导读:本文包含了人早孕绒毛滋养细胞株论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:双酚A,雌激素,绒毛滋养细胞,胰岛素样生长因子I
人早孕绒毛滋养细胞株论文文献综述
张毅,陈松,陈宏健,卢惠,周繇[1]（2019）在《双酚A对人早孕绒毛滋养细胞IGF-I及ADAM12表达的影响》一文中研究指出目的探讨对人早孕绒毛滋养细胞采用不同浓度双酚A(BPA)干扰,对其胰岛素样生长因子I(IGF-I)及解整合素-金属蛋白酶12(ADAM12)表达的影响。方法取海南医学院妇产科门诊人流室一名自然妊娠早孕50 d孕妇的新鲜绒毛组织制备绒毛滋养细胞(孕妇知情同意,并经医院伦理委员会批准),配制4组含不同浓度BPA的培养液(A组:1×10~(-4)g/L,B组:1×10~(-5)g/L,C组:1×10~(-6)g/L,D组:1×10~(-7)g/L),并设培养基(E组:BPA 0 g/L)为对照组,进行滋养细胞培养,72 h后收取滋养细胞行实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time PCR)实验,检测不同浓度BPA条件下IGF-I、ADAM12 mRNA表达量的变化。结果各实验组中ADAM12、IGF-I mRNA的表达受BPA的影响,均有不同程度升高。当BPA浓度为1×10~(-5)g/L(B组)时,IGF-I mRNA的表达明显升高,是C组的3.18倍(P<0.01),是对照组E组的5.48倍(P<0.01);ADAM12 mRNA的表达量明显上升,是C组的4.19倍(P<0.01),是对照组E组的6.27倍(P<0.01)。结论 BPA对绒毛滋养细胞的IGF-I和ADAM12的mRNA表达有刺激升高的作用。(本文来源于《中国临床研究》期刊2019年07期）
曾倩,薛华容,邓礼林,夏宛廷,周航[2]（2018）在《基于死亡受体途径探讨脾肾双补方对离体人早孕绒毛滋养细胞HTR-8凋亡蛋白TNF-α、Caspase-3的影响》一文中研究指出目的:探索脾肾双补方对人早孕绒毛滋养细胞中凋亡相关蛋白TNF-α、Caspase-3表达的影响。方法:采用动物含药血清,体外分组培养HTR-8细胞48 h,采用免疫组织化学法检测各组细胞凋亡蛋白TNF-α、Caspase-3表达的情况。结果:与空白对照组比,脾肾双补方高、中剂量组HTR-8细胞凋亡蛋白TNF-α、Caspase-3的表达均降低(P <0. 05),地屈孕酮组HTR-8细胞TNF-α、Caspase-3的表达显着低于空白对照组(P <0. 01);与地屈孕酮组比,脾肾双补方高、中剂量组TNF-α、Caspase-3的表达差异无统计学意义(P>0. 05);脾肾双补方高、中剂量组间TNF-α的表达差异无统计学意义(P> 0. 05)。结论:脾肾双补方含药血清可以促进人早孕绒毛滋养细胞数目增加,其机制可能是:减少人早孕绒毛滋养细胞的凋亡,保护细胞存活,继而有利于早期妊娠的维持,其作用途径可能是:脾肾双补方含药血清通过降低细胞凋亡诱导蛋白TNF-α的表达,抑制死亡受体途径,减少凋亡执行蛋白Caspase-3的表达,从而抑制人早孕绒毛滋养细胞的凋亡,保护细胞存活,维持妊娠。(本文来源于《中华中医药学刊》期刊2018年10期）
段培培,薛华容,王毅,周航,夏宛廷[3]（2018）在《安胎协定方对离体人早孕绒毛滋养细胞增殖活力及ERK1/2信号通路的影响》一文中研究指出目的:观察不同浓度的安胎协定方含药血清对离体人早孕绒毛滋养细胞HTR-8细胞增殖活力及ERK1/2信号通路的影响,探究其维持妊娠机制。方法:雌性SD大鼠灌胃制备空白血清和各组含药血清。将HTR-8细胞分为5组:空白对照组,地屈孕酮组,中药高、中、低剂量组(5%、10%、20%含药血清)。MTT法检测24、48、72h的吸光度,表示细胞增殖活力,免疫组化法检测48h细胞EGF、EGRR及ERK1/2表达含量。结果:与空白对照组比较,除中药低剂量组外,其余各组3个时间段的吸光度及48h细胞EGF、EGFR、ERK1/2含量均显着升高(P<0.05);与地屈孕酮组比较,中药低剂量组3个时间段的吸光度及48h细胞EGF、EGFR、ERK1/2含量显着降低(P<0.05);与中药低剂量组比较,中药中、高剂量组3个时间段的吸光度及48h细胞EGF、EGFR、ERK1/2含量显着升高(P<0.05)。结论:安胎协定方可改善绒毛滋养细胞增殖活力,避免增殖过度以维持妊娠,可能是通过适度上调细胞内EGF及EGFR的含量表达,促进ERK1/2磷酸化而实现的。(本文来源于《中华中医药杂志》期刊2018年06期）
邓礼林[4]（2018）在《基于STAT3信号通路研究脾肾双补方对离体人早孕绒毛滋养细胞增殖作用的机制》一文中研究指出目的观察脾肾双补方含药血清对离体人早孕绒毛滋养细胞(HTR-8)总数、分裂数、凋亡数及STAT3信号转导通路相关蛋白IL-6、STAT3、VEGF、Survivin表达水平的影响,初步研究脾肾双补方促进人早孕绒毛滋养细胞增殖,抑制细胞凋亡,调控STAT3信号通路以防治先兆流产的作用机制。方法将80只健康雌性成年SD大鼠随机分为空白对照组、地屈孕酮组、滋肾育胎丸高、中与低剂量组、脾肾双补方中药高、中及低剂量组8组,连续7天分别予以相应药物混悬液灌胃,于第7天末次灌胃给药12h后行股动脉采血、室温下静置、离心、分离血清、无菌过滤、水浴灭活,制备含药血清于4℃冰箱保存以备用。把HTR-8细胞移入无菌细胞培养瓶进行培养传代。随机抽取8瓶细胞为8组样本细胞,各组分别予以相应组15%大鼠含药血清1640完全培养基培养48h后,采集标本制作细胞块,采用HE染色法观察细胞的总数目、分裂数目及凋亡数目,采用免疫组织化学法对细胞中IL-6、STAT3、VEGF、Survivin蛋白的表达情况进行检测。本实验数据运用IBM SPSS 21.0统计软件处理,结果以均数±标准差((x|-)±s)表示。结果与空白对照组比,脾肾双补方中药高、中剂量与滋肾育胎丸高、中剂量及地屈孕酮片均能显着增加绒毛滋养细胞总数与分裂数,降低凋亡数,差异均有统计学意义(P<0.05);脾肾双补方中药高剂量组绒毛滋养细胞总数、分裂数目及凋亡数目均较滋肾育胎丸高、中剂量组以及地屈孕酮组叁组的差异均无统计学意义(P>0.05),脾肾双补方中药高、中剂量组细胞无增殖过度与凋亡减少过度的趋势。与空白对照组比,脾肾双补方中药高、中剂量与滋肾育胎丸高剂量、中剂量及地屈孕酮片均能增高绒毛滋养细胞中IL-6、STAT3、VEGF及Survivin的表达水平(P<0.05);与地屈孕酮组比,脾肾双补方中药高、中剂量对IL-6、STAT3、VEGF及Survivin表达的影响,差异均无统计学意义(P>0.05)。各组绒毛滋养细胞总数与IL-6、STAT3、VEGF、Survivin蛋白的表达水平呈显着正相关,有统计学意义(P<0.001)。结论脾肾双补方能促进人早孕绒毛滋养细胞的有效增殖,其机制可能是:通过调控STAT3信号转导通路,上调细胞内IL-6的表达,引起STAT3表达增加,从而直接介导Survivin表达增多,同时可介导VEGF的表达增加,间接提高Survivin的表达水平,促进细胞分裂增殖,抑制细胞凋亡,保证细胞的有效增殖,调节人绒毛滋养细胞增殖与凋亡的动态平衡,进而促进新血管的生成、胎盘的形成和胚胎的生长发育,达到保胎的作用,维持妊娠。(本文来源于《成都中医药大学》期刊2018-05-01）
薛华容[5]（2017）在《基于对凋亡通路的影响探讨脾肾双补方对离体人早孕绒毛滋养细胞HTR-8凋亡的作用及机制研究》一文中研究指出【目的】基于前期对脾肾双补方治疗早期先兆流产的临床疗效观察,为进一步探索其维持妊娠的作用机理,本实验研究通过脾肾双补方大鼠含药血清作用于体外人早孕绒毛滋养细胞HTR-8,观察大鼠含药血清对HTR-8细胞的总数,凋亡数目以及调控滋养细胞凋亡相关蛋白TNF-a、Bcl-2、Bax、Caspase-3表达的影响,探索脾肾双补方在增加人早孕绒毛滋养细胞数目,减少凋亡,保护细胞存活,从而防治先兆流产,维持妊娠的细胞分子机制,为中医药安胎提供实验支撑,丰富中医生殖理论的科学内涵。【方法】将80只SPF级健康成年雌性SD大鼠随机分成8组:空白对照组,地屈孕酮组,滋肾育胎丸高、中、低剂量组,脾肾双补方高、中、低剂量组,每组各10只。空白对照组给予生理盐水灌胃,地屈孕酮组灌胃服地屈孕酮片蒸馏水调制剂,滋肾育胎丸高、中、低剂量组分别给予滋肾育胎丸高、中、低剂量生理盐水调制剂灌胃,脾肾双补方高、中、低剂量组分别给予脾肾双补方高、中、低剂量水煎剂灌胃,早晚各1次,连续7天。于第7天末次给药1h后行股动脉采血,采血前12h禁食不禁水。血液标本于室温下静置4h后进行3000r/min离心15min,分离得出血清,0.22μm无菌滤膜过滤,56℃水浴灭活30min,置4℃冰箱保存以备体外培养滋养细胞使用。将HTR-8细胞接种于无菌细胞培养瓶中,待细胞贴壁后均匀传代。随机抽取八瓶细胞作为八组样本细胞,每组样本6个复孔,各组分别添加含体积分数15%的相应药物血清培养,将各组HTR-8细胞给予大鼠含药血清的完全培养基培养48h后HE染色观察细胞的总数及凋亡数目,免疫组织化学法检测各组细胞凋亡蛋白TNF-a、Bcl-2、Bax、Caspase-3表达的情况。【结果】1.脾肾双补方大鼠含药血清对体外培养的人早孕绒毛滋养细胞HTR-8细胞总数的影响与空白对照组相比,脾肾双补方高、中剂量组,滋肾育胎丸高、中剂量组HTR-8细胞总数均增加,差异有统计学意义(P<0.05),脾肾双补方低剂量组与滋肾育胎丸低剂量组HTR-8细胞总数无增加趋势,差异无统计学意义(P>0.05),地屈孕酮组HTR-8细胞总数较空白对照组比显着增加,差异有统计学意义(P<0.01);与地屈孕酮组相比,脾肾双补方高、中剂量组HTR-8细胞总数有增加的趋势,但差异无统计学意义(P>0.05),脾肾双补方低剂量组细胞总数较地屈孕酮组细胞总数降低,差异有统计学意义(P<0.05),脾肾双补方高、中剂量组间HTR-8细胞总数差异无统计学意义(P>0.05);与滋肾育胎丸高、中、低剂量组相比,脾肾双补方高、中、低剂量组HTR-8细胞总数差异无统计学意义(P>0.05)。2.脾肾双补方大鼠含药血清对体外培养的人早孕绒毛滋养细胞HTR-8细胞凋亡数目的影响脾肾双补方高、中剂量组,滋肾育胎丸高、中剂量组HTR-8细胞凋亡数目均低于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05),脾肾双补方低剂量组与滋肾育胎丸低剂量组HTR-8细胞凋亡数目较空白对照组比无降低,差异无统计学意义(P>0.05);地屈孕酮组HTR-8细胞凋亡数目显着低于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.01);与地屈孕酮组相比,脾肾双补方高、中剂量组HTR-8细胞凋亡数目无增加(P>0.05),脾肾双补方低剂量组细胞凋亡数目增多,差异有统计学意义(P<0.05),脾肾双补方高、中剂量组间HTR-8细胞凋亡数目差异无统计学意义(P>0.05);与滋肾育胎丸高、中、低剂量组相比,脾肾双补方高、中、低剂量组HTR-8细胞凋亡数目差异无统计学意义(P>0.05)。3.脾肾双补方大鼠含药血清对体外培养的人早孕绒毛滋养细胞HTR-8凋亡诱导蛋白TNF-a表达的影响与空白对照组相比,脾肾双补方高、中剂量组,滋肾育胎丸高、中剂量组HTR-8细胞凋亡蛋白TNF-a表达的面积总和、积分光密度总和及平均黑度均值均降低,差异有统计学意义(P<0.05),脾肾双补方低剂量组与滋肾育胎丸低剂量组TNF-a表达的面积总和、积分光密度总和及平均黑度均值无降低(P>0.05),地屈孕酮组HTR-8细胞TNF-a表达的面积总和、积分光密度总和以及平均黑度均值显着低于空白对照组(P<0.01);与地屈孕酮组相比,脾肾双补方高剂量组TNF-a表达的面积总和、积分光密度总和以及平均黑度均值无显着升高,差异无统计学意义(P>0.05),脾肾双补方中剂量组TNF-a表达的积分光密度总和及平均黑度均值差异无统计学意义(P>0.05),脾肾双补方高、中剂量组间TNF-a的表达差异无统计学意义(P>0.05);与滋肾育胎丸高、中、低剂量组相比,脾肾双补方高、中、低剂量组TNF-a表达的面积总和、积分光密度总和及平均黑度均值差异无统计学意义(P>0.05)。4.脾肾双补方大鼠含药血清对体外培养的人早孕绒毛滋养细胞HTR-8凋亡调节蛋白Bcl-2、Bax及其比值表达的影响与空白对照组相比,脾肾双补方高、中剂量组,滋肾育胎丸高、中剂量组HTR-8细胞抑凋亡蛋白Bcl-2表达的面积总和、积分光密度总和以及平均黑度均值均升高(P<0.05),脾肾双补方低剂量组与滋肾育胎丸低剂量组Bcl-2表达的面积总和、积分光密度总和以及平均黑度均值无升高趋势,差异无统计学意义(P>0.05),地屈孕酮组HTR-8细胞Bcl-2表达的面积总和、积分光密度总和以及平均黑度均值较空白对照组比显着升高(P<0.01);与地屈孕酮组相比,脾肾双补方高、中剂量组HTR-8细胞Bcl-2表达的面积总和、积分光密度总和及平均黑度均值差异无统计学意义(P>0.05),脾肾双补方高、中剂量组间Bcl-2表达的面积总和、积分光密度总和及平均黑度均值差异无统计学意义(P>0.05);脾肾双补方高、中、低剂量组HTR-8细胞Bcl-2表达的面积总和、积分光密度总和及平均黑度均值较滋肾育胎丸高、中、低剂量组比差异无统计学意义(P>0.05)。与空白对照组相比,脾肾双补方高、中剂量组,滋肾育胎丸高、中剂量组HTR-8细胞促凋亡蛋白Bax表达的面积总和、积分光密度总和以及平均黑度均值均降低(P<0.05),脾肾双补方低剂量组与滋肾育胎丸低剂量组Bax表达的面积总和、积分光密度总和以及平均黑度均值无降低趋势,差异无统计学意义(P>0.05);地屈孕酮组HTR-8细胞Bax表达的面积总和、积分光密度总和以及平均黑度均值显着低于空白对照组(P<0.01);与地屈孕酮组相比,脾肾双补方高剂量组及中剂量组HTR-8细胞凋亡蛋白Bax的表达差异无统计学意义(P>0.05),脾肾双补方高、中剂量组间Bax的表达差异无统计学意义(P>0.05);与滋肾育胎丸高剂量组相比,脾肾双补方高剂量组HTR-8细胞凋亡蛋白Bax表达的面积总和降低(P<0.05),与滋肾育胎丸中、低剂量组相比,脾肾双补方中、低剂量组HTR-8细胞Bax表达的面积总和、积分光密度总和以及平均黑度均值差异无统计学意义(P>0.05)。与空白对照组相比,脾肾双补方高、中剂量组,滋肾育胎丸高、中剂量组HTR-8细胞Bcl-2/Bax比值的面积总和、积分光密度总和以及平均黑度均值均升高(P<0.05),脾肾双补方低剂量组与滋肾育胎丸低剂量组Bcl-2/Bax比值的面积总和、积分光密度总和以及平均黑度均值无升高趋势,差异无统计学意义(P>0.05),地屈孕酮组HTR-8细胞Bcl-2/Bax比值的面积总和、积分光密度总和以及平均黑度均值显着高于空白对照组(P<0.01);与地屈孕酮组相比,脾肾双补方高、中剂量组Bcl-2/Bax比值的面积总和、平均黑度均值无显着升高的趋势,差异无统计学意义(P>0.05),脾肾双补方高、中剂量组间Bcl-2/Bax的比值差异无统计学意义(P>0.05);与滋肾育胎丸高剂量组相比,脾肾双补方高剂量组HTR-8细胞Bcl-2/Bax比值的积分光密度总和升高,差异有统计学意义(P<0.05),脾肾双补方中、低剂量组Bcl-2/Bax比值的面积总和、积分光密度总和及平均黑度均值较滋肾育胎丸中、低剂量组比差异无统计学意义(P>0.05)。5.脾肾双补方大鼠含药血清对体外培养的人早孕绒毛滋养细胞HTR-8凋亡执行蛋白Caspase-3表达的影响与空白对照组相比,脾肾双补方高、中剂量组,滋肾育胎丸高、中剂量组HTR-8细胞凋亡蛋白Caspase-3表达的面积总和、积分光密度总和以及平均黑度均值均降低(P<0.05),脾肾双补方低剂量组与滋肾育胎丸低剂量组Caspase-3表达的面积总和、积分光密度总和以及平均黑度均值无降低趋势,差异无统计学意义(P>0.05),地屈孕酮组HTR-8细胞Caspase-3表达的面积总和、积分光密度总和以及平均黑度均值显着低于空白对照组(P<0.01);与地屈孕酮组相比较,脾肾双补方高、中剂量组Caspase-3表达的面积总和、积分光密度总和以及平均黑度均值差异无统计学意义(P>0.05),脾肾双补方高、中剂量组间Caspase-3表达的面积总和、积分光密度总和以及平均黑度均值差异无统计学意义(P>0.05);与滋肾育胎丸高剂量组相比,脾肾双补方高剂量组Caspase-3表达的积分光密度总和、平均黑度均值降低,差异有统计学意义(P<0.05);与滋肾育胎丸中剂量组相比,脾肾双补方中剂量组Caspase-3表达的平均黑度均值降低,差异有统计学意义(P<0.05);与滋肾育胎丸低剂量组相比,脾肾双补方低剂量组Caspase-3表达的面积总和、积分光密度总和以及平均黑度均值差异无统计学意义(P>0.05)。6.脾肾双补方大鼠含药血清对体外培养的人早孕绒毛滋养细胞HTR-8凋亡相关蛋白表达的综合调控各组HTR-8细胞Caspase-3表达的积分光密度总和与各组相应TNF-a的表达水平呈正相关,与Bcl-2的表达水平呈负相关,与Bax的表达水平呈正相关,与Bcl-2/Bax的比值呈负相关;Caspase-3积分光密度总和表达水平与相应Bcl-2/Bax比值显着相关,与TNF-a的表达水平无明显相关。【结论】1.脾肾双补方含药血清可以促进人早孕绒毛滋养细胞数目增加,其机制可能是:减少人早孕绒毛滋养细胞的凋亡,保护细胞存活,继而有利于早期妊娠的维持,其作用途径可能是:(1)脾肾双补方含药血清通过降低细胞凋亡诱导蛋白TNF-α的表达,抑制死亡受体途径,减少凋亡执行蛋白Caspase-3的表达,从而抑制人早孕绒毛滋养细胞的凋亡,保护细胞存活,维持妊娠;(2)脾肾双补方含药血清通过提高细胞凋亡抑制蛋白Bcl-2的表达,降低细胞促凋亡蛋白Bax的表达,提高Bcl-2/Bax的比值,降低细胞凋亡执行蛋白Caspase-3的表达,抑制细胞凋亡线粒体途径,减少人早孕绒毛滋养细胞的凋亡,保护细胞存活,维持生长,促进妊娠早期胚胎的正常发育,进而维持早期妊娠的正常进行。2.脾肾双补方含药血清通过影响上述凋亡通路不仅可以保护人早孕绒毛滋养细胞的存活、生长,还可通过调控Bcl-2/Bax的比值,不使凋亡失衡,不会导致凋亡不足而引起滋养细胞疾病。(本文来源于《成都中医药大学》期刊2017-05-01）
邢长英,归绥琪,陶敏芳,滕银成[6]（2013）在《补肾益气方影响人早孕绒毛滋养细胞分泌功能的研究》一文中研究指出目的:探讨补肾益气方调控人早孕母-胎界面内分泌免疫网络的机制。方法:收集正常孕6~8周行人工流产术后的绒毛,体外分离、培养人早孕绒毛滋养细胞。运用血清药理学方法,分别以体积分数10%和20%补肾益气方含药血清(分别为中药低剂量组和高剂量组)处理细胞24 h、36 h、48 h,同时设立体积分数10%及20%对照组血清和空白对照组,ELISA法测定细胞培养上清液中白介素-10(IL-10)、干扰素-γ(IFN-γ)分泌水平,电化学发光免疫分析法测定孕酮(P)水平。结果:24 h起,中药低、高剂量组IL-10水平高于血清对照组及空白对照组(P<0.05);并且48 h时,中药高剂量组IL-10浓度高于低剂量组(P<0.01)。IFN-γ水平中药组与血清对照组相近(P>0.05)。24 h起,中药低剂量组和高剂量组的孕酮(P)水平均高于各对照组(P<0.01),并且中药高剂量组高于中药低剂量组(P<0.05)。结论:补肾益气方含药血清以剂量-时间依赖方式促进人早孕滋养细胞的IL-10、P分泌,可能是其调节内分泌免疫网络的作用机制之一。(本文来源于《生殖与避孕》期刊2013年08期）
王永萍[7]（2009）在《抗子宫内膜抗体对人早孕绒毛滋养细胞凋亡及FasL蛋白表达的影响》一文中研究指出目的:探讨体外培养人早孕绒毛滋养层细胞在含有抗子宫内膜抗体(EmAb)血清环境中细胞凋亡指数(apoptosis index,AI)及凋亡相关蛋白因子配体(factor associated suicide ligend,FasL)的表达情况。方法:抽取在我院门诊就诊的EmAb阳性而其它与自然流产相关的免疫性抗体阴性的病人肘静脉血5ml用于EmAb(+)血清处理组,同法取5ml各相关免疫性抗体均阴性的正常育龄妇女血清用于EmAb(-)血清处理组。静脉血静置、离心后取上清-80℃保存备用,作为实验干预条件。无菌条件下获取正常妊娠6～8周早孕绒毛组织,经胰蛋白酶/DNA酶Ⅰ联合消化,Percoll密度梯度离心法对得到的细胞进行纯化并培养,将最终获得的CTs应用免疫细胞化学法对其进行纯度鉴定,并同时传代培养。将传1-2代的CTs分为2组:EmAb(+)血清处理组和EmAb(-)血清处理组,分别加入EmAb(+)血清处理和EmAb(-)血清处理并培养,于0h、48h、72h、96h,分别经过台盼蓝排出试验观察CTs的活力、计算细胞存活率;采用DNA末端转移酶介导的原位缺口末端标记法(lebeling of DNA strandbreak- TUNEL)测定两组绒毛滋养细胞于培养0h、48h、72h、96h时刻的细胞凋亡指数,同时采用免疫细胞化学法测定FasL蛋白的表达情况。结果:EmAb(+)血清处理组于培养72h、96h时间点测得AI明显高于EmAb(-)血清处理组(P＜0.01);FasL蛋白表达明显低于EmAb(-)血清处理组;而培养48h时AI及FasL蛋白表达在两组之间无显着性差异。结论:绒毛滋养细胞在EmAb(+)环境下培养达到一定时间后其细胞凋亡指数增加,FasL蛋白表达减少。意义:CTs中AI、FasL蛋白在不同干预条件下的反应有助于进一步理解自然流产的发病机制。EmAb(+)血清处理组绒毛滋养细胞AI明显高于EmAb(-)血清处理组,提示我们可以从细胞凋亡入手探讨EmAb在自然流产中所发挥的作用。绒毛滋养细胞在加入EmAb(+)血清培养72h.96h后,FasL的表达明显低于EmAb(-)血清处理组,说明EmAb抑制FasL蛋白的表达。但经过纯化培养的滋养细胞中大部分淋巴细胞被清除,由此可以认为本实验中的绒毛细胞凋亡与FasL的表达减少应该没有关系。但是在体内环境下,EmAb(+)的RSA患者的绒毛细胞FasL表达减少可能会使母血和蜕膜组织中的Fas+杀伤性淋巴细胞凋亡减少,Fas+杀伤性淋巴细胞数目相对增多,使得胎盘部位滋养细胞凋亡增多,从而导致或促进自然流产的发生。(本文来源于《山东大学》期刊2009-04-12）
王永萍,徐永萍,邱健青,马小静[8]（2008）在《抗子宫内膜抗体对人早孕绒毛滋养细胞凋亡及FasL蛋白表达的影响》一文中研究指出目的:探讨体外培养人早孕绒毛滋养层细胞在游离抗子宫内膜抗体(Em-Ab)环境中,细胞凋亡指数(apoptosis index,AI)及凋亡相关因子配体(factor associated suicide ligend,FasL)的表达。方法:培养经胰蛋白酶/DNA酶Ⅰ联合消化,通过Percoll细胞分离液纯化得到绒毛滋养细胞。用TUNEL法测定EmAb(+)血清处理组和EmAb(-)血清处理组绒毛滋养细胞培养0、48、72、96h时的细胞凋亡指数,同时用免疫细胞化学法测定FasL蛋白的表达。结果:EmAb(+)血清处理组于培养72、96h时间点测得的AI明显高于EmAb(-)血清处理组(P<0.01);FasL蛋白表达明显低于EmAb(-)血清处理组;而培养48h AI及FasL蛋白表达无显着差异。结论:绒毛滋养细胞在EmAb(+)环境下AI增加,FasL蛋白表达减少。(本文来源于《现代妇产科进展》期刊2008年12期）
王岩岩,徐永萍,王永萍[9]（2008）在《不同氧浓度对原代培养人早孕绒毛细胞滋养细胞血管内皮生长因子及其可溶性受体表达的影响》一文中研究指出目的:探讨原代培养人早孕绒毛细胞滋养层细胞(CT)在缺氧时血管内皮生长因子(VEGF)和可溶性血管内皮生长因子受体-1(sFlt-1)的表达。方法:将经胰蛋白酶/DNA酶Ⅰ联合消化通过Percoll分离纯化得到的细胞滋养层细胞进行原代培养。采用ELISA法测定正常氧浓度(20%O2,A组)、低氧浓度Ⅰ组(8%O2,B组)和Ⅱ组(2%O2,C组)及低氧复氧组(2%O2/20%O2,D组)培养的不同时段细胞上清液中VEGF和sFlt-1蛋白的表达。结果:B组、C组于培养72h、96h、120h、144h时间点测得VEGF、sFlt-1的浓度明显高于A组(P<0.01);D组于培养96h、120h、144h后测得VEGF、sFlt-1的浓度较72h低,且分别与A组同期相比无明显差异(P>0.05)。结论:细胞滋养层细胞在低氧条件下VEGF、sFlt-1分泌增加,低氧复氧后VEGF和sFlt-1表达均恢复正常。(本文来源于《生殖与避孕》期刊2008年04期）
刘晓宁[10]（2007）在《GnRH激动剂对人早孕蜕膜基质细胞和绒毛外滋养细胞多种基质金属蛋白酶表达的影响》一文中研究指出胚胎种植及胎盘形成是胚胎与母体之间协同作用的精细而复杂的生理过程。妊娠的成功与否直接取决于胎盘的建成和维持，滋养层细胞迁移和侵袭母体子宫组织和螺旋动脉的过程是胎盘建成的重要事件。正常情况下需要细胞外基质酶学降解、血管生成和滋养层细胞分化等共同协调作用而完成母胎界面处的物理环境变化，多种生长因子、细胞因子和激素等共同作用通过调节细胞滋养层细胞的增值和分化以确保滋养层侵入局限在一定的时间和空间内。滋养层细胞侵入过度和不足都能引起一些妊娠疾病，如绒癌、先兆子痫和宫内胎儿生长抑制等。随着胚胎的植入与发育，母胎界面发生一系列复杂而精细的生理变化。研究发现人着床前早期胚胎和滋养层细胞均分泌多种基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases，MMPs)，提示MMPs在母胎对话中发挥了极其重要的作用。MMPs是蛋白水解酶的成员之一，是一类结构相关，催化活性依赖Zn~(2+)、Ca~(2+)的蛋白水解酶家族，通过水解胶原，糖蛋白以及蛋白多糖等多种细胞外基质(extracellular matrix，ECM)成分，参与细胞粘附、迁移、增值、分化以及胚胎发育着床等过程，是参与ECM降解的关键酶，也是滋养层细胞侵袭行为调控的关键因素，在胚胎着床和胎盘形成过程中发挥重要作用。MMPs／TIMPs之间的比例作为一种指标用以衡量滋养层细胞的侵入程度。一些在胎盘形成中发挥重要作用的激素，可调节MMPs活性，以介导滋养层细胞的粘附、迁移、侵入等过程。因此母胎界面之间MMPs／TIMPs的动态平衡对于重建基质和控制侵入是很关键的。促性腺激素释放激素(gonadotropin-releasing-hormone，GnRH)是由下丘脑神经元分泌的十肽氨基酸，是一种关键的神经调节物质。以脉冲式分泌刺激垂体促性腺细胞分泌LH和FSH，从而调节性腺内配子形成和激素功能。体内GnRH的氨基酸稳定性差，人工合成的九肽化合物，其化学结构与GnRH极为相似，称促性腺激素释放激素类似物(gonadotropin-releasing-hormone-analog，GnRHa)，它包括GnRH激动剂(GnRH agonist)及GnRH抑制剂(GnRH antagonist)。本课题使用的GnRH激动剂—醋酸亮丙瑞林，是下丘脑GnRH的高活性九肽氨基酸类似物。其促LH释放活性约为GnRH的100倍，抑制垂体—性腺系统功能的作用也强于GnRH。此外，它比GnRH有更强的对蛋白分解酶的抵抗力和对GnRH受体的亲和力，能有效抑制垂体—性腺系统的功能。学者们相继发现人的胎盘中也有GnRH的分泌，并逐渐认识它不仅在维持妊娠方面有重要作用，而且对生殖激素有调节作用。前期研究已证明下丘脑分泌的GnRH与丘脑外其他组织中分泌的GnRH在免疫、生理、生化等特性方面相同。GnRH及其受体广泛分布于神经、内分泌、生殖、免疫和消化系统中，是这些系统中相互联系的重要信使之一。中枢神经系统，GnRH作为神经递质和调质发挥作用，在周围组织中，它可作为自分泌或旁分泌因子起作用。妊娠早期，胎盘就能够分泌高浓度的GnRH，是调节HCG合成和分泌的主要调节剂。细胞滋养层细胞和合体滋养细胞都表达GnRH受体mRNA，GnRH在妊娠各期的分泌呈规律变化。在妊娠妊娠早期呈平行增长的趋势，这与HCG的分泌平行，说明GnRH和HCG之间存在密切关系，表明GnRH对胎盘的HCG的合成与释放有调节功能，提示GnRH在妊娠中特别是在维持早期胚胎过程中发挥了重要作用。HCG与LH在分子结构和功能上类似。滋养细胞能分泌合成GnRH，同时也表达GnRH受体。研究发现在体外培养的恒河猴胚胎、老鼠胚胎以及人胚胎的植入过程都产生和分泌GnRH。甚至在桑椹期囊胚阶段就已经开始分泌GnRH。在人子宫内膜和蜕膜组织中也了发现GnRH的结合位点。体外实验提示GnRH本身不同的脉冲频率和剂量对GnRH受体的表达呈现不同的作用，同时雌激素、抑制素、激活素A增加GnRH受体的表达水平，孕激素减低GnRH受体的表达水平。少数几个IVF中心在早期胚胎培养液中添加GnRH激动剂，发现胚胎质量提高、胚胎着床率和妊娠率增加。结果提示，GnRH可能在人胚胎种植和胎盘形成过程中起重要的调节作用。以往的研究提示GnRH激动剂在胚胎种植和胎盘形成过程中对MMPs的表达有影响。迄今为止，GnRH在这些组织中生物学功能仍不清楚。本课题利用Luminex液相蛋白芯片技术从蛋白水平，分析GnRH激动剂对人早孕蜕膜基质细胞和绒毛外滋养细胞MMPs(MMP-1、-2、-3、-7、-9)的表达影响，探讨GnRH在胚胎着床和早期妊娠建立过程中的调节作用。第一部分GnRH激动剂对人早孕蜕膜基质细胞多种基质金属蛋白酶表达的影响目的研究GnRH激动剂对人早孕蜕膜基质细胞(decidualized stromal cells，DSC)MMPs(MMP-1，-2，-3，-7和—9)表达的影响，以探讨GnRH在人胚胎着床和早期妊娠建立过程中的调节作用。材料和方法1收集人早孕6-9周蜕膜组织10例进行离体培养，用0.25％胰蛋白酶，温和消化蜕膜组织。消化完毕后以等体积的10％胎牛血清终止消化，过滤离心。用1.5％-3％BSA纯化蜕膜细胞，去除成纤维细胞、巨噬细胞等。将同批来源的细胞分为4组，按4×10~5／ml接种于24孔培养板，加入含10％小牛血清的FD完全培养液培养24h后首次换液，清除未贴壁的蜕膜细胞及红细胞，再培养24h后收集上清液。2 GnRH激动剂处理蜕膜基质细胞。一组更换1mlFD培养液作为对照组，其余叁组分别加入0.1 nm GnRH激动剂，1 nm GnRH激动剂和10 nm GnRH激动剂各1ml，培养24h，收集各组上清液准备测定。3倒置显微镜下观察细胞生长状态，镜下拍照。4免疫组化鉴定细胞纯度将无菌盖玻片置于培养皿中进行蜕膜基质细胞爬片培养，待细胞爬片基本长满时，取出盖玻片，PBS漂洗5min，4％多聚甲醛4℃固定30 min，以链霉素抗生物素蛋白-过氧化酶(streptavidin-peroxide，SP)染色法进行染色，第一抗体分别为波形蛋白，加酶底物DAB、H_2O_2显色，光学显微镜观察，阳性细胞的细胞质呈棕黄色。用PBS代替一抗做阴性对照。5利用Luminex液相蛋白技术检测蜕膜基质细胞MMP-1，-2，-3，-7和-9的表达6所得计量资料以Mean±SD表示，用SSPS 13.0软件包处理数据，用重复测量方差分析(ANOVA for repeated measurement)及双变量相关分析统计数据，P＜0.05差异有统计学意义。结果1体外培养蜕膜基质细胞的特征蜕膜基质细胞在接种30min后贴壁，培养的形态为梭形或多角形，胞浆薄而透明，核仁居中。培养1周左右延伸为长梭形，相互平行排列成束。原代培养细胞约7—12d长满融合。2免疫组化鉴定蜕膜基质细胞结果蜕膜基质细胞波形蛋白染色阳性可见细胞质内有大量棕黄色颗粒，细胞纯度在95％以上，生物学特性得以维持，可以用来实验。3蜕膜基质细胞MMPs的表达特点及GnRH激动剂对它们的调节蜕膜基质细胞表达这五种MMP，以MMP-1，-3的高表达为主，其中MMP-1，-3，-2，-7和-9的表达依次降低。4 GnRH激动剂对蜕膜基质细胞多种MMP蛋白表达的影响4．1不同浓度GnRH激动剂均能上调蜕膜基质细胞MMP-1，-2，-3，-7，-9的蛋白表达，10nm GnRH激动剂上调MMPs表达的作用最为显着，1nm GnRH激动剂的上调作用其次。各浓度组之间有显着性差异(P＜0.001)，重复测量方差分析GnRH激动剂各浓度(0.1nm，1nm和10nm)之间均有显着性差异(P＜0.001)，组内效应(F=29988.7，P＜0.001)，提示不同浓度GnRH激动剂之间的差异有统计学意义；组间效应(F=2165.7，P＜0.001)，说明五种MMP之间的差异有统计学意义。4．2从图1—3发现，随着GnRH激动剂浓度的增加，除MMP-9的曲线趋于水平外，其他四种MMP的表达曲线成上升趋势。5蜕膜基质细胞对照组与试验组相关性分析。各浓度GnRH与对照组之间成正相关，相关关系显着，且关系密切(0.814≤r≤0.997 P＜0.001)。结论1人早孕蜕膜基质细胞表达MMP-1，-2，-3，-7和-9，以MMP-1，-3高表达尤为显着2 GnRH激动剂(0.1nm、1nm、10nm)能上调人早孕蜕膜基质细胞MMP-1，-2，-3，-7和-9的蛋白表达并成浓度依赖性。10nm GnRH激动剂的上调作用最为显着，1nm GnRH激动剂的上调作用次之。3 GnRH激动剂能调节蜕膜基质细胞MMP-1，-2，-3，-7和-9的表达，提示GnRH通过影响MMPs的表达，从而在胚胎种植过程中发挥重要的调节作用。4 Luminex液相蛋白芯片分析技术，能同时检测到同一样本多个极微量的分子蛋白，比其它的检测方法具有更多优势。第二部分GnRH激动剂对人早孕绒毛外滋养细胞多种基质金属蛋白酶表达的影响目的研究GnRH激动剂对人早孕绒毛外滋养细胞(extravillous cytotrophoblasts，EVCT)多种基质金属蛋白酶(MMP-1，-2，-3，-7和-9)表达的影响，以探讨GnRH在绒毛外滋养细胞侵袭母体过程和早期妊娠建立过程中的调节作用。材料和方法1收集人早孕6-9周绒毛组织10例进行离体培养，0.125％胰酶消化，过滤，1.5％-3％BSA梯度纯化绒毛外细胞滋养层细胞，将同批来源细胞分为4组，按4×10~5／ml接种在24孔培养板，1mlFD培养液培养48h后收集上清液。2倒置显微镜下观察细胞生长状态，镜下拍照。3 GnRH激动剂处理EVCT。一组更换1mlFD培养液，其余叁组分别加入0.1nmGnRH激动剂，1nm GnRH激动剂和10nm GnRH激动剂培养液各1ml作为实验组，培养24h后收集各组上清液准备测定。4利用Luminex液相蛋白技术检测EVCT5种MMP(MMP-1，-2，-3，-7和-9)蛋白表达的变化。5所得计量资料以Mean±SD表示，用SSPS13.0软件包处理数据，用重复测量方差分析(ANOVA for repeated measurement)及双变量相关分析进行统计分析，P＜0.05差异有统计学意义。结果1体外培养EVCT的特征：体外培养2h后EVCT后可贴壁，由最初的卵圆形逐渐伸展成纺锤形、星形、多角形，EVCT可迁移、聚集，但不融合，基本不增殖。2 EVCT免疫组化鉴定：角蛋白阳性结果为EVCT细胞膜表达有棕褐色颗粒，用于实验的EVCT细胞纯度大于95％。3体外培养EVCT中MMPs的表达及GnRH激动剂对它们的调节。3．1 EVCT表达这五种MMP，以MMP-2、-9、-7、-3、-1的表达依次降低，其中MMP-2和MMP-9为高表达。3．2 0.1nm GnRH激动剂，1nm GnRH激动剂和10nm GnRH激动剂均能上调EVCT中MMP-1，-2，-3，-7，-9的蛋白表达，10nm GnRH激动剂的上调作用最明显，1nmGnRH激动剂次之。重复测量方差分析GnRH激动剂各浓度间均有显着性差异(P＜0.001)，组内效应(F=29988.7，P＜0.001)，提示GnRH激动剂不同浓度间差异有统计学意义，组间效应(F=2165.7，P＜0.001)，说明五种MMP之间的差异有统计学意义。3．3从图2—3中发现，MMP-2和MMP-9的曲线随GnRH激动剂浓度的增加成上升趋势，而MMP-1，-3，-7的曲线趋于水平。4滋养层细胞对照组与试验组相关性分析。各浓度GnRH激动剂与对照组之间成正相关，相关关系显着，且关系密切(0.926≤r≤1.000 P＜0.001)。结论1人早孕绒毛外滋养层细胞表达五种MMP，以MMP-2，MMP-9，MMP-7，MMP-3，MMP-1的表达依次降低，其中MMP-2和MMP-9高表达尤为显着。2 GnRH激动剂(0.1nm．1nm，10nm)均能以浓度依赖方式上调人早孕绒毛外滋养细胞MMP-1，MMP-2，MMP-3，MMP-7和MMP-9的蛋白表达，10nm GnRH激动剂对五种MMP的上调作用最高，1nm GnRH激动剂次之。3 GnRH可以通过影响MMPs的表达调节绒毛外滋养细胞侵袭能力，从而在胚胎种植和妊娠建立过程中发挥重要的调节作用。(本文来源于《南方医科大学》期刊2007-05-01）
人早孕绒毛滋养细胞株论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:探索脾肾双补方对人早孕绒毛滋养细胞中凋亡相关蛋白TNF-α、Caspase-3表达的影响。方法:采用动物含药血清,体外分组培养HTR-8细胞48 h,采用免疫组织化学法检测各组细胞凋亡蛋白TNF-α、Caspase-3表达的情况。结果:与空白对照组比,脾肾双补方高、中剂量组HTR-8细胞凋亡蛋白TNF-α、Caspase-3的表达均降低(P <0. 05),地屈孕酮组HTR-8细胞TNF-α、Caspase-3的表达显着低于空白对照组(P <0. 01);与地屈孕酮组比,脾肾双补方高、中剂量组TNF-α、Caspase-3的表达差异无统计学意义(P>0. 05);脾肾双补方高、中剂量组间TNF-α的表达差异无统计学意义(P> 0. 05)。结论:脾肾双补方含药血清可以促进人早孕绒毛滋养细胞数目增加,其机制可能是:减少人早孕绒毛滋养细胞的凋亡,保护细胞存活,继而有利于早期妊娠的维持,其作用途径可能是:脾肾双补方含药血清通过降低细胞凋亡诱导蛋白TNF-α的表达,抑制死亡受体途径,减少凋亡执行蛋白Caspase-3的表达,从而抑制人早孕绒毛滋养细胞的凋亡,保护细胞存活,维持妊娠。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
人早孕绒毛滋养细胞株论文参考文献
[1].张毅,陈松,陈宏健,卢惠,周繇.双酚A对人早孕绒毛滋养细胞IGF-I及ADAM12表达的影响[J].中国临床研究.2019
[2].曾倩,薛华容,邓礼林,夏宛廷,周航.基于死亡受体途径探讨脾肾双补方对离体人早孕绒毛滋养细胞HTR-8凋亡蛋白TNF-α、Caspase-3的影响[J].中华中医药学刊.2018
[3].段培培,薛华容,王毅,周航,夏宛廷.安胎协定方对离体人早孕绒毛滋养细胞增殖活力及ERK1/2信号通路的影响[J].中华中医药杂志.2018
[4].邓礼林.基于STAT3信号通路研究脾肾双补方对离体人早孕绒毛滋养细胞增殖作用的机制[D].成都中医药大学.2018
[5].薛华容.基于对凋亡通路的影响探讨脾肾双补方对离体人早孕绒毛滋养细胞HTR-8凋亡的作用及机制研究[D].成都中医药大学.2017
[6].邢长英,归绥琪,陶敏芳,滕银成.补肾益气方影响人早孕绒毛滋养细胞分泌功能的研究[J].生殖与避孕.2013
[7].王永萍.抗子宫内膜抗体对人早孕绒毛滋养细胞凋亡及FasL蛋白表达的影响[D].山东大学.2009
[8].王永萍,徐永萍,邱健青,马小静.抗子宫内膜抗体对人早孕绒毛滋养细胞凋亡及FasL蛋白表达的影响[J].现代妇产科进展.2008
[9].王岩岩,徐永萍,王永萍.不同氧浓度对原代培养人早孕绒毛细胞滋养细胞血管内皮生长因子及其可溶性受体表达的影响[J].生殖与避孕.2008
[10].刘晓宁.GnRH激动剂对人早孕蜕膜基质细胞和绒毛外滋养细胞多种基质金属蛋白酶表达的影响[D].南方医科大学.2007