袁晓丹:大片吸虫钙结合蛋白2基因的克隆表达及其表达产物的免疫活性研究论文

袁晓丹:大片吸虫钙结合蛋白2基因的克隆表达及其表达产物的免疫活性研究论文

本文主要研究内容

作者袁晓丹,张念章,黄思扬,马元元,王春仁,朱兴全(2019)在《大片吸虫钙结合蛋白2基因的克隆表达及其表达产物的免疫活性研究》一文中研究指出:通过克隆、表达大片吸虫钙结合蛋白2(FgCaBP2)基因,旨在探索其作为诊断抗原的可行性。在分析大片吸虫蛋白组数据的基础上,根据肝片吸虫CaBP2基因组序列和转录组数据,设计以NdeⅠ和XhoⅠ作为酶切位点的引物。以大片吸虫总RNA为模板,通过RT-PCR获得FgCaBP2基因,对其进行测序、生物信息学分析。构建pET-30a-FgCaBP2重组表达载体,在大肠杆菌Transetta(DE3)感受态细胞中完成诱导、表达;对纯化的目的蛋白进行SDS-PAGE和Western-blot分析,并用目的蛋白免疫家兔,制备多克隆抗体。结果表明,FgCaBP2基因的开放阅读框长570 bp,编码189个氨基酸残基。生物信息学预测显示,FgCaBP2主要以α螺旋为主,β折叠较少,有7个β转角、4个较长的无规则卷曲、含有4个亲水区、具有较多的B细胞抗原表位。SDS-PAGE分析表明,FgCaBP2呈现出可溶性表达。Western-blot分析表明,25 ku大小的特异性目的蛋白条带能够很好地被大片吸虫感染的阳性水牛血清识别,具有良好的免疫反应性。本研究成功克隆了FgCaBP2基因,并获得了可溶性重组蛋白,该蛋白具有良好的免疫原性和免疫反应性,是潜在的大片吸虫病诊断抗原。

Abstract

tong guo ke long 、biao da da pian xi chong gai jie ge dan bai 2(FgCaBP2)ji yin ,zhi zai tan suo ji zuo wei zhen duan kang yuan de ke hang xing 。zai fen xi da pian xi chong dan bai zu shu ju de ji chu shang ,gen ju gan pian xi chong CaBP2ji yin zu xu lie he zhuai lu zu shu ju ,she ji yi NdeⅠhe XhoⅠzuo wei mei qie wei dian de yin wu 。yi da pian xi chong zong RNAwei mo ban ,tong guo RT-PCRhuo de FgCaBP2ji yin ,dui ji jin hang ce xu 、sheng wu xin xi xue fen xi 。gou jian pET-30a-FgCaBP2chong zu biao da zai ti ,zai da chang gan jun Transetta(DE3)gan shou tai xi bao zhong wan cheng you dao 、biao da ;dui chun hua de mu de dan bai jin hang SDS-PAGEhe Western-blotfen xi ,bing yong mu de dan bai mian yi jia tu ,zhi bei duo ke long kang ti 。jie guo biao ming ,FgCaBP2ji yin de kai fang yue dou kuang chang 570 bp,bian ma 189ge an ji suan can ji 。sheng wu xin xi xue yu ce xian shi ,FgCaBP2zhu yao yi αluo xuan wei zhu ,βshe die jiao shao ,you 7ge βzhuai jiao 、4ge jiao chang de mo gui ze juan qu 、han you 4ge qin shui ou 、ju you jiao duo de Bxi bao kang yuan biao wei 。SDS-PAGEfen xi biao ming ,FgCaBP2cheng xian chu ke rong xing biao da 。Western-blotfen xi biao ming ,25 kuda xiao de te yi xing mu de dan bai tiao dai neng gou hen hao de bei da pian xi chong gan ran de yang xing shui niu xie qing shi bie ,ju you liang hao de mian yi fan ying xing 。ben yan jiu cheng gong ke long le FgCaBP2ji yin ,bing huo de le ke rong xing chong zu dan bai ,gai dan bai ju you liang hao de mian yi yuan xing he mian yi fan ying xing ,shi qian zai de da pian xi chong bing zhen duan kang yuan 。

论文参考文献

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  • 论文详细介绍

    论文作者分别是来自中国兽医科学的袁晓丹,张念章,黄思扬,马元元,王春仁,朱兴全,发表于刊物中国兽医科学2019年03期论文,是一篇关于大片吸虫论文,钙结合蛋白论文,克隆论文,表达论文,诊断候选抗原论文,中国兽医科学2019年03期论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自中国兽医科学2019年03期论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。

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