导读:本文包含了促胰岛素分泌肽融合蛋白论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:促胰岛素分泌肽融合蛋白,转基因细胞,报告基因法,CRE
促胰岛素分泌肽融合蛋白论文文献综述
于雷,范文红,王兰,周长明,王军志[1]（2016）在《报告基因法检测促胰岛素分泌肽融合蛋白生物学活性》一文中研究指出目的:建立报告基因法检测促胰岛素分泌肽融合蛋白(Exendin-4-HSA,Byetalog)生物学活性。方法:将胰高血糖素样肽-1受体(glucagon-likepeptide 1 receptor,GLP-1R)表达载体和c AMP反应元件(c AMP response element,CRE)报告基因载体共转染CHO-K1细胞,经加压筛选和单克隆分离培养获得稳定的单克隆细胞株;使用药物反应强的单克隆细胞株建立报告基因方法;对新建方法进行条件优化,并用优化的方法对促胰岛素分泌肽融合蛋白原液和成品进行生物学活性测定。结果:经加压筛选和单克隆分离培养后获得对Byetalog强反应性的细胞株CHOglpar/crec14;新建方法剂量反应曲线符合四参数方程,R~2大于0.99;对促胰岛素分泌肽融合蛋白的原液和成品分别测定3次,RSD值均低于5.0%,回收率在70%~130%之间。结论:报告基因法操作简便,重复性和准确性都较高,有望作为替代方法应用于促胰岛素分泌肽融合蛋白的生物学活性测定。(本文来源于《药物分析杂志》期刊2016年03期）
邹建伟[2]（2009）在《促胰岛素分泌肽融合蛋白的初步药效及同位素示踪法测定其药代动力学的实验研究》一文中研究指出第一部分促胰岛素分泌肽融合蛋白对C57BL/6J小鼠的药效学研究目的研究促胰岛素分泌肽融合蛋白(以下简称Betalog)对C57BL/6J小鼠的糖耐量、胰岛素水平的影响。材料与方法①C57BL/6J小鼠32只,随机均分4组:人血清白蛋白(以下简称HSA)组(150μg?kg-1)、Betalog低剂量组(50μg?kg-1)、Betalog中剂量组(150μg?kg-1)、Betalog高剂量组(450μg?kg-1),对照组与实验组于腹腔注药1h后腹腔注射葡萄糖1.5mg?g-1 (体重),各组分别于注药前和注射葡萄糖后0,10,20,30,60,90, 120min从尾静脉采血测血糖水平。②另40只C57BL/6J小鼠,随机均分4组:HSA组(1mg?kg-1 )、给Betalog(1mg?kg-1)后1h组、给Betalog后24h组、给Betalog后48h组,以腹腔注射方式进行持久降糖的糖耐量试验。③另12只C57BL/6J小鼠,分成2组:HSA组(1mg?kg-1),Betalog组(1mg?kg-1),注药1h后腹腔注射葡萄糖1.5mg?g-1 (体重),各组分别于注射葡萄糖后20min和60min从尾静脉采血100μL做胰岛素测定。结果在急性降糖试验中,HSA组与Betalog中剂量组在注糖后各时间点间血糖值均有差异, Betalog组血糖值低于HSA组。Betalog叁种剂量除注糖后20 min及30 min组间有差异外,余时间点均无差异。在持久降糖试验中,注糖后10 min及其以后各时间点,各处理组间比较有差异。经过与HSA组间的两两比较显示:注糖后20 min及30 min点,Betalog的各组与HSA对照组比皆有差异;在注糖后60 min时,注药后1h组与HSA组比有统计学差异,余两组与对照组比无差异;在注糖后90 min时,注药后24h组与HSA对照组比无统计学差异,余两组与对照组比皆有差异。HSA组和Betalog中剂量组在20min、60min胰岛素水平比较有显着性差异。结论Betalog能有效控制C57BL/6J小鼠糖负荷后的血糖水平,不同剂量对血糖水平有所影响。给Betalog后48h仍能对糖负荷后的血糖水平有所控制。Betalog可明显提高正常小鼠的胰岛素水平。第二部分促胰岛素分泌肽融合蛋白对GK大鼠的药效学研究目的研究Betalog对GK大鼠的糖耐量、胰岛素水平的影响。材料与方法12只雄性GK大鼠随机均分2组,分别腹腔注射人血清白蛋白(HSA)(1mg?kg-1)和Betalog(1mg?kg-1),在注药前及注药后0.5h,2h,4h,8h,12h,24h,48h从尾静脉采血测血糖水平,同时分别于2h,8h,48h尾静脉采血100μL行血浆胰岛素测定。结果模型鼠HSA组的血糖水平在各时间点均较稳定,Betalog组在注药后血糖呈下降趋势,在注药后0.5h,2h,4h与HSA组无差异,而在8h、12h、24h、48h均有显着性差异(P<0.01)。两组胰岛素水平在2h无统计学差异(P>0.05),8h及48h均有统计学差异(P<0.05), Betalog组胰岛素水平高于HSA组。结论Betalog给药48h内对糖尿病模型鼠的血糖控制及促胰岛素分泌有效。第叁部分同位素示踪法测定促胰岛素分泌肽融合蛋白药代动力学实验目的:研究Betalog在大鼠体内的动态变化规律,阐明该药吸收、分布、代谢和排泄的过程与特点,提供药代动力学参数,为药理、毒理研究和临床合理用药提供依据。方法:①采用同位素标记示踪法结合叁氯醋酸(TCA)沉淀法技术研究125I-Betalog的药代动力学。②用氯胺-T(Ch-T)法对Betalog进行125I标记,标记物的放射化学纯度测定采用叁氯醋酸(TCA)沉淀法。该法用于分离Betalog和它的代谢物。③同位素示踪法测量叁种不同剂量的Betalog在大鼠体内的血药浓度随时间的变化。大鼠皮下注射剂量分别为150μg?kg-1,300μg?kg-1和600μg?kg-1。用DAS2.0软件拟合大鼠的药物代谢数学模型,并计算其药代动力学参数。④125I-Betalog在大鼠体内的分布采用放射性示踪法。⑤收集大鼠不同时间段排出的尿、粪和胆汁,测量它们的放射性,计算不同时间内累积排出百分数。结果:①125I-Betalog标记物的放射化学纯度大于90%,Ch-T法标记125I对Betalog的物理化学性质和生物活性无影响。②测量方法准确度在96%~112%范围,各批试验的TCA沉淀前后的标准曲线呈线性(r>0.9979),标准曲线的浓度覆盖了样品测量的范围,125I-Betalog的TCA沉淀率基本都大于90%,而TCA沉淀方法测定125I-非特异性沉淀率为5.10%±0.58%。③叁种不同剂量的125I-Betalog单次皮下注射后在大鼠体内的动力学过程都符合一室模型,叁个剂量组的半衰期T1/2为15.2h～16.7h,大鼠皮下高、中、低叁组给药剂量与AUC和Cmax呈线形关系,相关系数都达0.98。皮下给药2h内,血液中以代谢物为主,24h后血液中以原形药为主。④代谢初期,125I-Betalog在大鼠中主要分布的脏器是肾、甲状腺、肺等,给药72 h后,除甲状腺和肾中含量稍高外,其余脏器均很少。此外,药物在大鼠卵巢有较高水平浓集,应关注其生殖毒性。大鼠脑中放射性水平较低,说明Betalog不能透过大鼠的血脑屏障。⑤大鼠体内药物主要通过尿液排出,144h排出95.0%,而排出物中以体内生成的游离放射性125I为主,也就是以代谢物为主。粪中药物的排出很少,占1.5%左右,其中最高含有37.6%左右的原形药物。胆汁中药物的排出11.67%,而粪中排出只占1.5%。结论:125I-Betalog在大鼠体内药代动力学符合一室模型,AUC与注射剂量成线性相关,肾、甲状腺、肺是它的主要分布器官,而肾脏是它主要的代谢器官。Betalog药代动力学的研究对其进一步的开发具有指导价值。(本文来源于《苏州大学》期刊2009-11-01）
促胰岛素分泌肽融合蛋白论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
第一部分促胰岛素分泌肽融合蛋白对C57BL/6J小鼠的药效学研究目的研究促胰岛素分泌肽融合蛋白(以下简称Betalog)对C57BL/6J小鼠的糖耐量、胰岛素水平的影响。材料与方法①C57BL/6J小鼠32只,随机均分4组:人血清白蛋白(以下简称HSA)组(150μg?kg-1)、Betalog低剂量组(50μg?kg-1)、Betalog中剂量组(150μg?kg-1)、Betalog高剂量组(450μg?kg-1),对照组与实验组于腹腔注药1h后腹腔注射葡萄糖1.5mg?g-1 (体重),各组分别于注药前和注射葡萄糖后0,10,20,30,60,90, 120min从尾静脉采血测血糖水平。②另40只C57BL/6J小鼠,随机均分4组:HSA组(1mg?kg-1 )、给Betalog(1mg?kg-1)后1h组、给Betalog后24h组、给Betalog后48h组,以腹腔注射方式进行持久降糖的糖耐量试验。③另12只C57BL/6J小鼠,分成2组:HSA组(1mg?kg-1),Betalog组(1mg?kg-1),注药1h后腹腔注射葡萄糖1.5mg?g-1 (体重),各组分别于注射葡萄糖后20min和60min从尾静脉采血100μL做胰岛素测定。结果在急性降糖试验中,HSA组与Betalog中剂量组在注糖后各时间点间血糖值均有差异, Betalog组血糖值低于HSA组。Betalog叁种剂量除注糖后20 min及30 min组间有差异外,余时间点均无差异。在持久降糖试验中,注糖后10 min及其以后各时间点,各处理组间比较有差异。经过与HSA组间的两两比较显示:注糖后20 min及30 min点,Betalog的各组与HSA对照组比皆有差异;在注糖后60 min时,注药后1h组与HSA组比有统计学差异,余两组与对照组比无差异;在注糖后90 min时,注药后24h组与HSA对照组比无统计学差异,余两组与对照组比皆有差异。HSA组和Betalog中剂量组在20min、60min胰岛素水平比较有显着性差异。结论Betalog能有效控制C57BL/6J小鼠糖负荷后的血糖水平,不同剂量对血糖水平有所影响。给Betalog后48h仍能对糖负荷后的血糖水平有所控制。Betalog可明显提高正常小鼠的胰岛素水平。第二部分促胰岛素分泌肽融合蛋白对GK大鼠的药效学研究目的研究Betalog对GK大鼠的糖耐量、胰岛素水平的影响。材料与方法12只雄性GK大鼠随机均分2组,分别腹腔注射人血清白蛋白(HSA)(1mg?kg-1)和Betalog(1mg?kg-1),在注药前及注药后0.5h,2h,4h,8h,12h,24h,48h从尾静脉采血测血糖水平,同时分别于2h,8h,48h尾静脉采血100μL行血浆胰岛素测定。结果模型鼠HSA组的血糖水平在各时间点均较稳定,Betalog组在注药后血糖呈下降趋势,在注药后0.5h,2h,4h与HSA组无差异,而在8h、12h、24h、48h均有显着性差异(P<0.01)。两组胰岛素水平在2h无统计学差异(P>0.05),8h及48h均有统计学差异(P<0.05), Betalog组胰岛素水平高于HSA组。结论Betalog给药48h内对糖尿病模型鼠的血糖控制及促胰岛素分泌有效。第叁部分同位素示踪法测定促胰岛素分泌肽融合蛋白药代动力学实验目的:研究Betalog在大鼠体内的动态变化规律,阐明该药吸收、分布、代谢和排泄的过程与特点,提供药代动力学参数,为药理、毒理研究和临床合理用药提供依据。方法:①采用同位素标记示踪法结合叁氯醋酸(TCA)沉淀法技术研究125I-Betalog的药代动力学。②用氯胺-T(Ch-T)法对Betalog进行125I标记,标记物的放射化学纯度测定采用叁氯醋酸(TCA)沉淀法。该法用于分离Betalog和它的代谢物。③同位素示踪法测量叁种不同剂量的Betalog在大鼠体内的血药浓度随时间的变化。大鼠皮下注射剂量分别为150μg?kg-1,300μg?kg-1和600μg?kg-1。用DAS2.0软件拟合大鼠的药物代谢数学模型,并计算其药代动力学参数。④125I-Betalog在大鼠体内的分布采用放射性示踪法。⑤收集大鼠不同时间段排出的尿、粪和胆汁,测量它们的放射性,计算不同时间内累积排出百分数。结果:①125I-Betalog标记物的放射化学纯度大于90%,Ch-T法标记125I对Betalog的物理化学性质和生物活性无影响。②测量方法准确度在96%~112%范围,各批试验的TCA沉淀前后的标准曲线呈线性(r>0.9979),标准曲线的浓度覆盖了样品测量的范围,125I-Betalog的TCA沉淀率基本都大于90%,而TCA沉淀方法测定125I-非特异性沉淀率为5.10%±0.58%。③叁种不同剂量的125I-Betalog单次皮下注射后在大鼠体内的动力学过程都符合一室模型,叁个剂量组的半衰期T1/2为15.2h～16.7h,大鼠皮下高、中、低叁组给药剂量与AUC和Cmax呈线形关系,相关系数都达0.98。皮下给药2h内,血液中以代谢物为主,24h后血液中以原形药为主。④代谢初期,125I-Betalog在大鼠中主要分布的脏器是肾、甲状腺、肺等,给药72 h后,除甲状腺和肾中含量稍高外,其余脏器均很少。此外,药物在大鼠卵巢有较高水平浓集,应关注其生殖毒性。大鼠脑中放射性水平较低,说明Betalog不能透过大鼠的血脑屏障。⑤大鼠体内药物主要通过尿液排出,144h排出95.0%,而排出物中以体内生成的游离放射性125I为主,也就是以代谢物为主。粪中药物的排出很少,占1.5%左右,其中最高含有37.6%左右的原形药物。胆汁中药物的排出11.67%,而粪中排出只占1.5%。结论:125I-Betalog在大鼠体内药代动力学符合一室模型,AUC与注射剂量成线性相关,肾、甲状腺、肺是它的主要分布器官,而肾脏是它主要的代谢器官。Betalog药代动力学的研究对其进一步的开发具有指导价值。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
促胰岛素分泌肽融合蛋白论文参考文献
[1].于雷,范文红,王兰,周长明,王军志.报告基因法检测促胰岛素分泌肽融合蛋白生物学活性[J].药物分析杂志.2016
[2].邹建伟.促胰岛素分泌肽融合蛋白的初步药效及同位素示踪法测定其药代动力学的实验研究[D].苏州大学.2009
标签：促胰岛素分泌肽融合蛋白; 转基因细胞; 报告基因法; Cre;