本文主要研究内容
作者吴庭辉,李涛,李树伟(2019)在《平原型和田羊毛囊KAP4.2基因的克隆与原核表达》一文中研究指出:为了探索影响平原型和田羊羊毛品质的角蛋白关联蛋白(keratin association protein,KAP)4.2基因的结构与功能,试验以平原型和田羊毛囊总RNA反转录得到的cDNA为模板,经RT-PCR扩增KAP4.2基因成熟蛋白序列,与pMD18-T载体连接,经PCR扩增、双酶切鉴定连接正确后再与原核表达载体pET-28a连接,连接正确后对其测序并进行同源性分析及氨基酸分析。结果表明:平原型和田羊重组质粒pMD-18T-KAP4.2构建成功,表达质粒pET-28a-KAP4.2成功原核表达。在不同诱导时间KAP4.2基因表达蛋白的量明显不同,在诱导4小时时蛋白表达量最大;不同体积IPTG诱导后KAP4.2基因表达蛋白的量明显不同,体积为10μL时蛋白表达量最大。平原型和田羊毛囊KAP4.2基因序列与GenBank中美利奴羊(X05639.1)基因序列同源性为99.1%,显示有3处发生突变,分别为第77位的T突变为C,第108位的G突变为T,第200位的C突变为T。平原型和田羊KAP4.2蛋白基因第26位氨基酸由亮氨酸突变为脯氨酸,第67位氨基酸由脯氨酸突变为亮氨酸。说明平原型和田羊毛囊KAP4.2基因序列与GenBank中美利奴羊基因序列同源性较高,虽然高度保守,但存在碱基突变和氨基的变异。
Abstract
wei le tan suo ying xiang ping yuan xing he tian yang yang mao pin zhi de jiao dan bai guan lian dan bai (keratin association protein,KAP)4.2ji yin de jie gou yu gong neng ,shi yan yi ping yuan xing he tian yang mao nang zong RNAfan zhuai lu de dao de cDNAwei mo ban ,jing RT-PCRkuo zeng KAP4.2ji yin cheng shou dan bai xu lie ,yu pMD18-Tzai ti lian jie ,jing PCRkuo zeng 、shuang mei qie jian ding lian jie zheng que hou zai yu yuan he biao da zai ti pET-28alian jie ,lian jie zheng que hou dui ji ce xu bing jin hang tong yuan xing fen xi ji an ji suan fen xi 。jie guo biao ming :ping yuan xing he tian yang chong zu zhi li pMD-18T-KAP4.2gou jian cheng gong ,biao da zhi li pET-28a-KAP4.2cheng gong yuan he biao da 。zai bu tong you dao shi jian KAP4.2ji yin biao da dan bai de liang ming xian bu tong ,zai you dao 4xiao shi shi dan bai biao da liang zui da ;bu tong ti ji IPTGyou dao hou KAP4.2ji yin biao da dan bai de liang ming xian bu tong ,ti ji wei 10μLshi dan bai biao da liang zui da 。ping yuan xing he tian yang mao nang KAP4.2ji yin xu lie yu GenBankzhong mei li nu yang (X05639.1)ji yin xu lie tong yuan xing wei 99.1%,xian shi you 3chu fa sheng tu bian ,fen bie wei di 77wei de Ttu bian wei C,di 108wei de Gtu bian wei T,di 200wei de Ctu bian wei T。ping yuan xing he tian yang KAP4.2dan bai ji yin di 26wei an ji suan you liang an suan tu bian wei fu an suan ,di 67wei an ji suan you fu an suan tu bian wei liang an suan 。shui ming ping yuan xing he tian yang mao nang KAP4.2ji yin xu lie yu GenBankzhong mei li nu yang ji yin xu lie tong yuan xing jiao gao ,sui ran gao du bao shou ,dan cun zai jian ji tu bian he an ji de bian yi 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自黑龙江畜牧兽医的吴庭辉,李涛,李树伟,发表于刊物黑龙江畜牧兽医2019年13期论文,是一篇关于平原型和田羊论文,角蛋白关联蛋白论文,基因论文,毛囊论文,原核表达论文,半粗羊毛论文,黑龙江畜牧兽医2019年13期论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自黑龙江畜牧兽医2019年13期论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。
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