导读:本文包含了胞外解聚酶论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:P34HB,P34HB解聚酶,Paecilomyces,sp.DS1407,生物降解
胞外解聚酶论文文献综述
谢丽娟[1]（2014）在《拟青霉DS1407菌株的选育及其胞外解聚酶的研究》一文中研究指出3-羟基丁酸-co-4-羟基丁酸共聚物(P34HB)是聚羟基烷酸酯(PHAs)家族的第四代产品,具有广泛的应用前景。而且由于第二单体的成功引入,P34HB的力学性能与聚乙烯(PE)、聚丙烯(PP)非常相似,可以用传统塑料设备进行成型加工,因此在工业、农业、医药等领域具有广泛的应用前景。在本文的研究中,从自然界中分离得到一株可降解P34HB的真菌菌株,经18S rDNA的比对,发现该菌株与Paecilomyces nostocoides等拟青霉菌属有99%的相似性,并结合其菌落特征及菌体形态,可鉴定该菌株为拟青霉菌属(Paecilomyces),最终命名为Paecilomyces sp.DS1407。采用单因素实验和正交试验对菌株DS1407的发酵条件进行了优化。单因素条件优化结果为：温度为28℃,pH为7.0,含碳量为0.25%(w/v),装液量为75/250mL,培养时间为4天；根据单因素条件优化结果,设计一个四因素叁水平的正交试验,最终确定菌株DS1407的最佳产酶条件为：温度为28℃,pH为7.0,含碳量为0.3%(w/v),装液量为50/250mL。经过验证实验得出较单因素实验酶活力提高了41%。对菌株DS1407分泌的胞外解聚酶进行了分离纯化。粗酶液通过离心、冻干、阳离子交换层析及疏水层析等步骤纯化出一个分子量约为55kDa的胞外P34HB解聚酶,经计算其纯化倍数为8.86,回收率为21.33%。该P34HB解聚酶的最适反应温度和pH分别30℃和6.0,当温度低于50℃时及pH4.0-7.0的范围内均能保持较高的酶活力。Mg2+离子一定程度上促进该解聚酶活力,Ca2+、Zn2+、Fe2+、Fe3+、Cu2+、Mn2+不同程度地抑制该解聚酶活力；而甘油等几种有机溶剂、EDTA及PMSF两种抑制剂均对该解聚酶有抑制作用。在底物特异性方面,该酶可降解不同碳链长度的对硝基苯酯,具有酯酶活性；除了可降解P34HB外,还可降解PHB和PHBV,但不能降解同是脂肪族的聚己内酯(PCL)和聚乳酸(PLA)。纯化的P34HB解聚酶对C4的底物催化效率最高,经质谱检测该P34HB解聚酶降解P34HB的主要产物为羟基丁酸单体(HB),推测该解聚酶降解P34HB的模式是一种外切酶的方式,即每次从端链切下一个羟基丁酸,且对3HB-3HB酯键、4HB-4HB酯键和3HB-4HB酯键无差异识别。(本文来源于《东北师范大学》期刊2014-06-01）
冯夫妮[2]（2010）在《PHBV胞外解聚酶的纯化及酶学性质的研究》一文中研究指出目前最常见的生物降解材料是聚羟基烷酸酯(PHAs)。PHAs具有类似于通用塑料的物化特性,生物可降解性,生物相容性,资源可再生性等。PHBV(3-羟基丁酸与3-羟基戊酸的共聚物)是PHAs的一种,具有优良的理化性质和较好的加工性能,最有工业前景和吸引力。但是目前关于PHBV降解的研究还较少,本论文研究门多萨假单胞菌对PHBV的降解,分离纯化PHBV胞外解聚酶,并对酶学性质进行表征。主要结果如下:1、PHBV的降解。通过PHBV粉末固体平板点植法培养,菌落周围出现了透明圈,培养2d透明圈的直径是2cm,培养4d透明圈的直径是3.7cm。PHBV粉末液体培养降解实验表明,24d PHBV粉末完全消失。PHBV膜降解实验表明,PHBV膜在实验室摇瓶培养下6d彻底降解。2、PHBV胞外解聚酶分离纯化。本实验优化了分离纯化步骤,经离心,超滤,冻干,凝胶层析得到纯酶,酶的纯化倍数是109.06,酶活回收率是4%。3、PHBV解聚酶分子量测定。已纯化的PHBV胞外解聚酶,经TCA沉淀后,进行SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)。PHBV解聚酶纯酶的相对分子量为30.3kDa。4、PHBV胞外解聚酶酶学性质。PHBV解聚酶粗酶和纯酶的酶学性质差别不大,最适反应温度为50℃,在10-50℃的温度范围内比较稳定,最适反应pH为8.6,在pH值为8-9.5范围内稳定性较好。不同种类、浓度的金属离子对PHBV解聚酶活力的影响不同。Ca2+、Mn2+、Co2+、K+对PHBV解聚酶有明显的激活作用,Cu2+、Fe3+、Zn2+对PHBV解聚酶有明显的抑制作用,Mg2+、Na+对PHBV解聚酶没有明显的影响。当金属离子的浓度由1mM提高到5mM时,其相应的离子对PHBV解聚酶的相应影响进一步加强。0.1%(w/v)SDS和4M脲素对PHBV解聚酶有明显的激活作用,Tween-20、EDTA、巯基乙醇对PHBV解聚酶基本没有影响。5、降解产物测定。粗酶和纯酶的的降解产物均为3-羟基丁酸。(本文来源于《东北师范大学》期刊2010-05-01）
胞外解聚酶论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目前最常见的生物降解材料是聚羟基烷酸酯(PHAs)。PHAs具有类似于通用塑料的物化特性,生物可降解性,生物相容性,资源可再生性等。PHBV(3-羟基丁酸与3-羟基戊酸的共聚物)是PHAs的一种,具有优良的理化性质和较好的加工性能,最有工业前景和吸引力。但是目前关于PHBV降解的研究还较少,本论文研究门多萨假单胞菌对PHBV的降解,分离纯化PHBV胞外解聚酶,并对酶学性质进行表征。主要结果如下:1、PHBV的降解。通过PHBV粉末固体平板点植法培养,菌落周围出现了透明圈,培养2d透明圈的直径是2cm,培养4d透明圈的直径是3.7cm。PHBV粉末液体培养降解实验表明,24d PHBV粉末完全消失。PHBV膜降解实验表明,PHBV膜在实验室摇瓶培养下6d彻底降解。2、PHBV胞外解聚酶分离纯化。本实验优化了分离纯化步骤,经离心,超滤,冻干,凝胶层析得到纯酶,酶的纯化倍数是109.06,酶活回收率是4%。3、PHBV解聚酶分子量测定。已纯化的PHBV胞外解聚酶,经TCA沉淀后,进行SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)。PHBV解聚酶纯酶的相对分子量为30.3kDa。4、PHBV胞外解聚酶酶学性质。PHBV解聚酶粗酶和纯酶的酶学性质差别不大,最适反应温度为50℃,在10-50℃的温度范围内比较稳定,最适反应pH为8.6,在pH值为8-9.5范围内稳定性较好。不同种类、浓度的金属离子对PHBV解聚酶活力的影响不同。Ca2+、Mn2+、Co2+、K+对PHBV解聚酶有明显的激活作用,Cu2+、Fe3+、Zn2+对PHBV解聚酶有明显的抑制作用,Mg2+、Na+对PHBV解聚酶没有明显的影响。当金属离子的浓度由1mM提高到5mM时,其相应的离子对PHBV解聚酶的相应影响进一步加强。0.1%(w/v)SDS和4M脲素对PHBV解聚酶有明显的激活作用,Tween-20、EDTA、巯基乙醇对PHBV解聚酶基本没有影响。5、降解产物测定。粗酶和纯酶的的降解产物均为3-羟基丁酸。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
胞外解聚酶论文参考文献
[1].谢丽娟.拟青霉DS1407菌株的选育及其胞外解聚酶的研究[D].东北师范大学.2014
[2].冯夫妮.PHBV胞外解聚酶的纯化及酶学性质的研究[D].东北师范大学.2010
标签：P34HB; P34HB解聚酶; Paecilomyces; sp.DS1407; 生物降解;