膜来源间充质干细胞成软骨分化能力的比较[J].郑州大学学报(医学版).2019
[7].张娜.人脐带间充质干细胞微泡通过miR-19/TLR2通路对类风湿关节炎患者滑膜成纤维细胞分泌细胞因子的影响[D].山西医科大学.2019
[8].郑慧.人脐带间充质干细胞微泡对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞自噬水平影响的研究[D].山西医科大学.2019
[9].王兆飞,王炳,周渊,宋登新,何小文.大鼠滑膜间充质干细胞的鉴定及定向分化[J].实用医学杂志.2019
[10].孙祥燚,张雷,陈烁,周利武,赵建宁.微小RNA-564基因下调对滑膜间充质干细胞成软骨分化的影响[J].中华关节外科杂志(电子版).2019