基因可能功能论文-苏星

基因可能功能论文-苏星

导读:本文包含了基因可能功能论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:全基因组外显子测序,细胞分化周期蛋白27,神经纤维瘤病Ⅰ型基因,X染色体关联的泛素特异性蛋白酶9

基因可能功能论文文献综述

苏星[1](2018)在《全基因组外显子测序发现的叁种PSIS可能致病基因的体外功能验证》一文中研究指出目的:探究叁种由全基因组外显子测序筛选所得的PSIS可能致病基因体外的功能验证,为垂体柄中断综合征病因研究的体内实验提供理论依据。方法:利用全基因组外显子测序技术对1例合并中枢性性早熟的垂体柄中断综合征患儿及父母(一共叁例,父母为对照)进行基因,经过对比和深入分析,初步确定可能的致病基因。针对上述的基因,首先进行确认,进一步设计小干扰RNA(siRNA)分别转染至GH3细胞内,每种基因均设置实验纸阴性对照组(Negative Control Group,NC)、空白对照组(Blank Group)。通过RT-PCR筛选出各基因最佳的siRNA敲低序列以用于复筛,Western Blot(WB)复筛各基因最佳敲低序列在蛋白水平的表达,以确定目标基因进行下一步研究。依次运用CCK-8(cell counting kit-8)检测细胞增殖能力及形态,细胞划痕实验检测细胞迁移,酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测细胞分泌功能,WB检测垂体特异性转录因子-1(pit-oct-uncclass 1 homeobox 1,POU1F1)和垂体特异性转录因子祖先蛋白(homeoboxproteinprophetofPit-1,PROP1)表达水平。结果:1)经过分析患者基因结果,并与父母比对,发现有叁个基因有明显突变,分别是细胞分化周期蛋白27(cell division cycle protein 27,CDC27)、神经纤维瘤病1型(neurofibromatosis type 1,NF1)、X染色体关联的泛素特异性蛋白酶9(ubiquitin specific peptidase 9,X-Linked,USP9X);2)CDC27 在 siRNA-117 和siRNA-1968序列时能够达到稳定的沉默效率,并且在mRNA及蛋白两个水平上均能够被敲低,NF1和UPS9X仅能在mRNA水平实现敲低而没有实现蛋白水平的敲低,无法进行后续实验;3)CDC27沉默对于细胞的增殖及形态无明显影响(P>0.05);4)CDC27沉默能够明显抑制细胞的迁移能力(P<0.05);5)CDC27能够明显下调POU1F1与PROP1的表达水平(P<0.05);6)CDC27沉默能够明显抑制细胞分泌生长激素(growth hormone,GH)、泌乳素(prolactin,PRL)分泌(P<0.05),对促甲状腺激素(thyroid stimulating hormone,TSH)分泌的影响无明显差异(P>0.05)。结论:利用全基因组外显子测序技术对该例中枢性性早熟的PSIS患者的测序分析发现叁个可能的致病基因,其中CDC27沉默可以抑制GH3细胞的迁移及其生长激素、泌乳素的分泌和下调POU1F1与PROP1的表达。(本文来源于《中国人民解放军医学院》期刊2018-05-23)

岳崟,王丽梅,刘仁禄,刘志国,刘烈炬[2](2015)在《学习与记忆功能可能相关的基因研究现状》一文中研究指出学习与记忆是大脑极为重要的两种生理功能,它们两者是相互区别又相互联系的神经生物学过程。学习指的是从外界获取新知识的生物学过程,而记忆是对所获取知识的储存与重新整理的过程。学习记忆过程是人类适应环境变化,依据环境以及经验,来做出相应的反应以适应环境的过程。换言之,一个人毕生的成就,大部分取决于他所获取的知识与掌握的技能,因此学习与记忆功能在人类的一生中扮演着(本文来源于《神经解剖学杂志》期刊2015年01期)

孙春莲[3](2014)在《类受体激酶基因StLRPK1在本氏烟中的晚疫病抗性功能鉴定及其介导的可能信号途径分析》一文中研究指出马铃薯是继水稻、小麦、玉米之后的第四大粮食作物。目前,全世界马铃薯生产面临的最大问题是由致病疫霉菌(Phytophthora infestans (Mont.) De Bary.)引起的晚疫病,严重时导致作物绝收。植物抵抗病害的先天免疫系统主要由病原相关分子模式(PAMPs)激发的PTI和效应蛋白激发的ETI两个免疫反应组成。PTI是植物抵御病原微生物的重要机制,具有广谱持久的特点。前期研究中实验室在马铃薯中克隆到一个类受体激酶基因StLRPK1,初步研究显示StLRPK1可能作为模式识别受体在晚疫病持久抗性中起着重要的作用。本研究旨在通过在模式植物本氏烟草草中异源超量表达StLRPK1,进一步研究StLRPK1在晚疫病抗性中的作用,探讨StLRPK1介导的抗病信号传导途径,以期为利用PTI途径关键基因培育广谱、持久的马铃薯抗病新品种提供新思路和新方法。主要结果如下:1、为利用农杆菌介导的瞬时表达技术在本氏烟草中高效表达外源蛋白,为将来开展StLRPK1蛋白活体免疫共沉淀研究打下基础,构建了pCB302-3-GFP的双元表达载体。通过优化表达条件,包括通过检测荧光蛋白GFP的表达发现:共同注射基因沉默抑制子p19、调整农杆菌菌液浓度OD600为0.8-1.0之间、农杆菌侵染3-5天时,GFP在本氏烟草中表现很强的荧光,表明以pCB302-3为载体,通过优化条件可以实现外源蛋白在本氏烟草草中高效表达。2、获得了超量表达StLRPK1的本氏烟草稳定转基因株系。晚疫病原菌接种鉴定表明:超量表达StLRPK1后,转基因株系对晚疫病抗性明显增强;组织化学染色显示:超量表达株系接种点周围活性氧和胼胝质累积增强;转基因株系中的两个PTI信号途径重要Marker基因Pti5和Acre31的表达量比对照明显增高。进一步证明StLRPK1在晚疫病抗性中具有重要作用3、为了探索晚疫病菌分泌的效应子(Effectors)对StLRPK1介导的PTI的抑制作用,利用在转基因本氏烟草叶片上瞬时表达效应子,再在注射点附近接种晚疫病原菌的方法,从18个效应子中筛选出了4个能够显着抑制StLRPK1介导抗性的效应子,为深入开展这些效因子如何调控StLRPK1介导的PTI奠定了基础。4、探索了StLRPK1可能参与的防卫信号传递途径。转基因株系中WRKY8下游基因NADP-ME和HMGR2的表达量与对照相比明显增强。但VIGS沉默转基因本氏烟草中与MAPK信号途径有关的MKK3、MPK2、MPK1、MPK3基因后,沉默株系中WRKY8及其下游基因NADP-ME和HMGR2的相对表达量总体上变化趋势不明显。结果表明StLRPK1介导的PTI与MAPK信号途径相关,但还需进一步严格验证。5、在细菌中成功表达、纯化了StLRPK1的激酶结构域;与γ-32P-ATP哺育后没有检测到特异的放射性产物,表明StLRPK1激酶域可能没有自激活性。黄色荧光互补实验初步证明StLRPK1与PTI信号传导关键组份BAK1蛋白可能互作,为深入研究StLRPK1介导PTI信号识别与传递奠定了基础。(本文来源于《华中农业大学》期刊2014-06-01)

杨曼曼[4](2014)在《TRIM28基因克隆和可诱导稳定表达细胞系的建立及其可能的功能分析》一文中研究指出目的:①将TRIM28克隆到可诱导表达载体,建立稳定表达TRIM28的细胞系。②探讨TRIM28调控蛋白表达水平及其对靶基因的稳定性作用,揭示其生物学新功能。③检测TWIST的泛素化,探讨TRIM28是否具有调节TWIST的泛素化作用及其调节机制。方法:首先,将TRIM28克隆到可诱导表达载体;以已有TRIM28的cDNA作为模板,高保真PCR多聚酶扩增,用EcoRV和NheI双酶切将pcDNA5/ FRT/TO表达载体消化后与相同内切酶消化的TRIM28连接,获得pc DNA5/FRT/TO/TRIM28重组质粒。其次,建立稳定的表达TRIM28细胞系并分析其表达和可能的功能;将pcDNA5/FRT/TO/TRIM28重组质粒转染入宿主细胞Flp-InTMT-RExTM-293细胞系,潮霉素B筛选获得阳性克隆。再次,将获得的pcDNA5/FRT/TO/TRIM28转染入内源性表达TWIST的4T1细胞中,通过Real-Time PCR和WB分析TRIM28对TWIST的可能调节作用。本课题完成了如下实验:1、经酶切、PCR和测序验证了阳性克隆;2、采用不同剂量的DOX以及不同作用时间对pcDNA5/FRT/TO-TRIM28 HEK293 (293-TRIM28)细胞系进行诱导表达,用Western blotting检测TRIM28的表达情况;3、将重组质粒pcDNA5/FRT/TO/TRIM28转染入4T1细胞,并通过免疫印迹分析其在细胞内的表达情况。4、在内源性表达TWIST的4T1细胞中转入TRIM28和空载体,通过WB检测其刘TWIST的调节作用。5、MDA-MB-435细胞加入蛋白质泛素化抑制剂MG-132,不同时间处理,免疫印迹分析TWIST的稳定性。6、DOX诱导pcDNA5/ FRT/TO-TRIM28 HEK293 (293-TRIM28)细胞系,同时过表达TWIST和UB,用WB检测TWIST的泛素化。结果:构建了pcDNA5/F RT/TO/TRIM28重组质粒及可被DOX诱导的稳定表达pcDNA5/TRIM28的细胞系。将空载体和重组质粒转入细胞,发现无论加DOX还是不加DOX诱导转染了空载体pcDNA5/FRT/TO的对照组HEK293细胞系中,都检测不到TRIM28的表达。而转染了pcDNA5/FRT/TO-TRIM28的HEK293细胞系中在加入DOX诱导后,发现TRIM28有较高的表达,而在没有加DOX诱导的细胞系中未检测到表达。同时我们发现在诱导表达时0.001μg/ml的DOX即可诱导pcDNA5/TRIM28细胞系的表达,0.01μg/ml的DOX可使pcDNA5/TRIM28细胞系的表达明显增强,DOX的浓度增加为0.1μg/ml时,TRIM28的表达最为显着。DOX对该细胞系的作用1h后即可出现但较弱,2h后该细胞系的TRIM28表达明显增强。通过逆转录反应和荧光定量PCR我们发现TWIST的mRNA在转染了TRIM28的4T1细胞中的表达量低于转染了空载体的表达量,但是差异没有意义(P>0.05)。但是我们发现TWIST蛋白的表达在转染了TRIM28的4T1细胞中也低于转染了空载体的表达量,且差异有统计学意义(P<0.05)。MDA-MB-435细胞加入蛋白质泛素化抑制剂MG-132,不同时间处理,免疫印迹分析TWIST的表达增高,说明TWIST存在泛素化调节而提高其稳定性。DOX诱导pcDNA5/FRT/TO-TRIM28 HEK293 (293-TRIM28)细胞系,同时过表达TWIST和UB,用WB检测,结果显示TRIM28促进了TWIST泛素化。结论:本研究建立了可诱导稳定表达TRIM28的细胞系,研究结果表明TRIM28不显着减少TWIST mRNA的表达,但它显着减少TWIST蛋白的表达。TWIST存在泛素化调节。这说明TRIM28对TWIST的调控可能主要在翻译水平而非转录水平,但是具体的调控机制还有待于进一步的研究。(本文来源于《泸州医学院》期刊2014-05-01)

陆剑平[5](2012)在《组蛋白去乙酰化酶抑制剂伏立诺他(SAHA)对AD转基因小鼠认知功能的影响及其可能的机制》一文中研究指出【目的】观察组蛋白去乙酰化酶抑制剂(Histone deacetylases inhibitor,HDACi)对AD转基因小鼠认知功能的影响,并探讨其可能的机制。【方法】选择HDAC抑制剂伏立诺他(Suberoylanilide hydroxamic acid,SAHA)处理5XFAD转基因(5XFAD-CC)和野生型(WT)小鼠,利用Y-迷宫、Morris-水迷宫评估5XFAD小鼠学习和记忆能力,通过免疫荧光技术观察HDAC6在5XFAD-CC小鼠皮层和海马脑区的分布情况,蛋白免疫印迹检测α-tubulin乙酰化、tau和GSK3β蛋白及其磷酸化水平,并初步观察和评价药物的非临床安全性。【结果】 SAHA可改善5XFAD-CC小鼠即刻记忆、工作记忆能力,SAHA组自发性交替频率显着增加(t=2.642, P=0.0333),总体自发活动有增多趋势(t=1.612, P>0.05),进入新奇区域的次数(t=2.688, P=0.0312)和停留时间(t=3.271, P=0.017)较溶媒对照组明显增加;同时,SAHA可改善5XFAD-CC小鼠空间参考记忆能力,SAHA组寻找平台的潜伏期较溶媒对照组缩短(F=5.936,P=0.045)及进入原平台所在象限的时间(t=2.317, P=0.049)和穿越原平台所在位置的次数(t=2.670, P=0.0284)增加。此外,HDAC6在5XFAD-CC小鼠皮层和海马脑区有广泛的表达,SAHA可增加5XFAD-CC和WT小鼠脑内HDAC6底物α-tubulin乙酰化水平(分别增加26.42%和29.64%),降低5XFAD-CC小鼠海马Tau-pSer396、Tau-pSer404和Tau-pThr231磷酸化水平(与溶媒对照组比较,分别减少24.22%、48.98%和26.95%)和GSK3β磷酸化水平(31.29%)。最后,SAHA短期给药并不影响动物的体重、外周血白细胞、红细胞水平,也未损害动物的肝、肾功能等生化指标。【结论】 SAHA可改善5XFAD-CC小鼠的学习和记忆能力,可能与其降低tau和GSK3β蛋白磷酸化水平或与SAHA抑制HDAC6的催化活性有关。因此,组蛋白去乙酰化酶抑制剂有望成为治疗AD的潜在药物,HDAC6有可能成为治疗AD药物的作用靶点之一。(本文来源于《福建医科大学》期刊2012-06-01)

黄嵘峰[6](2009)在《乙肝病毒X基因对正常人肝细胞株HL-7702线粒体功能的影响及可能机制的探讨》一文中研究指出目的:利用RNA干扰技术研究乙型肝炎病毒(HBV)X基因及其产物X蛋白(HBx)对正常人肝细胞株HL-7702线粒体功能的影响,并探讨其可能机制。方法:利用分子克隆技术构建并鉴定靶向HBx的小干扰RNA(siRNA)重组表达质粒pX1和pX2,并以不针对任何序列的重组质粒pScr作为对照,通过脂质体介导转染入稳定表达HBx基因的正常人肝细胞株HL-7702/HBx,应用RT-PCR及Western印迹分别从mRNA、蛋白水平检测其对HBx阻抑效应,并用流式细胞仪检测细胞内活性氧(ROS)和线粒体膜电位(?Ψm)水平的变化。Western印迹分别检测HL-7702/HBx组、转染pX1组、转染pScr组以及加入抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)组细胞氧化应激信号传导通路相关蛋白Bax、Bcl-2、细胞色素C(cyt C)、caspase-9和caspase -3的表达。结果:酶切鉴定和测序结果证实了pX1和pX2的成功构建。pX1、pX2分别转染入HL-7702/HBx细胞48h后,与空白对照组比较,pX1和pX2两组HBx mRNA和蛋白表达水平均明显降低(P<0.05),但pX1组抑制效果强于pX2组(P<0.05)。流式细胞仪分析显示经过RNAi后细胞内ROS水平明显降低,ΔΨm水平明显升高,与空白对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。Western印迹检测显示,转染pX1的RNAi组和抗氧化剂NAC组与HL-7702/HBx组相比,线粒体Bax蛋白表达下调,Bcl-2蛋白表达上调,胞质中cyt C蛋白表达减少,线粒体中cyt C蛋白表达增加,同时细胞内活化的caspase-9和caspase-3蛋白表达均下调,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论: HBx能够降低宿主细胞线粒体膜电位,提高细胞内ROS水平,从而诱发线粒体氧化应激的产生,可能是通过激活线粒体损伤的内源性凋亡信号传导途径而发生作用。(本文来源于《福建医科大学》期刊2009-05-01)

封振[7](2009)在《水稻Os-miR396过表达转基因植株的获得及可能功能分析》一文中研究指出microRNA对动植物的正常发育有着非常重要的调节作用。然而,目前植物microRNA的功能研究主要是集中在拟南芥中。本实验以粳稻日本晴为实验材料,试图通过过表达转基因手段研究10个水稻microRNA的功能。这10个水稻microRNA的靶基因分别为F-box蛋白、GRF(Growth regulational factor)以及未知蛋白等等,预期功能分别为影响开花时间、调节茎的长短以及与信号转导和逆境胁迫相关等等。根据靶基因的功能,对这10个microRNA进行探索性研究。取得的主要研究结果如下:1.根据microRNA前体基因的结构特点,设计引物,成功从水稻基因组利用PCR扩增出了Os-miR396等10个microRNA的前体基因,并将其构建在UbiI水稻组成型启动子之下。2.以UbiI组成型启动子驱动,将带有目的基因的过表达载体通过冻融法转入农杆菌,再经农杆菌介导来转化水稻愈伤,通过潮霉素筛选得到抗性愈伤组织,经分化再生获得了OS-miR396的T0代转基因植株。3.经形态学考察,过表达OS-miR396的T_0代转基因植株具有明显的矮化性状,其最高高度仅有野生型的一半。在T_1代,部分转基因种子晚萌发5-7天,随后的苗期阶段,均呈现出发育迟缓、植株矮化等特点。4.对转基因植株进行基因组DNA的PCR鉴定,确定含有外源的目的片段。(本文来源于《扬州大学》期刊2009-05-01)

李旻,甘勃[8](2007)在《基因敲除开启生命科学新纪元》一文中研究指出瑞典卡罗林斯卡医学院10月8日宣布,将2007年诺贝尔生理学或医学奖授予美国人马里奥·卡佩基、奥利弗·史密斯和英国人马丁·埃文斯3人,以表彰他们“发现了利用胚胎干细胞对小鼠基因进行特定改变的原理”。 他们的工作使哺乳动物特定基因的改造成为可能。基(本文来源于《大众科技报》期刊2007-10-11)

李文静,王宪[9](2004)在《白细胞介素-1β诱导Ⅱ型肺上皮细胞分泌降钙素基因相关肽的机制及可能的功能意义》一文中研究指出我室以前的研究表明,哮喘和慢性阻塞性肺病(COPD)病人的痰液中降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide;CGRP)的含量明显高于正常人;在造成慢性支气管炎的大鼠模型中,大鼠的气管灌流液、肺组织和支气管组织内的CGRP含量明显升高。在许多气道炎性疾病,如哮喘和COPD,炎症因子的水平是增加的。在哮喘的急性期病人肺内炎症因子IL-1β的浓度升高,而且这种升高与哮喘的病理过程相关。目的:本实验用培养的人Ⅱ型肺上皮细胞观测了IL-1β对CGRP的诱导作用并且分析了其可能的机制和功能意义。方法:用免疫荧光的方法检测正常小鼠及人Ⅱ型肺上皮A549细胞系CGRP的表达;用CGRP放射性免疫分析方法检测培(本文来源于《国际心脏研究会中国分会第八届学术会议暨中国病理生理学会心血管专业委员会第十一届学术会议论文摘要集》期刊2004-06-30)

刘杰[10](2003)在《一个可能与肿瘤恶性增生及转移相关的新基因的克隆及功能研究》一文中研究指出随着人类基因组计划的不断完善,疾病相关基因,即功能基因的克隆目前是医学界研究的热点。我们应用抑制差减杂交及马拉松全长cDNA扩增技术(RACE PCR),从人肝癌细胞株中克隆出一全长2552bp,编码592个氨基酸,相对分于质量为65ku的蛋白分子。经美国NIH人类基因组数据库比较,此基因定位在人类11号染色体,无同源基因,为一新基因。因其为肝癌的上调基因(Up Regulated Gene),故命名为URG11。经蛋白质综合信息库分析(SWISS PROT),此蛋白理论上具有胞浆及胞膜区,并且在末端具有众多的酪氨酸。在蛋白结构域的分析中,另发现两个血管黏附分子的同源结构域(VWC(本文来源于《全面建设小康社会:中国科技工作者的历史责任——中国科协2003年学术年会论文集(上)》期刊2003-09-01)

基因可能功能论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

学习与记忆是大脑极为重要的两种生理功能,它们两者是相互区别又相互联系的神经生物学过程。学习指的是从外界获取新知识的生物学过程,而记忆是对所获取知识的储存与重新整理的过程。学习记忆过程是人类适应环境变化,依据环境以及经验,来做出相应的反应以适应环境的过程。换言之,一个人毕生的成就,大部分取决于他所获取的知识与掌握的技能,因此学习与记忆功能在人类的一生中扮演着

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

基因可能功能论文参考文献

[1].苏星.全基因组外显子测序发现的叁种PSIS可能致病基因的体外功能验证[D].中国人民解放军医学院.2018

[2].岳崟,王丽梅,刘仁禄,刘志国,刘烈炬.学习与记忆功能可能相关的基因研究现状[J].神经解剖学杂志.2015

[3].孙春莲.类受体激酶基因StLRPK1在本氏烟中的晚疫病抗性功能鉴定及其介导的可能信号途径分析[D].华中农业大学.2014

[4].杨曼曼.TRIM28基因克隆和可诱导稳定表达细胞系的建立及其可能的功能分析[D].泸州医学院.2014

[5].陆剑平.组蛋白去乙酰化酶抑制剂伏立诺他(SAHA)对AD转基因小鼠认知功能的影响及其可能的机制[D].福建医科大学.2012

[6].黄嵘峰.乙肝病毒X基因对正常人肝细胞株HL-7702线粒体功能的影响及可能机制的探讨[D].福建医科大学.2009

[7].封振.水稻Os-miR396过表达转基因植株的获得及可能功能分析[D].扬州大学.2009

[8].李旻,甘勃.基因敲除开启生命科学新纪元[N].大众科技报.2007

[9].李文静,王宪.白细胞介素-1β诱导Ⅱ型肺上皮细胞分泌降钙素基因相关肽的机制及可能的功能意义[C].国际心脏研究会中国分会第八届学术会议暨中国病理生理学会心血管专业委员会第十一届学术会议论文摘要集.2004

[10].刘杰.一个可能与肿瘤恶性增生及转移相关的新基因的克隆及功能研究[C].全面建设小康社会:中国科技工作者的历史责任——中国科协2003年学术年会论文集(上).2003

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