导读:本文包含了脱氧寡核苷酸论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4,脱氧寡核苷酸,佐剂,疫苗
脱氧寡核苷酸论文文献综述
李鑫[1]（2018）在《CTLA-4 mRNA 3'UTR靶向性脱氧寡核苷酸的疫苗佐剂效应》一文中研究指出细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4)是表达在活化T细胞表面的一种重要的免疫抑制性分子。T细胞活化需要两个信号:抗原提呈细胞(APCs)表面MHC分子提呈的抗原肽与T细胞表面的T细胞受体(TCR)相互作用产生T细胞活化的第一信号;APCs表面的CD80或CD86与T细胞表面的CD28相互作用产生T细胞活化的第二信号。CTLA-4可通过与T细胞表面的CD28竞争结合APCs表面的CD80或CD86对T细胞活化发挥抑制作用。因此,抑制CTLA-4介导的免疫抑制性信号,可以促进T细胞活化,从而增强T细胞依赖的抗体应答,使CTLA-4抑制剂发挥疫苗佐剂效应。基于此,本研究设计并筛选了靶向CTLA-4 mRNA 3’非编码区(3’UTR)的单链脱氧寡核苷酸(ODNs),以此抑制CD4~+T细胞表面CTLA-4的表达水平,并确定其作用机制及对抗体应答的促进作用,为新型疫苗佐剂的研究提供了一个新策略。中文摘要CTLA-4 mRNA 3’UTR靶向性脱氧寡核苷酸的疫苗佐剂效应T细胞活化在T细胞依赖的抗体应答中发挥着重要作用,而细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4)是表达在活化T细胞表面的一种重要的抑制性分子,可以与T细胞表面的CD28竞争结合抗原提呈细胞(APCs)表面的CD80或CD86,从而抑制T细胞活化。因此,阻断CTLA-4介导的免疫抑制性信号,可以促进T细胞的活化,从而增强T细胞依赖的抗体应答。本研究以人和小鼠CTLA-4 mRNA 3’非翻译区(3’UTR)的保守序列为靶点,设计了两个CTLA-4mRNA 3’UTR靶向性脱氧寡核苷酸(ODNs),CMD-1和CMD-2,并对这两个ODNs对CTLA-4表达的抑制作用及增强抗体应答的疫苗佐剂效应进行了研究,结果如下:1.CTLA-4 mRNA 3’UTR靶向性ODN的设计、筛选及鉴定为了获得CTLA-4 mRNA 3’UTR靶向性ODNs,我们通过网络数据库和生物信息软件,以人和小鼠CTLA-4 mRNA 3’UTR的保守序列为靶点,设计了一系列CTLA-4 mRNA 3’UTR候选靶向性ODNs,并通过生物信息软件对ODNs二级结构、自由能及靶点序列的二级结构等进行了分析,初步筛选并合成了两个ODNs,分别命名为CMD-1和CMD-2。结果显示,CMD-1和CMD-2形成分子间或分子内二级结构所需的自由能较高,而与靶区mRNA结合所需的自由能较低,并且不易非特异性地结合其他与CTLA-4无关的mRNA。由此可见,从理论上看,CMD-1和CMD-2相对不易形成分子间或分子内二级结构,易与靶区mRNA结合,并且具有良好的特异性。2.CTLA-4 mRNA 3’UTR靶向性ODN对CTLA-4抑制作用的研究为了研究CTLA-4 mRNA 3’UTR靶向性ODN对CTLA-4的抑制作用,我们首先对ODNs进入靶细胞的动力学进行了分析,然后分别采用流式细胞术和实时定量PCR(RT-PCR)法分析了ODNs对CTLA-4蛋白质及mRNA水平的影响,并对其作用机制进行了探讨。2.1 CMD-1及CMD-2进入靶细胞的动力学分析由于CTLA-4主要在CD4~+T细胞上发挥在生物学功能,因此,我们采用荧光标记的CMD-1和CMD-2,以体外和体内示踪的方法检测了两种ODNs进入CD4~+T细胞的情况。结果显示:1)CMD-1和CMD-2能以相似的效率进入体外培养淋巴结细胞中的CD4~+T细胞,并随着孵育时间的延长,CMD-1或CMD-2进入CD4~+T细胞的比例逐渐增加;2)CMD-1和CMD-2在CD4~+T细胞中的分布情况相似;3)当以肌肉注射的给药方式注射于na?ve ICR小鼠的右后肢时,CMD-1和CMD-2主要分布在注射部位同侧的腘窝淋巴结,在注射6、12及24 h后,注射部位同侧腘窝淋巴结的CD4~+T中均可以检测到CMD-1或CMD-2。以上结果提示,CMD-1和CMD-2可以进入CD4~+T细胞,这为ODNs在体内发挥作用提供了可能。2.2 CMD-1及CMD-2对CTLA-4表达的抑制作用为了研究CMD-1和CMD-2在进入CD4~+T细胞后是否可以对CTLA-4的表达发挥抑制作用,我们用重组Cp蛋白刺激Cp蛋白免疫小鼠的脾细胞,使T细胞活化,诱导小鼠CTLA-4的表达,在刺激细胞的过程中加入CMD-1或CMD-2,检测CMD-1或CMD-2对小鼠CD4~+T表面CTLA-4表达水平的影响。结果显示,CMD-1可以显着降低小鼠CD4~+T细胞表面CTLA-4的表达水平,而CMD-2对CTLA-4的表达没有显着抑制作用。为了进一步检测CMD-1和CMD-2是否可以抑制人CD4~+T细胞表面CTLA-4的表达,我们用佛波酯(PMA)和离子霉素(IONO)刺激人外周血细胞,使其中的T细胞活化,诱导CTLA-4的表达,同时加入CMD-1或CMD-2,检测CMD-1或CMD-2对人CD4~+T细胞表面CTLA-4表达的影响。结果显示,CMD-1和CMD-2均能显着降低人CD4~+T细胞表面CTLA-4的表达水平;尽管两种ODNs对CTLA-4的抑制作用没有统计学差异,但用CMD-1处理的CD4~+T细胞表面表达CTLA-4百分率的平均值要低于CMD-2处理的细胞。以上结果提示,CMD-1对人和小鼠CD4~+T细胞表面CTLA-4的表达均有显着抑制作用,这不仅使我们可以在小鼠模型上研究CMD-1是否可以通过抑制CTLA-4的免疫抑制信号而发挥佐剂效应,也使CMD-1有应用于人的潜力。2.3 CMD-1及CMD-2对CTLA-4 mRNA的作用为了验证CMD-1对CTLA-4的抑制作用是否是通过干扰CTLA-4 mRNA实现的,我们检测了CMD-1和CMD-2在细胞内对CTLA-4 mRNA水平的影响。结果显示,与CMD-2相比,CMD-1在细胞内可以有效下调CTLA-4 mRNA的水平,并且随着CMD-1被消耗,其对CTLA-4 mRNA的干扰作用逐渐消失,甚至可以出现负反馈上调。为了研究CMD-1干扰CTLA-4 mRNA的作用机制,我们通过体外转录的方法合成了CTLA-4 mRNA,然后将CMD-1或CMD-2与CTLA-4 mRNA共孵育,并在反应体系中加入RNase H,检测RNase H对mRNA的切割效率。结果显示,与CMD-2相比,CMD-1可以更好的与CTLA-4 mRNA结合,诱导RNase H对mRNA的切割。以上结果提示,CTLA-4 mRNA 3’UTR靶向性ODN CMD-1是一种有效的CTLA-4抑制剂,它可以进入CD4~+T细胞,通过与CTLA-4的mRNA结合,诱导RNase H对靶mRNA的切割降解,进而抑制小鼠或人CD4~+T细胞表面CTLA-4的表达。3.CTLA-4 mRNA 3’UTR靶向性ODN的疫苗佐剂效应研究为了研究CMD-1是否可以通过抑制T细胞的CTLA-4抑制性信号而发挥增强抗体应答的疫苗佐剂效应,我们检测了CMD-1对疫苗免疫小鼠后抗体水平和免疫细胞的影响,并探究了其作用机制。3.1 CMD-1对疫苗免疫小鼠血清抗体水平的影响为了研究CMD-1是否具有作为疫苗佐剂的潜能,我们将ODNs与灭活病毒疫苗或重组亚单位疫苗联用免疫小鼠,检测ODNs对抗体水平的影响;并且对小鼠品系、ODN剂型及ODN剂量对ODNs佐剂效应的影响进行了研究。结果显示:1)在与灭活口蹄疫病毒(FMDV)疫苗联用免疫小鼠时,CMD-1可以在免疫的第21天和第28天显着提高小鼠的血清抗体水平;2)在与重组CPAC VLPs疫苗联用免疫小鼠时,CMD-1在免疫的第14、21及28天均能显着提高小鼠的血清抗体水平;3)CMD-1不仅能在ICR小鼠中发挥佐剂效应,也可以在BALB/c小鼠中发挥佐剂效应;4)CMD-1的佐剂效应在一定程度上受到乳化剂的影响;5)CMD-1的疫苗佐剂效应有剂量依赖性,5μg/只或10μg/只的CMD-1均能显着上调免疫小鼠的血清抗体水平。3.2 CMD-1对疫苗免疫小鼠免疫细胞的影响为了探索CMD-1在体内对免疫细胞的影响,我们用ODNs和CPAC VLPs疫苗联用免疫小鼠,于第二次免疫后的48 h检测了小鼠的免疫同侧引流区淋巴结细胞和脾细胞中CD4~+T细胞、CD11c~+细胞及CD19~+B细胞的变化。结果显示,CMD-1在与疫苗联用免疫小鼠时,可以显着抑制CD4~+T细胞表面CTLA-4的表达,从而使CD4~+T细胞的比例及CD11c~+细胞表面CD80表达比例显着上调,但对CD19~+B细胞的影响不明显。3.3 CMD-1发挥佐剂效应的机制研究为了对CMD-1发挥疫苗佐剂效应的机制进行研究,我们通过利用Cp蛋白刺激Cp蛋白免疫小鼠的脾细胞的体外实验体系诱导T细胞活化,在刺激过程中加入ODNs,进一步检测ODNs对CD11c~+细胞表面CD80/CD86的表达、CD4~+T细胞和CD19~+B细胞的增殖活化能力及T_H2重要细胞因子IL-4的影响。结果显示,CMD-1可以通过抑制T细胞的CTLA-4免疫抑制性信号,促进CD4~+T细胞的增殖活化,进而促进CD11c~+细胞表面CD80及CD86的维持,上调IL-4的表达并促进B细胞的增殖活化。以上结果提示,CMD-1可以通过抑制T细胞的CTLA-4免疫抑制性信号,促进T细胞依赖的抗体应答,从而在灭活病毒疫苗和重组亚单位疫苗中发挥提高抗体水平的佐剂效应。综上所述,CMD-1可以作为一种新型疫苗佐剂,通过抑制T细胞的CTLA-4免疫抑制性信号而发挥增强抗体应答的作用,这种通过抑制免疫抑制性信号从而增强免疫应答的思路为疫苗佐剂的设计提供了一种新策略。(本文来源于《吉林大学》期刊2018-06-01）
高爽[2]（2017）在《抑制性脱氧寡核苷酸通过DNA感受器的免疫调节作用和治疗脓毒症性腹膜炎的机制探讨》一文中研究指出固有免疫系统的过度激活可导致自身炎症或自身免疫性疾病。为了在抵御病原微生物和组织损伤的同时维持机体健康和免疫自稳状态,研发抑制固有免疫过度激活的药物是十分必要的。本课题组在前期的研究中已经证明SAT05f和MS19具有免疫调节(抑制)活性,可以减少自身组织细胞损伤,对治疗过度免疫激活显示出良好潜能。本研究中,我们尝试发掘抑制性脱氧寡核苷酸进入人单核细胞所激活的信号通路,研究发现SAT05f和MS19可以通过U937细胞表面受体DEC-205的内化作用进入细胞,被胞浆中的DNA感受器IFI16识别,启动IFN-α信号途径;用si RNA干涉IFI16可部分抑制SAT05f和MS19激活的IFN-α产生。另外,我们通过E.coli诱导建立小鼠脓毒症性腹膜炎模型,发现MS19可以延长模型小鼠生存期,下调i NOS和IRF5的表达,抑制M1型巨噬细胞的极化,干扰IRF5的核转运,防止下游炎症因子过度激活。这些结果将有助于阐明MS19的作用机理,为治疗炎症或自身免疫性疾病研制一种抑制性寡核苷酸药物提供了实验依据。(本文来源于《吉林大学》期刊2017-12-01）
惠长野,张文,杨学琴,李丽梅,陈钰婷[3]（2013）在《聚脱氧寡核苷酸生化药去纤苷用药安全性评价》一文中研究指出去纤苷(Defibrotide,DF)是意大利Gentium SpA公司开发的多组分生化药,是由猪小肠黏膜基因组DNA,通过控制解聚制得的分子量在15～30 ku的单链脱氧寡核苷酸钠盐的混合物,临床上用于治疗多发性骨髓瘤及由化疗和干细胞移植引发的肝小静脉闭塞症。DF毒理学资料对新兴的核酸类药物安全评价具有很高的借鉴价值。DF可以通过静脉注射及口服两种方式给药,静脉注射可以迅速达到最大血药浓度Cmax,口服30 min后可达到C_(max)。鉴于消化道DNase水解失活、小肠吸收效率及肝脏首过效应等因素,DF口服生物利用度只有58%～70%DF。急性毒性实验已在小鼠、大鼠、家兔和狗中开展,口服给药剂量高达3600～5000,300～570 mg·kg~(-1)iV,600～2280 mg·kg~(-1)ip,实验动物均无毒性反应发生。慢性毒性实验结果表明:大鼠口服给药3500 mg·kg~(-1)·d~(-1),持续用药8周;口服给药2000 mg·kg~(-1)·d~(-1),用药52周;400 mg·kg~(-1)iV 4周;150 mg·kg~(-1)ip 26周;80 mg·kg~(-1)im 13周;20 mg·kg~(-1)im 26周;均无毒性反应发生。家兔40 mg·kg~(-1)iV 14周;900 mg·kg~(-1)iV2.5周;Beagle犬口服3600 mg·kg~(-1)4周;口服2000 mg·kg~(-1)52周;150 mg·kg~(-1)iV 26周;20 mg·kg~(-1)im 52周,也无毒性反应发生。两代繁殖毒性、致畸实验证实其对大鼠、家兔无生殖毒性。DF被证实无免疫毒性,受试动物无过敏性反应发生,且不影响其细胞免疫应答。哺乳动物细胞染色体畸变、基因突变实验结果表明DF无致突变风险,而且可以拮抗某些化学致癌剂(二甲基苯并蒽、道诺霉素、苯并芘)的诱变活性。已证实DNA疫苗不会在体内广泛分布和长期滞留,同样DF注射给药的半衰期仅为10～30 min,而口服给药DF的清除需要数小时,主要通过尿液及粪便排出体外。多项临床试验已证实患者对DF口服给药具有很好的耐受性,过敏性或类变态反应如出汗、心动过速、红疹、瘙痒等发生率为1.9%～12.5%,偶见胃肠功能紊乱如恶心、呕吐、胃脘痛,发热、心悸、头晕、头痛和背痛也有少量报道。注射给药引起血液透析患者体位性低血压偶见报道。DF对凝血成分几乎没有影响,因而出血风险极低。DNA及其衍生物虽然没有免疫原性,但已出现DF引发Ⅰ型过敏反应的病例,这点在核酸类药物开发过程中值得借鉴。(本文来源于《中国毒理学会第六届全国毒理学大会论文摘要》期刊2013-11-12）
刘春梅,丁依玲[4]（2013）在《热休克蛋白70反义脱氧寡核苷酸对宫颈癌HeLa细胞生长和凋亡及化学治疗敏感性的影响》一文中研究指出目的:探讨反义脱氧寡核苷酸封闭HSP70基因对体外宫颈癌HeLa细胞增殖、凋亡及化疗敏感性的影响。方法:1)将体外培养的宫颈癌HeLa细胞分为正常对照组(Ctrl组)、反义寡核苷酸处理组(AS组)、正义寡核苷酸处理组(S组)、随机寡核苷酸处理组(R组),每组各5例,分别转染体外培养的宫颈癌HeLa细胞,采用Western免疫印迹检测各组细胞HSP70蛋白表达。2)将顺铂处理体外培养的宫颈癌HeLa细胞分为正常对照组(Ctrl组)、单纯顺铂处理组(Cis组)、反义寡核苷酸+顺铂处理组(AS+Cis组)、正义寡核苷酸+顺铂处理组(S+Cis组)、随机寡核苷酸+顺铂处理组(R+Cis组),每组各8例。采用四甲基偶氮唑蓝光吸收法(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法检测HeLa细胞的生长抑制率;流式细胞术检测HeLa细胞的凋亡率。结果:1)Ctrl组、AS组、S组、R组HSP70灰度比值分别为1.365±0.187,0.379±0.134,1.403±0.163和1.410±0.158,转染AS组HSP70灰度比值明显下降(P<0.01);2)AS+Cis组生长抑制率和凋亡率明显高于其它各组,差异有统计学意义(P<0.05),S+Cis组和R+Cis组细胞生长抑制率和凋亡率与Cis组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论:HSP70反义脱氧寡核苷酸通过下调HeLa细胞中HSP70蛋白表达,抑制细胞增殖并诱导细胞凋亡。HSP70反义脱氧寡核苷酸与顺铂联合具有协同作用,能提高细胞对顺铂化学治疗的敏感性。(本文来源于《国际病理科学与临床杂志》期刊2013年02期）
惠长野,张希,黄胜和[5]（2012）在《去纤苷——单链脱氧寡核苷酸生化药》一文中研究指出去纤苷是单链脱氧寡核苷酸混合物衍生的生化药,主要作用于内皮细胞并产生多种生物学效应,临床研究主要是围绕心血管功能紊乱的适应症来开展的。临床实验证实去纤苷可以有效预防及治疗肝小静脉闭塞症。最近,在一些动物实验中,去纤苷表现出了抗肿瘤及抗血管新生的活性。相关的研究一直在深入开展。(本文来源于《集成技术》期刊2012年03期）
杨光,杨凯,陆莹,杜洪伟,于波[6]（2012）在《CT-1反义脱氧寡核苷酸、AG490、川芎嗪抑制AngⅡ诱导的心肌细胞肥大》一文中研究指出目的探讨血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)对心肌营养素-1(cardiotrophin-1,CT-1)的影响及CT-1反义脱氧寡核苷酸、AG490、川芎嗪在CT-1诱导心肌细胞肥大中的作用。方法利用AngⅡ刺激心肌细胞造成细胞肥大、凋亡,应用CT-1反义脱氧寡核苷酸、AG490、川芎嗪进行干预。检测心肌细胞大小及3H-亮氨酸掺入率的变化;以及通过逆转录聚合酶链反应观察CT-1 mRNA表达。结果相差显微镜下可见经AngⅡ刺激的心肌细胞面积变大,3H-亮氨酸掺入率增高;CT-1 mRNA表达增加。CT-1反义脱氧寡核苷酸组心肌细胞面积较肥大组减小,3H-亮氨酸掺入率减少;CT-1 mRNA表达亦减少。AG490和川芎嗪减小心肌细胞面积、3H-亮氨酸掺入率,但不影响CT-1 mRNA的表达。结论 CT-1参与心肌细胞肥大,CT-1反义脱氧寡核苷酸、AG490、川芎嗪可减少心肌细胞肥大。(本文来源于《哈尔滨医科大学学报》期刊2012年02期）
徐丽粉,郭晓楠,刘英芳[7]（2012）在《细胞周期蛋白E2反义脱氧寡核苷酸对K562细胞增殖及凋亡的调控作用》一文中研究指出目的研究细胞周期蛋白E2(cyclin E2)反义脱氧寡核苷酸(ASON)对人红白血病细胞K562增殖的调控作用。方法采用反义技术合成ASON并与K562细胞共培养。用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测转染ASON和脂质体lipofectamineTM2000后的细胞活力,逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法检测转染细胞cyclin E2mRNA表达水平及流式细胞术和形态学观察检测细胞凋亡。结果 Cyclin E2特异的ASON能显着地抑制cyclin E2mRNA水平的表达(F=26.442,P<0.01);白血病细胞的生长明显受抑制(P<0.01),细胞凋亡明显增加。结果表明反义脱氧寡核苷酸能有效地抑制K562细胞的增殖,抑制K562细胞cyclin E2mRNA表达上调,并显着地诱导细胞凋亡。结论脂质体转染cyclin E2的反义寡核苷酸能够有效地抑制K562细胞cyclin E2mRNA的表达,同时对白血病细胞K562的生长有明显的抑制作用,并可诱导K562细胞凋亡。提示cyclin E2在细胞周期调控中起作用,cyclinE2基因有望作为反义技术治疗急性白血病中的一个较有意义的新靶点。(本文来源于《临床荟萃》期刊2012年01期）
崔岫,李玉香,张焱,朱万平,余建强[8]（2011）在《内皮素-1反义脱氧寡核苷酸对糖尿病大鼠心肌超微结构的影响》一文中研究指出目的研究内皮素-1反义脱氧寡核苷酸(ET-1AS-ODN)对链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导的糖尿病大鼠心肌超微结构的影响。方法一次性腹腔注射STZ(60mg.kg-1),建立大鼠糖尿病模型,并饲养5周后,造成糖尿病心肌损伤大鼠模型,ET-1AS-ODN干预,采用BL-420生物信号采集系统检测大鼠心功能,透射电镜观察大鼠心肌超微结构。结果 ET-1AS-ODN各剂量组均可使LVEDP、+dp/dtmax、-dp/dtmax表现出一定的改善(P<0.05,P<0.01);电镜观察可见ET-1AS-ODN各剂量组心肌细胞超微结构均明显改善,表现心肌细胞内肌节结构清晰、排列基本正常,线粒体增多、肿胀减轻、内嵴结构趋于清晰,排列整齐。结论内皮素-1反义寡核苷酸可减轻STZ诱导的糖尿病大鼠的心肌损伤,对心肌组织具有保护作用。(本文来源于《宁夏医科大学学报》期刊2011年12期）
杨爽,杨凯,陆莹,于波[9]（2011）在《心肌营养素-1反义脱氧寡核苷酸、AG490、川芎嗪抑制血管紧张素Ⅱ诱导的心肌细胞肥大、凋亡的影响》一文中研究指出目的建立血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)促心肌细胞肥大、凋亡的模型,观察AngⅡ对心肌营养素-1(CT-1)的影响,CT-1是否参与AngⅡ的作用;观察CT-1反义脱氧寡核苷酸、AG490、川芎嗪对心肌细胞肥大、凋亡的影响。方法利用AngⅡ刺激心肌细胞造成细胞肥大、凋亡,应用CT-1反义脱氧寡核苷酸、AG490、川芎嗪进行干预。检测心肌细胞大小及~3H-亮氨酸掺入率的变化;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)以观察CT-1 mRNA表达;酶联免疫法(ELISA)法定量检测心肌细胞凋亡。(本文来源于《第十叁次全国心血管病学术会议论文集》期刊2011-06-23）
刘春梅[10]（2011）在《热休克蛋白70反义脱氧寡核苷酸对宫颈癌HeLa细胞生长凋亡及化疗敏感性的影响》一文中研究指出目的探讨用反义脱氧寡核苷酸封闭宫颈癌Hela细胞的HSP70基因,对宫颈癌Hela细胞的增殖、凋亡及顺铂化疗敏感性的影响。方法1.分别对体外培养的宫颈癌Hela细胞进行转染,实验分为正常对照组、正义寡核苷酸处理组、反义寡核苷酸处理组、随即寡核苷酸处理组。采用Western blot检测各组细胞HSP70蛋白表达的请况。2.顺铂处理体外培养的宫颈癌Hela细胞,分为正常对照组、单纯顺铂处理组、反义寡核苷酸+顺铂处理组、正义寡核苷酸+顺铂处理组、随机寡核苷酸+顺铂处理组。采用MTT法检测经顺铂处理的各组HeLa细胞的生长抑制率；流式细胞术检测经顺铂处理的各组HeLa细胞的凋亡率。结果1.正常对照组、反义寡核苷酸处理组、正义寡核苷酸处理组、随机寡核苷酸处理组HSP70蛋白灰度比值分别为(1.37±0.19)、(0.38±0。13)、(1.40±0.16)、(1.41±0.16)。转染反义脱氧寡核苷酸组的HSP70蛋白表达明显下降(P<0.01),表明反义脱氧寡核苷酸转染能有效抑制宫颈癌Hela细胞HSP70蛋白的表达。2.正常对照组、单纯顺铂处理组、反义寡核苷酸+顺铂处理组、正义寡核苷酸+顺铂处理组、随机寡核苷酸+顺铂处理组细胞生长抑制率分别为(100.00+6.71)%、(81.29+5.42)%、(61.79士3.18)%、(81.72+6.41)%和(80.00±7.12)%。结果表明转染反义脱氧寡核苷酸组的生长抑制率明显高于其它各组(P<0.01),抑制HSP70蛋白表达能增强顺铂对Hela细胞的生长抑制。3.正常对照组、单纯顺铂处理组、反义寡核苷酸+顺铂处理组、正义寡核苷酸+顺铂处理组、随机寡核苷酸+顺铂处理组细胞凋亡率分别为(4.32±1.57)%、(14.86±2.65)%、(24.61±2.90)%、(16.63±3.01)和(16.01+2.71)%。反义脱氧寡核苷酸组与顺铂处理组相比凋亡率明显增高(P<0.05),与正常对照组相比P<0.01。结果表明抑制HSP70蛋白表达能增加顺铂诱导的Hela细胞调亡。结论HSP70反义脱氧寡核苷酸通过下调HeLa细胞中HSP70蛋白表达,协同顺铂抑制Hela细胞增殖及促进Hela细胞调亡,提高了Hela细胞对化疗的敏感性。HSP70可望成为宫颈癌基因治疗的一个新靶(本文来源于《中南大学》期刊2011-05-01）
脱氧寡核苷酸论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
固有免疫系统的过度激活可导致自身炎症或自身免疫性疾病。为了在抵御病原微生物和组织损伤的同时维持机体健康和免疫自稳状态,研发抑制固有免疫过度激活的药物是十分必要的。本课题组在前期的研究中已经证明SAT05f和MS19具有免疫调节(抑制)活性,可以减少自身组织细胞损伤,对治疗过度免疫激活显示出良好潜能。本研究中,我们尝试发掘抑制性脱氧寡核苷酸进入人单核细胞所激活的信号通路,研究发现SAT05f和MS19可以通过U937细胞表面受体DEC-205的内化作用进入细胞,被胞浆中的DNA感受器IFI16识别,启动IFN-α信号途径;用si RNA干涉IFI16可部分抑制SAT05f和MS19激活的IFN-α产生。另外,我们通过E.coli诱导建立小鼠脓毒症性腹膜炎模型,发现MS19可以延长模型小鼠生存期,下调i NOS和IRF5的表达,抑制M1型巨噬细胞的极化,干扰IRF5的核转运,防止下游炎症因子过度激活。这些结果将有助于阐明MS19的作用机理,为治疗炎症或自身免疫性疾病研制一种抑制性寡核苷酸药物提供了实验依据。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
脱氧寡核苷酸论文参考文献
[1].李鑫.CTLA-4mRNA3'UTR靶向性脱氧寡核苷酸的疫苗佐剂效应[D].吉林大学.2018
[2].高爽.抑制性脱氧寡核苷酸通过DNA感受器的免疫调节作用和治疗脓毒症性腹膜炎的机制探讨[D].吉林大学.2017
[3].惠长野,张文,杨学琴,李丽梅,陈钰婷.聚脱氧寡核苷酸生化药去纤苷用药安全性评价[C].中国毒理学会第六届全国毒理学大会论文摘要.2013
[4].刘春梅,丁依玲.热休克蛋白70反义脱氧寡核苷酸对宫颈癌HeLa细胞生长和凋亡及化学治疗敏感性的影响[J].国际病理科学与临床杂志.2013
[5].惠长野,张希,黄胜和.去纤苷——单链脱氧寡核苷酸生化药[J].集成技术.2012
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标签：细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4; 脱氧寡核苷酸; 佐剂; 疫苗;