导读:本文包含了基因表达与定位论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:水稻,乙烯应答因子(ERF),生物信息学,亚细胞定位
基因表达与定位论文文献综述
邹杰,李生强,刘显军,陈刚[1]（2019）在《水稻OsERF103基因生物信息学分析、亚细胞定位及表达分析》一文中研究指出乙烯应答因子(ethylene responsive factors, ERFs)是一类植物特有的转录因子,在植物的生长发育和逆境胁迫响应中起重要调控作用。为了研究水稻(Oryza sativa) OsERF103基因(Gen Bank No. XM_015768788)的功能,本研究利用生物信息学方法对其序列特征进行分析;构建了p BWA(V)HS-OsERF103-Glosgfp融合表达载体并转化水稻原生质体,通过激光共聚焦显微镜观察融合蛋白在水稻原生质体的亚细胞定位;利用q RT-PCR技术对该基因在水稻不同组织及不同逆境胁迫下的表达模式进行分析。结果表明OsERF103含有1个AP2 (APETALA2)结构域,为亲水性蛋白,不含信号肽和跨膜结构,在进化关系上与短舌野生稻(Oryza brachyantha)类脱落酸阻遏因子1 (abscisic acid repressor 1-like, ABR1-like)蛋白的亲缘关系最近;亚细胞定位结果显示OsERF103定位于细胞核;q RT-PCR分析结果显示,OsERF103在孕穗期的根、茎、叶、叶鞘、叶枕和幼穗中均有表达,其在根中表达最强,在叶和幼穗中表达较弱;OsERF103被高温、低温、PEG6000、高盐和脱落酸(abscisic acid, ABA)诱导表达,但在不同的胁迫条件下该基因表达模式不尽相同。本研究为进一步研究水稻OsERF103基因的功能提供了基础资料。(本文来源于《农业生物技术学报》期刊2019年12期）
李惠华,曾碧玉,王伟,常强,苏明华[2]（2019）在《枇杷悬浮细胞AS基因的瞬时表达载体构建与亚细胞定位》一文中研究指出枇杷(Eriobotrya japonica)细胞悬浮培养可以产生丰富的五环叁萜类化合物。香树素合成酶(amyrine synthase, AS)是叁萜合成途径中的关键酶,决定主要代谢和次生代谢的分支点。枇杷AS基因的功能未见报道。本研究以AS基因过表达质粒(p DONR207-AS)为模板,经PCR扩增获得AS基因的正向开放阅读框,经酶切及与载体的连接,成功构建表达载体p BWA(V)HS-AS-GFP-Tnos。以枇杷悬浮细胞(AS分离的同源系统)为受体材料,在农杆菌(Agrobacterium tumefaciens) GV3101的介导下进行瞬时表达,通过共转化的GFP在激光共聚焦显微镜下成像,分析AS蛋白的亚细胞定位;采用气相色谱-质谱联合分析AS催化产物。研究结果显示,AS在枇杷悬浮细胞中定位于内质网;枇杷悬浮细胞中AS的催化产物含α-香树素和β-香树素,AS属于多功能酶。本研究可为明确五环叁萜类化合物合成途径以及枇杷悬浮细胞的转基因应用提供参考依据。(本文来源于《农业生物技术学报》期刊2019年11期）
邵盈,张艳芳,赵令敏,敖兰吉亚,霍秀文[3]（2019）在《山药V-ATPase B2亚基基因的克隆、表达分析及亚细胞定位》一文中研究指出ATP合成酶(V-ATPase)催化能源物质ATP的合成,从而保证细胞各项生命活动的能量供应。目前对山药(Dioscoreaopposita)生长发育相关差异表达基因的研究鲜有报道。本研究中通过分析ATP酶、V-ATPaseB2亚基基因对山药块茎膨大的影响,为进一步解析山药生长发育的分子调节机制提供试验依据与线索,并为山药块茎膨大提供候选基因。试验材料为毕克齐山药和大和长芋山药。在呼和浩特地区山药块茎在播后90 d左右开始膨大。在块茎膨大期间,每隔15d取1次样,即播后的105、120、135、150和165d进行取样,分别采集叶、茎和块茎。两个品种各选取3株作为生物学重复。使用RACE技术克隆了V-ATPase B2亚基基因的cDNA全长;对其开放阅读框进行了生物信息学分析;克隆其gDNA;使用农杆菌介导法注射烟草叶片进行V-ATPase B2蛋白的亚细胞定位;对ATPase活性和V-ATPase B2亚基基因进行表达模式分析。通过全长克隆得到山药V-ATPase B2亚基基因的cDNA全长为1 874 bp,编码488个氨基酸,基因登录号为MK858181。该基因编码蛋白的理论分子量为54289.76,等电点为5.08;分子式为C2404H3824N654O741S17,总原子数为7640,亲水性的平均值为–0.268。通过gDNA的克隆,得到V-ATPase B2的编码区分为14个外显子,15个内含子。同源序列进化分析表明,山药与凤梨的亲缘关系最近。亚细胞定位表明山药V-ATPase B2蛋白定位于细胞质。通过ATP酶活性的测定与实时荧光定量PCR分析,得到两品种山药的ATPase活性和V-ATPaseB2相对表达量同时达到最高值。在山药块茎膨大中前期二者极显着正相关,而在成熟收获时则为极显着负相关,相关系数为–0.963(P<0.01)。说明V-ATPaseB2的表达水平影响着ATPase的活性。ATPase活性在叶中最高,而V-ATPase B2在块茎中表达量最高。从广义上讲,V-ATPase B2在山药块茎膨大过程中发挥着一定的作用,可进一步为山药生长发育提供候选基因。(本文来源于《中国园艺学会2019年学术年会暨成立90周年纪念大会论文摘要集》期刊2019-10-21）
王冕,张朝昕,陈娜,陈明娜,禹山林[4]（2019）在《花生AhMKK4基因的克隆、表达分析和亚细胞定位研究》一文中研究指出为挖掘花生抗逆相关基因,本研究以花生品种花育20号为试验材料,根据cDNA文库中已知的促丝裂原活化蛋白激酶激酶(MKK)基因EST序列设计引物,通过RACE-PCR克隆得到AhMKK4基因。结果表明,AhMKK4基因序列全长1 434 bp,含有3′非编码区151 bp,5′非编码区317 bp,开放阅读框全长966 bp,编码一条含有322个氨基酸的蛋白序列。预测其分子量为36.74 kDa,属于MAPKK基因家族D组成员。亚细胞定位显示AhMKK4基因定位于细胞质和细胞核中。RT-qPCR分析发现,AhMKK4基因在根中表达量高于其他组织,说明该基因具有组织表达特异性;AhMKK4基因受JA和IAA诱导时表达量上调,受SA和ABA诱导时表达量下调,说明该基因可能参与到JA和IAA介导的信号转导途径;AhMKK4在盐胁迫下表达量上调,说明该基因可能参与花生对盐胁迫的适应性调控。本研究结果为花生抗逆育种研究提供了新的基因资源。(本文来源于《核农学报》期刊2019年12期）
王志刚,刘士力,李贤露,吕卓云,毛丽盈[5]（2019）在《翘嘴红鲌(Erythroculter ilishaeformis)果糖-1,6-二磷酸醛缩酶(ALDO-C)基因定位、克隆及表达分析》一文中研究指出翘嘴红鲌(Erythroculterilishaeformis)是大型淡水鱼类鳊鲌亚科(Abramidinae)中最大的一种鱼,具有较高的经济价值。但其饲料转化率及抗病性研究相对较少,相关基因信息缺乏。本研究以翘嘴红鲌为对象,利用RACE技术克隆翘嘴红鲌果糖-1.6-二磷酸醛缩酶(ALDO-C)基因,该基因cDNA全长1945bp,其中ORF区975bp,编码325个氨基酸.5′非编码区933bp.3′非编码区37bp。通过实时荧光定量PCR检测了ALDO-C在不同组织中相对表达水平。发现ALDO-C基因在翘嘴红鲌的肾、肝、肌肉、性腺中均有表达,且在肾中表达量最高,显着高于其他组织。同时采用石蜡切片、H.E染色和原位杂交染色,观察分析翘嘴红鲌的肾组织显微结构和ALDO-C基因的表达定位,结果表明,ALDO-C在鱼类肾单位和集合管结构、调节肾组织水平衡及抗病性方面有重要作用。可以考虑将翘嘴红鲌醛缩酶C基因作为生长发育及抗病性相关的候选基因,用于翘嘴红鲌鱼的分子辅助育种,以期为今后的研究提供理论基础。(本文来源于《海洋与湖沼》期刊2019年05期）
贾羊羊,贾哓玮,司旭阳,张洪艳,张科[6]（2019）在《拟南芥AtDGK7基因的组织定位及应答不同胁迫的表达分析》一文中研究指出二酰甘油激酶(DGKs)是植物肌醇磷脂信号系统中的关键酶之一,催化二酰甘油(DAG)的磷酸化形成植物中新型的第二信使分子磷脂酸(PA)。拟南芥中AtDGKs有7个亚型。本文利用报告基因GUS和实时定量RT-PCR的方法,检测了拟南芥中AtDGK7亚型基因不同组织的表达特征,以及AtDGK7基因在植物受到各种非生物胁迫及激素刺激下的表达变化。结果显示,AtDGK7在幼苗、根以及花器官中均有表达;该基因在盐和干旱胁迫下表达升高,受到24-eBL的诱导表达,暗示AtDGK7对于拟南芥适应逆境发挥重要作用,同时介导了植物对激素的响应过程。我们的数据为进一步研究AtDGK7的生物学功能提供了基础。(本文来源于《河北农业大学学报》期刊2019年05期）
蔡云婷,贾力,拓昊苑[7]（2019）在《玉米ZmTOC1a、ZmTOC1b基因的克隆、表达及亚细胞定位分析》一文中研究指出拟南芥TOC1基因在拟南芥中与2个MYB类蛋白基因LHY (Late elongated hypocotyl)、CCA1(Circadian clock associated1)组成中央振荡器,通过光周期调节途径调控拟南芥对光照的响应。为了揭示玉米中央振荡器中重要基因ZmTOC1a与ZmTOC1b的生物学功能,通过同源搜索找到玉米中的2个同源基因ZmTOC1a与ZmTOC1b,并通过同源克隆得到了这2个基因的序列,进而对这2个基因进行组织表达分析和编码蛋白的亚细胞定位。结果表明,通过同源克隆得到ZmTOC1a的开放阅读框的总长度为1 236 bp,共编码411个氨基酸; ZmTOC1b的开放阅读框的全长为1 554 bp,共编码517个氨基酸。通过Prot PARAM进行基因编码蛋白质的理化性质分析,ZmTOC1a与ZmTOC1b均为酸性蛋白。Net Phos 3. 1 Server预测结果显示,ZmTOC1a存在46个潜在磷酸化位点,其中丝氨酸36个,苏氨酸8个,酪氨酸2个; ZmTOC1b共存在53个潜在磷酸化位点,丝氨酸38个,苏氨酸12个,酪氨酸3个。在玉米中选取11个不同的组织进行qRT-PCR分析,结果表明,ZmTOC1a及ZmTOC1b分别在胚根以及胚芽鞘中高表达。通过构建目的蛋白与GFP融合的表达载体并注射烟草,发现ZmTOC1a及ZmTOC1b表达蛋白主要集中在细胞核中。综上所述,玉米TOC1基因可能与拟南芥TOC1基因作用一致,在玉米的生物钟调节中起到了重要的作用。(本文来源于《华北农学报》期刊2019年04期）
陈潇潇,罗红艳,顾真琪,陈世品,曹光球[8]（2019）在《油茶CoFAD2-1基因的克隆、亚细胞定位及组织表达》一文中研究指出【目的】克隆油茶CoFAD2-1基因,并进行亚细胞定位和组织表达研究。【方法】采用CTAB法提取油茶4种组织中的总RNA;运用RT-PCR方法,设计基因特异性引物,从油茶未成熟胚中克隆CoFAD2-1基因;用生物信息学手段分析了CoFAD2-1基因的结构和进化关系;利用实时荧光定量PCR技术研究CoFAD2-1基因在不同组织的表达;同时运用烟草瞬时表达技术对该基因进行亚细胞定位分析。【结果】该基因编码区全长为1 149 bp,共编码382个氨基酸,具有FAD2基因家族保守的3个组氨酸簇。系统树分析显示该基因与种子特异表达的FAD2基因聚在一起,组织表达分析也表明CoFAD2在种子中特异表达,转化烟草叶片验证CoFAD2-1蛋白定位于内质网膜上。【结论】CoFAD2-1基因在种子中特异性表达,且定位在内质网膜上。(本文来源于《四川农业大学学报》期刊2019年04期）
张浩杰,刘梅,李春燕,何冉,兰景超[9]（2019）在《犬恶丝虫核苷二磷酸激酶(NDPK)基因的原核表达及其免疫荧光定位》一文中研究指出对犬恶丝虫核苷二磷酸激酶(NDPK)基因的基本特征进行探究,并评估其诊断价值,旨在为犬恶丝虫病的诊断提供依据。本研究原核表达了Di-NDPK,通过生物信息学、免疫印迹和免疫荧光组化分析了该蛋白的基本特征,通过检测犬恶丝虫阳性血清评估了rDi-NDPK的诊断价值。免疫印迹显示,Di-NDPK具有良好的反应原性,免疫荧光组化显示,Di-NDPK在犬恶丝虫的侧索及肠上皮细胞和肠腔中分布。间接ELISA显示,该方法的敏感性为66.7%(16/24),特异性为38.9%(14/36),其中与犬细粒棘球蚴病阳性血清、犬钩虫病阳性血清以及犬弓首蛔虫病阳性血清发生交叉反应。Di-NDPK是一个分泌蛋白,但不适合作为犬恶丝虫病的诊断候选抗原。(本文来源于《浙江农业学报》期刊2019年09期）
王文青,蒋保余,曲自刚,刘保红,肖星星[10]（2019）在《柔嫩艾美耳球虫穿孔素样蛋白基因的原核表达与亚细胞定位》一文中研究指出为了研究柔嫩艾美耳球虫(E. tenella)穿孔素样蛋白(Et PLP)在球虫感染中与宿主相互作用关系,首次成功获得EtPLP1(1 932 bp)和EtPLP2(4 215 bp)2个目的基因。通过表达纯化得到2个大小分别为37和67ku的目的蛋白,Western-blot结果显示其反应原性良好。通过免疫荧光技术,观察到EtPLP1定位在子孢子顶端。m RNA转录水平检测结果显示,EtPLP1在子孢子阶段的表达量最高,其次是第1代裂殖子阶段,EtPLP2m RNA水平在第1代裂殖子阶段表达量最高,其次是第2代裂殖子阶段;它们在其他阶段表达量极低或不表达。结果表明EtPLP1和EtPLP2可能参与虫体入侵与逸出宿主细胞,为EtPLPs蛋白功能研究奠定了基础。(本文来源于《中国兽医科学》期刊2019年11期）
基因表达与定位论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
枇杷(Eriobotrya japonica)细胞悬浮培养可以产生丰富的五环叁萜类化合物。香树素合成酶(amyrine synthase, AS)是叁萜合成途径中的关键酶,决定主要代谢和次生代谢的分支点。枇杷AS基因的功能未见报道。本研究以AS基因过表达质粒(p DONR207-AS)为模板,经PCR扩增获得AS基因的正向开放阅读框,经酶切及与载体的连接,成功构建表达载体p BWA(V)HS-AS-GFP-Tnos。以枇杷悬浮细胞(AS分离的同源系统)为受体材料,在农杆菌(Agrobacterium tumefaciens) GV3101的介导下进行瞬时表达,通过共转化的GFP在激光共聚焦显微镜下成像,分析AS蛋白的亚细胞定位;采用气相色谱-质谱联合分析AS催化产物。研究结果显示,AS在枇杷悬浮细胞中定位于内质网;枇杷悬浮细胞中AS的催化产物含α-香树素和β-香树素,AS属于多功能酶。本研究可为明确五环叁萜类化合物合成途径以及枇杷悬浮细胞的转基因应用提供参考依据。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
基因表达与定位论文参考文献
[1].邹杰,李生强,刘显军,陈刚.水稻OsERF103基因生物信息学分析、亚细胞定位及表达分析[J].农业生物技术学报.2019
[2].李惠华,曾碧玉,王伟,常强,苏明华.枇杷悬浮细胞AS基因的瞬时表达载体构建与亚细胞定位[J].农业生物技术学报.2019
[3].邵盈,张艳芳,赵令敏,敖兰吉亚,霍秀文.山药V-ATPaseB2亚基基因的克隆、表达分析及亚细胞定位[C].中国园艺学会2019年学术年会暨成立90周年纪念大会论文摘要集.2019
[4].王冕,张朝昕,陈娜,陈明娜,禹山林.花生AhMKK4基因的克隆、表达分析和亚细胞定位研究[J].核农学报.2019
[5].王志刚,刘士力,李贤露,吕卓云,毛丽盈.翘嘴红鲌(Erythroculterilishaeformis)果糖-1,6-二磷酸醛缩酶(ALDO-C)基因定位、克隆及表达分析[J].海洋与湖沼.2019
[6].贾羊羊,贾哓玮,司旭阳,张洪艳,张科.拟南芥AtDGK7基因的组织定位及应答不同胁迫的表达分析[J].河北农业大学学报.2019
[7].蔡云婷,贾力,拓昊苑.玉米ZmTOC1a、ZmTOC1b基因的克隆、表达及亚细胞定位分析[J].华北农学报.2019
[8].陈潇潇,罗红艳,顾真琪,陈世品,曹光球.油茶CoFAD2-1基因的克隆、亚细胞定位及组织表达[J].四川农业大学学报.2019
[9].张浩杰,刘梅,李春燕,何冉,兰景超.犬恶丝虫核苷二磷酸激酶(NDPK)基因的原核表达及其免疫荧光定位[J].浙江农业学报.2019
[10].王文青,蒋保余,曲自刚,刘保红,肖星星.柔嫩艾美耳球虫穿孔素样蛋白基因的原核表达与亚细胞定位[J].中国兽医科学.2019
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