导读:本文包含了肺腺癌小鼠论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:H1975,Stat3信号通路,除痰解毒方
肺腺癌小鼠论文文献综述
童冰杰,王淑美,罗杨,赵宾[1]（2019）在《除痰解毒方联合吉非替尼对肺腺癌H1975荷瘤小鼠Bax、Cyclin D1、Bcl-XL的调节作用》一文中研究指出目的:研究除痰解毒方(Chutan Jiedu Decoction,CJD)与吉非替尼联合用药对肺腺癌H1975细胞Stat3信号通路的影响。方法:培养H1975细胞并建立H1975小鼠模型;隔日测量小鼠瘤体体积,绘制生长曲线;第15天麻醉取材,采用Western Blot、免疫组化、q-PCR检测Bax、Cyclin D1、Bcl-XL的表达。结果:与建立的模型相比较,治疗组Bax表达升高,Cyclin D1、Bcl-XL表达降低,且联合用药组优于单独用药组。结论:除痰解毒方与吉非替尼联合用药可能通过调节Bax、Cyclin D1、Bcl-XL,抑制H1975增殖。(本文来源于《第十七届全国中西医结合肿瘤学术大会摘要集》期刊2019-07-05）
李巧玲[2]（2019）在《爱康方对人肺腺癌A549、小鼠Lewis细胞内Bad、Caspase-9、Survivin、mTOR蛋白及基因表达影响的研究》一文中研究指出目的在课题组前期实验的基础上,观察爱康方对人肺腺癌A549、小鼠Lewis细胞内Bad、Caspase-9、Survivin、m TOR蛋白及基因表达的影响,更深层次探讨爱康方促进肺癌细胞凋亡及与环磷酰胺起到协同作用可能的分子机制。方法选用纯系SPF级雄性大鼠40只,体重在220±20克范围之间,用随机分组的方法,分为空白对照组(生理盐水灌胃)、环磷酰胺组(环磷酰胺腹腔注射)、爱康方组(爱康方灌胃)及爱康方联合环磷酰胺组(爱康方灌胃联合环磷酰胺腹腔注射),每组各10只。大鼠连续灌胃5天之后进行心脏取血,血清分离并灭活,置于-80℃冰箱保存。购买A549、Lewis细胞进行培养,根据所加的不同含药血清对应分组:空白对照组、环磷酰胺组、爱康方组及爱康方联合环磷酰胺组,分别培养48h和72h,收集细胞用于检测。分别采用免疫荧光法和蛋白免疫印迹法(Western Blot)法检测Bad、Caspase-9、Survivin、m TOR蛋白表达水平;采用实时荧光定量PCR技术(Real Time Quantitative PCR,简称RT-PCR)检测样本中Bad、Caspase-9、Survivin、m TOR目的基因m RNA转录水平的变化情况,以明确爱康方促进肺癌细胞凋亡及与环磷酰胺起到协同作用可能的分子机制。结果1.爱康方及爱康方协同环磷酰胺对A549细胞中Bad、Caspase-9表达的影响:免疫荧光法和Western blot法检测发现Bad、Caspase-9蛋白的表达水平随着药效的增加而上升;其中空白对照组表达水平最低,爱康方联合环磷酰胺组表达水平最高;与空白对照组相比,爱康方组、环磷酰胺组、爱康方联合环磷酰胺组蛋白表达水平均显着上升,差异具有统计学意义(P<0.01);与环磷酰胺组相比,爱康方联合环磷酰胺组蛋白表达水平升高更明显,差异具有统计学意义(P<0.05)。RT-PCR法检测结果显示,Bad及Caspase-9的m RNA表达水平均随着药效的增加而上升;表达趋势同Western bl-oting法结果。2.爱康方及爱康方协同环磷酰胺对A549细胞中Survivin、m TOR表达的影响:免疫荧光法和Western bloting法检测发现Survivin、m TOR蛋白的表达水平随着药效的增加而降低;其中空白对照组表达水平最高,爱康方联合环磷酰胺组表达水平最低;与空白对照组相比,爱康方组、环磷酰胺组、爱康方联合环磷酰胺组蛋白表达水平均显着下降,差异具有统计学意义(P<0.01);与环磷酰胺组相比,爱康方联合环磷酰胺组蛋白表达水平降低更明显,差异具有统计学意义(P<0.05)。RT-PCR法检测结果显示,Surv ivin及m TOR的m RNA表达水平均随着药效的增加而下降;表达趋势同Western blot法结果。3.爱康方对Lewis细胞中Bad、Caspase-9、Survivin、m TOR蛋白及基因表达的影响结果同A549细胞。结论1.爱康方以及爱康方协同环磷酰胺能够使人肺腺癌A549、小鼠Lewis细胞内Bad、Caspase-9蛋白及基因表达水平上调,Survivin、m TOR蛋白及基因表达水平下调。2.爱康方能够促进人肺腺癌A549、小鼠Lewis细胞凋亡,并与环磷酰胺起到协同作用,其机制可能是:(1)与调节凋亡相关蛋白Bad、Caspase-9、Survivin的表达相关;(2)通过下调m TOR蛋白的表达,抑制PI3K/AKT-m TOR信号通路在肺癌细胞中的异常活化,从而促进细胞凋亡,同时减轻环磷酰胺的耐药水平,且凋亡程度与时间相关。(本文来源于《宁夏医科大学》期刊2019-03-01）
房昕[3]（2019）在《NFE2L1和NFE2L2在乌拉坦所致小鼠肺腺癌发生中的作用》一文中研究指出目的:癌症是当今世界威胁人类生命的主要疾病,其中肺癌以其发病率和死亡率高、预后差,成为癌症中最受关注的对象之一。肺癌形成的分子机制十分复杂,但氧化应激是肺癌发生中普遍公认的重要机制之一。NFE2L2和NFE2L1同属于CNC-bZIP家族的具有碱性赖氨酸拉链结构的转录因子,在抵御氧化应激,维持机体氧化还原稳态中发挥重要作用。大量研究显示NFE2L2具有预防与氧化应激相关的疾病,抑制肿瘤的发生等优势,但癌症细胞会利用NFE2L2的优势来协助癌细胞生长、转移、扩散等,即NFE2L2在肿瘤发生和发展中具有双重作用。此外,与NFE2L2相比,NFE2L1可能具有更强的生理和病理作用,因此NFE2L1可能是癌症防治中更为重要的靶点,但仍存大量研究空白。本研究利用肺泡Ⅱ型上皮(Alveolar type Ⅱ epithelial,ATⅡ)细胞的特异性启动子肺表面活性蛋白C(Surfactant protein C,Sftpc/SP-C)来构建Nfe2l1和Nfe2l2肺泡Ⅱ型上皮细胞特异性敲除的小鼠(Nfe2l1(ATⅡ)-KO及Nfe2l2(ATⅡ)-KO),研究NFE2L1和NFE2L2在乌拉坦(Urethane,Ure)所致的小鼠肺腺癌发生中的作用,并初步探索可能的机制。研究方法:1.Nfe2l1(ATⅡ)-KO和Nfe2l2(ATⅡ)-KO小鼠的构建:采用C57BL/6遗传背景的小鼠构建Nfe2l1-KI/Sftpc-rtTA~(+/-)/Teto-Cre~(+/-)和Nfe2l2-KI/Sftpc-rtTA~(+/-)/Teto-Cre~(+/-)叁重转基因小鼠,通过基因型鉴定,将Nfe2l1-KI、Nfe2l1-KI/Sftpc-rtTA~(+/-)、Nfe2l1-KI/Teto-Cre~(+/-)、Nfe2l1-KI/Sftpc-rtTA~(+/-)/Teto-Cre~(+/-)、Nfe2l2-KI、Nfe2l2-KI/Sftpc-rtTA~(+/-)、Nfe2l2-KI/Teto-Cre~(+/-)、Nfe2l2-KI/Sftpc-rtTA~(+/-)/Teto-Cre~(+/-)及Sftpc-rtTA~(+/-)/Teto-Cre~(+/-)几种基因型的小鼠在6周龄时给予含有2 mg/mL强力霉素(doxycycline,DOX),5%蔗糖的饮用水,饮水2周。2.小鼠原代ATⅡ细胞的提取与鉴定:应用Dispase Ⅱ消化法制备小鼠肺组织单细胞悬液,采用免疫磁珠分选法从小鼠肺组织分选Lin~-/Ep-CAM~+细胞,经过48 h培养后,贴壁细胞即为小鼠原代ATⅡ细胞,通过倒置显微镜观察贴壁细胞形态,并采用免疫荧光法鉴定小鼠原代ATⅡ细胞特异表达标志物SP-C的表达。3.Nfe2l1(ATⅡ)-KO和Nfe2l2(ATⅡ)-KO小鼠特异性敲除效果鉴定:提取Nfe2l1(ATⅡ)-KO、Nfe2l2(ATⅡ)-KO及其KI对照组小鼠的原代ATⅡ细胞,用实时定量聚合酶链式反应(Quantative polymerase chain reaction,qPCR)检测各组小鼠原代ATⅡ细胞中Nfe2l1和Nfe2l2的mRNA表达量,以判断Nfe2l1(ATⅡ)-KO和Nfe2l2(ATⅡ)-KO小鼠Nfe2l1和Nfe2l2的敲除效果。ATⅡ细胞分选过程中所得Ep-CAM~-细胞用作敲除效果阴性对照。4.Ure致小鼠肺腺癌模型构建:预实验采用C57BL/6遗传背景的野生型小鼠,用Ure以1 g/kg的剂量进行腹腔注射,每周1次,连续10周,在注射结束后10周进行观察;正式试验将Nfe2l1(ATⅡ)-KO和Nfe2l2(ATⅡ)-KO各种基因型小鼠随机分配到注射Ure的实验组和注射生理盐水的对照组,Ure以1 g/kg的剂量进行腹腔注射,每周1次,连续10周,在注射结束后17周进行观察。5.Ure致小鼠肺腺癌的评价与鉴定:收取小鼠时通过计数肺表面肿瘤个数,测量肺表面肿瘤直径,计算肺表面肿瘤体积及平均直径,测量肺脏重量等来评估肿瘤负荷;肺组织包埋切片,HE染色评价肺肿瘤病理类别,免疫组化检测SP-C以鉴定肺腺癌细胞来源,免疫组化检测PCNA及TTF1以鉴定肺腺癌。6.小鼠ATⅡ细胞MLE-12 Nfe2l1基因沉默与鉴定:用携带靶向Nfe2l1 shRNA的慢病毒(Nfe2l1-KD)与非靶标阴性对照慢病毒(Scramble,Scr)转染MLE-12细胞,用0.5μg/m L嘌呤霉素筛选稳定转染的细胞,通过检测MLE-12细胞Nfe2l1的mRNA及蛋白表达水平来鉴定沉默效果。7.转录组测序(RNA-Sequence,RNA-Seq)及信息分析:Nfe2l1(ATⅡ)-KO及Nfe2l1-KI小鼠原代ATⅡ细胞,Scr及Nfe2l1-KD MLE-12细胞,收取后于Trizol保存,由广州基迪奥公司进行mRNA建库、测序,通过Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes(KEGG)对差异基因表达分析和功能进行富集分析。以qPCR对测序所得目标RNA进行验证。8.统计分析:本研究所有数据均使用GraphPad Prism 5软件进行数据分析。结果:1.成功构建Nfe2l1(ATⅡ)-KO和Nfe2l2(ATⅡ)-KO小鼠:免疫磁珠分选法提取小鼠原代ATⅡ细胞,细胞呈圆形并呈铺路石样生长,且ATⅡ细胞特异性标志物SP-C阳性染色,即成功提取小鼠原代ATⅡ细胞。Nfe2l1(ATⅡ)-KO组较Nfe2l1-KI组小鼠原代ATⅡ细胞中的Nfe2l1表达量明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05),阴性对照细胞Nfe2l1表达无变化;Nfe2l2(ATⅡ)-KO组较Nfe2l2-KI组小鼠ATⅡ原代细胞中的Nfe2l2表达量明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05),阴性对照细胞Nfe2l2表达无变化。2.成功构建Ure致野生型小鼠肺腺癌模型:采用连续给药的方式进行造模,实验终点时,在小鼠肺表面观察到乳白色瘤体,切片HE染色后可观察到上皮样增生、腺瘤样增生、以及腺瘤几种典型的肺腺癌病灶。3.Nfe2l2(ATⅡ)-KO不影响Ure所致小鼠肺腺癌易感性:采用连续给药的方式对Nfe2l2(ATⅡ)-KO小鼠进行肺腺癌造模,实验终点时观察Nfe2l2-KI组小鼠与Nfe2l2(ATⅡ)-KO组小鼠的患病情况无明显差别,通过肿瘤负荷评估(肺表面的结节数量,结节负担,平均肿瘤直径)依旧无明显差异。4.Nfe2l1(ATⅡ)-KO小鼠对Ure所致肺腺癌易感性升高:采用连续给药的方式对Nfe2l1(ATⅡ)-KO小鼠进行肺腺癌造模,实验终点时可明显观察到无论雄性还是雌性,与Cre和Nfe2l1-KI组小鼠相比Nfe2l1(ATⅡ)-KO组小鼠的患病情况更重。通过肿瘤负荷评估发现,Ure注射组Nfe2l1(ATⅡ)-KO小鼠的肺组织重量明显重于同组的Nfe2l1-KI小鼠且差异具有统计学意义(P<0.05);Nfe2l1(ATⅡ)-KO小鼠的肺表面肿瘤个数明显多于同组的Nfe2l1-KI小鼠且差异具有统计学意义(P<0.05);Nfe2l1(ATⅡ)-KO小鼠的肺表面肿瘤体积明显大于同组的Nfe2l1-KI小鼠且差异具有统计学意义(P<0.05);但Nfe2l1(ATⅡ)-KO小鼠的肺表面肿瘤平均直径与同组的Nfe2l1-KI小鼠相比并未发现明显的差异。此外,切片HE染色发现,相比于Nfe2l1-KI小鼠的瘤组织,Nfe2l1(ATⅡ)-KO小鼠的肺肿瘤部分更多,通过定量分析Nfe2l1(ATⅡ)-KO小鼠的肿瘤面积更多且差异具有统计学意义(P<0.05)。对肺组织切片进行免疫组化染色发现肿瘤组织部位表达SP-C、PCNA和TTF1,通过定量分析发现与Nfe2l1-KI组相比Nfe2l1(ATⅡ)-KO组的SP-C、PCNA和TTF1阳染细胞所占面积更多,并且差异具有统计学意义(P<0.05)。5.Nfe2l1敲除或沉默对ATⅡ细胞RNA表达的影响:RNA-Seq结果显示,与Nfe2l1-KI组相比,Nfe2l1(ATⅡ)-KO组ATⅡ细胞上调基因669个,下调基因406个;相比于Scr组,Nfe2l1沉默MLE-12细胞上调基因657个,下调基因220个。Nfe2l1抑制后,原代ATⅡ细胞和MLE-12小鼠ATⅡ细胞系在细胞因子-受体互作、粘附力、蛋白降解、细胞周期、细胞基质-受体互作和PI3K-Akt几个共性信号通路上发生变化。qPCR对代表性基因进行验证,其变化趋势与RNA测序结果一致。结论:1.成功构建Nfe2l1(ATⅡ)-KO和Nfe2l2(ATⅡ)-KO小鼠。2.肺泡Ⅱ型上皮细胞中NFE2L1在乌拉坦所致的小鼠肺腺癌中发挥肿瘤抑制作用。(本文来源于《中国医科大学》期刊2019-02-01）
库丽加那提·帕提汗,艾力扎提·艾则孜,侯梅华[4]（2018）在《艾迪注射液对肺腺癌小鼠多西紫杉醇化疗敏感性的影响探讨》一文中研究指出目的探讨艾迪注射液对肺腺癌小鼠多西紫杉醇化疗敏感性的影响,并分析机制。方法取75只小鼠建立肺腺癌模型,分为5组:化疗组(2 mg/kg多西紫杉醇)、模型组(0.3 ml蒸馏水)、低剂量组(2 mg/kg多西紫杉醇+50 mg/kg艾迪注射液)、中剂量组(2 mg/kg多西紫杉醇+100 mg/kg艾迪注射液)、高剂量组(2 mg/kg多西紫杉醇+200mg/kg艾迪注射液),腹腔注射,每天1次。分别在1周后、2周后、3周后各处死5只,比较抑瘤率,组织凋亡抑制蛋白(Survivin)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)mRNA和蛋白的表达量。结果化疗组、低、中、高剂量组抑瘤率均随着时间的延长显着升高(P<0.05),且同一时刻各组比较,化疗组最低,低、高剂量组次之,中剂量组最高;化疗组、低、中、高剂量组Survivin、Bcl-2 mRNA和蛋白均随着时间的延长显着降低(P<0.05),且同一时刻各组比较,模型组最高,化疗组次之,低、高剂量组稍低,中剂量组最低。结论艾迪注射液对肺腺癌小鼠多西紫杉醇化疗敏感性有增强作用,能够改善肿瘤控制效果,以100 mg/kg剂量效果最佳,推测与下调Survivin、Bcl-2 mRNA和蛋白的表达有关。(本文来源于《临床和实验医学杂志》期刊2018年14期）
杨川[5]（2018）在《多功能纳米金在肺腺癌A549荷瘤小鼠模型中的放射增敏作用及图像引导研究》一文中研究指出背景和目的:肺癌是全球范围内发病率及死亡率最高的恶性肿瘤,亦是威胁我国公民健康的重大疾病。肺癌患者通常需要采用以手术、放疗、化疗及靶向治疗为主的综合治疗。放射治疗在肺癌患者治疗中扮演了重要角色,但肺癌细胞的放射抵抗和肺自身存在的呼吸运动成为了限制肺癌患者的放疗精准性及提高肺癌患者治疗效果的重要因素。已有研究发现,多功能纳米金(Gold Nanoparticles,GNPs)具有潜在放射增敏及肿瘤CT成像的双重作用。本研究利用肺腺癌小鼠皮下移植瘤模型,通过瘤体内注射不同浓度GNPs,并采用不同剂量放射线,以探讨GNPs的放疗增敏及图像引导中的作用,以期为提高肺癌细胞的放射敏感性和图像引导放疗的精确性(Image-guided radiotherapy,IGRT)提供依据。方法:首先,我们通过皮下注射瘤细胞的方式建立了肺腺癌移植瘤模型。并通过单次给予不同X射线剂量(0Gy、2Gy、4Gy、6Gy、8Gy、10Gy和12Gy)照射人肺腺癌(A549)小鼠皮下移植瘤模型,通过观察瘤体反应,选择合适的照射剂量。随后,选取36只荷瘤小鼠,并在瘤体内注射纳米金,分别行160KV X线及6MV X线不同能量级照射,在不同时间点通过体外测量观察肿瘤体积变化。并行Micro CT扫描,观察纳米金在瘤组织中的成像及沉积时间。并通过血液学指标和重要脏器HE染色,观察纳米金对小鼠的毒性反应。结果:通过筛选,我们发现单次放射剂量4Gy为小鼠肺腺癌皮下移植瘤模型的最适剂量。对照组与纳米金组肿瘤体积变化无明显差异(P=0.941)。6MV X线联合纳米金组与6MV X线组比较小鼠肿瘤体积略缩小,但两组没有统计学差异(P=0.730)。160kv X线联合纳米金组小鼠肿瘤体积明显小于160kv X线组(P=0.026)。Micro CT扫描显示:纳米金在肿瘤中的沉积时间可持续30天,具有较好的成像效果,且在整个实验过程中未观察到明显的纳米金相关毒性。结论:单次放射剂量4Gy照射对肺腺癌A549荷瘤小鼠具有明显抑制肿瘤生长的作用。多功能纳米金在160kv X线照射肺腺癌A549移植瘤中有明显的放射增敏作用,而对6MV X线照射肺腺癌A549移植瘤无明显的放射增敏作用。纳米金在肺腺癌A549荷瘤小鼠模型中具有较好的CT成像作用,且并未发现明显的毒性作用。(本文来源于《广西医科大学》期刊2018-05-01）
王章飞,罗以勤,李娟,娄蓉[6]（2018）在《tumstatin基因修饰巨核细胞联合化疗抑制肺腺癌小鼠皮下移植瘤生长》一文中研究指出目的探讨肿瘤抑素(tumstatin)转基因巨核细胞联合化疗对肺腺癌小鼠生存率的影响和皮下移植瘤生长的抑制作用。方法制备tumstatin转基因巨核细胞,通过小鼠背部接种肺腺癌A549细胞,建立小鼠肺腺癌移植瘤模型。小鼠皮下瘤长径达到5 mm后随机分为4组:生理盐水对照组(A组,对照组),吉西他滨(GEM)化疗组(B组,单纯化疗组)、GEM联合巨核细胞组(C组)、GEM联合tumstatin转基因巨核细胞组(D组);其中B、C、D叁组为治疗组。对各组小鼠分别进行给药24 d,每3 d测1次肿瘤体积。在治疗第15天眼球取血,通过血液分析仪检测血细胞值;第24天剥离瘤体,测量大小及质量,免疫组织化学法检测肿瘤内微血管密度(MVD),HE染色检测肿瘤组织坏死情况,治疗期间记录小鼠生存情况。结果各治疗组肿瘤体积生长曲线显着慢于生理盐水组,其中D组瘤体生长最慢且该组生存率较单纯化疗组(B组)得到明显提高;与其他叁组相比,D组小鼠皮下瘤MVD受到显着抑制并引起肿瘤组织重度坏死,且相应小鼠体内保持较正常的血细胞水平。结论 tumstatin转基因巨核细胞联合化疗较单独化疗显着抑制肿瘤新生血管生长并可提升肺腺癌小鼠的生存率。(本文来源于《安徽医科大学学报》期刊2018年04期）
王亚磊[7]（2018）在《通过小鼠肺腺癌移植瘤模型研究贝伐珠单抗血管正常化寸间窗及联合培美曲塞治疗疗效》一文中研究指出目的利用小鼠肺腺癌转移瘤模型探究贝伐珠单抗诱导肿瘤血管正常化时间窗以及贝伐珠单抗联合培美曲塞的抗肿瘤疗效。方法成功构建A549人肺腺癌皮下移植瘤小鼠模型共24只,所有小鼠随机分为6组,在第1天分别腹腔注射生理盐水、培美曲赛50mg/kg、贝伐珠单抗15mg/kg、同时腹腔注射培美曲塞和贝伐珠单抗、第1天先腹腔注射贝伐珠单抗第3天再注射培美曲塞、第1天先腹腔注射贝伐珠单抗第5天再注射培美曲塞,在给药2周后处死小鼠,完整取出瘤体,分别测量瘤体质量,在分别行免疫组化观察瘤体内血管密度以及肿瘤细胞增殖活性。结果与空白对照相比,不论是单药培美曲塞、贝伐珠单抗亦或是培美曲塞与贝伐珠单抗联合应用均能够抑制肿瘤生长,同时瘤体内MVD也相应减少和肿瘤细胞增殖活性被抑制,其中以先腹腔注射贝伐珠单抗2天后再注射培美曲塞实验组肿瘤质量最小,瘤体内MVD最低并且肿瘤细胞增殖活性也显着被抑制。结论本实验中贝伐珠单抗在给药2天后再联合培美曲塞可达到最大的抗肿瘤活性,贝伐珠单抗诱导的血管正常化时间窗可能是1-3天左右。(本文来源于《北京协和医学院》期刊2018-04-01）
林莹[8]（2018）在《爱康方含药血清对人肺腺癌A549、小鼠Lewis细胞PI3K/AKT信号通路影响的研究》一文中研究指出目的课题组前期实验已证实爱康方含药血清对A549细胞和Lewis细胞生长有抑制和明显凋亡作用,本实验继前期研究基础上以20%最佳含药血清对其细胞培养,观察爱康方含药血清作用人肺腺癌A549细胞、小鼠Lewis细胞中磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、蛋白激酶-B(Akt)及磷酸化蛋白激酶-B(p-Akt)蛋白表达和PI3K、AKT mRNA水平的影响,进而探讨该方是否通过PI3K/AKT信号通路发挥凋亡作用。方法重复课题组前期制备含药血清实验方法,将SD大鼠80只进行分组:生理盐水对照组(NS组)、爱康方低剂量组、中剂量组、高剂量组、环磷酰胺疗组(CTX组)、爱康方低、中、高剂量分别联合环磷酰胺化疗组(低剂量+CTX、中剂量+CTX、高剂量+CTX),每组10只,制备含药血清。根据所加的含药血清,将细胞培养对应分组:空白对照组(只加DEME培养基)、对照组和实验组,对照组为NS组,实验组为低剂量组、中剂量组、高剂量组、CTX组、低剂量+CTX组、中剂量+CTX组、高剂量+CTX组。爱康方不同剂量、环磷酰胺及不同剂量联合环磷酰胺含药血清分别培养A549、Lewis细胞,采用免疫细胞化学法、Westorn Blot检测PI3K、Akt、p-Akt蛋白表达及RT-qPCR法检测PI3K、Akt mRNA水平。结果1.爱康方对人肺腺癌A549细胞PI3K、AKT表达影响免疫细胞化学法和Westorn Blot结合检测PI3K、AKT蛋白表达水平:各时间段实验组细胞PI3K、AKT蛋白表达均低于各空白对照组、NS组(P<0.05),实验各组蛋白表达大体上呈降低趋势(P<0.05),48小时蛋白表达明显低于24小时蛋白表达,Westorn Blot检测p-AKT 24时结果显示:相对于空白对照组、NS组来说,爱康方高剂量、CTX组及低、中、高联合CTX组蛋白明显低表达(P<0.05);RT-qPCR检测PI3K、Akt mRNA水平:各时间段实验组mRNA水平均低与空白对照组;48时结果与24时结果比较整体趋势明显降低,实验组间比较大体上呈降低趋势。2.爱康方对小鼠Lewis细胞PI3K、AKT表达影响免疫细胞化学法和Westorn Blot结合检测PI3K、AKT蛋白表达水平:各时间段实验组细胞PI3K、AKT蛋白表达均低于空白对照组、NS组(P<0.05),实验组蛋白表达逐次降低(P<0.05),48小时蛋白表达明显低于24小时表达,Westorn Blot检测p-AKT 24时结果显示:爱康方低、中、高不同剂量及不同剂量蛋白呈下调趋势(P<0.05),中剂量+CTX组蛋白低表达最明显;RT-qPCR检测PI3K、Akt mRNA水平:各时间段实验组m RNA水平均低与空白对照组;实验组mRNA水平大体上呈降低趋势,mRNA水平不随时间点延长而降低。结论1.爱康方及爱康方协同环磷酰胺可降低人肺腺癌A549细胞、小鼠Lewis细胞PI3K、AKT、p-AKT蛋白的表达,作用效果呈现出一定的时效性和剂量依赖性;2.爱康方及爱康方协同环磷酰胺可降低人肺腺癌A549细胞、小鼠Lewis细胞PI3K、AKT mRNA水平;3.爱康方可能通过抑制PI3K/AKT信号转导途径促进细胞的凋亡,这可能是抗非小细胞肺癌的作用途径之一。(本文来源于《宁夏医科大学》期刊2018-04-01）
张长洪,李琛,王布,肖丽,马素静[9]（2018）在《川芎嗪联合顺铂对Lewis小鼠肺腺癌移植瘤与血管生成的影响》一文中研究指出目的研究川芎嗪联合顺铂对Lewis肺腺癌小鼠移植瘤生长及抑制血管生成的作用机制。方法培养Lewis小鼠肺腺癌细胞,建立移植瘤模型。按照体重将成功制备的荷瘤小鼠模型随机分成4组,每组15只:模型组、顺铂组、川芎嗪组、联合组。模型组:0.9% NaCl,顺铂组:2 mg·kg~(-1),川芎嗪组:100mg·kg~(-1),联合组:两种药物相加。均每次0.2 mL,干预2周。称量瘤重,计算抑瘤率;用免疫组化方法检测每组血管内皮生长因子(VEGF)、血管抑制蛋白(VASH-1)的表达。结果给药后,联合组、顺铂组、川芎嗪组的抑瘤率分别为54.81%,32.36%,18.36%,与模型组(抑瘤率为0)比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。联合组、顺铂组、川芎嗪、模型组的VEGF表达分别为20.37±2.02,28.07±4.29,26.43±4.69,62.14±6.78;这4组的VASH-1表达分别为9.04±1.01,10.10±1.61,11.53±1.96,12.94±1.10,3个给药组与模型组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05)。Pearson相关性分析:VEGF与VASH-1成正相关(r=0.664,P<0.05)。结论川芎嗪联合顺铂协同抑制Lewis小鼠移植瘤生长,其作用机制可能为川芎嗪与顺铂可以直接作用癌细胞,同时降低VEGF与VASH-1表达,发挥抗血管生成作用。(本文来源于《中国临床药理学杂志》期刊2018年06期）
王章飞[10]（2018）在《Tumstatin转基因巨核细胞联合吉西他滨抑制小鼠肺腺癌移植瘤生长的实验研究》一文中研究指出背景:肺癌是恶性肿瘤的常见类型,临床治疗上常用到化疗,而化疗引起的血小板减少至今没有好的解决方法,临床常用的血小板输注经研究发现会有促进肿瘤生长和转移的风险。血小板是天然的细胞因子和生物分子的载体,血小板中含有多种血管生长调节因子,整体作用是促进新生血管生成。血小板靶点清晰,即损伤部位或增殖细胞密度较高的部位如血管损伤部位和肿瘤发生地,血小板可在肿瘤微环境中活化并释放活性分子发挥作用。利用新生血管生成抑制剂tumstatin基因修饰巨核细胞,即血小板前体细胞,最终产生能抑制新生血管生成的血小板,这种“设计的血小板”能在肿瘤微环境释放tumstatin,在肿瘤化疗过程中输入这种血小板有可能解决化疗引起的血小板下降问题又能与化疗药物共同发挥抗肿瘤作用。本研究在携带tumstatin基因的慢病毒转导CD34+细胞经体外扩增培养后生成有抗血管生成作用的巨核细胞/血小板并经尾静脉输注入NOD/SCID鼠体内产生有抑制血管形成且保持血小板正常聚集功能的研究基础上,建立NOD/SCID小鼠A549细胞肺腺癌移植瘤模型,研究tumstatin转基因巨核细胞联合化疗药物吉西他滨对A549细胞肺腺癌移植瘤治疗效果。目的:探讨肿瘤抑素(tumstatin)转基因巨核细胞联合化疗药物吉西他滨治疗A549细胞肺腺癌移植瘤可行性及其有效性。,为转基因血小板联合化疗治疗实体肿瘤提供依据。观察肿瘤抑素(tumstatin)基因修饰的巨核细胞联合吉西他滨对肺腺癌小鼠皮下移植瘤的组织生长、血管生成、组织坏死和凋亡的作用以及荷瘤小鼠生存率,探讨初步的抗瘤机制。方法:(1)制备tumstatin基因修饰的巨核细胞;(2)通过在NOD/SCID鼠背部接种肺腺癌A549细胞,建立小鼠肺腺癌移植瘤模型;随机分为4组:生理盐水对照组,吉西他滨化疗组、吉西他滨联合巨核细胞组、吉西他滨联合tumstatin转基因巨核细胞组,其中后面叁组为治疗组;依照分组对各组小鼠分别进行给药,共给药24 d,每3 d测1次肿瘤体积。在治疗第15天眼眶取血,用血细胞分析仪检测血细胞值;第24天剥离皮下瘤组织,称重并测量体积,经免疫组织化学法和HE染色法分别计数皮下瘤组织微血管密度(MVD),组织坏死情况,TUNEL法测皮下瘤组织凋亡情况,治疗期间记录小鼠生存情况,绘制小鼠生存曲线。结果:(1)治疗组肿瘤体积生长曲线显着慢于生理盐水组,其中转基因巨核细胞联合化疗组生长最慢;(2)治疗组中转基因巨核细胞联合化疗组组的生存率较单纯化疗组得到明显改善且肿瘤生长抑制作用高于其它叁组;(3)与其它叁组相比,转基因巨核细胞联合化疗组小鼠皮下瘤MVD受到显着抑制并引起肿瘤组织重度坏死且肿瘤组织凋亡指数最高。结论:tumstatin转基因巨核细胞联合吉西他滨显着抑制小鼠肺腺癌A549细胞移植瘤的生长,提升了荷瘤小鼠的生存率,这种联合治疗实体瘤方法有一定可行性。其初步的机理是通过抑制移植瘤新生血管生长和促进肿瘤细胞坏死和凋亡。(本文来源于《安徽医科大学》期刊2018-03-01）
肺腺癌小鼠论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的在课题组前期实验的基础上,观察爱康方对人肺腺癌A549、小鼠Lewis细胞内Bad、Caspase-9、Survivin、m TOR蛋白及基因表达的影响,更深层次探讨爱康方促进肺癌细胞凋亡及与环磷酰胺起到协同作用可能的分子机制。方法选用纯系SPF级雄性大鼠40只,体重在220±20克范围之间,用随机分组的方法,分为空白对照组(生理盐水灌胃)、环磷酰胺组(环磷酰胺腹腔注射)、爱康方组(爱康方灌胃)及爱康方联合环磷酰胺组(爱康方灌胃联合环磷酰胺腹腔注射),每组各10只。大鼠连续灌胃5天之后进行心脏取血,血清分离并灭活,置于-80℃冰箱保存。购买A549、Lewis细胞进行培养,根据所加的不同含药血清对应分组:空白对照组、环磷酰胺组、爱康方组及爱康方联合环磷酰胺组,分别培养48h和72h,收集细胞用于检测。分别采用免疫荧光法和蛋白免疫印迹法(Western Blot)法检测Bad、Caspase-9、Survivin、m TOR蛋白表达水平;采用实时荧光定量PCR技术(Real Time Quantitative PCR,简称RT-PCR)检测样本中Bad、Caspase-9、Survivin、m TOR目的基因m RNA转录水平的变化情况,以明确爱康方促进肺癌细胞凋亡及与环磷酰胺起到协同作用可能的分子机制。结果1.爱康方及爱康方协同环磷酰胺对A549细胞中Bad、Caspase-9表达的影响:免疫荧光法和Western blot法检测发现Bad、Caspase-9蛋白的表达水平随着药效的增加而上升;其中空白对照组表达水平最低,爱康方联合环磷酰胺组表达水平最高;与空白对照组相比,爱康方组、环磷酰胺组、爱康方联合环磷酰胺组蛋白表达水平均显着上升,差异具有统计学意义(P<0.01);与环磷酰胺组相比,爱康方联合环磷酰胺组蛋白表达水平升高更明显,差异具有统计学意义(P<0.05)。RT-PCR法检测结果显示,Bad及Caspase-9的m RNA表达水平均随着药效的增加而上升;表达趋势同Western bl-oting法结果。2.爱康方及爱康方协同环磷酰胺对A549细胞中Survivin、m TOR表达的影响:免疫荧光法和Western bloting法检测发现Survivin、m TOR蛋白的表达水平随着药效的增加而降低;其中空白对照组表达水平最高,爱康方联合环磷酰胺组表达水平最低;与空白对照组相比,爱康方组、环磷酰胺组、爱康方联合环磷酰胺组蛋白表达水平均显着下降,差异具有统计学意义(P<0.01);与环磷酰胺组相比,爱康方联合环磷酰胺组蛋白表达水平降低更明显,差异具有统计学意义(P<0.05)。RT-PCR法检测结果显示,Surv ivin及m TOR的m RNA表达水平均随着药效的增加而下降;表达趋势同Western blot法结果。3.爱康方对Lewis细胞中Bad、Caspase-9、Survivin、m TOR蛋白及基因表达的影响结果同A549细胞。结论1.爱康方以及爱康方协同环磷酰胺能够使人肺腺癌A549、小鼠Lewis细胞内Bad、Caspase-9蛋白及基因表达水平上调,Survivin、m TOR蛋白及基因表达水平下调。2.爱康方能够促进人肺腺癌A549、小鼠Lewis细胞凋亡,并与环磷酰胺起到协同作用,其机制可能是:(1)与调节凋亡相关蛋白Bad、Caspase-9、Survivin的表达相关;(2)通过下调m TOR蛋白的表达,抑制PI3K/AKT-m TOR信号通路在肺癌细胞中的异常活化,从而促进细胞凋亡,同时减轻环磷酰胺的耐药水平,且凋亡程度与时间相关。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
肺腺癌小鼠论文参考文献
[1].童冰杰,王淑美,罗杨,赵宾.除痰解毒方联合吉非替尼对肺腺癌H1975荷瘤小鼠Bax、CyclinD1、Bcl-XL的调节作用[C].第十七届全国中西医结合肿瘤学术大会摘要集.2019
[2].李巧玲.爱康方对人肺腺癌A549、小鼠Lewis细胞内Bad、Caspase-9、Survivin、mTOR蛋白及基因表达影响的研究[D].宁夏医科大学.2019
[3].房昕.NFE2L1和NFE2L2在乌拉坦所致小鼠肺腺癌发生中的作用[D].中国医科大学.2019
[4].库丽加那提·帕提汗,艾力扎提·艾则孜,侯梅华.艾迪注射液对肺腺癌小鼠多西紫杉醇化疗敏感性的影响探讨[J].临床和实验医学杂志.2018
[5].杨川.多功能纳米金在肺腺癌A549荷瘤小鼠模型中的放射增敏作用及图像引导研究[D].广西医科大学.2018
[6].王章飞,罗以勤,李娟,娄蓉.tumstatin基因修饰巨核细胞联合化疗抑制肺腺癌小鼠皮下移植瘤生长[J].安徽医科大学学报.2018
[7].王亚磊.通过小鼠肺腺癌移植瘤模型研究贝伐珠单抗血管正常化寸间窗及联合培美曲塞治疗疗效[D].北京协和医学院.2018
[8].林莹.爱康方含药血清对人肺腺癌A549、小鼠Lewis细胞PI3K/AKT信号通路影响的研究[D].宁夏医科大学.2018
[9].张长洪,李琛,王布,肖丽,马素静.川芎嗪联合顺铂对Lewis小鼠肺腺癌移植瘤与血管生成的影响[J].中国临床药理学杂志.2018
[10].王章飞.Tumstatin转基因巨核细胞联合吉西他滨抑制小鼠肺腺癌移植瘤生长的实验研究[D].安徽医科大学.2018