导读:本文包含了单核源性巨噬细胞论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:猪,lncRNA,单核源性巨噬细胞,FSL-1
单核源性巨噬细胞论文文献综述
赵为民,方晓敏,涂枫,周李生,李碧侠[1]（2019）在《猪单核源性巨噬细胞受FSL-1刺激后lncRNAs的鉴定与特征分析》一文中研究指出lncRNA是新近发现的一种具有重要功能的RNA分子,在各种生理活动中发挥着重要作用。为鉴定猪单核源性巨噬细胞受FSL-1刺激后相关的lncRNA,利用二代测序技术结合生物信息学对lncRNA进行了组装与特征分析。结果显示FSL-1刺激成功地构建了细胞炎症模型,试验组与对照组共鉴定到1 056个lncRNA转录本,其对应于831个基因座,这些lncRNA的平均长度为1 643 bp,平均外显子数为2.4个。相对于对照组,试验组有51个lncRNA上调表达,44个lncRNA下调表达。在上调lncRNA两侧相邻的蛋白质编码基因参与免疫反应、炎症反应、病毒反应等通路,而在下调lncRNA两侧相邻的蛋白质编码基因参与的通路较少,不参与上述通路。定量PCR结果显示挑选的4个lncRNA的差异倍数与RNA-Seq的结果相似,其中上调的lncRNA呈现一定的组织特异表达,而下调的lncRNA呈现多组织表达。这些结果为进一步研究lncRNA在FSL-1介导的炎症反应中的作用奠定了基础。(本文来源于《江苏农业学报》期刊2019年02期）
刘承[2]（2017）在《姜黄素对人源性单核巨噬细胞胆固醇流出及IL-6、TNF-α、MCP-1分泌的影响及其机制研究》一文中研究指出目的:研究姜黄素对人单核细胞白血病细胞(human acute monocytic leukemiacell line,THP-1)源性巨噬细胞胆固醇逆转运相关蛋白的表达,胆固醇外流和肿瘤坏死因-α(tumornecrosis factor,TNF-α)、单核细胞趋化因子-1(Monocyte chemotactic protein-1,MCP-1)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)分泌的影响,深究其可能存在的机制,为姜黄素抗动脉粥样硬化(Artherosclerosis,AS)提供可靠理论基础,进一步为姜黄素预防和治疗心血管疾病提供一定的实验依据。方法:本实验以体外培养的THP-1细胞为研究对象,用佛波酯(Phorbol-12-myristate-13-acetate,PMA)诱导生成巨噬细胞,按照以下方法进行实验1姜黄素毒性检测以不同终浓度(0-80 μM)的姜黄素与THP-1巨噬细胞孵育24h,细胞计数试剂盒(CellCountingKit-8,CCK-8)检测细胞活性。2姜黄素对THP-1巨噬细胞miR33a、TLR4、ABCA1的表达和胞内脂质含量,泡沫细胞形成率,IL-6、TNF-α和MCP-1分泌的影响实验分组:(1)空白对照组;(2)氧化型低密度脂蛋白(oxidized lowdensity lipoprotein,ox-LDL)(50 μg/mL)组;(3)ox-LDL+ 姜黄素(40 μM)组;油红O染色处理细胞,光镜下观察细胞形态,计算泡沫细胞形成率,酶法测量胞内脂质含量,计算胞内胆固醇酯(cholesterol ester,CE)与总胆固醇(total cholesterol,TC)之比(CE/TC),实时荧光定量聚合酶链反应(Real-Time qPCR,RT-qPCR)测定 ATP 结合盒转运体 A1(ATP-binding cassette transporter A1,ABCA1)、微型 RNA(MicroRNA,miRNA)33a、Toll 样受体(Toll-like receptor,TLR)4 mRNA的表达,蛋白质免疫印迹法(Western Blot)检测ABCA1、TLR4蛋白含量,酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)试剂盒测定 IL-6、TNF-α和 MCP-1 的含量。3不同浓度和不同作用时间的姜黄素对THP-1巨噬细胞胆固醇流出率的影响ox-LDL诱导THP-1源性巨噬细胞吸收脂质,与不同浓度(0-40μM)或不同作用时间(6-24 h)条件的姜黄素共孵育,胆固醇荧光标记测定胆固醇流出率。4脂质体转染检测实验分组:(1)空白对照组;(2)泡沫细胞模型组;(3)ox-LDL+miR33a inhibitor 组;(4)ox-LDL+control sequence 组;使用提前设计的miR33a inhibitor和control sequence以脂质体转染法将其转染入THP-1巨噬细胞,RT-qPCR测定miR33a的表达。5姜黄素通过miR33a影响ABCA1表达,胆固醇流出率,IL-6、TNF-αMCP-1 的分泌实验分组:(1)空白对照组;(2)泡沫细胞模型组;(3)ox-LDL+姜黄素组;(4)ox-LDL+miR33 inhibitor组;(5)ox-LDL+姜黄素+miR33a inhibitor 组;(6)ox-LDL+control sequence 组;(7)ox-LDL+姜黄素+control sequence 组;RT-qPCR 测定 ABCA1 mRNA 的表达,Western Blot 测定 ABCA1 蛋白含量,荧光标记法检测胆固醇流出率,ELIS A试剂盒测定IL-6、TNF-αMCP-1的含量。6姜黄素对NF-κB/miR33a通路的影响实验分组:(1)空白对照组;(2)泡沫细胞模型组;(3)ox-LDL+姜黄素;(4)ox-LDL+NF-κB抑制剂PDTC组;RT-qPCR检测miR33amRNA的表达,Western Blot检测胞核内核转录因子 kappa B(nuclear factor kappa B,NF-κB)的表达、胞浆内 NF-κB 抑制剂α(NF-κB inhibitor alpha,IκBα)和磷酸化 IκBα(phosphorylation IκBα,p-IκBα)的表达。7姜黄素通过NF-κB/miR33a通路影响ABCA1表达,胆固醇流出率以及IL-6、TNF-α、MCP-1 的分泌实验分组:(1)空白对照组;(2)泡沫细胞模型组;(3)ox-LDL+姜黄素组;(4)ox-LDL+miR3 3 a inhibitor组;(5)ox-LDL+PDTC 组;(6)ox-LDL+姜黄素+miR33a inhibitor 组;(7)ox-LDL+姜黄素+PDTC组;(8)ox-LDL+ control sequence 组;RT-qPCR 测定 ABCA1 mRNA 的表达,Western Blot 测定 ABCA1 蛋白含量,荧光标记法检测胆固醇流出率,ELISA试剂盒测定IL-6、TNF-α和MCP-1的含量。8姜黄素通过TLR4/NF-KB/miR33a通路影响ABCA1表达,胆固醇流出率以及IL-6、TNF-α和MCP-1的分泌实验分组:(1)空白对照组;(2)泡沫细胞模型组;(3)ox-LDL+姜黄素组;(4)ox-LDL+TLR4抗体组;(5)ox-LDL+姜黄素+TLR4抗体组;(6)ox-LDL+TLR4同源非特异抗体组;(7)ox-LDL+姜黄素+TLR4同源非特异抗体组;RT-qPCR 检测 miR33a 和 ABCA1 mRNA 的表达,Western Blot 检测ABCA1蛋白含量和胞核内NF-κB p65、胞浆内IKBα和p-IκBα的含量,荧光标记法检测胆固醇流出率,ELISA试剂盒测定IL-6、TNF-α和MCP-1的含量。结果:1姜黄素毒性检测与空白对照组相比,在0-40 μM浓度范围内,姜黄素对细胞活性无显着影响(P>0.05),而在80 μM浓度时,姜黄素引起细胞活性下降,差异具有统计学意义(P<0.05)。2姜黄素增加THP-1巨噬ABCA1的表达,抑制miR33a,TLR4的表达和IL-6、TNF-α和MCP-1的分泌,降低胞内脂质含量和泡沫细胞形成率与空白对照组相比,ox-LDL组胞内脂质大量集聚,泡沫细胞形成率增高,脂质含量增加,CE/TC高达65.09±1.30,miR33a和TLR4表达增高,IL-6、TNF-α和MCP-1分泌增加,ABCA1表达下降。与ox-LDL组比较,ox-LDL+姜黄素组胞内脂质含量降低,miR33a和TLR4表达下降,IL-6、TNF-α和MCP-1分泌减少,ABCA1表达增高,差异具有统计学意义(P<0.05)。3 THP-1巨噬细胞胆固醇流出率与姜黄素浓度或作用时间成正相关与泡沫细胞模型组相比,10-40 μM浓度和6-24h作用时间的姜黄素能显着增加胆固醇流出率,且流出率与姜黄素浓度和作用时间正相关,差异具有统计学意义(P<0.05),而ox-LDL+5μM姜黄素组与模型组之间无显着差异(P>0.05),48h与24h作用时间组无显着差异(P>0.05)。4脂质体转染检测与空白对照组相比,泡沫细胞模型组miR33amRNA的表达显着增加,差异具有统计学意义(P<0.05)。与泡沫细胞模型组相比,ox-LDL+miR33a inhibitor组miR33amRNA的表达显着下降,差异具有统计学意义(P<0.05),而 ox-LDL+control sequence 组与模型组无显着差异(P>0.05)。5姜黄素通过抑制miR33a增加ABCA1表达,胆固醇流出率,降低IL-6、TNF-α和MCP-1的分泌与空白对照组相比,泡沫细胞模型组ABCA1的表达明显降低,IL-6、TNF-α和MCP-1分泌增加,差异具有统计学意义(P<0.05)。与泡沫细胞模型组相比,ox-LDL+姜黄素组和ox-LDL+miR33a inhibitor组ABCA1的表达和胆固醇流出率显着增加,IL-6、TNF-α和MCP-1的分泌减少,差异具有统计学意义(P<0.05),而ox-LDL+control sequence组与泡沫细胞模型组无显着差异(P>0.05)。6姜黄素抑制NF-κB/miR33a通路与空白对照组相比,泡沫细胞模型组miR33a的表达明显增加,胞核内NF-κB p65和胞浆p-IκBα的表达增加,胞浆内IκBα的表达下降,差异具有统计学意义(P<0.05)。与泡沫细胞模型组相比,ox-LDL+姜黄素组和ox-LDL+NF-κB阻断剂PDTC组miR33a的表达均显着降低,胞核内NF-κB p65和胞浆p-IκBα的表达减少,胞浆内IκBα的表达上调,差异具有统计学意义(P<0.05)。7姜黄素通过抑制NF-KB/miR33a通路增加ABCA1表达,胆固醇流出率,降低IL-6、TNF-α和MCP-1的分泌与空白对照组相比,泡沫细胞模型组ABCA1的表达明显降低,IL-6、TNF-α、MCP-1分泌增加,差异具有统计学意义(P<0.05)。与泡沫细胞模型组相比,ox-LDL+ 姜黄素组、ox-LDL+PDTC 组、ox-LDL+miR33a inhibitor组ABCA1的表达和胆固醇流出率显着增加,IL-6、TNF-α、MCP-1的分泌降低,差异具有统计学意义(P<0.05),而ox-LDL+control sequence组与泡沫细胞模型组无显着差异(P>0.05)。8姜黄素通过抑制TLR4/NF-KB/miR33a通路增加ABCA1表达和胆固醇流出率,降低IL-6、TNF-α、MCP-1的分泌与空白对照组相比,泡沫细胞模型组miR33a的表达增加,胞核内NF-κB p65和胞浆内p-IKBα的蛋白量增加,胞浆内IκBα的蛋白量下降,ABCA1的表达下降,IL-6、TNF-α、MCP-1分泌增加,差异具有统计学意义(P<0.05)。与泡沫细胞模型组相比,ox-LDL+姜黄素组、ox-LDL+TLR4抗体组miR33a的表达均显着降低,胞核内NF-κB p65和胞浆内p-IκBα的蛋白量下降,胞浆内IκBα的蛋白量增高,ABCA1的表达和胆固醇流出率上升,IL-6、TNF-α、MCP-1的分泌降低,差异具有统计学意义(P<0.05),而ox-LDL+TLR4同源非特异抗体组与泡沫细胞模型组无显着差异(P>0.05)。结论:1在0-40 μM的浓度范围内,姜黄素对THP-1巨噬细胞无毒性;2姜黄素在适当的浓度范围(10-40 μM)和作用时间(6-24h)内对胆固醇流出率呈浓度、时间依赖递增效应;3 TLR4/NF-κB/miR33a信号通路介导了 THP-1巨噬细胞胆固醇逆转运相关蛋白ABCA1的表达和胆固醇外流,参与调节IL-6、TNF-α和MCP-1的分泌;4姜黄素可以通过TLR4/NF-κB/miR33a信号通路增加THP-1巨噬细胞胆固醇逆转运相关蛋白ABCA1的表达和胆固醇外流,降低IL-6、TNF-α和MCP-1的分泌。(本文来源于《西南医科大学》期刊2017-05-01）
丁娟[3]（2017）在《hucMSCs源性外泌体对单核巨噬细胞表型及功能影响的研究》一文中研究指出目的:研究体外人脐带间质干细胞(huc MSCs)及其外泌体对单核巨噬细胞表型和部分功能的影响。方法:1.采用组织块贴壁法,从人脐带组织中培养间质干细胞,后续实验使用3~6代huc MSCs。2.huc MSCs与单核巨噬细胞共培养条件的摸索及使用Luminex方法初筛炎症因子的分泌变化并对部分因子做进一步确定。3.采用高速超速离心法提取huc MSCs的外泌体,用Western blot及电镜做进一步鉴定,使用BCA蛋白测定法检测外泌体的浓度,并调整浓度为0.1 mg/m L备用。4.采用普通PCR及实时荧光定量PCR(q RT-PCR)检测huc MSCs及其来源的外泌体作用单核巨噬细胞后炎性因子IL-8、IL-12、IL-10 m RNA的表达;采用蛋白印迹法及ELISA法从蛋白水平检测huc MSCs及其来源的外泌体作用单核巨噬细胞后,单核巨噬细胞及其培养上清液中IL-8、IL-12、IL-10的表达;应用MTT法及Annexin V-FITC、PI双染色法及Transwell法等检测huc MSCs及其来源的外泌体对单核巨噬细胞增殖、凋亡和迁移等功能的影响。结果:1.成功分离培养并鉴定hucMSCs及其来源的外泌体。2.hucMSCs与单核巨噬细胞共培养比例为1:2时,细胞生长状态良好,且在此比例下培养24 h时,相关炎性因子m RNA的分泌水平变化相对较明显。3.huc MSCs及其来源的外泌体在某种程度上可抑制M1型巨噬细胞因子IL-8、IL-12等的表达而上调M2型巨噬细胞因子IL-10等的表达。4.huc MSCs及来源外泌体在一定程度上可能促进单核巨噬细胞的增殖、抑制其凋亡并显着增加其迁移能力。结论:1.在体外hucMSCs及其外泌体可能促使单核巨噬细胞向M2型极化。2.huc MSCs及其外泌体可抑制单核巨噬细胞凋亡并增强其增殖和迁移能力。3.通过分泌外泌体可能是huc MSCs对单核巨噬细胞表型极化及部分功能影响的途径之一。(本文来源于《蚌埠医学院》期刊2017-05-01）
鄢雯,李囡,刘立新,夏山,刘扬[4]（2016）在《SCARF1在人THP-1单核源性巨噬细胞抗烟曲霉菌刺激中的作用》一文中研究指出目的:运用干扰腺病毒沉默THP1细胞中SCARF1基因研究其在体外抗烟曲霉中的作用。方法:用灭活的烟曲霉分生孢子(1×105 CFU/m L)于不同时间点处理THP-1细胞,RT-PCR分别检测SCARF1和TNF-αm RNA的表达;将Ad-si RNA-SCARF1转导细胞24 h后给予烟曲霉孢子刺激24 h,通过RT-PCR法检测细胞中TNF-αm RNA表达,Western blot法检测细胞中SCARF1表达以及NF-κB通路相关信号分子的活性。结果:RT-PCR证实烟曲霉孢子刺激能时间依赖性增强THP1细胞中SCARF1和TNF-α表达;Western法证实与Ad-GFP组比较Ad-si RNA-SCARF1组SCARF1的表达量显着降低(P<0.05),沉默效率为71%;与Ad-GFP组比较,Ad-GFP+Af组NF-κB亚单位p65的磷酸化水平明显升高(P<0.05),在Ad-si RNA-SCARF1+Af组,磷酸化p65的产生明显减少,SCARF1沉默后细胞因子TNF-α的分泌明显减少。结论:烟曲霉孢子刺激能诱导巨噬细胞SCARF1的表达增加,诱导信号分子NF-κB的活化,导致相应的细胞因子分泌增加,从而在巨噬细胞抗烟曲霉中发挥作用。(本文来源于《现代生物医学进展》期刊2016年25期）
郑晶晶[5]（2016）在《血源性单核巨噬细胞在中枢神经系统损伤中的作用》一文中研究指出中枢神经系统(CNS)损伤是体外循环(cardiopulmonary bypass,CPB)心脏手术最常见的术后并发症。主动脉插管部位斑块脱落造成的血管栓塞以及手术和麻醉过程中的缺血再灌注是CPB脑损伤的主要原因。脑组织缺血缺氧损伤后损伤区局部大量小胶质细胞被活化产生细胞因子募集血液中(本文来源于《2016中国中西医结合麻醉学会[CSIA]年会暨第叁届全国中西医结合麻醉学术研讨会、河南省中西医结合学会麻醉专业委员会成立大会论文汇编》期刊2016-06-23）
刘承,李家富,冯健,钟毅[6]（2016）在《姜黄素对ox-LDL诱导的人单核巨噬细胞源性泡沫细胞形成的影响及机制》一文中研究指出目的研究姜黄素对氧化型低密度脂蛋白(oxidized lowdensitylipoprotein,ox-LDL)诱导的人单核巨噬细胞源性泡沫细胞形成的影响及其可能的机制。方法采用体外培养的人单核细胞白血病细胞(human acute monocytic leukemia cell line,THP-1)作为研究对象,由佛波酯(Phorbol-12-myristate-13-acetate,PMA)刺激人单核细胞为巨噬细胞,再加入ox-LDL(50μg·m L~(-1))诱导复制形成泡沫细胞模型。实验分为空白对照组,模型组,姜黄素组,Toll样受体(Toll-like receptor,TLR)4抗体组,TLR4抗体+姜黄素组,TLR4同源非特异性抗体组。采用油红O染色观察细胞形态;实时荧光定量PCR和蛋白印迹法检测TLR4的表达;酶法测定细胞内总胆固醇(total cholesterol,TC)、游离胆固醇(free cholesterol,FC)、胆固醇酯(cholesterol ester,CE)和甘油叁酯(triglyceride,TG)。结果与空白对照组比较,模型组TLR4 m RNA和蛋白表达增加(P<0.05),ox-LDL刺激使巨噬细胞胞内红染颗粒显着增多,且细胞大量聚集。与模型组比较,姜黄素组TLR4 m RNA和蛋白表达降低(P<0.05);姜黄素组、TLR4抗体组、TLR4抗体+姜黄素组胞内红染颗粒显着减少,细胞的聚集减轻,胞内TC、FC、CE和TG的含量明显降低(P<0.05);而TLR4同源非特异性抗体组的差异没有统计学意义(P>0.05)。结论姜黄素通过抑制TLR4表达,降低胞内脂质的含量,减少人单核巨噬细胞源性泡沫细胞的形成。(本文来源于《中药新药与临床药理》期刊2016年03期）
哈丽娜,赵丽,张辉,杨安宁,姜怡邓[7]（2015）在《枸杞多糖对同型半胱氨酸致THP-1单核细胞源性巨噬细胞脂质沉积及内质网应激的影响》一文中研究指出目的探讨枸杞多糖(LBP)对同型半胱氨酸(Hcy)致THP-1单核细胞源性巨噬细胞脂质沉积及内质网应激(ERS)的影响。方法复制THP-1单核细胞源性巨噬细胞模型,共分为以下6组:NC组不做其他处理,Hcy组选用100μmol/L的Hcy干预,20 LBP组选用终浓度100μmol/L的Hcy+20μg/m L的LBP干预,50 LBP组选用终浓度100μmol/L的Hcy+50μg/m L的LBP干预,100 LBP组选用终浓度100μmol/L的Hcy+100μg/m L的LBP干预,200 LBP组选用终浓度100μmol/L的Hcy+200μg/m L的LBP干预。显微镜下观察巨噬细胞模型是否复制成功;RT-q PCR分析脂肪酸结合蛋白4(FABP4)mRNA表达改变;免疫荧光检测巨噬细胞内FABP4蛋白含量的变化;ELISA检测细胞内氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)及内质网应激标志蛋白(CHOP、GRP78、XBP-1)含量的变化。结果成功复制THP-1单核细胞源性巨噬细胞模型。与NC组比较,Hcy组巨噬细胞内ox-LDL及FABP4的含量及内质网应激标志蛋白表达显着增加(P<0.05,P<0.01)。而不同LBP作用浓度组间比较,oxLDL含量和FABP4 mRNA水平,50LBP组、100LBP组、200LBP组与Hcy组比较,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01),100LBP组、200LBP组与50LBP组比较差异有统计学意义(P<0.05)。200 LBP组与Hcy组、50 LBP组比较,GRP78含量差异统计学意义(P<0.05,P<0.01)。100 LBP组、200 LBP组与Hcy组比较,CHOP含量差异有统计学意义(P<0.01),200 LBP组与50 LBP组比较,CHOP含量差异有统计学意义(P<0.05)。50 LBP组、100LBP组、200 LBP组与Hcy组比较,Xbp-1含量差异有统计学意义(P<0.01),100 LBP组、200 LBP组与50 LBP组比较,Xbp-1含量差异有统计学意义(P<0.01)。结论随着LBP浓度的增加,可逐渐减少Hcy导致的THP-1单核细胞源性巨噬细胞内的脂质沉积及内质网应激蛋白含量,从而发挥抗动脉粥样硬化的作用。(本文来源于《广东医学》期刊2015年18期）
都基莎,顾宁[8]（2015）在《宁心痛颗粒对人类单核细胞株源性巨噬细胞泡沫化的影响》一文中研究指出目的探讨宁心痛颗粒干预动脉粥样硬化易损斑块的可能作用机制。方法 SD大鼠分别灌胃宁心痛颗粒3、15、30、60 g/(kg·d)浓煎剂4天,制备宁心痛颗粒等剂量、5倍、10倍、20倍含药血清。实验分为巨噬细胞组、模型组及宁心痛颗粒含药血清等剂量5倍、10倍、20倍剂量组。除巨噬细胞组外其余各组采用氧化低密度脂蛋白体外诱导正常生长的人类单核细胞株(THP-1)细胞建立巨噬细胞泡沫化模型。宁心痛颗粒含药血清各剂量组分别加入相应剂量的含药血清,使含药血清终浓度为3%,每组实验重复4次。运用Western blot法检测各组细胞脂蛋白受体清道夫受体A(SRA)、CD36蛋白表达水平。结果模型组细胞SRA、CD36蛋白表达含量较巨噬细胞组明显增高(P<0.05);宁心痛颗粒含药血清各剂量组细胞SRA、CD36蛋白水平均较模型组明显降低(P<0.01);宁心痛颗粒含药血清10倍剂量组细胞SRA、CD36的蛋白表达水平低于宁心痛颗粒其他剂量组(P<0.01)。结论宁心痛颗粒能够下调巨噬细胞SRA、CD36蛋白表达,从而抑制泡沫细胞的形成,可能是其干预动脉粥样硬化易损斑块的分子机制之一。(本文来源于《中医杂志》期刊2015年15期）
郭敏,闫蕊,史宏涛,王彩霞,郭爽[9]（2015）在《阿托伐他汀对急性冠脉综合征患者外周血单核细胞源性巨噬细胞脂蛋白相关磷脂酶A2的影响》一文中研究指出目的观察阿托伐他汀对急性冠脉综合征(ACS)患者外周血单核细胞源性巨噬细胞脂蛋白相关磷脂酶A2[Lp-PLA(2)]的影响。方法入选2013年3月—2013年12月ACS患者38例,分离培养ACS患者外周血单核细胞源性巨噬细胞,分为4组:空白对照组、氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)组、阿托伐他汀低浓度组和阿托伐他汀高浓度组。分别给予不同处理,收集培养细胞上清液及巨噬细胞,实时定量RT-PCR法检测巨噬细胞Lp-PLA(2)mRNA表达,Western-blot法检测巨噬细胞Lp-PLA(2)蛋白表达,ELISA法检测培养细胞上清液Lp-PLA(2)、超敏C反应蛋白(hsCRP)、单核细胞趋化因子(MCP-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素6(IL-6)水平。结果 ox-LDL刺激可以明显增加ACS患者外周血单核细胞源性巨噬细胞Lp-PLA(2)mRNA与蛋白的表达,而阿托伐他汀可以显着降低其诱导的Lp-PLA(2)表达增加及炎症因子分泌,且该反应呈浓度依赖性。结论阿托伐他汀抑制ACS患者外周血单核细胞源性巨噬细胞Lp-PLA(2)的表达,从而起到调节炎症反应,稳定斑块作用。(本文来源于《中西医结合心脑血管病杂志》期刊2015年05期）
康文[10]（2015）在《经Hutat2:Fc基因修饰的人单核细胞源性巨噬细胞抗HIV相关神经认知紊乱的实验研究》一文中研究指出研究背景和目的:HIV-1反式激活因子Tat对HIV的复制至关重要,也是导致HIV相关神经认知功能紊乱(HIV-associated neurocognitive disorder,HAND)的重要神经毒性因子。抗逆转录病毒治疗不能有效抑制脑内HIV的复制,且不能阻止病毒早期蛋白尤其是Tat的产生,尚不能彻底治愈HAND。HIV感染一旦建立,脑内的HIV感染的巨噬细胞和胶质细胞可不断释放Tat至细胞外,由此产生直接和间接的神经毒性。因此,设法在脑内产生稳定的抗Tat抗体将可中和Tat,保护神经细胞。本研究将构建人源化抗Tat单链抗体-Fc融合蛋白Hutat2:Fc,通过慢病毒载体转导至人单核细胞系、神经细胞系和原代人单核细胞源性巨噬细胞(human monocyte-derived macrophages,hMDM),观察其在不同细胞中的表达情况,并评价Hutat2:Fc融合蛋白的生理学功能及潜在的副作用。单核/巨噬细胞可自由的通过血脑屏障(blood-brain barrier,BBB),是较为理想的中枢神经系统药物或基因递送载体,以此为载体的治疗方法的建立需要很好的了解体外培养的单核细胞在炎症情况下经外周循环向脑内迁徙效率。故本研究还将对大肠杆菌脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的脑炎情况下小鼠骨髓源性单核细胞(bonemarrowderivedmonocytes,bmdm)向脑内迁徙的规律和特点进行初步观察。方法:将构建的融合了人igg1引导序列、人源化抗-tat单链抗体hutat2、人igg3fc段的重组基因片段(hutat2:fc)连入tat基因敲除的转移质粒骨架phr-hb7-ires-egfp,与pcmv-Δr8.2、pcmv-vsv-g共转染293t细胞制备重组慢病毒载体hr-hutat2。用重组慢病毒载体分别转导人神经细胞系htb-11、单核细胞系u937和hmdm,通过免疫荧光染色、qrt-pcr、westernblot法和elisa检测细胞重组融合蛋白hutat2:fc的表达和分泌。通过免疫斑点结合实验和westernblot法体外检测hutat2:fc与tat的结合作用,通过细胞活力和细胞相对存活率检测评价hutat2:fc对tat诱导的htb-11和原代小鼠皮质神经元毒性的保护作用,通过p24定量来评价hutat2:fc对hiv-1感染的hmdm的病毒抑制作用。通过对细胞形态学、细胞生长动力学、qrt-pcr对15个hmdm功能相关基因表达的检测,及对hmdm分泌的il1β、il8、il10和tnf-α的检测来评价慢病毒基因转导的潜在的副作用。用lps小鼠脑炎模型评价经鼠尾静脉输注的超顺磁性氧化铁(superparamagneticironoxide,spio)标记的外源性小鼠bmdm和gfp转基因小鼠bmdm向中枢神经系统迁徙的特点和分布规律。结果:慢病毒载体可高效转导实验细胞系和hmdm(转导效率分别为99%,95%和53%)。转导的细胞可长期、稳定的表达目的蛋白。在细胞内和细胞培养上清液中均可检测到正确形式的hutat2:fc融合蛋白,hutat2:fc融合蛋白可在细胞培养上清液中累积至高浓度。hutat2:fc可体外结合hiv-1tat,拮抗tat对htb-11细胞系和原代小鼠皮质神经元的毒性作用。分泌的hutat2:fc和hr-hutat2转导的hmdm可显着抑制hiv-1bal感染的人巨噬细胞p24的表达及hiv-1诱导的细胞病变效应。慢病毒载体介导的基因转导对细胞形态学和细胞活力无显着影响。15个检测基因中,转导的hmdm的il8、stat1和ido1基因表达上调,但并未观察到这些基因表达上调对hutat2:fc的神经保护作用的影响。体外培养的小鼠bmdm细胞可迁徙入lps诱导的脑炎小鼠患侧大脑,在移植后第2天数目达到高峰,随后逐渐聚集在炎性部位周围,进入脑内的单核细胞数目随脑内炎症的消散而逐渐减少。结论:慢病毒载体介导的基因转导可有效的将目的基因导入人细胞系和hmdm,且不引起hmdm明显的免疫激活。受试人类细胞系和原代hmdm表达的hutat2:fc融合蛋白具有与完全tat单克隆抗体相似的神经保护和抑制hiv复制的效果。小鼠bmdm可在脑内炎症情况下迁徙入大脑并聚集在患侧炎性部位周围。本研究为利用以Hutat2:Fc为工具的、以单核/巨噬细胞为基因运载工具的HAND的基因治疗奠定了理论和实验基础。(本文来源于《第四军医大学》期刊2015-05-01）
单核源性巨噬细胞论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:研究姜黄素对人单核细胞白血病细胞(human acute monocytic leukemiacell line,THP-1)源性巨噬细胞胆固醇逆转运相关蛋白的表达,胆固醇外流和肿瘤坏死因-α(tumornecrosis factor,TNF-α)、单核细胞趋化因子-1(Monocyte chemotactic protein-1,MCP-1)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)分泌的影响,深究其可能存在的机制,为姜黄素抗动脉粥样硬化(Artherosclerosis,AS)提供可靠理论基础,进一步为姜黄素预防和治疗心血管疾病提供一定的实验依据。方法:本实验以体外培养的THP-1细胞为研究对象,用佛波酯(Phorbol-12-myristate-13-acetate,PMA)诱导生成巨噬细胞,按照以下方法进行实验1姜黄素毒性检测以不同终浓度(0-80 μM)的姜黄素与THP-1巨噬细胞孵育24h,细胞计数试剂盒(CellCountingKit-8,CCK-8)检测细胞活性。2姜黄素对THP-1巨噬细胞miR33a、TLR4、ABCA1的表达和胞内脂质含量,泡沫细胞形成率,IL-6、TNF-α和MCP-1分泌的影响实验分组:(1)空白对照组;(2)氧化型低密度脂蛋白(oxidized lowdensity lipoprotein,ox-LDL)(50 μg/mL)组;(3)ox-LDL+ 姜黄素(40 μM)组;油红O染色处理细胞,光镜下观察细胞形态,计算泡沫细胞形成率,酶法测量胞内脂质含量,计算胞内胆固醇酯(cholesterol ester,CE)与总胆固醇(total cholesterol,TC)之比(CE/TC),实时荧光定量聚合酶链反应(Real-Time qPCR,RT-qPCR)测定 ATP 结合盒转运体 A1(ATP-binding cassette transporter A1,ABCA1)、微型 RNA(MicroRNA,miRNA)33a、Toll 样受体(Toll-like receptor,TLR)4 mRNA的表达,蛋白质免疫印迹法(Western Blot)检测ABCA1、TLR4蛋白含量,酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)试剂盒测定 IL-6、TNF-α和 MCP-1 的含量。3不同浓度和不同作用时间的姜黄素对THP-1巨噬细胞胆固醇流出率的影响ox-LDL诱导THP-1源性巨噬细胞吸收脂质,与不同浓度(0-40μM)或不同作用时间(6-24 h)条件的姜黄素共孵育,胆固醇荧光标记测定胆固醇流出率。4脂质体转染检测实验分组:(1)空白对照组;(2)泡沫细胞模型组;(3)ox-LDL+miR33a inhibitor 组;(4)ox-LDL+control sequence 组;使用提前设计的miR33a inhibitor和control sequence以脂质体转染法将其转染入THP-1巨噬细胞,RT-qPCR测定miR33a的表达。5姜黄素通过miR33a影响ABCA1表达,胆固醇流出率,IL-6、TNF-αMCP-1 的分泌实验分组:(1)空白对照组;(2)泡沫细胞模型组;(3)ox-LDL+姜黄素组;(4)ox-LDL+miR33 inhibitor组;(5)ox-LDL+姜黄素+miR33a inhibitor 组;(6)ox-LDL+control sequence 组;(7)ox-LDL+姜黄素+control sequence 组;RT-qPCR 测定 ABCA1 mRNA 的表达,Western Blot 测定 ABCA1 蛋白含量,荧光标记法检测胆固醇流出率,ELIS A试剂盒测定IL-6、TNF-αMCP-1的含量。6姜黄素对NF-κB/miR33a通路的影响实验分组:(1)空白对照组;(2)泡沫细胞模型组;(3)ox-LDL+姜黄素;(4)ox-LDL+NF-κB抑制剂PDTC组;RT-qPCR检测miR33amRNA的表达,Western Blot检测胞核内核转录因子 kappa B(nuclear factor kappa B,NF-κB)的表达、胞浆内 NF-κB 抑制剂α(NF-κB inhibitor alpha,IκBα)和磷酸化 IκBα(phosphorylation IκBα,p-IκBα)的表达。7姜黄素通过NF-κB/miR33a通路影响ABCA1表达,胆固醇流出率以及IL-6、TNF-α、MCP-1 的分泌实验分组:(1)空白对照组;(2)泡沫细胞模型组;(3)ox-LDL+姜黄素组;(4)ox-LDL+miR3 3 a inhibitor组;(5)ox-LDL+PDTC 组;(6)ox-LDL+姜黄素+miR33a inhibitor 组;(7)ox-LDL+姜黄素+PDTC组;(8)ox-LDL+ control sequence 组;RT-qPCR 测定 ABCA1 mRNA 的表达,Western Blot 测定 ABCA1 蛋白含量,荧光标记法检测胆固醇流出率,ELISA试剂盒测定IL-6、TNF-α和MCP-1的含量。8姜黄素通过TLR4/NF-KB/miR33a通路影响ABCA1表达,胆固醇流出率以及IL-6、TNF-α和MCP-1的分泌实验分组:(1)空白对照组;(2)泡沫细胞模型组;(3)ox-LDL+姜黄素组;(4)ox-LDL+TLR4抗体组;(5)ox-LDL+姜黄素+TLR4抗体组;(6)ox-LDL+TLR4同源非特异抗体组;(7)ox-LDL+姜黄素+TLR4同源非特异抗体组;RT-qPCR 检测 miR33a 和 ABCA1 mRNA 的表达,Western Blot 检测ABCA1蛋白含量和胞核内NF-κB p65、胞浆内IKBα和p-IκBα的含量,荧光标记法检测胆固醇流出率,ELISA试剂盒测定IL-6、TNF-α和MCP-1的含量。结果:1姜黄素毒性检测与空白对照组相比,在0-40 μM浓度范围内,姜黄素对细胞活性无显着影响(P>0.05),而在80 μM浓度时,姜黄素引起细胞活性下降,差异具有统计学意义(P<0.05)。2姜黄素增加THP-1巨噬ABCA1的表达,抑制miR33a,TLR4的表达和IL-6、TNF-α和MCP-1的分泌,降低胞内脂质含量和泡沫细胞形成率与空白对照组相比,ox-LDL组胞内脂质大量集聚,泡沫细胞形成率增高,脂质含量增加,CE/TC高达65.09±1.30,miR33a和TLR4表达增高,IL-6、TNF-α和MCP-1分泌增加,ABCA1表达下降。与ox-LDL组比较,ox-LDL+姜黄素组胞内脂质含量降低,miR33a和TLR4表达下降,IL-6、TNF-α和MCP-1分泌减少,ABCA1表达增高,差异具有统计学意义(P<0.05)。3 THP-1巨噬细胞胆固醇流出率与姜黄素浓度或作用时间成正相关与泡沫细胞模型组相比,10-40 μM浓度和6-24h作用时间的姜黄素能显着增加胆固醇流出率,且流出率与姜黄素浓度和作用时间正相关,差异具有统计学意义(P<0.05),而ox-LDL+5μM姜黄素组与模型组之间无显着差异(P>0.05),48h与24h作用时间组无显着差异(P>0.05)。4脂质体转染检测与空白对照组相比,泡沫细胞模型组miR33amRNA的表达显着增加,差异具有统计学意义(P<0.05)。与泡沫细胞模型组相比,ox-LDL+miR33a inhibitor组miR33amRNA的表达显着下降,差异具有统计学意义(P<0.05),而 ox-LDL+control sequence 组与模型组无显着差异(P>0.05)。5姜黄素通过抑制miR33a增加ABCA1表达,胆固醇流出率,降低IL-6、TNF-α和MCP-1的分泌与空白对照组相比,泡沫细胞模型组ABCA1的表达明显降低,IL-6、TNF-α和MCP-1分泌增加,差异具有统计学意义(P<0.05)。与泡沫细胞模型组相比,ox-LDL+姜黄素组和ox-LDL+miR33a inhibitor组ABCA1的表达和胆固醇流出率显着增加,IL-6、TNF-α和MCP-1的分泌减少,差异具有统计学意义(P<0.05),而ox-LDL+control sequence组与泡沫细胞模型组无显着差异(P>0.05)。6姜黄素抑制NF-κB/miR33a通路与空白对照组相比,泡沫细胞模型组miR33a的表达明显增加,胞核内NF-κB p65和胞浆p-IκBα的表达增加,胞浆内IκBα的表达下降,差异具有统计学意义(P<0.05)。与泡沫细胞模型组相比,ox-LDL+姜黄素组和ox-LDL+NF-κB阻断剂PDTC组miR33a的表达均显着降低,胞核内NF-κB p65和胞浆p-IκBα的表达减少,胞浆内IκBα的表达上调,差异具有统计学意义(P<0.05)。7姜黄素通过抑制NF-KB/miR33a通路增加ABCA1表达,胆固醇流出率,降低IL-6、TNF-α和MCP-1的分泌与空白对照组相比,泡沫细胞模型组ABCA1的表达明显降低,IL-6、TNF-α、MCP-1分泌增加,差异具有统计学意义(P<0.05)。与泡沫细胞模型组相比,ox-LDL+ 姜黄素组、ox-LDL+PDTC 组、ox-LDL+miR33a inhibitor组ABCA1的表达和胆固醇流出率显着增加,IL-6、TNF-α、MCP-1的分泌降低,差异具有统计学意义(P<0.05),而ox-LDL+control sequence组与泡沫细胞模型组无显着差异(P>0.05)。8姜黄素通过抑制TLR4/NF-KB/miR33a通路增加ABCA1表达和胆固醇流出率,降低IL-6、TNF-α、MCP-1的分泌与空白对照组相比,泡沫细胞模型组miR33a的表达增加,胞核内NF-κB p65和胞浆内p-IKBα的蛋白量增加,胞浆内IκBα的蛋白量下降,ABCA1的表达下降,IL-6、TNF-α、MCP-1分泌增加,差异具有统计学意义(P<0.05)。与泡沫细胞模型组相比,ox-LDL+姜黄素组、ox-LDL+TLR4抗体组miR33a的表达均显着降低,胞核内NF-κB p65和胞浆内p-IκBα的蛋白量下降,胞浆内IκBα的蛋白量增高,ABCA1的表达和胆固醇流出率上升,IL-6、TNF-α、MCP-1的分泌降低,差异具有统计学意义(P<0.05),而ox-LDL+TLR4同源非特异抗体组与泡沫细胞模型组无显着差异(P>0.05)。结论:1在0-40 μM的浓度范围内,姜黄素对THP-1巨噬细胞无毒性;2姜黄素在适当的浓度范围(10-40 μM)和作用时间(6-24h)内对胆固醇流出率呈浓度、时间依赖递增效应;3 TLR4/NF-κB/miR33a信号通路介导了 THP-1巨噬细胞胆固醇逆转运相关蛋白ABCA1的表达和胆固醇外流,参与调节IL-6、TNF-α和MCP-1的分泌;4姜黄素可以通过TLR4/NF-κB/miR33a信号通路增加THP-1巨噬细胞胆固醇逆转运相关蛋白ABCA1的表达和胆固醇外流,降低IL-6、TNF-α和MCP-1的分泌。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
单核源性巨噬细胞论文参考文献
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