导读:本文包含了细胞外基质磷酸化糖蛋白论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:细胞外基质磷酸化糖蛋白,基因克隆,骨形成发生蛋白2,双荧光素酶基因检测
细胞外基质磷酸化糖蛋白论文文献综述
宫春梅,张娟娟,夏天永,孙岩[1]（2015）在《细胞外基质磷酸化糖蛋白基因启动子的构建及初步研究》一文中研究指出目的:研究细胞外基质磷酸化糖蛋白(MEPE)基因启动子在小鼠前成骨细胞中表达的调控机制。方法:利用软件分析小鼠的MEPE基因启动子,得到5条启动子候选序列后,设计引物进行不同长度MEPE基因启动子的构建,并分别将其转染小鼠前成骨细胞;然后利用双荧光素酶基因检测报告系统分析不同长度MEPE基因启动子在前成骨细胞中的转录活性,并同时观察BPM2对小鼠前骨细胞中不同长度MEPE基因启动子转录活性的影响及其时间效应。结果:成功构建了P-78~+66、P-140~+66、P-300~+66、P-500~+66、P-1 081~+66的MEPE基因启动子;分别转染小鼠前成骨细胞后,不同长度MEPE基因启动子的活性两两相比均有显着性差异(P<0.05),其中以P-500~+66的活性最强,推测-140~-500区域可能为MEPE转录表达的调控元件主要结合部位;BMP2作用于不同长度MEPE基因启动子后检测发现,BMP2在启动子-140~-500区域内可明显上调MEPE基因的转录活性(P<0.05)。结论:成功构建了MEPE基因启动子,并发现BMP2调控MEPE基因启动子的主要区域在-140~-500区域。(本文来源于《牙体牙髓牙周病学杂志》期刊2015年09期）
孙玉娇,宫春梅,郝建忠,孙岩,刘晓影[2]（2015）在《转录因子Runx2调控前成骨细胞外基质磷酸化糖蛋白基因启动子的表达》一文中研究指出背景:细胞外基质磷酸化糖蛋白基因在骨的矿化和吸收、成骨细胞与破骨细胞的平衡中起重要的作用,研究细胞外基质磷酸化糖蛋白的功能及其调控机制可为骨质疏松症的治疗提供新的思路。目的:分析转录因子Runx2在小鼠前成骨细胞中对细胞外基质磷酸化糖蛋白基因启动子的调控作用,进而初步研究转录因子Runx2在骨形成发育过程中的作用。方法:首先根据Genbank中Runx2的基因序列构建Runx2真核表达载体;然后利用双荧光素酶基因检测报告系统分析Runx2对不同长度的细胞外基质磷酸化糖蛋白基因启动子转录活性的影响,以确定Runx2有明显作用的启动子区段,分析3种MAPK信号通路抑制剂调控Runx2对细胞外基质磷酸化糖蛋白基因启动子转录活性的影响;最后利用定时定量RT-PCR法分析Runx2对细胞外基质磷酸化糖蛋白基因启动子表达活性的影响。结果与结论:成功构建Runx2真核表达载体;双荧光素酶基因检测报告系统分析显示Runx2能够上调细胞外基质磷酸化糖蛋白基因启动子在前成骨细胞中的转录活性,在(-300-+66)366 bp片段区域内上调效果较为显着,Runx2可通过激活MEK激酶MAPK通路上调细胞外基质磷酸化糖蛋白启动子活性;定时定量RT-PCR法检测再次验证Runx2上调细胞外基质磷酸化糖蛋白基因启动子的表达水平。提示转录因子Runx2可以通过MEK激酶MAPK信号通路对细胞外基质磷酸化糖蛋白基因表达进行调节,为探讨细胞外基质磷酸化糖蛋白在骨形成发育过程中的意义奠定基础。(本文来源于《中国组织工程研究》期刊2015年37期）
张慧明,富尧,刘爽[3]（2015）在《骨形态发生蛋白与细胞外基质磷酸化糖蛋白相关性研究进展》一文中研究指出骨形态发生蛋白(BMP)是转化生长因子β超家族成员,细胞外基质磷酸化糖蛋白(MEPE)是一种细胞外基质的非胶原磷酸化糖蛋白,两者都是成骨信号通路中的重要蛋白。近年来发现MEPE表达水平受BMP的调节,并在磷酸盐代谢调节、成骨细胞增殖分化中发挥重要作用,同时与肿瘤细胞的骨转移有着密切的关联。在此,我们简要综述近年来BMP与MEPE的关系以及它们在肿瘤细胞骨转移方面的作用。(本文来源于《生物技术通讯》期刊2015年03期）
艾林,王慧媛,霍丽,李明勇[4]（2013）在《重组人细胞外基质磷酸化糖蛋白对人牙髓细胞体外矿化的影响》一文中研究指出目的:探讨细胞外基质磷酸化糖蛋白(Matrix extracellular phosphogl ycoprotein,MEPE)对人牙髓细胞(human dental pulpcells,HDPCs)在体外的矿化能力的影响,从而了解该蛋白在牙齿生长发育过程中的作用。方法:常规方法培养获得人牙髓细胞,实验组中使用的MEPEs的浓度为100μg/L。通过Vonkossa染色观察MEPE对人牙髓细胞矿化的影响。结果:MEPE蛋白能促进人牙髓细胞的矿化。结论:MEPE具有促进人牙髓细胞的矿化的能力,可能在牙齿生长发育过程中起着重要的作用。(本文来源于《中国美容医学》期刊2013年05期）
聂礼强,刘芳霞,王慧媛,艾林[5]（2011）在《人细胞外基质磷酸化糖蛋白对人牙髓细胞生长和黏附的影响》一文中研究指出目的探讨细胞外基质磷酸化糖蛋白(MEPE)对人牙髓细胞(HDPCs)黏附、伸展、增殖的影响。方法常规培养获得人牙髓细胞,各实验组中MEPEs的浓度分别为0.01,0.1,1,10,100μg/L以不加MEPE作为空白对照组。细胞计数法测定细胞的黏附能力;通过计数高倍视野中伸展的细胞数,计算骨髓基质细胞在不同时间的伸展率;MTT法检测各组细胞的增殖活性。结果体外培养的人牙髓细胞生长良好;各实验组间及与对照组比较,100μg/L组对细胞的黏附性的影响有差异;各组细胞的伸展率无差异;MEPE对人牙髓细胞有较明显的促增殖作用。结论 MEPE对体外培养的人牙髓细胞的伸展率无影响,但可明显促进其黏附性和增殖。(本文来源于《临床军医杂志》期刊2011年03期）
艾林,王捍国,肖明振,王慧媛[6]（2009）在《重组人细胞外基质磷酸化糖蛋白(MEPE)对牙髓细胞碱性磷酸酶活性的影响》一文中研究指出目的:通过构建细胞外基质磷酸化糖蛋白的原核表达质粒并在大肠杆菌中诱导成釉蛋白的全长表达并进行纯化,观察MEPE对人牙髓细胞增殖和碱性磷酸酶活性的影响,从而了解该蛋白在牙齿发育过程中的作用。方法:使用人脑cDNA文库克隆MEPE基因并进行序列分析。在大肠杆菌中表达细胞外基质磷酸化糖蛋白,并纯化和分析。检测重组人细胞外基质磷酸化糖蛋白对牙髓细胞碱性磷酸酶活性的影响。结果:重组人细胞外基质磷酸化糖蛋白可提高牙髓细胞的ALP活性水平(P<0.05)。结论:MEPE可提高牙髓细胞的ALP活性水平,为MEPE在临床上对生活牙髓的保存治疗和组织工程化牙本质修复牙体组织缺损提供理论基础。(本文来源于《临床口腔医学杂志》期刊2009年02期）
艾林[7]（2008）在《人细胞外基质磷酸化糖蛋白的重组表达及在牙本质形成中的作用和机理研究》一文中研究指出MEPE,又名成骨细胞/骨细胞因子45(Osteoblast/Osteocyte Factor 45;OF45)或是Osteoregulin。2000年,Rowe在筛选肿瘤性低血磷性骨软化症(oncogenic hypophosphatemic osteomalacia,OHO)患者肿瘤组织cDNA文库中表达上调的基因时,发现了MEPE。RT-PCR检测发现,正常组织中,MEPE在骨髓和大脑中表达,肺、肾和胎盘中的表达水平很低。同年,Petersen等在大鼠骨髓源性的成骨细胞中克隆到MEPE基因,Northern blot和免疫组织化学研究显示:MEPE仅在骨组织中表达,特别是骨小梁和皮质骨中的骨细胞呈高表达。2003年,Gowen等克隆了小鼠MEPE基因,发现其上游存在叁个蛋氨酸密码子,可以选择性转录起始,最大可编码441个氨基酸残基的蛋白质。Northern和Western blot显示MEPE在骨组织和成牙本质细胞中表达。目前在口腔医学领域MEPE的研究还是处于初期,对于MEPE的功能我们还知之甚少。前期研究提示MEPE可能参与牙本质形成。本课题通过MEPE基因克隆、原核以及真核蛋白表达等方法,在mRNA和蛋白质的水平上,从MEPE的表达、在牙齿细胞中功能以及在羟基磷灰石晶体形成和生长中作用等几个方面,全面深入地研究MEPE参与牙本质基质形成和矿化的过程、作用和机理等。这将阐明MEPE在牙本质牙髓复合体形成和损伤修复中的机制,丰富牙髓生物学和牙齿发育生物学,并为临床上生活牙髓的保存治疗和组织工程化牙本质修复牙体组织缺损提供理论基础本研究分为以下5个部分内容:一、MEPE基因克隆和序列分析利用PCR技术,设计一对引物从人脑cDNA文库中扩增出MEPE编码区基因片段(约1.5kb),将扩增的基因片段插入pGEM-T Easy克隆载体,限制性酶切进行鉴定并进行核苷酸序列测定。结果表明:克隆到人MEPE蛋白编码区基因片段,序列与GenBank中收录的人MEPE cDNA序列一致。二、MEPE基因在原核和真核细胞中的表达将MEPE编码区全长片段亚克隆至表达载体pGEX-4T-1中,大肠杆菌中诱导表达,纯化后获得人MEPE蛋白。以重组、纯化的MEPE为抗原,混入完全/不完全弗氏佐剂,免疫新西兰大白兔,制备MEPE多克隆抗体。分别将MEPE基因亚克隆入非融合和融合真核表达载体pcDNA3.1和pEGFP-C3中,脂质体介导将载体转染哺乳动物细胞COS-7,通过免疫组织化学、Western Blot等方法检测MEPE蛋白在哺乳动物细胞中的表达。发现表达的绿色荧光蛋白融合蛋白所发出的荧光位于细胞浆中,胞核中无荧光,与免疫组化结果一致,说明MEPE位于细胞浆中。Western Blot检测显示在COS-7细胞中表达的MEPE的分子量为61kDa,与理论值相符。叁、MEPE蛋白的组织表达特性研究用制备的抗人MEPE蛋白抗体对狗牙胚组织切片进行免疫组化染色,发现成牙本质细胞染色阳性,前期牙本质染色阳性,牙髓细胞染色阴性。四、MEPE蛋白对牙髓细胞和牙周膜细胞的生物学作用采用四唑盐比色法观察了MEPE蛋白对人牙周膜细胞、牙髓细胞增殖的影响,结果发现MEPE蛋白对牙周膜细胞增殖无促进作用、对牙髓细胞的增殖有促进作用。酶动力学方法观察了MEPE蛋白对人牙周膜细胞、牙髓细胞ALP活性的影响。研究结果表明,MEPE蛋白可提高牙髓细胞、牙周膜细胞的ALP活性。Von kossa染色结果显示MEPE蛋白可促进牙髓细胞的体外矿化。五、采用稳态琼脂糖凝胶的HA生长系统,研究MEPE蛋白质在体外矿化中的作用本实验首次将不同浓度的MEPE蛋白质加入HA晶体生长系统的平衡透析池,测定凝胶中磷酸盐和钙离子浓度、以及HA晶体的大小和完整性,证明MEPE蛋白质在体外可以促进HA晶体形成、生长。(本文来源于《第四军医大学》期刊2008-04-01）
韦曦,刘路,凌均棨[8]（2007）在《细胞外基质磷酸化糖蛋白的研究现状》一文中研究指出细胞外基质磷酸化糖蛋白(MEPE)定位于人类染色体4q21.1。由于MEPE在肿瘤相关性低磷性骨软化患者(OHO)的肿瘤组织中高表达,故其被认为是导致低磷性骨软化的调磷因子。MEPE主要表达于分化成熟的成骨细胞和骨细胞中,具有抑制骨形成和矿化的作用,是一种矿化抑制因子。在牙齿组织中,MEPE主要表达于成牙本质细胞,并与多种致病基因位于染色体4q21上的牙体硬组织疾病如釉质发育不全、Ⅱ和Ⅲ型牙本质发育不全有关。(本文来源于《国际口腔医学杂志》期刊2007年04期）
李伟,刘兴容[9]（2006）在《细胞外基质磷酸化糖蛋白与其多肽链片段的生物学作用》一文中研究指出细胞外基质磷酸化糖蛋白(MEPE)是一种细胞外基质的非胶原磷酸化糖蛋白,也是一种调磷因子,对磷酸盐代谢紊乱及各种骨组织疾病的成骨细胞增生及牙周组织生理连接的重建有重要作用。dentonin/AC100作为MEPE的一个基因片段,对骨组织形成的作用已成为研究热点。本文就近年来MEPE与其多肽链片段dentonin/AC100的研究进行一综述。(本文来源于《国外医学.口腔医学分册》期刊2006年03期）
刘嘉利,王晓方,史俊南,张海滨,胡蓝靛[10]（2003）在《Ⅱ型乳光牙家系细胞外基质磷酸化糖蛋白、骨涎蛋白基因的检测》一文中研究指出目的通过对2个遗传性牙本质发育不全Ⅱ型家系的细胞外基质磷酸化糖蛋白(matrixextracellularphosphoglycoprotein,MEPE)、骨涎蛋白(BonesialoproteinⅡ,IBSP)进行突变检测,寻找Ⅱ型乳光牙致病基因,为临床诊断、基因治疗提供分子基础。方法在MEPE、IBSP基因内设计引物,经PCR和DNA测序对基因编码序列及其临近内含子进行突变检测。结果在MEPE基因发现c.1027G>A的碱基变化,该变化导致MEPE出现V330I的氨基酸变化,在IBSP发现c.797G>A的碱基变化,该变化导致IBSP出现G219R的氨基酸变化。两种变化在家系内与表型不存在一一对应关系。结论排除了MEPE、IBSP为两个DGI-Ⅱ型家系致病基因的可能,进一步缩小了候选基因范围,为最终的基因治疗提供基础。(本文来源于《中国临床康复》期刊2003年14期）
细胞外基质磷酸化糖蛋白论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
背景:细胞外基质磷酸化糖蛋白基因在骨的矿化和吸收、成骨细胞与破骨细胞的平衡中起重要的作用,研究细胞外基质磷酸化糖蛋白的功能及其调控机制可为骨质疏松症的治疗提供新的思路。目的:分析转录因子Runx2在小鼠前成骨细胞中对细胞外基质磷酸化糖蛋白基因启动子的调控作用,进而初步研究转录因子Runx2在骨形成发育过程中的作用。方法:首先根据Genbank中Runx2的基因序列构建Runx2真核表达载体;然后利用双荧光素酶基因检测报告系统分析Runx2对不同长度的细胞外基质磷酸化糖蛋白基因启动子转录活性的影响,以确定Runx2有明显作用的启动子区段,分析3种MAPK信号通路抑制剂调控Runx2对细胞外基质磷酸化糖蛋白基因启动子转录活性的影响;最后利用定时定量RT-PCR法分析Runx2对细胞外基质磷酸化糖蛋白基因启动子表达活性的影响。结果与结论:成功构建Runx2真核表达载体;双荧光素酶基因检测报告系统分析显示Runx2能够上调细胞外基质磷酸化糖蛋白基因启动子在前成骨细胞中的转录活性,在(-300-+66)366 bp片段区域内上调效果较为显着,Runx2可通过激活MEK激酶MAPK通路上调细胞外基质磷酸化糖蛋白启动子活性;定时定量RT-PCR法检测再次验证Runx2上调细胞外基质磷酸化糖蛋白基因启动子的表达水平。提示转录因子Runx2可以通过MEK激酶MAPK信号通路对细胞外基质磷酸化糖蛋白基因表达进行调节,为探讨细胞外基质磷酸化糖蛋白在骨形成发育过程中的意义奠定基础。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
细胞外基质磷酸化糖蛋白论文参考文献
[1].宫春梅,张娟娟,夏天永,孙岩.细胞外基质磷酸化糖蛋白基因启动子的构建及初步研究[J].牙体牙髓牙周病学杂志.2015
[2].孙玉娇,宫春梅,郝建忠,孙岩,刘晓影.转录因子Runx2调控前成骨细胞外基质磷酸化糖蛋白基因启动子的表达[J].中国组织工程研究.2015
[3].张慧明,富尧,刘爽.骨形态发生蛋白与细胞外基质磷酸化糖蛋白相关性研究进展[J].生物技术通讯.2015
[4].艾林,王慧媛,霍丽,李明勇.重组人细胞外基质磷酸化糖蛋白对人牙髓细胞体外矿化的影响[J].中国美容医学.2013
[5].聂礼强,刘芳霞,王慧媛,艾林.人细胞外基质磷酸化糖蛋白对人牙髓细胞生长和黏附的影响[J].临床军医杂志.2011
[6].艾林,王捍国,肖明振,王慧媛.重组人细胞外基质磷酸化糖蛋白(MEPE)对牙髓细胞碱性磷酸酶活性的影响[J].临床口腔医学杂志.2009
[7].艾林.人细胞外基质磷酸化糖蛋白的重组表达及在牙本质形成中的作用和机理研究[D].第四军医大学.2008
[8].韦曦,刘路,凌均棨.细胞外基质磷酸化糖蛋白的研究现状[J].国际口腔医学杂志.2007
[9].李伟,刘兴容.细胞外基质磷酸化糖蛋白与其多肽链片段的生物学作用[J].国外医学.口腔医学分册.2006
[10].刘嘉利,王晓方,史俊南,张海滨,胡蓝靛.Ⅱ型乳光牙家系细胞外基质磷酸化糖蛋白、骨涎蛋白基因的检测[J].中国临床康复.2003
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