本文主要研究内容
作者文继锋,申欢欢,龚永平,易可可,杨智捷,邓英,颜其贵（2019）在《三种融合标签对大熊猫轮状病毒结构蛋白VP6-VP7可溶性表达的影响》一文中研究指出：大熊猫轮状病毒(giant panda rotavirus,GPRV)是引起幼龄大熊猫腹泻的主要病原,对圈养大熊猫产生了较大的危害。轮状病毒结构蛋白VP6是一种载体蛋白,可介导黏膜免疫反应。VP7是轮状病毒结构蛋白中主要的中和抗原。因此,VP6-VP7的融合表达作为候选抗原对该病的防治具有重要的意义。传统大肠埃希菌原核表达存在表达量低、可溶性差以及纯度低等弊端。本研究使用醛缩酶(EDA)、谷胱甘肽S-转移酶(GST)、麦芽糖结合蛋白(MBP)3种融合标签,以实现获得表达量高和纯度高的GPRV-VP6-VP7重组表达蛋白。将扩增的VP6、VP7基因片段利用同源重组酶构建到含3种融合标签的表达载体pET21b上,将重组质粒转化至大肠埃希菌Rosetta(DE3)感受态细胞中进行低温诱导表达。用Ni-柱亲和层析法纯化目的蛋白,SDS-PAGE和Image J分析蛋白表达量和可溶性,Western blot分析得到表达的重组表达蛋白正确且具有蛋白活性。实验结果证明,EDA标签能显著促进VP6-VP7蛋白的原核可溶性表达,提高VP6-VP7蛋白表达量。
Abstract
da xiong mao lun zhuang bing du (giant panda rotavirus,GPRV)shi yin qi you ling da xiong mao fu xie de zhu yao bing yuan ,dui juan yang da xiong mao chan sheng le jiao da de wei hai 。lun zhuang bing du jie gou dan bai VP6shi yi chong zai ti dan bai ,ke jie dao nian mo mian yi fan ying 。VP7shi lun zhuang bing du jie gou dan bai zhong zhu yao de zhong he kang yuan 。yin ci ,VP6-VP7de rong ge biao da zuo wei hou shua kang yuan dui gai bing de fang zhi ju you chong yao de yi yi 。chuan tong da chang ai xi jun yuan he biao da cun zai biao da liang di 、ke rong xing cha yi ji chun du di deng bi duan 。ben yan jiu shi yong quan su mei (EDA)、gu guang gan tai S-zhuai yi mei (GST)、mai ya tang jie ge dan bai (MBP)3chong rong ge biao qian ,yi shi xian huo de biao da liang gao he chun du gao de GPRV-VP6-VP7chong zu biao da dan bai 。jiang kuo zeng de VP6、VP7ji yin pian duan li yong tong yuan chong zu mei gou jian dao han 3chong rong ge biao qian de biao da zai ti pET21bshang ,jiang chong zu zhi li zhuai hua zhi da chang ai xi jun Rosetta(DE3)gan shou tai xi bao zhong jin hang di wen you dao biao da 。yong Ni-zhu qin he ceng xi fa chun hua mu de dan bai ,SDS-PAGEhe Image Jfen xi dan bai biao da liang he ke rong xing ,Western blotfen xi de dao biao da de chong zu biao da dan bai zheng que ju ju you dan bai huo xing 。shi yan jie guo zheng ming ,EDAbiao qian neng xian zhe cu jin VP6-VP7dan bai de yuan he ke rong xing biao da ,di gao VP6-VP7dan bai biao da liang 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自浙江农业学报的文继锋,申欢欢,龚永平,易可可,杨智捷,邓英,颜其贵，发表于刊物浙江农业学报2019年07期论文，是一篇关于大熊猫轮状病毒论文,蛋白论文,融合标签论文,醛缩酶论文,浙江农业学报2019年07期论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自浙江农业学报2019年07期论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
标签：大熊猫轮状病毒论文; 蛋白论文; 融合标签论文; 醛缩酶论文; 浙江农业学报2019年07期论文;