导读:本文包含了缺失菌株论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:沙门菌,基因缺失,CpxR,A
缺失菌株论文文献综述
吴同垒,苏硕青,李巧玲,史秋梅,张志强[1]（2019）在《狐源沙门菌cpxR基因缺失菌株的构建及部分表型研究》一文中研究指出为研究狐源沙门菌双组份系统CpxR/A在细菌耐药和抗血清杀伤中的作用,本研究利用λ-Red重组技术构建了cpxR基因缺失株S-ΔcpxR,评价其在生物被膜形成、耐药、抗血清杀伤和细菌毒力中的重要作用。结果显示,与野生型相比,cpxR基因缺失株的生长速度、生化特性没有改变,但是生物被膜形成能力显着降低,对阿莫西林、阿米卡星和恩诺沙星的敏感性增加,血清中存活率和对小鼠的毒力显着降低。结果表明,沙门菌CpxR与毒力相关,为狐源沙门菌基因缺失苗的研究奠定基础。(本文来源于《中国兽医学报》期刊2019年03期）
陈国枝,储炬[2]（2019）在《农杆菌转化法高效构建顶头孢霉sorA和sorB双缺失菌株提高头孢菌素C产量》一文中研究指出目的获得顶头孢霉sorA和sorB双缺失菌株,以阻断sorbicillinoids的合成,并研究其与头孢菌素C(CPC)产量的关系。方法通过根癌农杆菌转化法,依据同源双交换的原理,同时敲除合成sorbicillinoids骨架结构的两个聚酮合酶基因sorA和sorB,并通过摇瓶发酵实验检测缺失菌和野生菌的产量。结果筛选并验证了6株A. chrysogenum-?pks菌株,遗传稳定,转化效率约为20%。通过发酵实验测定发现,缺失菌株产CPC能力比野生菌提高了70%。结论农杆菌转化法是一个高效的顶头孢霉遗传操作系统,并且顶头孢霉中sorbicillinoids的缺失可以提高CPC产量。(本文来源于《中国抗生素杂志》期刊2019年07期）
林凡,张震宇,孙付保,于林[3]（2018）在《sucA缺失型大肠杆菌菌株的构建与发酵条件优化》一文中研究指出反式-4-羟脯氨酸在多领域具有重要应用价值。为了进一步提高反式-4-羟脯氨酸的产量,在已构建好的E. coli BL21(DE3)△putA的基础上,敲除基因sucA的同时插入密码子优化后的反式-4-羟化酶基因(hyp),并将构建好的质粒pUC19-ptrp2-hyp-vgb导入该基因敲除菌株中。之后在摇瓶水平上,单因素优化发酵条件与发酵培养基的组分,并通过正交实验进一步确定敲除菌株的培养条件。结果表明:与含有同样质粒的原菌和两种单敲除菌E. coli BL21(DE3)△sucA、E. coli BL21(DE3)△putA相比,E. coli BL21(DE3)△putA△sucA双敲除菌具有最高的全细胞酶活,大约是原菌的2.6倍;在摇瓶水平上,发酵条件优化后,以100 mmol/L的L-脯氨酸为底物进行发酵,12 h后可得到1.08 g/L的羟脯氨酸,是优化前的3.87倍。(本文来源于《食品与生物技术学报》期刊2018年08期）
崔红晶,袁源,陈亚芹,邱堃佩,赵炜[4]（2018）在《酵母ATG8与PMT1双基因缺失菌株的构建及鉴定》一文中研究指出目的构建自噬相关ATG8与蛋白质O-甘露糖转移酶1(PMT1)双基因缺失酵母菌株。方法一步基因置换法构建ATG8基因缺失菌株(BY4741 atag8::LEU2);通过将不同配型的酵母细胞杂交、显微镜下四分体拆分,平板印记、缺陷型培养基筛选等方法,构建ATG8和PMT1双基因缺失菌株(BY4742 agt8::LEU2 PMT1::URA3);PCR鉴定阳性克隆基因组DNA。结果 ATG8基因缺失菌株电泳条带为2759 bp和980 bp,ATG8和PMT1双基因缺失菌株电泳条带分别为2759 bp,980bp,1630 bp和731 bp。四分体拆分实验发现ATG8基因缺失酵母细胞形成较小的单克隆。结论成功构建ATG8基因缺失菌株和ATG8与PMT1双基因缺失菌株;缺失ATG8基因酵母细胞形成较小的单克隆。(本文来源于《牡丹江医学院学报》期刊2018年04期）
牟蕾,衣静莉,李星志,王虹,张志[5]（2018）在《一株高拮抗活性菌株的鉴定及其抗菌活性缺失突变体的获得》一文中研究指出本研究以黄瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporum)和青枯劳尔氏菌(Ralstonia solanacearum)为指示菌,从大豆植物根际土壤中筛选到一株拮抗活性较高的菌株(D-7),经Rec A基因序列分析,鉴定其为新洋葱伯克霍尔德氏菌(Burkholderia cenocepacia)。经PCR检测,该菌株不存在毒性基因BCESM(esmR)和cbl A。致病性分析发现该菌株对苜蓿幼苗和洋葱没有致病性。为了解该菌株的抗菌物质合成相关基因,利用Tn5转座子突变法构建菌株D-7的突变体库,并筛选获得10株对黄瓜枯萎病菌抗菌活性减弱的突变体。对各突变株插入位点分析发现,其中5个突变株的Tn5转座子插入到同一基因,该基因编码葡萄糖抑制的分裂蛋白A(Glucose-inhibited division protein A,Gid A),其余5株突变体的插入位点分别位于不同的基因上,编码的蛋白包括糖基转移酶(Glycosyl transferase)、Ⅱ型分泌系统蛋白(typeⅡsecretion system protein)等,表明菌株D-7的抗真菌能力有多个基因参与。(本文来源于《山东农业科学》期刊2018年07期）
揭金鑫,韩云艳,张彩丽,刘尊英,曾名涌[6]（2018）在《Shewanella baltica luxR基因缺失菌株的构建及其功能初步研究》一文中研究指出细菌的luxR基因作为群体感应信号分子受体蛋白的编码基因,在细菌的群体感应及其调控的功能中发挥着重要作用。为探究冷藏凡纳滨对虾特定腐败菌波罗的海希瓦氏菌(Shewanella baltica)(WT SA03)的群体感应现象,采用PCR融合和同源重组法构建了S.baltica的luxR基因缺失菌株(ΔluxR WT SA03),对比研究了luxR基因缺失后WT SA03的生长、产硫能力及蛋白表达的差异。结果表明,经PCR扩增融合后的重组质粒在大肠杆菌中成功表达,并通过接合反应将质粒从大肠杆菌转移到野生型S.baltica WT SA03中,构建了S.baltica的luxR基因缺失株。进一步研究表明,S.baltica的luxR基因缺失对其生长并无影响,但luxR基因对其产硫能力影响显着。表明luxR基因与WT SA03的致腐能力密切相关。研究结果为深入解析S.baltica的luxR基因功能及其调控的细菌群体感应与致腐机制提供了基础。(本文来源于《食品科技》期刊2018年06期）
梁佳元,孙蕾,王毳[7]（2018）在《RD105基因缺失法和双重PCR法对125株结核分枝杆菌菌株基因分型检测》一文中研究指出目的为明确比较RD105基因缺失法和双重PCR法对辽宁地区结核分枝杆菌中北京家族菌株的检测能力,同时掌握辽宁地区结核杆菌中北京家族菌株的流行情况而进行该项研究。方法选取2011—2013年间辽宁省内各地市临床分离菌株,随机抽取经传统方法菌种鉴定为结核分枝杆菌的菌株,共计125株。选用超声破碎法提取菌株DNA,应用RD105基因缺失法和双重PCR法,同时对收集到的125株结核分枝杆菌进行特异性扩增,最后使用琼脂糖凝胶水平电泳对扩增的结果进行判断。结果两种方法判断标准为:RD105基因缺失法结果中,出现283 bp大小片段的为北京家族菌株,不出现特异性条带的为非北京家族菌株;双重PCR法结果中,只出现393 bp大小片段的为北京家族菌株,而只出现570 bp大小片段为非北京家族菌株。使用上述两种方法鉴定本研究的125株结核分枝杆菌,结果完全相同,其中北京家族菌株有110株(88%),非北京家族菌株有15株(12%)。结论 RD105基因缺失法和双重PCR法对辽宁地区结核分枝杆菌中北京家族菌株的检测能力相当,并且北京家族菌株在辽宁地区流行的结核分枝杆菌中为绝对优势株;两种方法相对于传统的Spoligotyping法更简单、更省时,检测成本也较低,更适合在我国多数实验室推广应用。(本文来源于《中国热带医学》期刊2018年06期）
管章春,韩殿鹏,李静静,刘成华,高亚萍[8]（2018）在《金黄色葡萄球菌β-溶血素基因缺失突变菌株构建的研究》一文中研究指出目的:研究金黄色葡萄球菌(金葡菌)β-溶血素基因(hlb)缺失突变菌株的构建。方法:提取金葡菌COL基因组DNA,采用PCR扩增hlb基因上下游片段,构建同源重组序列;将卡那霉素抗性基因(kan)与同源重组序列连接,构建含有kan基因的同源重组序列;利用卡那霉素和氯霉素筛选获得已同源重组菌株和PCR、RTPCR和Western blot方法鉴定突变菌株中hlb基因的表达。结果:基因组PCR结果显示,突变菌株COL~(hlb)的基因组缺失hlb基因,以及进一步的RT-PCR和Western Blot结果均表明COL~(hlb)菌株不表达hlb。结论:金葡菌hlb基因敲除菌株COL~(hlb)构建成功,为β-溶血素参与金葡菌致病过程的机制研究奠定基础。(本文来源于《抗感染药学》期刊2018年03期）
付松[9]（2018）在《黑曲霉缺失突变体菌株ΔsodC的构建》一文中研究指出为探究黑曲霉中的超氧化物歧化酶编码基因sodC在其抗氧化代谢方面所起的作用,构建得到黑曲霉缺失突变体菌株ΔsodC。根据同源重组的技术原理,以黑曲霉基因组DNA为模板,扩增获得目的基因sodC的上下游侧翼片段,利用重迭序列对上下游片段进行PCR连接。将该片段与质粒pC3进行连接,并将其转入DH5α感受态细胞,通过蓝白斑筛选及PCR鉴定,得到已构建成功的重组质粒。通过CaCl_2/PEG转化法将重组质粒转入黑曲霉原生质体。通过多步骤的筛选及基因组DNA序列的检测,得到所需突变体菌株ΔsodC以备后续研究使用。(本文来源于《农业灾害研究》期刊2018年03期）
支飞杰[10]（2018）在《布鲁氏菌GntR缺失菌株构建及其对山羊肺泡巨噬细胞内质网应激的影响》一文中研究指出布鲁氏菌(Brucella)是革兰阴性细菌,多呈小球杆状或短杆状。布鲁氏菌能够感染人和多种动物,其中包括羊、牛和猪等家畜,引起重要的人兽共患传染病—布鲁氏菌病(Brucellosis)。布鲁氏菌病不仅对畜牧业造成巨大损失,而且还严重危害人类健康。布鲁氏菌作为兼性胞内寄生菌主要感染吞噬细胞和胚胎滋养层细胞,并且能够逃脱溶酶体杀伤从而完成胞内循环,造成机体的长期感染。山羊肺泡巨噬细胞作为布鲁氏菌感染的主要靶细胞,具有吞噬、免疫和分泌细胞因子的作用。本研究构建布鲁氏菌S2菌株(B.suis.S2)GntR样转录调控因子BSS2_II0438(GntR)原核表达载体,制备GntR多克隆抗体。通过同源重组方法构建B.suis.S2的GntR基因缺失菌株(ΔGntR),研究GntR基因的缺失对Ⅳ型分泌系统(the typeⅣsecretion system,T4SS)的影响和ΔGntR菌株在山羊肺泡巨噬细胞内增殖情况,通过检测内质网应激(ER stress,ERS)相关蛋白的表达变化,分析ΔGntR菌株与内质网相互作用中的关系;同时,检测山羊肺泡巨噬细胞培养液中TNF-α,IFN-γ,IL-1β和IL-10的变化,探究ΔGntR菌株感染山羊肺泡巨噬细胞期间细胞免疫活性的变化。试验结果如下:1.克隆B.suis.S2菌株的GntR基因,构建PET32a-GntR原核表达载体,表达并纯化GntR融合蛋白。免疫小鼠,经叁次基础免疫和一次加强免疫之后,ELISA检测抗体效价,达标后小鼠眼眶采血并分离血清,即获得GntR多克隆抗体。2.构建重组载体PUC19-GntR,经酶切和测序鉴定正确后,通过电转化将重组载体PUC19-GntR转入B.suis.S2感受态细胞中,经50μg/m L庆大霉素抗性TSA固体平板培养基筛选、PCR筛选和Western blotting验证,获得ΔGntR菌株。利用qRT-PCR的方法,检测ΔGntR菌株的T4SS结构基因的表达,表明VirB1、VirB9和VirB11无显着差异,而VirB2、Vir B6和VirB8显着下调,结果表明GntR基因的缺失可以影响T4SS结构基因的表达。3.检测ΔGntR菌株在山羊肺泡巨噬细胞内增殖,试验表明GntR基因的缺失不影响布鲁氏菌在胞内的增殖。通过qRT-PCR检测GRP78和CHOP的表达以及Western-blotting检测GRP78的表达,表明ΔGntR菌株在感染山羊肺泡巨噬细胞前期GRP78表达量增加,而在后期GRP78表达量减少;CHOP在感染前期表达量无显着差异,但后期表达量显着升高。结果表明GntR参与了布鲁氏菌与内质网的相互作用。改变ERS状态检测ΔGntR菌株在胞内增殖的数量,试验表明抑制ERSΔGntR菌株胞内增殖数量增加。此外,通过ELISA分别检测TNF-α,IFN-γ,IL-1β和IL-10的变化,表明TNF-α的表达量在感染12 h和24 h时显着增加(P<0.05),但在感染48 h后TNF-α的表达量无显著差异。结果表明ΔGntR菌株在感染前期能够促进早期TNF-α的分泌。(本文来源于《西北农林科技大学》期刊2018-05-01）
缺失菌株论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的获得顶头孢霉sorA和sorB双缺失菌株,以阻断sorbicillinoids的合成,并研究其与头孢菌素C(CPC)产量的关系。方法通过根癌农杆菌转化法,依据同源双交换的原理,同时敲除合成sorbicillinoids骨架结构的两个聚酮合酶基因sorA和sorB,并通过摇瓶发酵实验检测缺失菌和野生菌的产量。结果筛选并验证了6株A. chrysogenum-?pks菌株,遗传稳定,转化效率约为20%。通过发酵实验测定发现,缺失菌株产CPC能力比野生菌提高了70%。结论农杆菌转化法是一个高效的顶头孢霉遗传操作系统,并且顶头孢霉中sorbicillinoids的缺失可以提高CPC产量。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
缺失菌株论文参考文献
[1].吴同垒,苏硕青,李巧玲,史秋梅,张志强.狐源沙门菌cpxR基因缺失菌株的构建及部分表型研究[J].中国兽医学报.2019
[2].陈国枝,储炬.农杆菌转化法高效构建顶头孢霉sorA和sorB双缺失菌株提高头孢菌素C产量[J].中国抗生素杂志.2019
[3].林凡,张震宇,孙付保,于林.sucA缺失型大肠杆菌菌株的构建与发酵条件优化[J].食品与生物技术学报.2018
[4].崔红晶,袁源,陈亚芹,邱堃佩,赵炜.酵母ATG8与PMT1双基因缺失菌株的构建及鉴定[J].牡丹江医学院学报.2018
[5].牟蕾,衣静莉,李星志,王虹,张志.一株高拮抗活性菌株的鉴定及其抗菌活性缺失突变体的获得[J].山东农业科学.2018
[6].揭金鑫,韩云艳,张彩丽,刘尊英,曾名涌.ShewanellabalticaluxR基因缺失菌株的构建及其功能初步研究[J].食品科技.2018
[7].梁佳元,孙蕾,王毳.RD105基因缺失法和双重PCR法对125株结核分枝杆菌菌株基因分型检测[J].中国热带医学.2018
[8].管章春,韩殿鹏,李静静,刘成华,高亚萍.金黄色葡萄球菌β-溶血素基因缺失突变菌株构建的研究[J].抗感染药学.2018
[9].付松.黑曲霉缺失突变体菌株ΔsodC的构建[J].农业灾害研究.2018
[10].支飞杰.布鲁氏菌GntR缺失菌株构建及其对山羊肺泡巨噬细胞内质网应激的影响[D].西北农林科技大学.2018