脑炎病毒论文-赵丹华,李玉华

脑炎病毒论文-赵丹华,李玉华

导读:本文包含了脑炎病毒论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:荧光素酶,乙脑病毒感染性克隆,重组乙脑病毒

脑炎病毒论文文献综述

赵丹华,李玉华[1](2019)在《带荧光素酶基因的乙型脑炎病毒SA14-14-2感染性克隆的构建及鉴定》一文中研究指出目的:构建带有荧光素酶基因的乙型脑炎(简称乙脑)病毒感染性克隆,并通过体外拯救获得恢复病毒,用于乙脑病毒致病机理研究、病毒感染在小鼠体内的动态分布以及乙脑疫苗免疫效果评价的高通量方法建立。方法:应用反向遗传学、融合PCR以及无缝拼接等体外重组技术,将荧光素酶报告基因(F-LUC)插入到乙脑病毒SA14-14-2全长感染性克隆的5'非编码区与C蛋白编码区之间,线性化后体外转录为RNA并转染BHK_(21)细胞,在细胞感染和动物试验分别检测恢复病毒的拯救和F-LUC的表达情况。结果:成功构建了带有F-LUC报告基因的SA14-14-2乙脑病毒全长感染性克隆,并拯救获得了重组病毒。基因序列分析及细胞与动物水平均证明拯救的病毒可较高水平表达荧光素酶基因。结论:本研究构建出带有荧光素酶报告基因F-LUC的SA14-14-2感染性克隆,并拯救获得带有荧光素酶的重组乙脑病毒,为乙脑血清中和抗体的高通量筛选、病毒感染在小鼠体内的动态分布和致病机理研究奠定了基础。(本文来源于《中国药事》期刊2019年11期)

吕玉金,吴凤笋,刘胜利,李文刚[2](2019)在《猪日本乙型脑炎及猪细小病毒复合PCR检测方法的建立》一文中研究指出根据GenBank上登录的日本乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)与猪细小病毒(Porcine parvovirus,PPV)参考基因序列,设计合成2对特异性引物,在建立优化单项PCR检测方法的基础上,建立了PPV-JEV复合PCR检测方法,可扩增出预期的238 bp和152 bp特异性片段。该方法敏感性高、稳定性好、特异性强,临床样品检测结果与单项PCR检测结果符合率100%,该方法适合JEV和PPV的联合检测和鉴别诊断。(本文来源于《江苏农业科学》期刊2019年19期)

魏婉,蒋敏海[3](2019)在《人类疱疹病毒3型脑炎1例》一文中研究指出人类疱疹病毒3型又称为水痘-带状疱疹病毒(varicella zoster virus,VZV)。VZV在儿童初次感染后引起水痘,在成人感染后少数会引起带状疱疹,VZV常常侵犯皮肤,黏膜,很少受累中枢神经系统,现将我科通过脑脊液基因测序确诊的1例典型的VZV脑炎报道如下。患者男,59岁。患者13d前饮酒后出现排尿困难伴发热,最高体温不详,至当地医院就诊,查血常规:白细胞14×10~9/L,C反应蛋白(CRP):9mg/L,诊断考虑"急性前(本文来源于《浙江医学》期刊2019年20期)

冯亚岚,刘超越,李玥珂,黄荣,袁磊[4](2019)在《乙型脑炎病毒野毒株SA14包膜蛋白K279M突变对其神经毒力的影响》一文中研究指出目的构建乙型脑炎病毒野毒株SA14包膜蛋白K279M突变株感染性克隆并拯救病毒,探索K279M突变对其毒力的影响。方法应用重迭延伸PCR和分子克隆技术构建含有K279M突变的乙脑突变病毒全长cDNA质粒,经酶切鉴定后,以其为模板体外转录获得RNA,电转染BHK21细胞,得到恢复病毒JEV SA14 (K279M)。分别用野毒株JEV SA14和JEV SA14 (K279M)接种BHK21细胞和脑内接种昆明鼠,比较突变株与野毒株的蚀斑大小、生长特点以及对昆明鼠的神经毒力。结果酶切鉴定表明,突变病毒感染性克隆成功构建。病毒蚀斑试验显示,JEV SA14 (K279M)的蚀斑直径约为2~3 mm,大于野毒株蚀斑直径的1~2 mm。突变株病毒LD50为0.21PFU,大于野毒株病毒LD_(50)的0.05PFU。结论乙脑包膜蛋白K279M突变增大了病毒的蚀斑,但降低了病毒的脑内神经毒力。(本文来源于《中国病原生物学杂志》期刊2019年09期)

赵大杰,张旭,田琴,周碧君[5](2019)在《贵州省某猪场一株乙型脑炎病毒的分离与鉴定》一文中研究指出引言乙型脑炎病毒属于黄病毒科黄病毒属,也称日本脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JVE),是一种重要的人畜共患病病毒,是导致公猪急性睾丸炎、孕猪流产或死胎的主要病原之一~([1])。为查明贵州省某规模化猪场猪群出现食欲减退、饮欲增加、嗜睡、眼结膜红肿、眼睑突出和公猪的单侧睾丸肿大等现象的病因,通过猪乙型脑炎BHK-21细胞接种、乳鼠脑内接毒试验及RT-PCR检测和测序对比进行诊断,分离鉴定出乙型脑炎病毒株。该研究对于探讨JEV分离鉴定以及确诊乙型脑炎的方法具有一定的参考价值。材料与方法(本文来源于《第叁届中国猪业科技大会暨中国畜牧兽医学会2019年学术年会论文集》期刊2019-09-19)

王双双,赵红梅,周丹娜,蔡行,耿超[6](2019)在《日本乙型脑炎病毒NS3蛋白的真核表达及鉴定》一文中研究指出为了探讨日本乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)的复制机制及其蛋白与宿主蛋白的相互作用关系,试验以GenBank中收录的JEV HW1株NS3基因序列为模板设计引物,经PCR扩增获得NS3基因序列后,采用ClonExpress克隆技术将NS3基因连接到真核表达载体p EGFP-C3上,将得到的产物pEGFP-C3-NS3送生工生物工程(上海)股份有限公司测序;使用X-tremeGENE HP DNA Transfection Reagent体外转染幼地鼠肾细胞(BHK21细胞),观察24 h后应用Western-blot和IFA法进行鉴定。结果表明:PCR克隆获得的基因片段大小约为1 370 bp,NS3基因片段与HW1株同源性为100%; BHK21细胞密度在70%~80%时质粒转染效果最佳,质粒质量与转染试剂体积的比例为1∶3; Western-blot鉴定融合蛋白成功表达,分子质量约为79 ku; IFA鉴定融合蛋白成功表达,24 h为转染高峰期,绿色荧光最强,pEGFP-C3-NS3与NS3阳性血清反应显红色荧光。说明在BHK21细胞中成功表达出NS3蛋白。(本文来源于《黑龙江畜牧兽医》期刊2019年17期)

张轶,刘方蕾[7](2019)在《一种广泛可及的委内瑞拉马脑炎病毒复制子颗粒疫苗平台的开发》一文中研究指出人兽共患病病毒在动物宿主中成群体传播,而且能够在人群中出现,造成对公共健康产生不利影响的传染性疾病。在疾病暴发与新现的背景下,可便携的、安全且有效的疫苗平台被广泛需求。在此工作中,研究者报道了对甲病毒属复制子疫苗平台的生成与鉴定,这是基于非选择介质——减毒委内瑞拉马脑炎(VEE)病毒疫苗而完成的,所用毒株为3526(VRP3526)。使用诺如病毒和冠状病毒作为模式系统,研究者阐释了在生成重组蛋白、生产病毒样颗粒以及作为疫苗抵御新兴病(本文来源于《微生物学免疫学进展》期刊2019年04期)

石中南,郑帼[8](2019)在《单纯疱疹病毒脑炎继发抗-N-甲基-D天门冬氨酸受体脑炎1例》一文中研究指出1临床资料患儿,男,5岁4个月。2018年5月3日因"发热1 d余,抽搐3次"入院。患儿入院前1 d余无明显诱因下出现呕吐,为胃内容物,非喷射性,面色差,遂至当地诊所,予四磨汤及吗丁啉口服治疗。夜间睡前诉头晕,后出现发热,家长自述为低热,未测体温,再次出现呕吐,且突发抽搐一次,初为双眼凝视、流涎,四肢软,呼之不应,后渐出现四肢硬,牙关紧闭。急至当地医院予"苯巴比妥钠肌注镇静及吸氧"处理后缓解,缓解后入睡。抽搐时体温不详。(本文来源于《南京医科大学学报(自然科学版)》期刊2019年08期)

耿超,赵红梅,周丹娜,蔡行,王双双[9](2019)在《日本乙型脑炎病毒NS5rdrp蛋白的真核表达及鉴定》一文中研究指出为了探究日本乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)的复制机理和研制以JEV复制复合体为靶标的药物,试验以GenBank中收录的JEV HW1株基因序列为模板,设计针对NS5rdrp的特异性引物,提取JEV RNA,反转录得到cDNA,以其为模板使用PCR方法克隆得到NS5rdrp基因片段;利用T4DNA连接酶构建重组质粒pcDNA3.1-NS5rdrp,并对产物测序;提取去除内毒素的重组质粒,用转染试剂X-tremeGENE HP DNA Transfection Reagent转染BHK21细胞,转染24 h后观察结果;最后利用Western-blot技术检测NS5rarp蛋白的表达情况。结果表明:PCR扩增得到大小约为920 bp的NS5rdrp基因片段;测序结果经NCBI上BLAST比对分析,克隆得到的NS5rdrp基因与HW1株的同源性为100%;转染时细胞的最佳密度区间为70%~80%,转染试剂与转染质粒的比例为3∶1;经过Western-blot检测,重组质粒在细胞内正常表达,NS5rdrp蛋白的分子质量约为37 ku。说明试验通过真核表达成功获得NS5rdrp蛋白。(本文来源于《黑龙江畜牧兽医》期刊2019年15期)

袁磊,唐丽萍,黄荣,冯亚岚,杨会强[10](2019)在《乙型脑炎病毒疫苗株包膜蛋白K138E回复突变对其神经毒力的影响》一文中研究指出目的探索乙型脑炎疫苗株包膜蛋白(E蛋白)138位氨基酸向野毒株回复突变对其神经毒力与神经侵袭力的影响。方法采用重迭延伸PCR技术扩增含有K138E突变位点的DNA片段,构建乙脑疫苗株E蛋白K138E位氨基酸突变的病毒感染性克隆,体外转录病毒RNA,电转染BHK21细胞拯救病毒,绘制病毒生长曲线,采用蚀斑试验与测序鉴定突变病毒,通过动物试验评价突变病毒与疫苗株对昆明小鼠的神经毒力和神经侵袭力。结果酶切和测序表明K138E突变病毒感染性克隆构建成功,并通过电转染BHK21细胞包装得到K138E突变病毒。蚀斑试验显示突变病毒的蚀斑稍大于疫苗株,两株病毒的生长曲线与神经侵袭力无明显不同,但突变病毒神经毒力显着升高。结论乙脑疫苗株E138位氨基酸回复突变后神经毒力增强,E138位氨基酸是调控疫苗株神经毒力的重要位点。(本文来源于《中国病原生物学杂志》期刊2019年07期)

脑炎病毒论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

根据GenBank上登录的日本乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)与猪细小病毒(Porcine parvovirus,PPV)参考基因序列,设计合成2对特异性引物,在建立优化单项PCR检测方法的基础上,建立了PPV-JEV复合PCR检测方法,可扩增出预期的238 bp和152 bp特异性片段。该方法敏感性高、稳定性好、特异性强,临床样品检测结果与单项PCR检测结果符合率100%,该方法适合JEV和PPV的联合检测和鉴别诊断。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

脑炎病毒论文参考文献

[1].赵丹华,李玉华.带荧光素酶基因的乙型脑炎病毒SA14-14-2感染性克隆的构建及鉴定[J].中国药事.2019

[2].吕玉金,吴凤笋,刘胜利,李文刚.猪日本乙型脑炎及猪细小病毒复合PCR检测方法的建立[J].江苏农业科学.2019

[3].魏婉,蒋敏海.人类疱疹病毒3型脑炎1例[J].浙江医学.2019

[4].冯亚岚,刘超越,李玥珂,黄荣,袁磊.乙型脑炎病毒野毒株SA14包膜蛋白K279M突变对其神经毒力的影响[J].中国病原生物学杂志.2019

[5].赵大杰,张旭,田琴,周碧君.贵州省某猪场一株乙型脑炎病毒的分离与鉴定[C].第叁届中国猪业科技大会暨中国畜牧兽医学会2019年学术年会论文集.2019

[6].王双双,赵红梅,周丹娜,蔡行,耿超.日本乙型脑炎病毒NS3蛋白的真核表达及鉴定[J].黑龙江畜牧兽医.2019

[7].张轶,刘方蕾.一种广泛可及的委内瑞拉马脑炎病毒复制子颗粒疫苗平台的开发[J].微生物学免疫学进展.2019

[8].石中南,郑帼.单纯疱疹病毒脑炎继发抗-N-甲基-D天门冬氨酸受体脑炎1例[J].南京医科大学学报(自然科学版).2019

[9].耿超,赵红梅,周丹娜,蔡行,王双双.日本乙型脑炎病毒NS5rdrp蛋白的真核表达及鉴定[J].黑龙江畜牧兽医.2019

[10].袁磊,唐丽萍,黄荣,冯亚岚,杨会强.乙型脑炎病毒疫苗株包膜蛋白K138E回复突变对其神经毒力的影响[J].中国病原生物学杂志.2019

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