导读:本文包含了转基因水稻汕优论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:微滴式数字PCR,双通道法,定量检测,转基因水稻
转基因水稻汕优论文文献综述
陈雪娇,宗凯,孙娟娟,李云飞,郑海松[1]（2018）在《转基因水稻品系‘Bt汕优63’微滴式数字PCR定量检测方法的建立》一文中研究指出为进一步提升转基因水稻的定量检测效率,推动转基因定量标识制度的实施,对转基因水稻品系‘Bt汕优63’成分进行微滴式数字PCR法定量检测研究。基于转基因水稻品系‘Bt汕优63’的外源插入片段和水稻蔗糖磷酸盐合成酶基因SPS,选择、设计和合成高效特异性的内外源基因引物探针,用于微滴式数字PCR法扩增‘Bt汕优63’的内源基因和品系特异序列。引物探针优化实验表明,SPS60-F/R/P和‘Bt汕优63’品系基因-F/R/P适用于dd PCR双通道法定量检测‘Bt汕优63’成分。准确度验证试验表明,测得值与标准值相近,偏差分别为0.03、0.15、0.15、0.03。测得值的SD介于0.08~0.48之间,RSD介于4.86%~15.10%之间,小于欧盟要求25%,准确度较好。本研究建立的转基因水稻品系‘Bt汕优63’微滴数字PCR定量检测方法简便高效、准确度高,可用于农产品和食品中转基因水稻‘Bt汕优63’成分的定量检测。(本文来源于《中国农学通报》期刊2018年06期）
何晨梦[2]（2017）在《电化学传感检测转基因水稻“汕优63”技术研究》一文中研究指出由于近几年出口大米转基因污染事件的发生,急需开发针对转基因“汕优63”大米简单、经济、可靠的定量检测方法。新兴的电化学DNA生物传感技术在最近几年发展迅速。它致力于建立简单、快速、易于自动化、便携且成本低的检测系统,在转基因产品的检测上具有很大发展潜力。转入的基因序列可以通过固定于传感元件表面的特异性捕获探针进行检测。因此,本论文建立了-套运用电化学传感技术检测Bt63特异性序列的体系。基于亚甲基蓝的方波伏安响应被用于监测探针修饰及目标序列的杂交过程。实验中优化了亚甲基蓝的孵育及杂交过程中影响电化学检测结果的因素。结果表明,亚甲基蓝的电化学还原峰值与DNA浓度的对数存在线性关系,线性范围为1.0×10-10～1.0×10-5M,检测限为5.8×10-11M。本实验也用电化学传感技术对转基因水稻叶片粉末及几种不同的大米样品进行了检测,验证其在实际检测中的应用性及是否可有效区分不同阳性比例的DNA。实验结果表明,电化学传感可有效应用于作物和不同阳性掺比的样品检测,并且与PCR方法相比,检测范围更宽,灵敏度更高,因此具有很高的市场发展及应用前景。为提高传感器的检测灵敏度,本实验也开发了一种利用简便有效的原位超声方法制备石墨烯和纳米金的复合物作为修饰材料的Bt63大米电化学传感检测平台。通过紫外、透射电镜、拉曼和循环伏安法表征可以看出氧化石墨烯被成功还原,平均粒径为30 nm的纳米金粒子均匀分布于还原氧化石墨烯表面。对实验条件进行优化后,亚甲基蓝的还原峰与DNA浓度的对数成线性关系,线性范围为1.0×10-14～1.0×10-9M,检测限为3.36×10-15M。实验同样验证了该电化学传感器的重现性和稳定性良好,并通过对几种大米样品的检测显示其选择性良好。因此,该修饰后的传感器灵敏度及选择性明显提高,为开发用于微量大米检测的商业化传感装置奠定了基础。(本文来源于《北京化工大学》期刊2017-05-22）
李修强,陈法军,刘满强,陈小云,胡锋[3]（2012）在《转基因水稻Bt汕优63种植两年对土壤线虫群落的影响》一文中研究指出通过连续2年的大田试验,对转基因水稻Bt汕优63(BtSY63)及其亲本汕优63(SY63)种植下大田土壤线虫数量、营养类群组成、生态指标和群落组成进行对比分析.结果表明:BtSY63和SY63种植下土壤线虫数量均随种植时间发生明显波动,但两者间无显着差异;与SY63相比,BtSY63种植下捕杂食线虫百分比和Shannon多样性指数出现了短暂的增加,但仅在个别时间差异显着;非度量多变量排序(nMDS)分析表明,BtSY63和SY63种植下土壤线虫群落组成无显着差异.可见,大田BtSY63种植2年对土壤线虫群落的影响不显着.(本文来源于《应用生态学报》期刊2012年11期）
苏长青,谢家建,王奕海,王锡锋,彭于发[4]（2011）在《转基因水稻Bt汕优63的整合结构和品系特异性定量PCR方法》一文中研究指出为更好地监测转基因抗虫水稻(Oryza sativa L.)Bt汕优63品系的存在,满足转基因标识管理的要求,同时也为了解决阳性植物基因组DNA不容易获得的问题,本研究采用热不对称交互PCR(TAIL-PCR)、Genome Walking和长链PCR(LD-PCR)方法测定了基因枪转化的转cry1Ab/cry1Ac融合基因水稻品系Bt汕优63的外源插入DNA全序列,构建了含有Bt汕优633'旁侧和水稻内标基因gos9序列的标准质粒分子pMDBt63作为标准物质,建立了Bt汕优63实时荧光定量PCR方法。外源插入DNA全长9818bp,位于水稻基因组10号染色体(AP008214)第5348630位,由8个来源于两个转化质粒的DNA片段组成,其中两个cry1Ab/cry1Ac表达框以正向串连的方式插入。gos9和3'旁侧两个定量标准曲线的相关系数(R2)分别为0.9997和0.9992,扩增效率(E)分别为98.05%和99.46%。每反应100ng模板DNA的检测限(LOD)为10拷贝,定量限(LOQ)为100拷贝。此外,对已知5%和1%转基因含量的混合样品DNA进行定量检测,结果的平均值分别为4.98%和1.07%。结果表明标准质粒pMDBt63作为标准物质建立的定量方法可用于Bt汕优63的定量检测。(本文来源于《农业生物技术学报》期刊2011年03期）
曹茸[5]（2009）在《我国首度批准发放转基因粮食作物安全证书》一文中研究指出本报讯（ 曹茸）近日，根据《农业转基因生物安全管理条例》规定和农业转基因生物安全委员会评价结果，农业部批准发放了转基因抗虫水稻“华恢1号”及杂交种“Bt汕优63”和转植酸酶基因玉米BVLA430101的生产应用安全证书。这是我国首度为转基因粮食作物颁(本文来源于《农民日报》期刊2009-12-25）
刘凌[6]（2008）在《转基因水稻Bt汕优63外源插入结构验证和定量检测方法建立》一文中研究指出我国对转基因水稻的研究处于世界领先水平,其中,研发的一些抗病、抗虫转基因水稻品系已经进入申请生产种植用生物安全证书阶段,但由于它们的转基因生物安全问题等一些原因,至今尚未有品系批准商业化生产应用。而分子特征分析是对转基因作物进行生物安全性评价的一个重要方面。我国和国际上许多国家的转基因生物安全管理法规都有这方面的资料要求。因此,本研究以尚未进入商业化生产的转基因水稻“Bt汕优63”为研究对象,利用普通PCR、长链PCR、反转录PCR和荧光定量PCR等方法,从其DNA水平、RNA水平进行研究,主要研究内容和结果有以下四个方面:1.验证了基因枪转化的转cry1Ab/c融合基因水稻品系“Bt汕优63”的外源插入DNA的结构,证明其确实有部分标记基因片段存在。验证了其转化事件定性检测体系。并检测了其自交产生的下一代植株的外源插入结构,发现标记基因部分片段依然存在,外源基因的分离比符合单位点的孟德尔遗传。2.根据侧翼序列优化设计特异性引物,以转基因水稻种属特异性基因作为PCR扩增的内源参照,建立转化事件特异性定量检测体系。结果表明,定量体系具有较好的重复性,用标准分子确定的转基因水稻“Bt汕优63”的检测极限为100个拷贝数。3.利用RT-PCR的方法检测了转基因水稻“Bt汕优63”整个生育期外源标记基因、目的基因在mRNA水平上的表达情况,检测结果显示,外源标记基因在整个生育期没有表达,目的基因稳定表达。在此基础上,建立目的基因在mRNA水平上表达的定量检测体系。实验结果表明,定量体系重复性较好,苗期目的基因表达的量较少,其他生育期目的基因稳定表达。4.以标准分子作为定量PCR外部标准品并建立标准曲线。本文利用重组PCR的技术构建了标准分子,检测含有转基因成分的混合样品,根据标准曲线计算转基因成分的含量;区分转基因水稻“Bt汕优63”与“华恢1号”样品;以构建好的标准曲线检测目的基因在mRNA水平上的表达量。结果表明,以标准分子作为定量标准品的检测结果具有较好重复性和再现性,重组PCR技术用于构建标准分子是可行的。本文的研究内容通过对转基因水稻Bt汕优63外源插入结构的研究,成功建立了针对转基因水稻Bt汕优63转化事件特异性PCR定量检测方法,望为转基因水稻的监管提供技术支持,为今后我国转基因作物及其产品检测标准的制定,转基因作物及其产品的定量检测试剂盒的开发提供技术支持。建立了目的基因cry1Ab/c在转录水平mRNA表达的定量检测体系,这将为准确、高速的检测转基因水稻Bt汕优63目的基因在转录水平上表达及其相关标准的制定和其安全性管理提供参考依据。(本文来源于《中国农业科学院》期刊2008-05-01）
转基因水稻汕优论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
由于近几年出口大米转基因污染事件的发生,急需开发针对转基因“汕优63”大米简单、经济、可靠的定量检测方法。新兴的电化学DNA生物传感技术在最近几年发展迅速。它致力于建立简单、快速、易于自动化、便携且成本低的检测系统,在转基因产品的检测上具有很大发展潜力。转入的基因序列可以通过固定于传感元件表面的特异性捕获探针进行检测。因此,本论文建立了-套运用电化学传感技术检测Bt63特异性序列的体系。基于亚甲基蓝的方波伏安响应被用于监测探针修饰及目标序列的杂交过程。实验中优化了亚甲基蓝的孵育及杂交过程中影响电化学检测结果的因素。结果表明,亚甲基蓝的电化学还原峰值与DNA浓度的对数存在线性关系,线性范围为1.0×10-10～1.0×10-5M,检测限为5.8×10-11M。本实验也用电化学传感技术对转基因水稻叶片粉末及几种不同的大米样品进行了检测,验证其在实际检测中的应用性及是否可有效区分不同阳性比例的DNA。实验结果表明,电化学传感可有效应用于作物和不同阳性掺比的样品检测,并且与PCR方法相比,检测范围更宽,灵敏度更高,因此具有很高的市场发展及应用前景。为提高传感器的检测灵敏度,本实验也开发了一种利用简便有效的原位超声方法制备石墨烯和纳米金的复合物作为修饰材料的Bt63大米电化学传感检测平台。通过紫外、透射电镜、拉曼和循环伏安法表征可以看出氧化石墨烯被成功还原,平均粒径为30 nm的纳米金粒子均匀分布于还原氧化石墨烯表面。对实验条件进行优化后,亚甲基蓝的还原峰与DNA浓度的对数成线性关系,线性范围为1.0×10-14～1.0×10-9M,检测限为3.36×10-15M。实验同样验证了该电化学传感器的重现性和稳定性良好,并通过对几种大米样品的检测显示其选择性良好。因此,该修饰后的传感器灵敏度及选择性明显提高,为开发用于微量大米检测的商业化传感装置奠定了基础。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
转基因水稻汕优论文参考文献
[1].陈雪娇,宗凯,孙娟娟,李云飞,郑海松.转基因水稻品系‘Bt汕优63’微滴式数字PCR定量检测方法的建立[J].中国农学通报.2018
[2].何晨梦.电化学传感检测转基因水稻“汕优63”技术研究[D].北京化工大学.2017
[3].李修强,陈法军,刘满强,陈小云,胡锋.转基因水稻Bt汕优63种植两年对土壤线虫群落的影响[J].应用生态学报.2012
[4].苏长青,谢家建,王奕海,王锡锋,彭于发.转基因水稻Bt汕优63的整合结构和品系特异性定量PCR方法[J].农业生物技术学报.2011
[5].曹茸.我国首度批准发放转基因粮食作物安全证书[N].农民日报.2009
[6].刘凌.转基因水稻Bt汕优63外源插入结构验证和定量检测方法建立[D].中国农业科学院.2008