导读:本文包含了超速玻璃化冻存法论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:玻璃化,冻存,人肝细胞,胶原凝胶
超速玻璃化冻存法论文文献综述
徐兵,吴林岚,蒋晓织,杨晓梅[1]（2011）在《用超速玻璃化冻存人肝组织微团构建人工肝生物反应器的初步研究》一文中研究指出目的:探索用超速玻璃化冻存人肝组织微团构建人工肝生物反应器。方法:留取肝胆疾病患者手术切除的肝组织块和做血浆置换的重型肝炎患者血浆,制备成人肝组织微团,液氮罐中冻存l周后解冻复苏,制备小组织微团,然后用鼠尾胶原溶液与其混合为人肝组织微团悬液,将其注入中空纤维反应器外腔,构建生物反应器并循环培养,之后行利多卡因转化实验和重型肝炎患者血浆灌注实验,并进行细胞漏出监测。结果:超速玻璃化冻存肝组织微团1周,解冻后的肝细胞活率为(81±3.8)%。利多卡因转化实验结果显示:利多卡因浓度在0h为80mg/L,灌注8h为56.25mg/L,灌注16h为34.92 mg/L,灌注24h为13.25mg/L。灌注16h、24h组与0h组比较差别有统计学意义(n=6,P>4.75,P<0.01)。重型肝炎患者血浆灌注实验结果显示:灌注6.5h的血氨值,灌注4.5h、6.5h的TBil值、灌注6.5h的PT值分别与灌注0.5h值比较,差别都有统计学意义(单因素方差分析F值依次=6.64,12.37,22.7,7.2,F;4.6,P<0.05)。循环灌注结束后镜检各次灌注液都未发现细胞。结论:超速玻璃化冻存人肝组织微团构建的生物反应器有明显的肝细胞代谢合成功能。(本文来源于《第6届全国疑难及重症肝病大会论文集》期刊2011-09-14）
党玲[2]（2009）在《绵羊卵巢组织大皮质块超速玻璃化冻存研究》一文中研究指出一定数量的卵泡是维持卵巢功能的基础,卵巢组织冻存移植的目标在于不断改进冻存移植技术,使移植后获得尽可能多的存活卵泡,更利于移植后卵巢组织功能的恢复及长期维持。已有研究显示,小皮质片的冻存后移植,远期功能维持还不理想。故本研究目的是通过对卵巢大皮质块的玻璃化冻存条件的优化研究,探索可保存大量原始卵泡的简便、经济、有效的卵巢组织冻存法;通过添加促性腺激素对卵巢进行冷冻和移植前的干预,以诱导卵巢组织和受体移植部位VEGF表达的增强,减少移植物的缺血缺氧损伤,最大限度地防止卵泡丢失。为移植卵巢功能的正常维持提供科学依据,为增强临床的实用性和可行性提供技术方法。方法1.不同体积的绵羊卵巢皮质块冻存最佳玻璃化渗透平衡时间的研究:将2～6月龄的绵羊卵巢皮质按体积的不同分为叁组,小体积组:5mm×4mm×2mm(40mm3);中体积组:10mm×4mm×2mm(80mm3);大体积组:10mm×8mm×2mm(160 mm3)大小的组织块,采用两步渗透平衡法摸索适宜于不同体积的绵羊卵巢组织的玻璃化冷冻的渗透平衡时间,并对解冻后的卵巢进行普通光学显微镜、及凋亡相关的免疫组织化学检测。2. FSH对新鲜及解冻后培养的卵巢组织VEGF表达及卵泡发育影响的研究:在培养液中添加FSH,应用免疫组织化学法检测培养24h、48h的卵巢组织VEGF表达及观察培养6d卵泡直径的变化。3.小鼠卵巢器官不同部位移植对卵泡存活的影响的研究:将移植小鼠随机分为肾被膜下、颈部皮下、腹腔内及下肢根部肌肉肉芽肿内四组,移植168h后通过组织学观察存活卵泡数比较不同部位移植效果。4.新鲜及玻璃化冻融绵羊卵巢组织异种移植的实验研究:各组绵羊卵巢组织行裸鼠颈部皮下移植,通过血清FSH测定、移植存活卵泡数评价FSH对大皮质卵巢组织移植的作用。结果1.叁种不同体积的卵巢皮质块在玻璃化冷冻液中经适宜的渗透平衡后,进行玻璃化冻存。( 1)小体积(40mm3)皮质块在玻璃化液渗透平衡不同时间下冷冻后,卵巢组织内形态正常卵泡百分率以渗透平衡7min组(86.61±5.37)与新鲜对照组(88.30±4.71)相似外,5min、6min、8min组与新鲜对照组相比,差异有统计学意义,P<0.05;中体积(80mm3)皮质块在不同渗透平衡时间下冷冻后卵巢组织内形态正常卵泡数除渗透平衡13min组较低外,10min、11min、12min组与新鲜对照组(88.76±5.05)相比,差异无统计学意义,P>0.05;以11min组(88.33±3.95)与新鲜对照组最接近。渗透平衡各组间相互比较,13min组(84.35±5.45)与11min组差异有统计学意义,P<0.05;大体积(160mm3)皮质块在不同渗透平衡时间下冷冻后卵巢组织内形态正常卵泡除渗透平衡20min组较低外, 17min、18min、19min组与新鲜对照组( 87.24±3.40)相比,差异无统计学意义,P>0.05,以19min组(86.53±4.11)与新鲜对照组最接近。渗透平衡各组间相互比较,20min组(83.13±4.72)与19min组差异有统计学意义,P<0.05。(2)冷冻前后TUNEL阳性卵泡的观察:新鲜组及冻融组均可观察到卵泡发生凋亡,与冷冻前相比,冷冻后卵巢中卵泡发生凋亡的比例显着增加,差异有统计学意义,P<0.05。2.对上述结果进行分析研究,提出在22～24℃室温下,当厚度为2mm时,计算已知表面积S(mm2)卵巢大皮质块的玻璃化渗透平衡时间T(min)的数学模式为T=(S+15)/5。3.卵泡刺激素(FSH)可使培养6天的新鲜及玻璃化冻融卵巢卵泡发育,卵泡直径较未培养组显着增大,差异有统计学意义,P<0.05。培养24h与48h均表现为添加FSH的新鲜组与玻璃化冻融组VEGF表达增高,与非FSH干预组相比差异具有统计学意义,P<0.05,尤其是新鲜卵巢培养组VEGF阳性表达最高。对冻融组中卵巢组织培养6天培养液进行E2测定,同样显示添加FSH组E2水平高于未添加组,差异有统计学意义,P<0.05。4.小鼠卵巢器官不同部位移植168h各移植组移植物存活率及卵泡数比较:腹腔移植组存活卵泡数最少与其余各组相比差异均具统计学意义,其余叁个部位移植组卵泡存活数无显着性差异,其中以肾被膜下移植组存活卵泡数与正常对照最接近。5.新鲜及冻融羊卵巢组织大皮质块裸鼠颈部皮下移植的实验研究结果表明血清FSH去势对照组(ACG)最高,与其余各移植组差异有统计学意义,P<0.05;移植6周组织学显示新鲜移植组卵泡数最多,冻融移植组卵泡数显着低于新鲜组,而冻融+FSH移植组(VTFG)的卵泡数(235.57±94.51)明显高于冻融组(30.4±20.67)(VFG)。结论1.超速玻璃化法可有效冻存体积为40mm3、80mm3及160mm3绵羊卵巢组织大皮质块。在22～24℃条件下,当厚度为2mm时,计算已知表面积S(mm2)卵巢大皮质块的玻璃化渗透平衡时间T(min)的数学模式为T=(S+15)/5。2.培养液中添加10μg/mL FSH,可增加新鲜和冻融卵巢组织中VEGF的表达,并促进卵泡的发育。3.玻璃化液、解冻液和培养液中添加10μg/mL FSH,可提高玻璃化冻存绵羊卵巢组织裸鼠体内移植的存活卵泡数量。(本文来源于《宁夏医科大学》期刊2009-04-01）
超速玻璃化冻存法论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
一定数量的卵泡是维持卵巢功能的基础,卵巢组织冻存移植的目标在于不断改进冻存移植技术,使移植后获得尽可能多的存活卵泡,更利于移植后卵巢组织功能的恢复及长期维持。已有研究显示,小皮质片的冻存后移植,远期功能维持还不理想。故本研究目的是通过对卵巢大皮质块的玻璃化冻存条件的优化研究,探索可保存大量原始卵泡的简便、经济、有效的卵巢组织冻存法;通过添加促性腺激素对卵巢进行冷冻和移植前的干预,以诱导卵巢组织和受体移植部位VEGF表达的增强,减少移植物的缺血缺氧损伤,最大限度地防止卵泡丢失。为移植卵巢功能的正常维持提供科学依据,为增强临床的实用性和可行性提供技术方法。方法1.不同体积的绵羊卵巢皮质块冻存最佳玻璃化渗透平衡时间的研究:将2～6月龄的绵羊卵巢皮质按体积的不同分为叁组,小体积组:5mm×4mm×2mm(40mm3);中体积组:10mm×4mm×2mm(80mm3);大体积组:10mm×8mm×2mm(160 mm3)大小的组织块,采用两步渗透平衡法摸索适宜于不同体积的绵羊卵巢组织的玻璃化冷冻的渗透平衡时间,并对解冻后的卵巢进行普通光学显微镜、及凋亡相关的免疫组织化学检测。2. FSH对新鲜及解冻后培养的卵巢组织VEGF表达及卵泡发育影响的研究:在培养液中添加FSH,应用免疫组织化学法检测培养24h、48h的卵巢组织VEGF表达及观察培养6d卵泡直径的变化。3.小鼠卵巢器官不同部位移植对卵泡存活的影响的研究:将移植小鼠随机分为肾被膜下、颈部皮下、腹腔内及下肢根部肌肉肉芽肿内四组,移植168h后通过组织学观察存活卵泡数比较不同部位移植效果。4.新鲜及玻璃化冻融绵羊卵巢组织异种移植的实验研究:各组绵羊卵巢组织行裸鼠颈部皮下移植,通过血清FSH测定、移植存活卵泡数评价FSH对大皮质卵巢组织移植的作用。结果1.叁种不同体积的卵巢皮质块在玻璃化冷冻液中经适宜的渗透平衡后,进行玻璃化冻存。( 1)小体积(40mm3)皮质块在玻璃化液渗透平衡不同时间下冷冻后,卵巢组织内形态正常卵泡百分率以渗透平衡7min组(86.61±5.37)与新鲜对照组(88.30±4.71)相似外,5min、6min、8min组与新鲜对照组相比,差异有统计学意义,P<0.05;中体积(80mm3)皮质块在不同渗透平衡时间下冷冻后卵巢组织内形态正常卵泡数除渗透平衡13min组较低外,10min、11min、12min组与新鲜对照组(88.76±5.05)相比,差异无统计学意义,P>0.05;以11min组(88.33±3.95)与新鲜对照组最接近。渗透平衡各组间相互比较,13min组(84.35±5.45)与11min组差异有统计学意义,P<0.05;大体积(160mm3)皮质块在不同渗透平衡时间下冷冻后卵巢组织内形态正常卵泡除渗透平衡20min组较低外, 17min、18min、19min组与新鲜对照组( 87.24±3.40)相比,差异无统计学意义,P>0.05,以19min组(86.53±4.11)与新鲜对照组最接近。渗透平衡各组间相互比较,20min组(83.13±4.72)与19min组差异有统计学意义,P<0.05。(2)冷冻前后TUNEL阳性卵泡的观察:新鲜组及冻融组均可观察到卵泡发生凋亡,与冷冻前相比,冷冻后卵巢中卵泡发生凋亡的比例显着增加,差异有统计学意义,P<0.05。2.对上述结果进行分析研究,提出在22～24℃室温下,当厚度为2mm时,计算已知表面积S(mm2)卵巢大皮质块的玻璃化渗透平衡时间T(min)的数学模式为T=(S+15)/5。3.卵泡刺激素(FSH)可使培养6天的新鲜及玻璃化冻融卵巢卵泡发育,卵泡直径较未培养组显着增大,差异有统计学意义,P<0.05。培养24h与48h均表现为添加FSH的新鲜组与玻璃化冻融组VEGF表达增高,与非FSH干预组相比差异具有统计学意义,P<0.05,尤其是新鲜卵巢培养组VEGF阳性表达最高。对冻融组中卵巢组织培养6天培养液进行E2测定,同样显示添加FSH组E2水平高于未添加组,差异有统计学意义,P<0.05。4.小鼠卵巢器官不同部位移植168h各移植组移植物存活率及卵泡数比较:腹腔移植组存活卵泡数最少与其余各组相比差异均具统计学意义,其余叁个部位移植组卵泡存活数无显着性差异,其中以肾被膜下移植组存活卵泡数与正常对照最接近。5.新鲜及冻融羊卵巢组织大皮质块裸鼠颈部皮下移植的实验研究结果表明血清FSH去势对照组(ACG)最高,与其余各移植组差异有统计学意义,P<0.05;移植6周组织学显示新鲜移植组卵泡数最多,冻融移植组卵泡数显着低于新鲜组,而冻融+FSH移植组(VTFG)的卵泡数(235.57±94.51)明显高于冻融组(30.4±20.67)(VFG)。结论1.超速玻璃化法可有效冻存体积为40mm3、80mm3及160mm3绵羊卵巢组织大皮质块。在22～24℃条件下,当厚度为2mm时,计算已知表面积S(mm2)卵巢大皮质块的玻璃化渗透平衡时间T(min)的数学模式为T=(S+15)/5。2.培养液中添加10μg/mL FSH,可增加新鲜和冻融卵巢组织中VEGF的表达,并促进卵泡的发育。3.玻璃化液、解冻液和培养液中添加10μg/mL FSH,可提高玻璃化冻存绵羊卵巢组织裸鼠体内移植的存活卵泡数量。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
超速玻璃化冻存法论文参考文献
[1].徐兵,吴林岚,蒋晓织,杨晓梅.用超速玻璃化冻存人肝组织微团构建人工肝生物反应器的初步研究[C].第6届全国疑难及重症肝病大会论文集.2011
[2].党玲.绵羊卵巢组织大皮质块超速玻璃化冻存研究[D].宁夏医科大学.2009