酯键水解论文-朱均均,朱圆圆,程婷,季星岐,徐勇

酯键水解论文-朱均均,朱圆圆,程婷,季星岐,徐勇

导读:本文包含了酯键水解论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:乙酰酯键,糖苷键,氢氧化钠,水解行为

酯键水解论文文献综述

朱均均,朱圆圆,程婷,季星岐,徐勇[1](2013)在《乙酰酯键和糖苷键温和氢氧化钠水解行为的研究》一文中研究指出为了水解木质纤维原料中半纤维素上的乙酰酯键而不水解或少水解高聚糖,实现从源头上分离乙酸和高聚糖,减少乙酸对乙醇发酵的影响,以纤维二糖八乙酸酯为模型化合物,研究氢氧化钠浓度、温度、液固比和时间对乙酰酯键和糖苷键水解行为的影响。结果表明,纤维二糖八乙酸酯在液固比100,NaOH 5g/L,60℃下反应60min,其乙酰酯键水解率达到90.34%。温和氢氧化钠水解纤维二糖和葡萄糖的结果表明,氢氧化钠不仅能够水解糖苷键,也能水解碳-碳键。(本文来源于《中国科技论文》期刊2013年06期)

徐同成[2](2008)在《1,3-甘油二酯对2型糖尿病的影响及选择性水解甘油叁酯sn-2位酯键酶基因的克隆与表达》一文中研究指出2型糖尿病(T2DM)是一种世界性的流行性疾病,其患病率日益升高,且日趋年轻化。研究表明,T2DM与膳食脂肪摄入之间存在相关性。1,3-甘油二脂(1,3-DAG)是天然油脂的微量组成成分,以1,3-DAG替换膳食中的甘油叁酯(TAG),可以降低T2DM老鼠血清胰岛素和瘦素的浓度,改善T2DM人群的血脂代谢。但1,3-甘油二酯的摄入是否可以改善T2DM患者葡萄糖代谢相关指标,目前尚无大规模人体实验证实。天然油脂中1,3-DAG的含量极低,需通过对现有油脂资源进行改造而制备。目前在市场上销售的富含1,3-DAG的食用油是采用化学法制备而成,不易为消费者所接受,而利用脂肪酶制备1,3-DAG受到越来越多的关注。南极假丝酵母脂肪酶A(CAL-A)具有倾向性水解TAG sn-2位酯键的特性,可以利用其制备1,3-DAG。但该酶在原始菌株中产量极低。本学位论文拟调查1,3-DAG对T2DM的影响,并在外源蛋白表达系统中对编码CAL-A的基因进行表达,利用表达的重组脂肪酶水解TAG而制备1,3-DAG。本学位论文主要内容分述如下:采用双盲的、平行对照的膳食干预研究,评价1,3-DAG对T2DM的影响。共招募杭州地区127名40~65岁的T2DM受试者,随机分成两组,分别摄入等量DAG(1,3-DAG占64%)或TAG 120天。分别在第0、60和120天测定受试者生理参数并采集血液样品。采用商业化试剂盒对受试者的肝肾功能指标、血脂代谢指标、血糖浓度、血清胰岛素和瘦素浓度进行检测;采用气相色谱法检测受试者血清磷脂脂肪酸组成;胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)由以下公式进行计算:HOMA-IR=空腹胰岛素浓度×空腹血糖浓度/22.5。共有112名受试者完成本次实验,其中DAG组60人(36名女性,24名男性,平均年龄54.1±6.7岁),TAG组52人(29名女性,23名男性,平均年龄53.9±6.0岁)。结果发现,DAG组和TAG组受试者的体重均显着下降(p<0.05),但DAG组的下降幅度(1.2 kg)显着大于TAG组的幅度(0.5kg)(p<0.05)。DAG组受试者的腰围和臀围显着下降(p<0.05),TAG组的腰围和臀围未出现显着变化。DAG组受试者的血清葡萄糖浓度由第0天的7.4 mmol/L下降至第120天的7.06mmol/L,而TAG组则由第0天的7.81 mmol/L上升至第120天的7.88 mmol/L,均未达到显着水平。DAG组受试者的血清胰岛素和瘦素浓度均明显下降,但未达到显着水平,而TAG组胰岛素和瘦素浓度均显着升高(p<0.05)。DAG组受试者的胰岛素抵抗指数显着下降(p<0.05),而TAG组的胰岛素抵抗指数明显升高,但未达到显着水平。两组之间肝肾功能相关指标及血清磷脂必需脂肪酸组成无显着差异。以南极假丝酵母基因组为模板,对编码CAL-A的基因序列进行扩增,然后与原核表达载体pET-28a连接构建成重组载体,并将其转化入大肠杆菌DH5α中。通过抗生素平板和PCR扩增,筛选和鉴定重组子,并对其进行诱导表达。聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)显示,重组脂肪酶以包涵体的形式存在。采用尿素处理后,未恢复其活性。将编码CAL-A的PCR扩增产物与酵母分泌型载体pPIC9K连接构建成重组载体,并将其电转化入毕赤酵母GS115中。通过最小葡萄糖培养基和最小甲醇培养基及PCR扩增,筛选和鉴定重组子。重组酵母经192 h培养后,发酵液上清酶活达到17.4 U/mL。SDS-PAGE显示,重组脂肪酶分子量约为50 kD。粗酶液经中空纤维素膜超滤浓缩和离子柱交换层析后,得到经SDS-PAGE分析表明为单一条带的重组脂肪酶。该酶最适反应温度为75℃;热稳定性高,在70℃及以下温度保持30 min后仍具90%以上的酶活性;最适反应pH值为7.0,在pH 6.0~8.0的范围内具有较好的稳定性;Co~(2+)和EDTA溶液对重组脂肪酶的活性具有促进作用,Hg~(2+)对脂肪酶活性具有抑制作用,Ca~(2+)、Zn~(2+)、Ag~+等离子对脂肪酶的活性无显着影响。将叁油酸甘油酯与水以3:1(w:w)的比例混合,并加入占叁油酸甘油酯重量2%的重组脂肪酶,60℃200 rpm反应35 h后,反应体系中的1,3-DAG含量约为14%。采用短程蒸馏法除去反应体系中的水、甘油、自由脂肪酸和甘油单酯后,最终产物中1,3-DAG的含量可以达到43%。本学位论文检验了1,3-DAG对T2DM的影响。与TAG相比,1,3-DAG的摄入可显着降低T2DM患者体重、体重指数、腰围、臀围、胰岛素抵抗、血清胰岛素和瘦素浓度等指标:1,3-DAG可提供与TAG相同的必需脂肪酸,且对患者肝肾功能无毒副作用。将CAL-A基因序列与酵母分泌型载体pPIC9K连接构建重组载体,并将其转化进入组氨酸缺陷型酵母GS115中,成功进行了表达。重组脂肪酶分子量约为50kD;粗酶液经纯化后,得到电泳纯的重组脂肪酶。该重组脂肪酶具有很好的热稳定性,且对金属离子的毒害作用具有一定的抵抗性。利用重组CAL-A倾向性水解TAGsn-2位酰基,成功制备了1,3-DAG,1,3-DAG的含量可达43%。(本文来源于《浙江大学》期刊2008-08-01)

徐秀玲[3](2008)在《Penicillium melinii3.4474对芍药苷和芍药内酯苷酯键水解反应的初步研究》一文中研究指出天然产物的结构比较复杂,利用化学方法来进行结构修饰存在着产率低、反应专一性差、副产物多等缺点。而生物转化方法具有反应条件温和、环境友好、高效率和高选择性的特点。因此,生物转化在以天然活性成分为基础的创新药物研究与开发中具有重要的意义。羧酸酯水解酶作为一种重要的生物催化剂,已成功应用在不对称合成、手性化合物拆分等领域,因此在生物转化研究中具有重要的意义。本文通过二级发酵法,采用TLC分析方法,从15株霉菌中筛选到一株丝状真菌Penicillium melinii3.4474能够转化白芍双苷。通过光谱数据分析确定转化产物为去苯芍药苷(DBP)和去苯芍药内酯苷(DBA),发生的反应为酯键水解反应。采用HPLC分析技术,考察了Penicillium melinii3.4474静息细胞和生长细胞转化芍药苷的动态曲线及不同碳源对生长细胞转化芍药苷作用的影响。得出结论蔗糖对Penicillium melinii3.4474酯酶的产生起阻遏作用。确定3.4474静息细胞转化的最佳初始pH为5-6,芍药苷的最适浓度为1.5mg/mL。芍药内酯苷的最适浓度为0.5mg/mL。采用HPLC分析技术,对Penicillium melinii3.4474产酶条件、酶学特征、稳定性及影响酶活的因素进行了研究:确定该酯酶是存在于胞浆内的一种可溶性诱导酶。酶反应体系的最佳条件:0.2mol/L Na_2HPO_4-0.1mol/L柠檬酸缓冲液(pH6.0)、温度为42℃。单位体积的粗酶液转化芍药苷的最适浓度为2.0mg/mL,同样条件下芍药内酯苷的最适浓度为0.8 mg/mL。该酯酶热稳定性较差。最后,考察了底物诱导对Penicillium melinii3.4474产酯酶活力的影响,推测芍药苷是该酯酶的最适底物,也是诱导其产生的最佳诱导物。从SDS-PAGE上追踪到一蛋白条带,推测是Penicillium melinii3.4474产生的酯酶的蛋白条带,分子量约为37KDa。(本文来源于《沈阳药科大学》期刊2008-05-01)

酯键水解论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

2型糖尿病(T2DM)是一种世界性的流行性疾病,其患病率日益升高,且日趋年轻化。研究表明,T2DM与膳食脂肪摄入之间存在相关性。1,3-甘油二脂(1,3-DAG)是天然油脂的微量组成成分,以1,3-DAG替换膳食中的甘油叁酯(TAG),可以降低T2DM老鼠血清胰岛素和瘦素的浓度,改善T2DM人群的血脂代谢。但1,3-甘油二酯的摄入是否可以改善T2DM患者葡萄糖代谢相关指标,目前尚无大规模人体实验证实。天然油脂中1,3-DAG的含量极低,需通过对现有油脂资源进行改造而制备。目前在市场上销售的富含1,3-DAG的食用油是采用化学法制备而成,不易为消费者所接受,而利用脂肪酶制备1,3-DAG受到越来越多的关注。南极假丝酵母脂肪酶A(CAL-A)具有倾向性水解TAG sn-2位酯键的特性,可以利用其制备1,3-DAG。但该酶在原始菌株中产量极低。本学位论文拟调查1,3-DAG对T2DM的影响,并在外源蛋白表达系统中对编码CAL-A的基因进行表达,利用表达的重组脂肪酶水解TAG而制备1,3-DAG。本学位论文主要内容分述如下:采用双盲的、平行对照的膳食干预研究,评价1,3-DAG对T2DM的影响。共招募杭州地区127名40~65岁的T2DM受试者,随机分成两组,分别摄入等量DAG(1,3-DAG占64%)或TAG 120天。分别在第0、60和120天测定受试者生理参数并采集血液样品。采用商业化试剂盒对受试者的肝肾功能指标、血脂代谢指标、血糖浓度、血清胰岛素和瘦素浓度进行检测;采用气相色谱法检测受试者血清磷脂脂肪酸组成;胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)由以下公式进行计算:HOMA-IR=空腹胰岛素浓度×空腹血糖浓度/22.5。共有112名受试者完成本次实验,其中DAG组60人(36名女性,24名男性,平均年龄54.1±6.7岁),TAG组52人(29名女性,23名男性,平均年龄53.9±6.0岁)。结果发现,DAG组和TAG组受试者的体重均显着下降(p<0.05),但DAG组的下降幅度(1.2 kg)显着大于TAG组的幅度(0.5kg)(p<0.05)。DAG组受试者的腰围和臀围显着下降(p<0.05),TAG组的腰围和臀围未出现显着变化。DAG组受试者的血清葡萄糖浓度由第0天的7.4 mmol/L下降至第120天的7.06mmol/L,而TAG组则由第0天的7.81 mmol/L上升至第120天的7.88 mmol/L,均未达到显着水平。DAG组受试者的血清胰岛素和瘦素浓度均明显下降,但未达到显着水平,而TAG组胰岛素和瘦素浓度均显着升高(p<0.05)。DAG组受试者的胰岛素抵抗指数显着下降(p<0.05),而TAG组的胰岛素抵抗指数明显升高,但未达到显着水平。两组之间肝肾功能相关指标及血清磷脂必需脂肪酸组成无显着差异。以南极假丝酵母基因组为模板,对编码CAL-A的基因序列进行扩增,然后与原核表达载体pET-28a连接构建成重组载体,并将其转化入大肠杆菌DH5α中。通过抗生素平板和PCR扩增,筛选和鉴定重组子,并对其进行诱导表达。聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)显示,重组脂肪酶以包涵体的形式存在。采用尿素处理后,未恢复其活性。将编码CAL-A的PCR扩增产物与酵母分泌型载体pPIC9K连接构建成重组载体,并将其电转化入毕赤酵母GS115中。通过最小葡萄糖培养基和最小甲醇培养基及PCR扩增,筛选和鉴定重组子。重组酵母经192 h培养后,发酵液上清酶活达到17.4 U/mL。SDS-PAGE显示,重组脂肪酶分子量约为50 kD。粗酶液经中空纤维素膜超滤浓缩和离子柱交换层析后,得到经SDS-PAGE分析表明为单一条带的重组脂肪酶。该酶最适反应温度为75℃;热稳定性高,在70℃及以下温度保持30 min后仍具90%以上的酶活性;最适反应pH值为7.0,在pH 6.0~8.0的范围内具有较好的稳定性;Co~(2+)和EDTA溶液对重组脂肪酶的活性具有促进作用,Hg~(2+)对脂肪酶活性具有抑制作用,Ca~(2+)、Zn~(2+)、Ag~+等离子对脂肪酶的活性无显着影响。将叁油酸甘油酯与水以3:1(w:w)的比例混合,并加入占叁油酸甘油酯重量2%的重组脂肪酶,60℃200 rpm反应35 h后,反应体系中的1,3-DAG含量约为14%。采用短程蒸馏法除去反应体系中的水、甘油、自由脂肪酸和甘油单酯后,最终产物中1,3-DAG的含量可以达到43%。本学位论文检验了1,3-DAG对T2DM的影响。与TAG相比,1,3-DAG的摄入可显着降低T2DM患者体重、体重指数、腰围、臀围、胰岛素抵抗、血清胰岛素和瘦素浓度等指标:1,3-DAG可提供与TAG相同的必需脂肪酸,且对患者肝肾功能无毒副作用。将CAL-A基因序列与酵母分泌型载体pPIC9K连接构建重组载体,并将其转化进入组氨酸缺陷型酵母GS115中,成功进行了表达。重组脂肪酶分子量约为50kD;粗酶液经纯化后,得到电泳纯的重组脂肪酶。该重组脂肪酶具有很好的热稳定性,且对金属离子的毒害作用具有一定的抵抗性。利用重组CAL-A倾向性水解TAGsn-2位酰基,成功制备了1,3-DAG,1,3-DAG的含量可达43%。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

酯键水解论文参考文献

[1].朱均均,朱圆圆,程婷,季星岐,徐勇.乙酰酯键和糖苷键温和氢氧化钠水解行为的研究[J].中国科技论文.2013

[2].徐同成.1,3-甘油二酯对2型糖尿病的影响及选择性水解甘油叁酯sn-2位酯键酶基因的克隆与表达[D].浙江大学.2008

[3].徐秀玲.Penicilliummelinii3.4474对芍药苷和芍药内酯苷酯键水解反应的初步研究[D].沈阳药科大学.2008

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