本文主要研究内容
作者茅光耀,周鸿让,黄芸,岳志远,段磊,许秋利,郭云海,党志胜,张仪,肖宁（2019）在《Cu2+胁迫下福寿螺谷胱甘肽S转移酶基因表达分析》一文中研究指出：目的分析Cu2+胁迫前后福寿螺谷胱甘肽S转移酶（PcGST）基因的表达规律,探讨福寿螺适应Cu2+的相关机制。方法 80只福寿螺随机分为4组,每组20只福寿螺, Cu2+胁迫浓度分别为0、 50、 100、 150μg/L。分别于Cu2+胁迫后的0、 1、 7、 14 d,各组随机取3只福寿螺,分离其肝脏、鳃、肾脏组织,分别提取组织中的RNA,逆转录为cDNA,实时荧光定量PCR检测Cu2+胁迫前后PcGST m RNA的相对表达量。基于Cu2+胁迫下的福寿螺基因转录组筛选获得PcGST基因,构建pET-28a-PcGST重组质粒,转化至大肠埃希菌（E. coil） BL21 （DE3）感受态细胞中,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）诱导表达,十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDSPAGE）分析重组蛋白表达情况。将转化菌株（含PcGST基因的E. coil）和非转化菌株（未转化的E. coil）等量分成6份,随机取3份作为Cu2+胁迫组（含0.2 mmol/L的CuSO4）,另3份作为对照组（不含CuSO4）, 20℃、 150 r/min摇床培养。每隔1 h测定一次菌液吸光度（A600）值,连续测定6 h。采用t检验比较转化菌株和非转化菌株对Cu2+的耐受能力。结果设定无Cu2+胁迫下的福寿螺组织中PcGST mRNA的相对表达量为1.0±0.0。肝脏组织中, 50μg/L Cu2+胁迫下, PcGST mRNA的相对表达量于0～14 d呈持续上升趋势,峰值为4.9±0.5; 100μg/L、 150μg/L Cu2+胁迫下, PcGST mRNA的相对表达量先上升后下降,峰值均于7 d出现,分别为13.0±3.0和12.2±2.2。鳃组织中,50μg/L、 100μg/L Cu2+胁迫下, PcGST mRNA的相对表达量先上升后下降,峰值均于7 d出现,分别为5.3±0.7和23.3±16.5; 150μg/L Cu2+胁迫下, PcGST mRNA的相对表达量也呈现先上升后下降的趋势,峰值于1 d出现,为9.8±3.3。肾脏组织中, 50μg/L Cu2+胁迫下, PcGST mRNA的相对表达量随时间变化不显著; 100μg/L Cu2+胁迫下, PcGST m RNA的相对表达量前期随时间变化不显著,于14 d出现显著增加,为3.9±1.0; 150μg/L Cu2+胁迫下, PcGST mRNA的相对表达量于0～14 d呈持续上升趋势,峰值为18.0±0.8。PcGST基因PCR扩增产物约为600 bp。SDS-PAGE结果显示, PcGST蛋白的相对分子质量（Mr）约为26 370。LB液体培养基中,转化菌株与非转化菌株的生长曲线接近,最大A600值分别为1.5±0.0和1.4±0.0,差异无统计学意义（P> 0.05）;含0.2 mmol/L CuSO4的LB液体培养基中,转化菌株的生长曲线优于非转化菌株,最大A600值分别为1.5±0.1和1.0±0.0,差异有统计学意义（P <0.05）。结论Cu2+胁迫能促进福寿螺体内PcGST基因的表达。
Abstract
mu de fen xi Cu2+xie pai qian hou fu shou luo gu guang gan tai Szhuai yi mei （PcGST）ji yin de biao da gui lv ,tan tao fu shou luo kuo ying Cu2+de xiang guan ji zhi 。fang fa 80zhi fu shou luo sui ji fen wei 4zu ,mei zu 20zhi fu shou luo , Cu2+xie pai nong du fen bie wei 0、 50、 100、 150μg/L。fen bie yu Cu2+xie pai hou de 0、 1、 7、 14 d,ge zu sui ji qu 3zhi fu shou luo ,fen li ji gan zang 、sai 、shen zang zu zhi ,fen bie di qu zu zhi zhong de RNA,ni zhuai lu wei cDNA,shi shi ying guang ding liang PCRjian ce Cu2+xie pai qian hou PcGST m RNAde xiang dui biao da liang 。ji yu Cu2+xie pai xia de fu shou luo ji yin zhuai lu zu shai shua huo de PcGSTji yin ,gou jian pET-28a-PcGSTchong zu zhi li ,zhuai hua zhi da chang ai xi jun （E. coil） BL21 （DE3）gan shou tai xi bao zhong ,jing yi bing ji -β-D-liu dai ban ru tang gan （IPTG）you dao biao da ,shi er wan ji huang suan na -ju bing xi xian an ning jiao dian yong （SDSPAGE）fen xi chong zu dan bai biao da qing kuang 。jiang zhuai hua jun zhu （han PcGSTji yin de E. coil）he fei zhuai hua jun zhu （wei zhuai hua de E. coil）deng liang fen cheng 6fen ,sui ji qu 3fen zuo wei Cu2+xie pai zu （han 0.2 mmol/Lde CuSO4）,ling 3fen zuo wei dui zhao zu （bu han CuSO4）, 20℃、 150 r/minyao chuang pei yang 。mei ge 1 hce ding yi ci jun ye xi guang du （A600）zhi ,lian xu ce ding 6 h。cai yong tjian yan bi jiao zhuai hua jun zhu he fei zhuai hua jun zhu dui Cu2+de nai shou neng li 。jie guo she ding mo Cu2+xie pai xia de fu shou luo zu zhi zhong PcGST mRNAde xiang dui biao da liang wei 1.0±0.0。gan zang zu zhi zhong , 50μg/L Cu2+xie pai xia , PcGST mRNAde xiang dui biao da liang yu 0～14 dcheng chi xu shang sheng qu shi ,feng zhi wei 4.9±0.5; 100μg/L、 150μg/L Cu2+xie pai xia , PcGST mRNAde xiang dui biao da liang xian shang sheng hou xia jiang ,feng zhi jun yu 7 dchu xian ,fen bie wei 13.0±3.0he 12.2±2.2。sai zu zhi zhong ,50μg/L、 100μg/L Cu2+xie pai xia , PcGST mRNAde xiang dui biao da liang xian shang sheng hou xia jiang ,feng zhi jun yu 7 dchu xian ,fen bie wei 5.3±0.7he 23.3±16.5; 150μg/L Cu2+xie pai xia , PcGST mRNAde xiang dui biao da liang ye cheng xian xian shang sheng hou xia jiang de qu shi ,feng zhi yu 1 dchu xian ,wei 9.8±3.3。shen zang zu zhi zhong , 50μg/L Cu2+xie pai xia , PcGST mRNAde xiang dui biao da liang sui shi jian bian hua bu xian zhe ; 100μg/L Cu2+xie pai xia , PcGST m RNAde xiang dui biao da liang qian ji sui shi jian bian hua bu xian zhe ,yu 14 dchu xian xian zhe zeng jia ,wei 3.9±1.0; 150μg/L Cu2+xie pai xia , PcGST mRNAde xiang dui biao da liang yu 0～14 dcheng chi xu shang sheng qu shi ,feng zhi wei 18.0±0.8。PcGSTji yin PCRkuo zeng chan wu yao wei 600 bp。SDS-PAGEjie guo xian shi , PcGSTdan bai de xiang dui fen zi zhi liang （Mr）yao wei 26 370。LBye ti pei yang ji zhong ,zhuai hua jun zhu yu fei zhuai hua jun zhu de sheng chang qu xian jie jin ,zui da A600zhi fen bie wei 1.5±0.0he 1.4±0.0,cha yi mo tong ji xue yi yi （P> 0.05）;han 0.2 mmol/L CuSO4de LBye ti pei yang ji zhong ,zhuai hua jun zhu de sheng chang qu xian you yu fei zhuai hua jun zhu ,zui da A600zhi fen bie wei 1.5±0.1he 1.0±0.0,cha yi you tong ji xue yi yi （P <0.05）。jie lun Cu2+xie pai neng cu jin fu shou luo ti nei PcGSTji yin de biao da 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自中国寄生虫学与寄生虫病杂志的茅光耀,周鸿让,黄芸,岳志远,段磊,许秋利,郭云海,党志胜,张仪,肖宁，发表于刊物中国寄生虫学与寄生虫病杂志2019年02期论文，是一篇关于福寿螺论文,胁迫论文,谷胱甘肽转移酶论文,基因表达分析论文,中国寄生虫学与寄生虫病杂志2019年02期论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自中国寄生虫学与寄生虫病杂志2019年02期论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
标签：福寿螺论文; 胁迫论文; 谷胱甘肽转移酶论文; 基因表达分析论文; 中国寄生虫学与寄生虫病杂志2019年02期论文;