导读:本文包含了绿色糖单孢菌论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:麦芽糖α-淀粉酶,枯草芽孢杆菌,高效表达,优化
绿色糖单孢菌论文文献综述
柳梅梅,谢敏,杨燕芳,刘滔滔,杜丽琴[1]（2016）在《绿色糖单孢菌麦芽糖α-淀粉酶基因在枯草芽孢杆菌中的高效分泌表达》一文中研究指出【目的】构建高产麦芽糖α-淀粉酶的工程菌株并实现高效分泌表达。【方法】PCR扩增麦芽糖α-淀粉酶基因sva,再与大肠杆菌-枯草芽孢杆菌麦芽糖诱导型穿梭载体pHCMCO4-Pglv连接,构建重组质粒pHCMCO4-Pglv-sva并转入枯草芽孢杆菌进行表达,对重组酶进行SDS-PAGE分析,然后对重组菌株的生长及发酵条件进行优化。【结果】成功构建重组质粒pHCMCO4-Pglv-sva并在枯草芽孢杆菌中实现分泌表达,SDS-PAGE分析发现,在55kDa处得到特异性蛋白条带。单因素试验结果显示,重组菌的最适诱导温度为35℃,最适接种量为4%(V/V),最适装液量为30mL。正交实验结果显示,重组菌的最佳发酵条件组合是诱导温度37℃、接种量5%(V/V)、装液量25mL,在此条件下发酵液粗酶活力达到257.3698U/mL。装液量对重组菌的产酶量影响显着。【结论】成功构建能高效分泌表达麦芽糖α-淀粉酶的枯草芽孢杆菌工程菌株,经发酵条件优化后,重组酶产量显着提高10倍左右。(本文来源于《广西科学》期刊2016年01期）
王俊芬,吴玉英,谢响明,杨淼[2]（2015）在《绿色糖单孢菌木聚糖酶Svixyn10A基因在不同菌株表达分泌的木聚糖酶对纸浆预漂白效果》一文中研究指出生物酶制取成本过高是影响纸浆生物漂白推广商用的首要因素,如何降低产酶成本就成为生物漂白研究要考虑的首要问题。采用绿色糖单孢菌木聚糖酶基因在大肠杆菌、毕赤酵母菌中表达分泌的木聚糖酶处理桉木硫酸盐浆,考察其预漂白效果,并与酵母菌表达的胞外酶、商用木聚糖酶的效果进行对照。结果表明:毕赤酵母菌表达的木聚糖酶对纸浆的预处理效果良好;当预处理酶用量20 IU·g-1浆,处理时间60 min,后续DED叁段漂白总用氯量2.4%时,可使桉木硫酸盐浆白度达到89%ISO;与商品木聚糖酶相比,漂后纸浆黏度损失较少,白度稳定性更好。(本文来源于《纸和造纸》期刊2015年01期）
玉王宁,刘伟娜,郑菲,厚凌宇,王晓宇[3]（2014）在《嗜热绿色糖单孢菌木聚糖酶XyN10A基因在毕赤酵母中的分泌表达及其酶学性质研究》一文中研究指出木聚糖酶(Xylanase)可降解自然界中大量存在的木聚糖类半纤维素,由于其在饲料、食品、造纸等领域的广泛应用,越来越受到人们的关注。利用分子生物学技术首次成功构建了一株高效表达嗜热绿色糖单孢菌(Saccharomonospora viridis)木聚糖酶SviXyN10A的重组工程菌,建立了SviXyN10A的毕赤酵母表达体系,实现了SviXyN10A在毕赤酵母(Pichia pastoris)中的分泌表达,并对表达产物进行了诱导表达及纯化,以及酶学性质的研究。结果表明,重组木聚糖酶SviXyn10A用甲醇诱导2 d后酶活即达到7.53IU/mL,最适反应温度为70℃,pH7.0。pH作用范围较广(pH5.0-9.0),具有较强的热稳定性和耐碱性,几乎没有纤维素酶活性,故可以应用在很多工业领域,尤其是在纸浆造纸行业具有很大的潜在应用价值。(本文来源于《生物技术通报》期刊2014年06期）
杨颖,玉王宁,金一,刘伟娜,王晓宇[4]（2013）在《常压室温等离子体快速诱变绿色糖单孢菌筛选木聚糖酶高产菌株及其酶学性质研究》一文中研究指出【目的】利用常压室温等离子体快速诱变绿色糖单孢菌,筛选耐热耐碱木聚糖酶高产菌株,并对其进行酶学性质分析,确保其适用于生物制浆漂白工艺。【方法】采用刚果红平板水解圈法结合摇瓶发酵胞外酶测定法进行菌株筛选,并通过DNS木聚糖酶活性测定等方法对来源于不同突变株的木聚糖酶进行酶学性质分析对比。【结果】筛选出遗传稳定性良好的两株木聚糖酶高产菌株AT24和AT22-2,以麦草浆为诱导底物的粗酶液中,突变株AT24及AT22-2所产的木聚糖酶活性分别为512.74、552.70 U/mL,分别为原始菌株S.v的16和17倍的。来源于突变株AT22-2的木聚糖酶的最适反应pH为9.5,最适反应温度为90°C,在50°C 90°C温度范围内具有良好的热稳定性,在100°C条件下处理30 min剩余酶活仍为68%;突变株AT24所产木聚糖酶的最适反应温度为60°C,最适pH为10.0,在60°C 80°C的高温环境下,突变株AT24所产的木聚糖酶具有良好的热稳定性。【结论】突变株AT22-2所产具有耐碱耐高温性质的木聚糖酶,在应用领域尤其在纸浆造纸行业具有较大的潜在应用价值。(本文来源于《微生物学通报》期刊2013年05期）
汪小波,李美蓉,李雪,黄坚丽,黄英[5]（2013）在《绿色糖单孢菌高产麦芽糖α-淀粉酶基因的克隆表达及酶学性质》一文中研究指出为开发新型淀粉酶,鉴定了来自绿色糖单孢菌(Saccharomonospora viridis)在Genbank中注释为糖苷酶(Glycosidase)的一个ORF,研究表明该ORF编码一种α-淀粉酶.重组酶酶学性质的研究表明以可溶性淀粉为底物反应的最适pH为6.6,在pH 5.6-8.6有80%以上的相对活力,最适温度为60℃,比活力为319.49 U/mg.它与可溶性淀粉、六糖、五糖、四糖、叁糖反应,经HPLC检测产物均为麦芽叁糖、麦芽糖和葡萄糖的混合物.重组酶与20%的可溶性淀粉反应,产物含有高达67.15%的麦芽糖,还原糖的转化率约为75%,加入普鲁兰酶后,麦芽糖含量增加到69.7%,还原糖转化率约为91%,不能与麦芽糖、α-环糊精、β-环糊精和普鲁兰糖反应.(本文来源于《应用与环境生物学报》期刊2013年02期）
杨颖[6]（2013）在《常压室温等离子体快速诱变绿色糖单孢菌筛选木聚糖酶高产菌株及其酶学性质研究》一文中研究指出近几年,微生物来源的木聚糖酶由于其在不同工业领域的应用潜力吸引了科研工作者的广泛关注。在纸浆漂白领域,碱性木聚糖酶的应用可以降低漂白技术中含氯化合物的使用量,满足日渐严格的环保要求标准,是未来纸浆漂白的发展趋势。本研究以绿色糖单孢菌(Saccharomonospora viridis)为出发菌株,利用常压室温等离子体对其进行诱变处理,采用刚果红平板水解圈法结合摇瓶发酵胞外酶测定法筛选耐碱耐高温的木聚糖酶高产菌株,并通过DNS木聚糖酶活性测定等方法对来源于不同突变株的木聚糖酶进行酶学性质的对比分析。此外,本文还对六株突变株的木聚糖酶基因序列及氨基酸序列进行了初步研究。主要结果如下：1.筛选得到6株遗传稳定性良好的木聚糖酶高产菌株,分别是AT22-2、 AT24、AT28、AT29、CT22和BT76。这些突变株分泌的木聚糖酶与出发菌株S.v相比活性分别提高了16.51、15.24、4.30、55.75、12.45、8.94倍。2.对于六株突变株分泌的木聚糖酶的酶学性质进行分析,发现它们之间存在很大差异。其中,突变株AT22-2、AT24、AT29和CT22所分泌的木聚糖酶具有良好的热稳定性和耐碱性,在生物漂白技术应用中存在潜力。3.通过将6株突变株木聚糖酶基因及氨基酸序列与出发菌株进行多序列比对发现,突变株AT24、AT28、AT29和BT76的木聚糖酶基因序列均发生了碱基的变化,并导致氨基酸序列的部分改变。突变株AT22-2与CT22与出发菌株的木聚糖酶基因序列完全一致。这一结果为进一步研究木聚糖酶的活性及性质改变的分子机制提供了一定的分析依据。(本文来源于《北京林业大学》期刊2013-04-01）
王子元[7]（2012）在《绿色糖单孢菌木聚糖酶基因的克隆表达与酶学性质研究》一文中研究指出β-木聚糖酶是能水解含有p-1,4-木糖苷键的内切水解酶。它是半纤维素酶类中具有代表性的组分,主要存在于微生物、植物和低等动物中,在食品、饲料、制药、造纸、能源以及环境保护等多方面都有着重要的应用价值。本研究从放线菌来源的绿色糖单孢菌中克隆出木聚糖酶基因Svixyn10A,并对基因表达产物进行酶学性质分析。Svixyn10A包含1,374bp碱基对,编码由457个氨基酸组成的多肽链,由一个带信号肽的水解糖苷酶家族10的催化结构域,一个富含甘氨酸的短连接域和一个家族2的纤维素结合域(CBM)构成。该木聚糖酶的氨基酸序列与Streptomyces lividans TK24(ZP05528201)来源的木聚糖酶具有最高的同源性(57%)。含组氨酸标记的重组木聚糖酶SviXyn10A在大肠杆菌中表达并纯化。SviXyn10A的最适反应pH和温度分别为8.0和60℃。与其他嗜热及嗜温的的木聚糖酶相比,SviXyn10A在高温条件下具有更高的活性,在65-70。C范围内仍有>63%的最高酶活,并且在80。C时仍有40%左右的酶活。SviXyn10A还具有广泛的pH适应性(在pH5.0-11.0的范围内仍有>35%的酶活)和耐碱性(在37℃,pH8.0-11.0范围内保温处理1小时后仍有>70%的酶活),且有很高的耐热性(在70℃,pH8.0下保温处理3小时后仍有>75%的酶活)。本研究首次报道了糖单孢菌属的耐热耐碱性木聚糖酶,通过对该菌来源的木聚糖酶基因的克隆表达与酶学性质研究,证明该酶良好酶学特性在造纸制浆工业中具有极大的应用潜力。(本文来源于《北京林业大学》期刊2012-06-18）
王子元,王晓宇,谢响明[8]（2012）在《绿色糖单孢菌木聚糖酶的分离纯化与酶学性质研究》一文中研究指出木聚糖酶是一种重要的具有工业应用前景的木聚糖降解酶,在充分利用自然资源、保护生态环境等方面具有十分重要的意义.通过硫酸铵分级沉淀及Sephadex G-100凝胶柱层析方法从一株中度耐热耐碱放线菌—绿色糖单孢菌的胞外酶中纯化得到单一的木聚糖酶,相对分子质量为51 kD,酶纯度提高了13.01倍.纯酶最适反应温度为60℃,最适反应pH值为7.0;75℃以下该酶具有良好的热稳定性,在pH 7～10范围内具有较强的耐受力.金属离子Ca2+、Fe2+、Zn2+对该酶具有明显促进作用,Cu2+、Mn2+、Al3+和SDS具有抑制作用而K+,Na+,Mg2+没有明显的作用.该酶为大分子质量的糖基化蛋白,含糖量为21.96%.(本文来源于《生命科学研究》期刊2012年02期）
丁梦璇,刘炳梅,张国庆,翟楠,谢响明[9]（2011）在《绿色糖单孢菌木质素过氧化物酶的分离纯化及鉴定》一文中研究指出木质素过氧化物酶是一种重要的具有工业应用前景的木质素降解酶,但已报道真菌来源的木质素过氧化物酶只能在酸性低温条件下发挥作用,限制了其进一步的工业应用。通过培养一株耐热耐碱放线菌——绿色糖单孢菌发酵产酶,采用DEAE-Cellulose,CM-Cellulose和Superdex 75凝胶过滤层析等分离纯化方法,得到一种具有耐热耐碱特性的木质素过氧化物酶。经凝胶电泳检测其为单一蛋白,分子量为41kD。最终纯化倍数达到20倍,活性回收率为6%。采用LTQ法对纯酶进行蛋白质归类鉴定,得到其部分氨基酸片段,为该酶的进一步分子生物学研究奠定基础。(本文来源于《生物技术通报》期刊2011年08期）
翟楠[10]（2011）在《绿色糖单孢菌胞外酶预漂粗皮桉化学浆的研究》一文中研究指出本研究利用绿色糖单孢菌分泌的胞外酶对粗皮桉化学浆进行了预处理,探讨了预漂白的最佳工艺条件、预处理对于后续化学漂白的促进作用以及生物酶漂白的作用机理等内容。绿色糖单孢菌胞外酶漂白桉木KP浆和桉木AS-AQ浆的最佳工艺条件为：酶用量3U/g(以木素过氧化物酶计),pH值7.0,时间120min,温度70℃,浆浓10%,H202浓度0.1mmol·L-1当增加酶漂环节时,DED叁段漂的总用氯量仅为2.8%时,就可使桉木KP浆和AQ-AQ浆白度均达到82%ISO以上。经过生物预处理后,DED叁段漂过程中只需采用70%的总用氯量即可达到原有的白度,同时漂白废水的悬浮物SS、色度和CODcr下降幅度均在20%以上,助漂效果十分理想。生物酶预处理在一定程度上降低了纸浆的卡伯值,同时增加了纸浆白度,但是生物酶预漂的主要作用在于提升后续漂白的性能。在纸浆性能方面,酶处理对于桉木KP浆的处理效果略优于AS-AQ浆；而对于降低漂白过程中废水的污染负荷方面,增加酶处理对于桉木AS-AQ浆污染负荷的降低要比KP浆更加明显一些。绿色糖单孢菌胞外酶对纸浆有明显的降解作用,纸浆纤维表面出现局部断裂、孔洞及沟槽,使其纤维结构变得疏松,进一步暴露了内部的木素结构,促进了后续化学漂白过程中化学漂剂的渗透。同时,胞外酶对纤维素的无定型区产生了一定程度的破坏。绿色糖单孢菌分泌的胞外复合酶同时含有木聚糖酶和木素过氧化物酶,不仅可以降解木聚糖,同时还可以直接对木素进行破坏,还减少了纸浆中的发色基团和助色基团。酶漂后的纸浆木素产生了更多的羟基,可增强后续化学漂白过程中木素的反应活性；断裂掉了木素的部分侧链、氧化了一定量的碳水化合物；另外,在降解过程中紫丁香型结构的木素较易被降解,愈疮木基型木素更多的得到了保留。(本文来源于《北京林业大学》期刊2011-05-01）
绿色糖单孢菌论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
生物酶制取成本过高是影响纸浆生物漂白推广商用的首要因素,如何降低产酶成本就成为生物漂白研究要考虑的首要问题。采用绿色糖单孢菌木聚糖酶基因在大肠杆菌、毕赤酵母菌中表达分泌的木聚糖酶处理桉木硫酸盐浆,考察其预漂白效果,并与酵母菌表达的胞外酶、商用木聚糖酶的效果进行对照。结果表明:毕赤酵母菌表达的木聚糖酶对纸浆的预处理效果良好;当预处理酶用量20 IU·g-1浆,处理时间60 min,后续DED叁段漂白总用氯量2.4%时,可使桉木硫酸盐浆白度达到89%ISO;与商品木聚糖酶相比,漂后纸浆黏度损失较少,白度稳定性更好。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
绿色糖单孢菌论文参考文献
[1].柳梅梅,谢敏,杨燕芳,刘滔滔,杜丽琴.绿色糖单孢菌麦芽糖α-淀粉酶基因在枯草芽孢杆菌中的高效分泌表达[J].广西科学.2016
[2].王俊芬,吴玉英,谢响明,杨淼.绿色糖单孢菌木聚糖酶Svixyn10A基因在不同菌株表达分泌的木聚糖酶对纸浆预漂白效果[J].纸和造纸.2015
[3].玉王宁,刘伟娜,郑菲,厚凌宇,王晓宇.嗜热绿色糖单孢菌木聚糖酶XyN10A基因在毕赤酵母中的分泌表达及其酶学性质研究[J].生物技术通报.2014
[4].杨颖,玉王宁,金一,刘伟娜,王晓宇.常压室温等离子体快速诱变绿色糖单孢菌筛选木聚糖酶高产菌株及其酶学性质研究[J].微生物学通报.2013
[5].汪小波,李美蓉,李雪,黄坚丽,黄英.绿色糖单孢菌高产麦芽糖α-淀粉酶基因的克隆表达及酶学性质[J].应用与环境生物学报.2013
[6].杨颖.常压室温等离子体快速诱变绿色糖单孢菌筛选木聚糖酶高产菌株及其酶学性质研究[D].北京林业大学.2013
[7].王子元.绿色糖单孢菌木聚糖酶基因的克隆表达与酶学性质研究[D].北京林业大学.2012
[8].王子元,王晓宇,谢响明.绿色糖单孢菌木聚糖酶的分离纯化与酶学性质研究[J].生命科学研究.2012
[9].丁梦璇,刘炳梅,张国庆,翟楠,谢响明.绿色糖单孢菌木质素过氧化物酶的分离纯化及鉴定[J].生物技术通报.2011
[10].翟楠.绿色糖单孢菌胞外酶预漂粗皮桉化学浆的研究[D].北京林业大学.2011