导读:本文包含了星形胶质细胞增生论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:多发性硬化,实验性自身免疫性脑脊髓炎,星形胶质细胞增生,磷酸鞘氨醇
星形胶质细胞增生论文文献综述
马雯迪[1]（2019）在《苦参素抑制EAE大鼠脑中星形胶质细胞增生的机制研究》一文中研究指出目的:探究苦参素(matrine,MAT)对多发性硬化症(multiple sclerosis,MS)的经典动物模型—实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)大鼠的神经功能学指征和脑组织病理学特征的影响,通过观察其中星形胶质细胞表面标志物—胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)以及硫酸软骨素蛋白多糖(chondroitin sulfate proteoglycans,CSPG)的含量变化探究MAT对EAE大鼠脑中星形胶质细胞增殖情况的影响。同时,检测分析其中鞘氨醇(sphingosin,SPH),磷酸鞘氨醇(sphingosine 1-phosphate,S1P)和血浆凝溶胶蛋白(plasma gelsolin,pGSN)的含量变化,鞘氨醇激酶(sphingosine kinase,SPHK)的表达变化以及星形胶质细胞表面磷酸鞘氨醇1型受体(sphingosine 1-phosphate receptor 1,S1P1)表达的变化情况,探究MAT抑制EAE大鼠脑中星形胶质细胞增生现象的作用机制,为临床探索治疗MS的方法提供实验和理论依据。方法:1.建立EAE大鼠模型:在冰浴和无菌条件下制备豚鼠全脊髓匀浆(guinea pig spinal cord homogenate,GPSCH),与等体积含卡介苗(Bacillus Calmette-Guérin,BCG)6mg/ml的完全弗氏佐剂(complete Freund’s adjuvant,CFA)均匀混合,制成稳定的油包水(W/O)型抗原乳剂,四肢足垫皮下注射6~8周龄的雌性Wistar大鼠(0.5ml/只),建立GPSCH诱导的EAE大鼠模型。自免疫当天起,由两名实验人员每日独立进行实验动物神经功能学评分。2.动物分组及给药:采用随机数字表法,将30只免疫后大鼠分为叁组:EAE模型组(EAE+Saline)-自免疫后第1天起每日腹腔注射生理盐水(6.7ml/kg);苦参素治疗组(EAE+MAT)-自免疫后第11天起每日注射用生理盐水稀释后的苦参素注射液6.7 ml/kg(250mg/kg)和苦参素预防组EAE+MAT-P(MATPretreatment)-自免疫后第1天起实施与苦参素治疗组等量的治疗措施。叁组实验动物均干预至免疫后第17天。3.动物标本采集:免疫后第18天,将动物麻醉后,用生理盐水心脏灌注后留取大鼠脑组织并用磷酸盐缓冲液(phosphate buffer solution,PBS)冲洗。之后将右脑立即投入液氮中保存,左脑用4%多聚甲醛固定保存。4.相关指标检测:苏木素-伊红(hematoxylin and eosin,HE)和劳克坚牢蓝((Luxol fast blue,LFB)染色分别观察动物脑组织中炎性浸润和脱髓鞘的情况,免疫荧光技术(immunofluorescence,IF)检测GFAP、CSPG的表达以及GFAP与S1P1的共表达,蛋白质印记法(western blot,WB)检测GFAP、pGSN的表达,酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immuno sorbent assay,ELISA)测定SPH和S1P浓度,定量实时聚合酶链反应技术(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测SPHK1和SPHK2的mRNA表达。使用GraphPad Prism6.0软件对实验数据进行统计学分析。结果:1.神经功能学评分:统计分析结果显示,在EAE大鼠的发病高峰期(免疫后第18日),苦参素治疗组大鼠的神经功能学评分低于EAE模型组(P<0.001),且预防组与治疗组大鼠的神经功能学评分也存在显着差异(P<0.05)。2.脑组织病理学变化:与EAE模型组相较,苦参素对照组大鼠脑内炎性细胞浸润和脱髓鞘的情况明显缓解(P<0.001,P<0.01),苦参素预防组的情况又较于对照组发生明显缓解(P<0.05,P<0.01)。3.脑组织中星形胶质细胞增生情况的变化:western blot与免疫荧光染色结果显示,与苦参素治疗组相较,EAE模型组大鼠脑内的GFAP蛋白的表达量和荧光强度都明显更高(P<0.001,P<0.01),而苦参素预防组则较治疗组表达更低(P<0.001,P<0.01);与EAE模型组相较,苦参素治疗组大鼠脑内的CSPG的荧光强度亦表达显着降低(P<0.01),而苦参素预防组则表现出更低的趋势(P<0.05)。4.脑组织中S1P,SPH,pGSN的蛋白表达及SPHK1和SPHK2 mRNA的表达变化:ELISA结果显示,与EAE模型组相比,苦参素治疗组大鼠脑内S1P和SPH的含量均显着降低(P<0.001,P<0.001),苦参素预防组亦较治疗组显着降低(P<0.001,P<0.001);qRT-PCR结果表明,经苦参素治疗后,EAE模型组大鼠脑内SPHK1和SPHK2 mRNA的表达均明显减少(P<0.05,P<0.001);与苦参素治疗组相比,苦参素预防组大鼠脑内SPHK1 mRNA的表达量发生显着降低(P<0.001),而两组的SPHK2 mRNA表达量则无显着差异。此外,用western blot检测脑组织内pGSN表达,结果显示与EAE模型组相比,苦参素治疗明显提升了大鼠脑内pGSN蛋白的表达量(P<0.001),而苦参素预防组的pGSN蛋白量亦明显低于苦参素治疗组(P<0.001)。5.脑内及星形胶质细胞上的S1P1的表达量:qRT-PCR结果显示,与EAE模型组比较,苦参素治疗组大鼠脑内S1P1 mRNA的表达量显着降低(P<0.001),而苦参素预防组与之未表现出显着差异;与此对应,免疫荧光双染结果表明,与苦参素治疗组比较,EAE模型组大鼠脑内的星形胶质细胞表达更多的S1P1受体(P<0.001),而苦参素预防组未表现出与模型组的统计学差异。结论:MAT对EAE大鼠有良好的治疗及预防效果,可以显着抑制EAE大鼠脑内的星形胶质细胞增生。MAT可以显着降低EAE大鼠脑内的S1P含量,是通过抑制SPH的产生和SPHK1&2的表达,上调pGSN,并且抑制S1P1在星形胶质细胞上的表达,从而起到对EAE大鼠病情的治疗及预防作用。(本文来源于《郑州大学》期刊2019-03-01）
李坚,李刚,郭卫东,戴国宇,刘吉松[2]（2018）在《TGN-020对大鼠脊髓损伤后继发性水肿和星形胶质细胞增生的影响》一文中研究指出目的检测水通道蛋白4(aquaporin 4,AQP4)特异性抑制剂TGN-020对大鼠脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)后继发性水肿和星形胶质细胞增生相关指标的影响,为SCI后水肿与星形细胞增生之间的关系研究提供重要依据。方法成年雌性SD大鼠72只,体质量180~220g,随机分为假手术组(Sham组)、单纯脊髓损伤组(SCI组)、TGN-020干预组(TGN-020组),每组24只。采用改良后的动脉夹挤压脊髓建立SCI模型,Sham组仅行椎板切除术。术后TGN-020组腹腔内注射TGN-020(5mg/kg,ip)处理,Sham组和SCI组予以等体积的二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO)各组于术后3d收集标本,分别采用干湿重法检测含水量变化,采用蛋白印记、免疫荧光检测AQP4、胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)蛋白表达。结果术后3d,与Sham组相比,SCI组和TGN-020组脊髓损伤区含水量明显升高(P<0.01),与SCI组相比,TGN-020组脊髓损伤区含水量减少(P<0.05);SCI组和TGN-020组AQP4、GFAP、PCNA的表达较Sham组明显升高(P<0.01),TGN-020组AQP4、GFAP、PCNA的表达较SCI组降低(P<0.05)。结论 TGN-020可以通过下调大鼠脊髓损伤后AQP4的表达减轻继发性水肿,抑制星形胶质细胞增生,从而促进大鼠急性损伤后的功能恢复。(本文来源于《西安交通大学学报(医学版)》期刊2018年05期）
陈修平[3]（2017）在《“形神共养”对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠皮层神经元凋亡及星形胶质细胞增生的影响》一文中研究指出目的:构建“形神共养”的丰富环境,探讨“形养”、“神养”及“形神共养”的丰富环境对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠皮层神经元凋亡及星形胶质细胞增生的作用。方法:1、健康成年雄性Sprague-Dawley大鼠,200-240g,随机分为“形养”组(physical enrichment,PE),“神养”组(spiritual enrichment,SE),“形神共养”组(physical and spiritual enrichment,PSE),标准养组(ischemia + standard condition,IS)及假手术组(sham-operated + standard condition,SS)。采用线栓法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型。大鼠术后休息1天,然后接受为期14天的“形养”、“神养”及“形神共养”环境训练或标准养,并在训练的第3,7及14天时采用改良的神经缺损评分(modifed neurologicalseverity score,mNSS)及肢体放置测验(limb-placing test)进行神经行为学评价。训练第14天时处死大鼠,行TTC染色检测脑梗死体积;尼氏染色法观察大鼠梗死灶周围皮质神经元的存活率;透射电镜观察神经元超微结构的变化;TUNEL/NeuN免疫荧光双标法检测各组大鼠神经元凋亡情况;免疫组织化学染色检测脑梗死周围皮质Bcl-2、Bax及caspase-3蛋白的表达;western blot法进一步检测凋亡相关基因Bcl-2、Bax、cytochrome c、caspase-3及p53蛋白的表达情况。2、采用同样的实验分组方法,于训练的第3,7及14天时采用足失误试验(foot-fault test)和圆筒试验(cylinder test)进行神经行为学评价。于训练的第14天时行MRI检查观察脑梗死体积变化;GFAP/Ki67免疫荧光双标法检测大鼠梗死灶周围皮质星形胶质细胞的增生情况;western blot法检测BDNF的蛋白表达。结果:1、(1)缺血组(PE、SE、PSE及IS)大鼠在各个时间点行为学测试中的表现均差于SS组。在训练第7、14天时,PSE组大鼠的mNSS评分明显低于PE及SE组;PE组明显低于SE组。肢体放置试验结果显示:第7天和14天时,与PE和SE组相比,PSE组大鼠肢体放置的准确性明显提高。(2)TTC、尼氏染色及电镜结果显示:与PE和SE组相比,PSE组大鼠的脑梗死体积最小,神经元存活率最高,神经元超微结构受损程度最轻。(3)TUNEL/NeuN免疫荧光双标法结果显示:与IS组相比,PE、SE及PSE组大鼠神经元凋亡细胞数明显降低,其中PSE组最少,其次为PE组,最后为SE组。(4)免疫组织化学及荧光染色结果显示:与IS组相比,经过环境训练的叁组(PE、SE和PSE)大鼠梗死灶周围皮质的Bcl-2蛋白水平显着增多,而Bax及caspase-3明显下降。与PE和SE组相比,PSE组大鼠的Bcl-2蛋白表达最多,Bax和caspase-3最低,且PE组优于SE组。(5)Western blot法结果显示:与IS组相比,PE、SE及PSE组大鼠的Bcl-2蛋白表达量明显增加,而Bax、cytochrome c、caspase-3及p53的蛋白表达量明显降低,其中PSE组变化最为显着。2、(1)足失误试验和圆筒试验结果显示:在训练的第14天时,PSE组大鼠的左前肢踩空率和肢体使用不对称分数显着低于PE和SE组。(2)MRI结果显示:与IS组相比,PE和PSE组脑梗死体积明显减小。PSE组大鼠的脑梗死体积显着低于PE组。(3)GFAP/Ki67免疫荧光双标法结果显示:与IS组相比,PE、SE及PSE组大鼠梗死灶周围皮质的GFAP/Ki67双标阳性细胞数明显增加;PSE组大鼠Ki67阳性的星形胶质细胞数显着高于PE和SE组;PE组明显优于SE组。(4)Western blot法分析结果显示:与IS组相比,PE、SE及PSE组大鼠BDNF蛋白表达量明显增加。其中PSE组最多,其次为PE组,再次为SE组。(5)Spearman相关系数检验结果显示左前肢踩空发生率与星形胶质细胞增生和BDNF蛋白表达存在负相关,星形胶质细胞增生与BDNF蛋白表达量成正相关。结论:1、“形神共养”促进大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后神经功能的恢复。2、“形神共养”抑制梗死灶周围皮质神经元凋亡的发生,这可能是其发挥神经保护作用的可能机制之一。3、“形神共养”促进梗死灶周围皮质星形胶质细胞增生和BDNF蛋白的表达增加,这可能是其发挥神经保护作用的可能机制之一。(本文来源于《武汉大学》期刊2017-05-01）
[4]（2016）在《阿尔茨海默病极早期即出现星形胶质细胞增生》一文中研究指出尽管目前阿尔茨海默病(AD)的确诊仍需要依赖病理学检查,但现在已有多种影像学手段(比如PET成像)和脑脊液检查可在体显示淀粉样蛋白的病理改变。近期,Brain杂志发表了一篇研究,采用PET成像的方式研究了无症状家族性AD突变基因携带者,研究表明在AD的极早期(无症状期)就已经出现星形胶质细胞增生。英国学者Schott等对此研究发表了(本文来源于《中国医学创新》期刊2016年28期）
李瑞珍,银梅,唐海蓉,潘耀谦[5]（2016）在《兔脑炎原虫引起脑星形胶质细胞增生和脑屏障膜形成》一文中研究指出为了研究兔脑炎原虫引起脑组织星形胶质细胞增生的特点和脑屏障膜的形成,本研究用特殊染色、免疫组化染色和免疫印迹技术对30只病兔和10只对照兔的脑组织进行了详细的研究。结果表明,病兔的脑组织出现了弥漫性或局灶性非化脓性脑炎病变及不同形态的特异性肉芽肿。用改良的革兰氏染色可在肉芽肿的上皮样细胞及坏死组织中检出蓝色的兔脑炎原虫,用甲基绿派洛宁染色可在上皮样细胞的胞浆中检出红色的兔脑炎原虫。用抗-GFAP免疫组化染色,见病兔脑组织中有大量星形胶质细胞增生,在脑肉芽肿及血管套周围也有大量反应态星形胶质细胞,将之与正常脑组织隔离。增生的星形胶质细胞的足突在血管周围、脑软膜下和室管膜细胞的基底部形成厚层屏障膜。用免疫印迹技术检测,病兔脑组织中GFAP的丰度明显高于对照兔,且与抗-GFAP免疫组化染色的结果相一致。结论,兔脑炎原虫能引起脑组织中星形胶质细胞增生,反应态的星形胶质细胞形成的各种屏障膜可保护脑组织免受更大的伤害。(本文来源于《中国畜牧兽医学会兽医病理学分会、中国病理生理学会动物病理生理专业委员会、中国实验动物学会实验病理学专业委员会2016年学术研讨会论文集》期刊2016-07-01）
乔圆[6]（2016）在《氯沙坦对LPS诱导的星形胶质细胞反应性增生的调节作用及机制研究》一文中研究指出目的:血管紧张素II受体阻滞剂(ARBs),也称为AT1受体拮抗剂,是临床上一类常用的抗高血压药物。近年来众多研究证实了ARBs类药物的脑保护作用,其相关机制可能与减轻脑内的神经元凋亡、氧化应激反应及炎症反应等有关。但关于ARBs类药物对星形胶质细胞反应性增生的调节作用的研究还较少。本研究旨在探讨ARBs类药物氯沙坦预处理和后处理对LPS诱导的GFAP表达(GFAP表达增加是星形胶质细胞反应性增生的重要标志)的影响,及其作用机制是否与激活AMPK及其下游通路有关。方法:将成年雄性昆明小鼠随机分为对照组、LPS损伤组、氯沙坦预处理组、Compound C+氯沙坦预处理组及氯沙坦后处理组。LPS损伤组:连续两日侧脑室注射LPS(24μg/6μL/d);氯沙坦预处理组:于LPS给药前14 d至LPS停药后3 d分别每日腹腔注射氯沙坦0.5 mg/kg、1 mg/kg和5 mg/kg;Compound C(10 mg/kg/d,i.p.)于LPS注射前两天开始给药,并连续给药7d;氯沙坦后处理组:于每次LPS给药后立即给予氯沙坦(5mg/kg,i.p.),之后在该剂量下连续给药3 d。对照组则相应地给予生理盐水。利用Western blot或免疫组化检测LPS停药后3 d时海马组织GFAP、pAMPK/AMPK、P62、LC3II及pmTOR/tmTOR蛋白的表达水平。利用新事物识别模型评价氯沙坦(5mg/kg)预处理对LPS引起的学习记忆功能损伤的改善作用。结果:LPS(24μg/6μL/d)连续给药2d能诱导海马星形胶质细胞反应性增生,与对照组相比,LPS处理组的GFAP表达增加了76%±21%(p<0.05),而氯沙坦预处理能浓依赖的抑制LPS诱导的GFAP表达,其中氯沙坦给药剂量为5 mg/kg时抑制作用最强,而氯沙坦后处理并无明显作用。LPS单独给药对海马pAMPK的表达水平无明显作用,但氯沙坦预处理能浓度依赖的诱导AMPK的磷酸化,其中5 mg/kg作用最强。而氯沙坦后处理对pAMPK的表达水平并无调节作用。进一步,给予AMPK抑制剂Compound C能显着抑制氯沙坦对LPS诱导的GFAP表达的下调作用。但是,LPS和氯沙坦对AMPK下游的mTOR激酶活性及自噬相关的标志分子LC3II及p62的表达并无显着影响。此外,与对照组相比,LPS损伤组的新事物识别分数显着下降(p<0.01),而氯沙坦预处理能显着逆转LPS诱导的小鼠新事物识别能力的下降。结论:氯沙坦预处理(5 mg/kg)可通过诱导AMPK磷酸化抑制LPS诱导的海马星形胶质细胞反应性增生,该作用与AMPK下游的mTOR信号通路及自噬无关。而氯沙坦后处理对LPS诱导星形胶质细胞反应性增生并无调节作用。同时氯沙坦预处理能改善LPS诱发的小鼠新事物识别能力的损伤,这可能与其抑制星形胶质细胞反应性增生有关。(本文来源于《山西医科大学》期刊2016-05-24）
康文博,李晓红,陈翀,王景景,涂悦[7]（2016）在《亚低温对脊髓损伤后反应性星形胶质细胞增生的影响》一文中研究指出目的:观察在不同温度条件下脊髓星形胶质细胞划痕损伤活化后的形态和活性改变,以探讨亚低温对脊髓损伤后反应性星形胶质细胞增生的影响。方法:体外原代培养新生SD大鼠脊髓星形胶质细胞,以划痕实验制备反应性星形胶质细胞。亚低温选择33℃,细胞培养48 h。实验分为对照组、划痕组、亚低温组和划痕+亚低温组。各组在相应的时间点观察细胞形态,采用免疫荧光染色方法检测Nestin阳性率,MTT比色法观察细胞活性,PI染色方法观察细胞凋亡程度。结果:与对照组和亚低温组相比,划痕组和划痕+亚低温组细胞胞体肥大,周围突起增多、延展以及胞浆丰富,细胞生长率明显升高。与划痕组相比,划痕+亚低温组细胞变化减慢,周围突起减少,细胞长入划痕处所需时间增加,细胞Nestin阳性率、PI阳性率和细胞生长率明显降低,各结果差异显着(P<0.01)。结论:划痕损伤后星形胶质细胞活化为反应性星形胶质细胞并会增生,亚低温明显抑制脊髓反应性星形胶质细胞的活化增生,并可以抑制星形胶质细胞的凋亡。(本文来源于《中国应用生理学杂志》期刊2016年04期）
刘金之[8]（2015）在《FK506抑制钙神经素改善学习记忆和减轻脑水肿及星形胶质细胞增生的研究》一文中研究指出癫痫是神经科常见病,发病率高,根据目前的流行病学资料,我国的癫痫患者大约在900多万左右,大约25%-30%的患者发展为难治性癫痫。严重威胁患者本人健康,生活质量明显下降,同时存在较高的致残与致死率。癫痫持续状态(status epilepticus, SE)为神经内科常见急症,表现为患者癫痫发作时持续时间超过5分钟,或者患者反复频繁癫痫发作,意识没有完全恢复。氯化锂一匹鲁卡品癫痫模型作为经典的颞叶癫痫动物模型,该模型的行为学及脑电图改变,与人类癫痫持续状态和颞叶癫痫(temporal lobe epilepsy, TLE)相似,是目前研究SE和复杂部分性发作最常用的模型之一。研究证实,癫痫持续状态可导致一系列病理生理变化,可导致脑组织神经化学改变,如局灶性脑水肿,星形胶质细胞活化与神经元凋亡坏死等。在其一系列病理生理改变中,钙离子及钙依赖性信号传导途径发挥着重要作用,其中又以神经素(calcineurin, CaN)的作用尤为重要。癫痫发作可引起钙离子在胞内的浓度显着升高,释放明显增加,从而可导致胞内钙神经素的激活,引起神经元内一系列病理改变,导致线粒体功能变化,能量代谢障碍,导致后续级联反应,不仅可导致学习记忆等认知功能障碍,同时会导致海马的病理改变,最终导致癫痫反复发作,难治性癫痫形成。钙神经素是目前为止发现的丝／苏氨酸蛋白激酶家族中唯一受Ca2+/钙调素(CaM)调节的磷酸酶,在神经系统分布丰富。目前研究发现,钙神经素通过其脱磷酸作用,对神经细胞的多种病理生理变化发挥调节作用,如调节生物的学习与记忆,对长时程记忆发挥作用,影响神经递质的释放,在神经元凋亡过程中发挥重要作用。癫痫动物模型相关研究发现,在癫痫的发病发展过程中,可观察到钙神经素的激活,参与了N-甲基-D-天门冬氨基酸(NMDA)受体活化的过程,同时还可调节r-氨酸丁酸(GABA)受体介导的抑制性作用,参与基因转录的调节,细胞骨架蛋白合成等一系列过程,同时可通过与钙蛋白酶、bcl-2相关死亡蛋白、caspase信号途径相关蛋白等许多凋亡分子之间发生作用,介导一系列病理生理过程。还可通过与一氧化氮合酶(NOS)之间的作用参与神经元氧化应激过程。在星形胶质细胞中,钙神经素含量同样丰富,同时,在脑外伤,神经细胞老化及淀粉样变性等多个病理过程中,星形胶质细胞中钙神经素的含量明显升高。FK506因为具有强大的免疫抑制作用,目前在器官移植后被广泛应用于抑制排斥反应。FK506可与FK506结合蛋白12(FKBP 12)结合,通过抑制钙神经素的活性和表达,对一系列生化反应产生影响。同时,不断的动物实验提示,FK506可对神经发挥保护作用。通过大鼠脑缺血模型的研究,FK506可以使脑梗死面积缩小,抑制神经元的凋亡,减轻神经功能损害。在大鼠癫痫模型中,FK506可减轻癫痫发作程度,缩短病程,通过抑制海马区神经元苔藓纤维发芽,减轻癫痫后的海马组织神经元损伤,降低癫痫大鼠死亡率,发挥抗癫痫及神经保护作用。虽然目前关于FK506脑保护方面的实验证据不断出现,但是其具体机制仍未阐明,尚需进一步深入研究。免疫抑制剂雷帕霉素,是一种FK506的衍生物,也可与FKBP 12结合,但是FKBP 12-雷帕霉素结合后的复合物不具备抑制钙神经素活性的生物学作用,这点与FK506不同。本研究通过建立氯化锂一匹鲁卡品癫痫持续状态模型,观察实验动物行为学和学习记忆能力,同时对局灶性脑组织水肿进行相关检测,检测钙神经素及胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达,同时观察FK506的影响,进一步研究钙神经素在癫痫后学习记忆障碍、局部脑水肿及星形胶质细胞活化增生中的作用,并探讨其可能机制。为癫痫发病机制的进一步研究和临床治疗提供新的思路。本研究分为两个部分：第一部分：氯化锂一匹鲁卡品癫痫大鼠模型的建立、病理观察及FK506对癫痫大鼠行为学、学习记忆能力的作用目的：本研究建立氯化锂一匹鲁卡品癫痫持续状态模型,观察大鼠行为学变化,并对大鼠海马神经元进行进一步的病理学观察。同时观察FK506对癫痫持续状态大鼠的行为学和学习记忆能力的影响,探讨FK506在癫痫大鼠模型中的具体作用机制。方法：1.腹腔注射氯化锂-匹鲁卡品,建立大鼠氯化锂-匹鲁卡品癫痫持续状态模型。随机将实验动物分为叁组,分别为正常对照组,癫痫组(pilo组),FK506组。2.根据Racine分级,分别记录大鼠癫痫发作的程度分级,发作潜伏期,癫痫发作起止时间。3.应用Morris水迷宫试验,观察致痫大鼠学习及记忆能力的变化,并观察FK506对大鼠认知功能的影响。4.光镜HE染色观察实验动物癫痫发作后12d海马神经元的变化,包括形态及数目的改变,同时观察FK506对其的影响。结果：1.癫痫组和Fk506组大鼠腹腔注射匹鲁卡品后出现癫痫发作,开始较轻,发作程度逐渐加重,后出现癫痫持续状态。记录各组的潜伏期和发作强度的变化。与癫痫组相比,Fk506组大鼠的潜伏期延长,发作的强度级别降低。对照组大鼠腹腔注射生理盐水后未观察到癫痫发作。2.通过水迷宫试验我们发现,癫痫组潜伏期较对照组明显延长,于目标象限内的游泳距离缩短,次数减少,提示其存在明显认知功能障碍。K506组大鼠在水迷宫中的潜伏期较癫痫组缩短,可见于目标象限内的游泳距离延长,于目标象限内的游泳时间增加,穿过原平台位置的次数增多。提示FK506能改善癫痫持续状态大鼠的学习和记忆能力。3.光镜下对照组大鼠海马未见损害性改变,HE染色示CA3区锥体神经元排列紧密、整齐,分布呈现带状,可见清晰完整的细胞结构,胞浆透明,可见圆形或椭圆形的细胞核,细胞核染色质分布均匀,核仁清晰,形态正常。SE后12d时癫痫组大鼠的海马神经元出现不同程度变性、死亡,排列紊乱,数目减少,部分神经元形态不完整,胞体肿胀、变形、破裂,轮廓模糊、界限不清,坏死的神经元胞浆皱缩,红染,核碎裂甚至消失,失去正常结构,伴有胶质细胞增生；与对照组相比,FK506组神经元也有丢失,数目减少,但与癫痫组比较,存活神经元明显增多,海马损伤明显减轻。结论：1.氯化锂—匹鲁卡品可成功诱导Wistar大鼠癫痫持续状态发作,同时操作简单,造模成功率高,可作为癫痫发病机制的理想模型,可为新型抗癫痫药物提供理论依据。2.癫痫组和Fk506组大鼠腹腔注射匹鲁卡品后出现癫痫持续状态。Fk506组大鼠的潜伏期延长,发作的强度级别降低。提示FK506的抗癫痫作用。3.匹鲁卡品诱导的癫痫持续状态动物模型,其学习和空间记忆能力受损。应用FK506后可使大鼠的学习记忆能力出现好转,提示FK506对大鼠记忆学习能力的保护作用。4.氯化锂—匹鲁卡品癫痫持续状态大鼠海马病理学观察可见神经元损伤性改变,神经元数量减少、细胞结构损伤模糊及核固缩等改变,FK 506组大鼠海马损伤明显减轻。提示FK506的神经保护作用。第二部分：FK506抑制钙神经素减轻癫痫持续状态小鼠脑水肿及星形胶质细胞增生的研究目的：本研究建立氯化锂一匹鲁卡品癫痫持续状态模型,观察行为学变化,核磁共振对局灶性脑组织扫描观察脑水肿变化,测定脑组织水含量,测定钙神经素及GFAP的表达,同时观察免疫抑制剂FK506对脑组织水肿及钙神经素,GFAP表达的影响,进一步研究钙神经素在癫痫后局部脑水肿及星形胶质细胞活化增生中的作用,并探讨其可能机制。方法：1.腹腔注射氯化锂-匹鲁卡品建立小鼠癫痫持续状态模型。随即将实验动物分为四组,为正常对照组,癫痫组,雷帕霉素组,FK506组。2.根据Racine分级,分别记录小鼠癫痫发作的程度分级,发作潜伏期,癫痫发作起止时间。3.应用核磁共振技术对小鼠脑组织扫描,观察癫痫持续状态发作后不同时间点局部脑组织水肿情况。4.应用湿—干重法,检测癫痫持续状态发作后脑组织的水含量。5.通过免疫组织化学染色,观察癫痫持续状态发作后小鼠海马神经元GFAP的表达,进而反应星形胶质细胞的活化增生。6.应用Western Blot方法,测定癫痫持续状态发作后小鼠海马组织钙神经素(CaN)的表达变化。结果：1.癫痫组、Fk506组小鼠腹腔注射匹鲁卡品后出现癫痫发作,开始较轻,发作程度逐渐加重,后出现癫痫持续状态。记录各组的潜伏期和发作强度的变化。与癫痫组相比,Fk506组小鼠的潜伏期、发作的强度级别无明显差异。对照组小鼠腹腔注射生理盐水后未观察到癫痫发作。2.通过对各组小鼠在癫痫发作后的不同时间点行核磁共振检查,结果显示癫痫持续状态后24h可见局部脑组织T2像高信号,提示局部脑组织水肿明显,癫痫持续状态后7d时局部脑组织T2像信号明显减低,提示脑水肿明显减轻。FK506可显着减轻24h时局部的脑水肿,雷帕霉素未见明显的抑制作用。3.脑组织的水含量测定显示癫痫组,FK506组及雷帕霉素组小鼠的脑组织含水量在癫痫发作后24h时明显升高,7d时各组小鼠的脑组织含水量恢复到正常水平。与癫痫组小鼠相比,FK506组小鼠在24h时的脑组织含水量降低,而雷帕霉素组小鼠未显示出明显差异。4.通过Western blot测定癫痫持续状态后24h,72h及7d时脑组织钙神经素的表达。结果提示,钙神经素在癫痫发作后24h显着增加,一直持续到7d。结果提示脑组织的水肿与钙神经素的表达有关。5.通过免疫组化方法检测GFAP的表达。星形胶质细胞胞体的GFAP是一种细胞骨架蛋白,可反映星形胶质细胞活化的状态,是其特征性的蛋白标志,同时可以特异性的对星形胶质细胞进行标记。结果表明,在癫痫发作后72h时GFAP表达增加,7d时更加明显。CaN抑制剂FK506可以抑制GFAP的表达,抑制星形胶质细胞增生。雷帕霉素组在癫痫后7d时GFAP表达比癫痫组低,但比FK506组高,雷帕霉素对GFAP的抑制作用要弱于FK506。结果表明钙神经素在癫痫后星形胶质细胞活化中的作用,FK506可通过抑制钙神经素的表达,发挥抑制星形胶质细胞增生的作用。结论：1.通过核磁共振扫描及脑组织含水量检测,癫痫持续状态后脑组织出现明显脑水肿,发作后7d时水肿明显减轻。FK506可减轻癫痫后脑组织的水肿,发挥脑保护作用,雷帕霉素未见明显的保护作用。2.癫痫持续状态发作后脑组织钙神经素的表达在24h显着增加,一直持续到7d。CaN抑制剂FK506可显着减轻24h时局部的脑水肿,雷帕霉素未见明显的抑制作用。提示脑组织的水肿与钙神经素的表达有关。FK506对脑组织水肿的抑制作用与其抑制钙神经素的表达相关。3.癫痫发作后GFAP的表达增加,反映出星形胶质细胞的活化增生,CaN抑制剂FK506可以抑制GFAP的表达,抑制星形胶质细胞增生。雷帕霉素对GFAP的抑制作用要弱于FK506。提示钙神经素在癫痫后星形胶质细胞活化中的作用,K506可通过抑制钙神经素的表达,发挥抑制星形胶质细胞增生的作用。本课题应用氯化锂—匹鲁卡品癫痫持续状态模型,研究动物行为学,通过水迷宫实验研究实验动物的学习和空间记忆能力,通过7.0T核磁共振对实验动物脑部扫描观察局部脑组织水肿情况,Westblot方法观察CaN在癫痫发作后表达的动态改变,免疫组化观察GFAP的表达,同时观察癫痫发作后海马神经元的损伤。结果提示：钙神经素抑制剂FK506减轻癫痫发作,改善学习和记忆能力,减轻海马神经元的损伤；核磁共振检查示癫痫组局部脑组织T2像高信号,提示局部脑组织水肿明显,钙神经素在癫痫发作后显着增加,钙神经素抑制剂FK506可显着减轻局部的脑水肿,雷帕霉素未见明显的抑制作用,提示脑组织的水肿与钙神经素的表达有关,FK506通过抑制钙神经素的表达,减轻脑组织水肿；钙神经素抑制剂FK506可以抑制GFAP的表达,抑制星形胶质细胞增生,雷帕霉素对GFAP的抑制作用要弱于FK506,表明钙神经素在癫痫后星形胶质细胞活化中的作用,K506可通过抑制钙神经素的表达,发挥抑制星形胶质细胞增生的作用。本实验研究提示钙神经素在癫痫后的认知障碍、脑组织水肿及星形胶质细胞增生中的重要作用,FK506可通过对钙神经素的抑制作用,发挥抗癫痫及脑保护作用,为癫痫发病机制的进一步研究和临床治疗提供新的思路。(本文来源于《山东大学》期刊2015-10-06）
马辉,马雯,王丽,卢娜,燕晗祺[9]（2015）在《小分子融合肽TAT-KIR抑制星形胶质细胞反应性增生》一文中研究指出JAK2-STAT3信号通路在星形胶质细胞反应性增生过程中发挥重要作用,SOCS3蛋白可以阻断JAK2-STAT3信号通路,从而发挥对星形胶质细胞增生的负性调控作用。本研究利用SOCS3蛋白的激酶抑制区KIR(12肽)及穿膜肽TAT(9肽)合成小分子融合肽TAT-KIR;以IL-6刺激原代分离培养的星形胶质细胞模拟胶质细胞炎症反应,构建大鼠创伤性脑损伤(TBI)(本文来源于《中国解剖学会2015年年会论文文摘汇编》期刊2015-08-08）
田芳[10]（2015）在《STVNa抑制大鼠脑缺血/再灌注损伤后星形胶质细胞增生及其神经保护作用研究》一文中研究指出脑卒中是当前死亡率最高的叁大疾病之一。脑卒中发生后脑组织中会出现星形胶质细胞的活化及增生,这个过程对脑组织具有保护和损伤的双重作用,损伤迟发期星形胶质细胞增生形成的“胶质瘢痕”可能对脑组织造成进一步损伤,通过调控其增生可能起到有效的脑保护作用。研究表明异甜菊醇(isosteviol)及其可溶性钠盐异甜菊醇钠(STVNa)均可显着减轻缺血/再灌注引起的脑损伤,然而其机制尚不明确。本课题主要研究STVNa对大鼠脑缺血/再灌注损伤后星形胶质细胞增生的影响及对神经的保护作用。本研究用SD大鼠大脑中动脉闭塞/再灌注模型模拟人类缺血性脑卒中,探究了STVNa对脑损伤急性期(1天)及迟发期(7天)星形胶质细胞活化及增生的影响,结果显示STVNa对急性期的活性星形胶质细胞不产生明显作用,而持续治疗7天后则可有效抑制迟发期的星形胶质细胞增生。研究了STVNa持续治疗7天对损伤脑组织产生的保护作用,结果显示STVNa持续治疗可显着减小脑梗死体积(同溶剂对照相比,减小百分比为46.7%,P<0.01),同时可显着改善大鼠神经行为学及细胞形态,减少细胞凋亡,增加神经元存活比例。本研究进一步对STVNa急性期单次治疗后第7天的星形胶质增生状况及脑损伤恢复状况进行比较研究,发现STVNa单次治疗虽未对星形胶质细胞增生产生影响,但也可显着减小脑梗死体积(减小百分比为17.7%,P<0.05),并起到上述其他神经保护作用。比较持续治疗和单次治疗的结果,前者表现出更好的脑保护效果。分析上述结果,STVNa在损伤急性期即有明显的神经保护作用,其机制与对星形胶质细胞的影响无关,而在此后的持续治疗中有进一步的神经保护作用,其机制可能与抑制迟发期星形胶质细胞增生和瘢痕形成有关。本研究首次发现STVNa可通过两种不同的机制在脑缺血/再灌注损伤的急性期和迟发期发挥保护作用。同时确证了在损伤迟发期存在明显的星形胶质细胞增生和瘢痕形成现象,STVNa在显着抑制该现象的同时抑制了脑组织的进一步损伤。研究结果提示,临床中使用神经保护剂对脑卒中进行持续的治疗有利于进一步减少脑组织损伤和促进神经细胞和功能的恢复(本文来源于《华南理工大学》期刊2015-06-01）
星形胶质细胞增生论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的检测水通道蛋白4(aquaporin 4,AQP4)特异性抑制剂TGN-020对大鼠脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)后继发性水肿和星形胶质细胞增生相关指标的影响,为SCI后水肿与星形细胞增生之间的关系研究提供重要依据。方法成年雌性SD大鼠72只,体质量180~220g,随机分为假手术组(Sham组)、单纯脊髓损伤组(SCI组)、TGN-020干预组(TGN-020组),每组24只。采用改良后的动脉夹挤压脊髓建立SCI模型,Sham组仅行椎板切除术。术后TGN-020组腹腔内注射TGN-020(5mg/kg,ip)处理,Sham组和SCI组予以等体积的二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO)各组于术后3d收集标本,分别采用干湿重法检测含水量变化,采用蛋白印记、免疫荧光检测AQP4、胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)蛋白表达。结果术后3d,与Sham组相比,SCI组和TGN-020组脊髓损伤区含水量明显升高(P<0.01),与SCI组相比,TGN-020组脊髓损伤区含水量减少(P<0.05);SCI组和TGN-020组AQP4、GFAP、PCNA的表达较Sham组明显升高(P<0.01),TGN-020组AQP4、GFAP、PCNA的表达较SCI组降低(P<0.05)。结论 TGN-020可以通过下调大鼠脊髓损伤后AQP4的表达减轻继发性水肿,抑制星形胶质细胞增生,从而促进大鼠急性损伤后的功能恢复。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
星形胶质细胞增生论文参考文献
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