导读:本文包含了小鼠早期胚胎论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:Fibrillarin基因,早期胚胎发育,囊胚
小鼠早期胚胎论文文献综述
何金英,任宇,刘慧,黄翔华,马玉珍[1]（2019）在《纤维蛋白基因对大鼠早期胚胎发育的影响》一文中研究指出目的研究纤维蛋白(fibrillarin,FBL)基因对大鼠早期胚胎发育的影响。方法选取健康、性成熟的大鼠30只,按照1:1的比例将雌鼠放置于雄鼠笼子里,同笼交配。采集大鼠胚胎,构建FBL上调、下调慢病毒载体,免疫荧光技术检测FBL在胚胎细胞中的表达,使用荧光定量RT-PCR技术检测FBL mRNA、Oct 4、Sox 2、FGF 4表达量,并作组间比较。结果 FBL在卵裂期胚胎中特异性染色不明显,而在囊胚中可被检测到有表达。上调组大鼠囊胚期FBL mRNA表达量、FBL表达量高于对照组,8-细胞阶段卵裂率、囊胚孵化率、Oct 4、Sox 2、FGF 4表达量低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);下调组大鼠囊胚期FBL mRNA表达量、FBL表达量低于对照组,8-细胞阶段卵裂率、囊胚孵化率、Oct 4、Sox 2、FGF 4表达量高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);下调组大鼠囊胚期FBL mRNA表达量、FBL表达量低于上调组,8-细胞阶段卵裂率、囊胚孵化率、Oct 4、Sox 2、FGF 4表达量高于上调组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论下调FBL基因通过促进Oct 4、Sox 2的结合,调控FGF 4基因的表达,最终促进早期胚胎的分化。(本文来源于《中国计划生育和妇产科》期刊2019年11期）
刘东华,何曦,裴一岩,梁雨森,李凌衡[2]（2019）在《小鼠胚胎早期血细胞发生的研究进展》一文中研究指出根据时空上的不同,小鼠胚胎发育时期的血细胞发生目前被分为原始造血、红系/髓系祖细胞(EMPs)的产生和造血干细胞(HSCs)成熟并分化为各种血细胞3个阶段。最新的观点也把原始造血和EMPs的产生归结为非HSCs依赖性的血细胞谱系分化阶段,将第3阶段称为HSCs依赖性的血细胞谱系分化阶段。尽管胚胎时期的血细胞发生涉及多个造血器官,但本文中我们主要对近年在细胞和分子水平进行的造血细胞和HSCs在卵黄囊和腹主动脉-性腺-中肾(AGM)区发育的研究进行归纳总结,以此展示新近发现的胚胎发育早期血细胞发生的特点及其潜在机制。(本文来源于《解剖学报》期刊2019年05期）
馨娅[3]（2019）在《小鼠早期胚胎发育过程中全胚层谱系发生的时空转录组图谱问世》一文中研究指出[本刊讯]中国科学院生物化学与细胞生物学研究所景乃禾研究组、中国科学院—马普学会计算生物学伙伴研究所韩敬东研究组与中国科学院广州生物医药与健康研究院/广州再生医学与健康广东省实验室彭广敦课题组合作,构建了小鼠早期胚胎发育过程中全胚层谱系发(本文来源于《科学》期刊2019年05期）
刘敏,祁文甲,吕青青[4]（2019）在《不同超声剂量对孕鼠早期胚胎的安全性研究》一文中研究指出目的探讨不同超声剂量对孕鼠早期胚胎的安全性。方法研究时间为2018年1月到2018年8月,选择健康SPF级昆明种孕鼠80只,早期胚胎健康,孕鼠随机分为四组:正常组(n=20)、低剂量组(n=20)、中剂量组(n=20)与高剂量组(n=20),正常组不进行超声,低剂量组、中剂量组、高剂量组分别给予0. 5 MHz、1. 0 MHz和1. 5 MHz的腹部超声,记录超声后1 d、3 d、7 d、14 d早期胚胎的微核率,小鼠胸腺、脾脏淋巴细胞数,观察各组胚胎组织的形态学变化。结果所有胚胎都安全,无致死情况发生。与正常组比较,超声后1 d、3 d、7 d、14 d低剂量组、中剂量组与高剂量组胚胎的微核率显着升高(P <0. 05),且存在剂量依赖性。与正常组比较,超声后1 d、3 d、7 d、14 d低剂量组、中剂量组与高剂量组小鼠的胸腺、脾脏淋巴细胞数显着降低(P <0. 05),且存在剂量依赖型。低剂量组、中剂量组与高剂量组小鼠胚胎组织细胞出现显着水肿,胞核肿胀,部分细胞坏死。结论超声检查孕鼠不会对早期胚胎致死,但是可降低小鼠胸腺、脾脏淋巴细胞数,提高胚胎细胞微核率,加重胚胎组织损伤,且存在剂量依赖性。(本文来源于《临床和实验医学杂志》期刊2019年15期）
仇晓飞,何翃闳,张同享,韩小红,刘敏清[5]（2019）在《Hsp70在小鼠体外早期胚胎发育中的表达》一文中研究指出为探究热休克蛋白Hsp70在小鼠体外早期胚胎发育中的表达情况以及Hsp70在胚胎发育中的作用机理,本试验采集8～12周龄SPF小白鼠的卵巢,在体式显微镜下采集卵母细胞并培养成熟,用0. 1%透明质酸酶消化卵丘卵母细胞复合体后,放入SrCl_2+CB液中进行5 h(37℃)的孤雌激活,然后移入G1培养液进行培养。取培养至2细胞期、4～8细胞期、9～16细胞期、桑椹期和囊胚期的小鼠胚胎提取总RNA,通过实时荧光定量PCR检测Hsp70在各个时期的表达情况,免疫荧光染色检测其在各个时期小鼠胚胎的表达定位。实时荧光定量PCR结果表明,Hsp70在小鼠体外早期胚胎的2细胞期、4～8细胞期、9～16细胞期、桑椹期、囊胚期都有表达,但在2细胞期胚胎和4～8细胞期胚胎的相对表达水平较高,在9～16细胞期胚胎、桑椹期胚胎和囊胚期胚胎的相对表达水平较低。免疫荧光染色结果显示,Hsp70定位于各个时期胚胎的细胞核和细胞质中,但9～16细胞期以后Hsp70主要定位于细胞核中。综上所述,Hsp70对小鼠体外早期胚胎的发育具有潜在的调控作用,这为进一步明确热休克蛋白Hsp70在胚胎抗热应激中的作用及机理研究提供了理论依据。(本文来源于《核农学报》期刊2019年09期）
王柏涵,侯思元,常志林,兰雨,刘兵[6]（2019）在《利用谱系示踪研究小鼠胚胎发育早期的Flk1~+细胞》一文中研究指出目的:了解中胚层来源的Flk1~+细胞在小鼠胚胎发育早期不同部位的分化情况,进而探索Flk1~+细胞是否在血管发育过程中有分化为周细胞等间质谱系的潜能。方法:基于Cre-LoxP系统的条件型基因敲除研究策略,利用Flk1-Cre小鼠和ROSA26报告小鼠进行谱系示踪研究。用GFP~+群体示踪Flk1~+细胞群体的命运。结合中胚层标志Flk1,造血细胞特异性标志CD45,内皮细胞特异性标志CD31、CD144以及Emcn(endomucin),周细胞特异性标志PDGFRβ和NG2,利用免疫组织化学、免疫荧光等组织检测和流式细胞术探究所关注的问题。结果:对谱系示踪小鼠Flk1-Cre;ROSA26-EYFP在胚胎发育早期不同部位的免疫组化结果显示,在背主动脉、肢芽及卵黄囊等多处造血位点周围Flk1~+细胞来源的GFP~+群体中,观察到除了造血细胞、沿血管壁特异性分布的CD31~+/Emcn~+典型内皮细胞外,还有间质样细胞等多种类型的群体。组织学研究显示这群表达在血管周围的既非造血又非内皮的细胞是周细胞。流式细胞术分析也证实,Flk1~+细胞贡献了周细胞。此外,在如背主动脉、肢芽等部位造血位点周围的GFP~+群体中还观察到小部分形态为间质样的CD31~+CD140B~+细胞群体。结论:在胚胎发育早期,中胚层来源的Flk1~+群体不仅贡献了造血、内皮、以及肌肉等谱系,还贡献了包括周细胞在内的间质谱系。推测观察到的CD31~+CD140B~+细胞群体可能是由Flk1~+祖细胞分化而来的内皮细胞,正经历着内皮间质转化EndMT,逐渐丢失内皮表面特异性标志,同时也开始表达周细胞表面标志。(本文来源于《中国实验血液学杂志》期刊2019年03期）
刘雅贤,于海泉[7]（2019）在《AAPH诱导的氧化应激对小鼠早期胚胎发育的作用及机制研究》一文中研究指出哺乳动物胚胎发育是一个受复杂信号通路严格调控的过程,同时受遗传和环境因素等多种因素影响.由体外培养环境破坏活性氧ROS平衡所引起的氧化应激反应被认为是影响体外胚胎发育的重要因素之一,但活性氧影响胚胎的机制仍有待研究.本研究首先观察了迭氮化合物2,2'-偶氮二(2-脒基丙烷)盐酸盐AAPH[2,2-Azobis(2-Amidinopropane)dihydrochloride]处理后对胚胎发育的影响,检测了胚胎的活性氧水平、线粒体膜电位和细胞凋亡情况,同时检测了合子基因组激活相关基因的表达变化,针对活性氧诱导剂AAPH影响小鼠早期胚胎发育的分子机制进行研究.结果表明,AAPH能够提高小鼠胚胎的活性氧水平,影响胚胎发育率,AAPH的作用呈现剂量依赖性,这种影响是通过降低线粒体的膜电位,进而促发细胞凋亡.同时,抑制合子基因组激活相关基因Zscan4d、eIF-1A、Hspa1b、H2afz的表达.本研究探讨了活性氧影响早期胚胎发育过程的机制,为哺乳动物体外受精培养体系的优化提供了依据.(本文来源于《内蒙古大学学报(自然科学版)》期刊2019年05期）
郑丽[8]（2019）在《Activin A对小鼠早期胚胎干细胞系建立及分化的影响》一文中研究指出小鼠多能性胚胎干细胞(mouse pluripotent embryonic stem cells,mESCs)和上胚层胚胎干细胞(epiblast stem cells,EpiSCs)分别是从囊胚内细胞团(inner cell mass,ICM)和上胚层(epiblast)分离获得。ESCs其多能性的维持依靠Mek1/2、GSK3通路抑制剂(2i)及白血病抑制因子(LIF);而EpiSCs是由激活素A(Activin A,Act A)、成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)支持。本实验室利用添加Act A和bFGF化学成分明确的培养基(不包括KSR和饲养层细胞)培养小鼠囊胚获得了一种新型胚胎干细胞系(AFSCs)。本研究首先探究单独的Act A和bFGF对小鼠早期胚胎建系及对AFSCs细胞系诱导的影响,其次,用骨形态发生蛋白4(bone morphogenetic protein4,BMP4),GSK3通路抑制剂(CHIR99021)和白血病抑制因子(leukemia inhibitory factor,LIF)分别替代AF培养基中的bFGF,形成AB,AC,AL叁种培养基,培养AFSCs,使其诱导为一种具有早期特殊胚层特征并具有自我更新能力和多能性的细胞。1.类上胚层干细胞系的建立将小鼠受精后3.5天的囊胚(E3.5)分别放入AF(Act A+bFGF)、A(Act A)、2A(2×Act A)、4A(4×Act A)和2F(2×bFGF)五种培养液中培养,在AF、2A、4A中成功获得了AF/SCs(与AFSCs的建立来源及方法相同)、2A/SCs和4A/SCs叁种类上胚层干细胞系,且建系效率分别为15%、14.3%和7.2%。4A/SCs形态上类似AF/SCs,2A/SCs呈现杂合状态,二者AP染色均有阳性细胞。与2A/SCs相比,4A/SCs中多能基因和分化基因都显着提高。2.Act A对AF/SCs细胞系的影响将建立的AF/SCs细胞系放在添加不同浓度的Act A和bFGF的6种培养液(Act A、2×Act A、4×Act A、bFGF、2×bFGF、4×bFGF)中培养,获得了6种细胞系,分别为AF-A/SCs、AF-2A/SCs、AF-4A/SCs、AF-F/SCs、AF-2F/SCs和AF-4F/SCs。AP染色结果显示添加Act A组的阳性细胞数要比添加bFGF组的细胞数多。另外AF-4A/SCs高表达Nanog、Gata4和Cdx2;但AF-4A/SCs嵌合结果显示在胚胎和胚外结构中没有标记细胞,不具备贡献到胎儿的能力。3.Act A和BMP4共同作用对AF/SCs细胞系的影响由BMP4、CHIR99021和LIF分别替代AF/SCs培养基中的bFGF,对AF/SCs进行诱导,诱导后的细胞系分别命名为AF-AB/SCs、AF-AC/SCs和AF-AL/SCs。AF-AB/SCs和AF-AL/SCs与AF/SCs克隆形态相似,AP都呈阳性。AF-AB/SCs和AF-AL/SCs中高表达Nanog、Gata6和T。通过嵌合体制备技术证明:当把AF-AB/SCs和AF-AL/SCs注射到8细胞胚胎,在体外培养44小时,发现两种细胞既贡献到ICM又贡献到滋养外胚层(trophectoderm,TE)。进一步进行体内移植实验结果证明AF-AB/SCs只贡献到E6.5的胚外组织,而AF-AL/SCs既不贡献到胚胎也不贡献到胚外组织。转录组分析结果显示:AF/SCs、AF-AB/SCs和AF-AL/SCs有不同的基因表达模式,AF-AB/SCs中发育调节基因上调,部分差异表达基因富集于胚胎外组织发育和多能性信号通路。综上所述,Act A具有单独支持和维持干细胞自我更新的能力。Act A和BMP4可以将AF/SCs转化为类中胚层干细胞。由于人的ESCs的培养条件也是依赖Act A和bFGF,这个研究为人的ESCs培养及分化提供了新的见解。(本文来源于《内蒙古大学》期刊2019-06-05）
张喜美佳[9]（2019）在《长非编码RNA Gtl2在小鼠早期胚胎中调控转录因子Oct4的分子机制》一文中研究指出Gtl2基因位于小鼠12号染色体末端的Dlk1-Dio3印记区间,其转录的长非编码RNA Gtl2对胚胎发育和肿瘤发生都具有重要功能。本实验室前期对小鼠早期胚胎的研究发现,Gtl2于桑葚胚期开始表达,并最终特异性定位于囊胚内细胞团(ICM)。功能研究表明,干扰Gtl2的表达虽然不影响囊胚发育率,但会影响囊胚的孵化(hatching)、体外生长(outgrowth)和内细胞团(ICM)的形成。进一步研究发现,Gtl2的表达下调导致囊胚ICM特异性转录因子Oct4的表达下降,提示Gtl2很可能通过影响Oct4而发挥作用。前期实验已经证实,Gtl2可能作为ceRNA(competing endogenous RNA)通过miRNA途径调控Oct4的表达,从而在早期胚胎中发挥作用。因此,本课题旨在筛选可能与Gtl2结合并调控Oct4的候选miRNA,并揭示Gtl2在小鼠早期胚胎中调控Oct4可能的分子机制。首先,利用生物信息学网站工具并结合已发表的论文,我们筛选出既能与Gtl2有潜在结合能力又被实验证实可以下调Oct4的候选miRNAs:let-7c(2个结合位点)、miR-24、miR-29a、miR-31和miR-135b。进而通过双荧光素酶报告系统证实,let-7c的两个结合位点都与Gtl2具有显着的结合能力,而miR-24、miR-29a和miR-135b也能与Gtl2发生结合,只有miR-31未检测到与Gtl2的结合。因此,我们将let-7c、miR-24、miR-29a、和miR-135b作为候选miRNA进行下一步研究。在细胞水平,我们利用Gtl2高表达的MLTC-1细胞(小鼠睾丸间质细胞瘤细胞)验证候选miRNAs与内源Gtl2的相互作用,结果表明只有let-7c与内源Gtl2存在明显的结合。我们又利用另一种表达Gtl2的N2a细胞(小鼠神经母细胞瘤细胞),进一步证实let-7c与内源性Gtl2存在相互作用。因此,我们将let-7c作为最终候选miRNA,在胚胎水平进行进一步验证。在胚胎水平,我们通过挽救实验(rescue)证实,Gtl2能够挽救let-7c过表达所导致的囊胚体外生长过程中的ICM缺失,提高Oct4的表达水平,从而恢复胚胎的发育能力。说明Gtl2可以在早期胚胎内与let-7c发生相互作用,通过let-7c影响Oct4的表达,进而在早期胚胎中调控ICM的形成。综上所述,本课题筛选得到了与Gtl2结合并调控Oct4表达的候选miRNAs,并在细胞水平证实let-7c与内源Gtl2具有结合能力,进而在胚胎水平初步阐明了let-7c介导Gtl2调控Oct4的分子机制。此论文的研究成果,为深入理解Gtl2对早期胚胎发育及ICM的形成和分化机制奠定基础,为胚胎干细胞(ESC)和诱导多能干细胞(iPSC)等相关研究提供理论依据和参考。(本文来源于《哈尔滨工业大学》期刊2019-06-01）
田俊良[10]（2019）在《靶向修饰H19/IGF2的CTCF结合位点DNA甲基化对小鼠胚胎干细胞及早期胚胎发育的影响》一文中研究指出基因组印记(Genomic Imprinting)是控制印记基因(imprinted genes)表达的表观遗传调节机制,通过选择性地沉默父本或母本来源的一个等位基因,参与调节哺乳动物生长和发育,并与家族遗传病有关。人的印记基因H19和Igf2连锁位于染色体11p15.5区,由一套增强子调节基因表达,受H19/Igf2基因间的差异甲基化区域DMR(Differentially Methylated Region)控制,DMR区域的甲基化影响CTCF(CCCTC-binding factor)的结合控制H19和Igf2差异性表达,但目前对CTCF结合区域DNA甲基化的调节还有待认识。本研究利用CRISPR/dCas9介导的DNMT3A或TET特异修饰CTCF结合位点DNA甲基化状态,研究其对印记基因的表达、胚胎干细胞的细胞全能性和早期胚胎发育的影响。本研究首先利用CRISPR/dCas9技术,针对H19/Igf2的CTCF的四个结合位点,设计了8种gRNA,构建pgRNA-humanized-Igf2载体,同时与CRISPR/dCas9-Dnmt3a和CRISPR/dCas9-Tet载体组合共转染小鼠胎儿成纤维细胞(MEFs)后,显示针对CTCF第叁个位点的gRNA对Igf2的表达的影响最明显。亚硫酸氢盐测序结果表明,该gRNA引导的CRISPR/dCas9-Dnmt3a可提高靶位点甲基化,提高MEFs中Igf2的表达,CCK8检测显示MEFs细胞的增殖速度加快,细胞周期检测显示MEFs细胞周期缩短;该gRNA引导的CRISPR/dCas9-Tet可降低靶位点甲基化,降低MEFs中Igf2的表达,MEFs细胞增殖速度减慢,细胞周期延长。本研究还检测了以上两种修饰载体共转后对检测对Igf2相关基因的影响,结果表明,Igf1r、Irs1、Akt1、Mapk1基因的表达与Igf2的表达正相关。当将该gRNA与CRISPR/dCas9-Dnmt3a共转小鼠胚胎干细胞后,靶位点甲基化程度明显提高,Igf2基因表达升高,细胞多能相关基因Nanog、Oct4的表达无影响。为研究靶向修饰CTCF结合位点甲基化对小鼠早期胚胎发育的影响,对受精卵进行胞浆注射。结果表明,针对第叁个CTCF结合位点的gRNA引导的CRISPR/dCas9-Dnmt3a可显着提高Igf2的表达,小鼠胚胎2细胞和4细胞的发育率提高,小鼠胚胎的发育速度有所加快。注射后,从合子期到囊胚期胚胎,Igf1、Igf2r的表达下降,Igf1r、Akt1、Mapk1、Irs1、Rps6、mTOR的表达升高。综上所述,CRISPR/dCas9方法介导的DNMT3A或TET可以对H19/Igf2基因座CTCF结合位点进行DNA甲基化修饰,并影响Igf2基因的表达,同时影响Igf2相关基因的表达,但对小鼠胚胎干细胞多能型基因的表达无影响;原核注射CRISPR/dCas9-Dnmt3a可显着提高Igf2的表达,并提高胚胎发育率和发育速度。本研究为进一步探讨印记基因的调节机制奠定了基础。(本文来源于《内蒙古大学》期刊2019-06-01）
小鼠早期胚胎论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
根据时空上的不同,小鼠胚胎发育时期的血细胞发生目前被分为原始造血、红系/髓系祖细胞(EMPs)的产生和造血干细胞(HSCs)成熟并分化为各种血细胞3个阶段。最新的观点也把原始造血和EMPs的产生归结为非HSCs依赖性的血细胞谱系分化阶段,将第3阶段称为HSCs依赖性的血细胞谱系分化阶段。尽管胚胎时期的血细胞发生涉及多个造血器官,但本文中我们主要对近年在细胞和分子水平进行的造血细胞和HSCs在卵黄囊和腹主动脉-性腺-中肾(AGM)区发育的研究进行归纳总结,以此展示新近发现的胚胎发育早期血细胞发生的特点及其潜在机制。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
小鼠早期胚胎论文参考文献
[1].何金英,任宇,刘慧,黄翔华,马玉珍.纤维蛋白基因对大鼠早期胚胎发育的影响[J].中国计划生育和妇产科.2019
[2].刘东华,何曦,裴一岩,梁雨森,李凌衡.小鼠胚胎早期血细胞发生的研究进展[J].解剖学报.2019
[3].馨娅.小鼠早期胚胎发育过程中全胚层谱系发生的时空转录组图谱问世[J].科学.2019
[4].刘敏,祁文甲,吕青青.不同超声剂量对孕鼠早期胚胎的安全性研究[J].临床和实验医学杂志.2019
[5].仇晓飞,何翃闳,张同享,韩小红,刘敏清.Hsp70在小鼠体外早期胚胎发育中的表达[J].核农学报.2019
[6].王柏涵,侯思元,常志林,兰雨,刘兵.利用谱系示踪研究小鼠胚胎发育早期的Flk1~+细胞[J].中国实验血液学杂志.2019
[7].刘雅贤,于海泉.AAPH诱导的氧化应激对小鼠早期胚胎发育的作用及机制研究[J].内蒙古大学学报(自然科学版).2019
[8].郑丽.ActivinA对小鼠早期胚胎干细胞系建立及分化的影响[D].内蒙古大学.2019
[9].张喜美佳.长非编码RNAGtl2在小鼠早期胚胎中调控转录因子Oct4的分子机制[D].哈尔滨工业大学.2019
[10].田俊良.靶向修饰H19/IGF2的CTCF结合位点DNA甲基化对小鼠胚胎干细胞及早期胚胎发育的影响[D].内蒙古大学.2019
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