一、二异丙氧基磷酰化亮赖叉肽甲酯诱导K562细胞凋亡（论文文献综述）
强黎明,刘若雨,曹书霞,卢奎[1]（2010）在《N-磷酰化二肽甲酯和金属离子的相互作用》文中研究指明用紫外光谱研究了合成的系列磷酰化肽酯（DPP）与几种不同价态的常见金属离子——K+、Ag+、Mg2+、Cu2+、Fe3+和Al3+的相互作用,讨论了不同结构的磷酰化肽酯与金属离子相互作用的规律.结果表明,系列磷酰化肽酯与6种金属离子的相互作用没有差别,均表现为与K+、Fe3+和Al3+几乎没有相互作用,与Mg2+和Cu2+有弱的相互作用,与Ag+有较强的相互作用.相互作用的结果使磷酰化肽酯在190 nm左右的吸收峰强度下降、最大吸收波长红移.主要的作用位点应是系列磷酰化肽酯分子中不饱和基团的杂原子.它们的相互作用主要受金属离子的离子半径、电荷数、电子构型、水解性能和浓度的影响.
强黎明,杨柳,曹书霞,卢奎,赵玉芬[2]（2009）在《N-磷酰化肽酯及小肽与氨基酸相互作用的ESI-MS研究》文中进行了进一步梳理采用ESI-MS研究了一系列结构具有可比性的N-二异丙氧基磷酰化肽酯及小肽同20种蛋白氨基酸及3种D型氨基酸（D-Ala、D-Ser、D-Phe）的非共价相互作用。结果表明,可形成π-π共轭体系的芳香环,可显着增强磷酰化肽酯及小肽与氨基酸的相互作用力,π-π堆积力是首要的非共价相互作用力;可形成氢键的极性基团有利于形成复合物,但能否形成氢键还要受到分子柔顺性的影响;另外,分子大小、空间位阻对复合物的形成也有影响;而氨基酸的手性对它们的相互作用在质谱条件下没有表现出影响。
宇小青[3]（2006）在《N-磷酰肽衍生物诱导K562细胞凋亡及其机理的研究》文中提出磷在生命化学中扮演着十分重要的角色，它不仅是生物体的结构组成部分，而且是调节生命体新陈代谢等重要生理生化功能的基本元素。本文通过对磷酰化二肽进行结构修饰，得到了一系列N-磷酰化二肽衍生物，并初步研究了活性较好的化合物对肿瘤细胞K562增殖分化的调控及其作用机制，以期得到潜在抗肿瘤药物的先导化合物。 利用本实验室建立的方法，以几种常见的氨基酸为原料合成了六种N-二异丙氧基磷酰化二肽衍生物DIPP-AA1-AA2-R。MTT筛选实验表明，DIPP-Val-Phe-R对K562细胞有较好的增殖抑制活性，其半数有效浓度(IC50)为9.7μmol·L-1。 在DIPP-Val-Phe-R诱导K562细胞凋亡的研究中发现，利用Hoechst33258染色在荧光显微镜下可以观察到DIPP-Val-Phe-R作用后的K562细胞具有典型的凋亡形态学特征，流式细胞仪PI单染实验出现SubG0期的凋亡峰，Annexin v-FITC／PI双染也检测到早期的凋亡细胞，从而从形态学和生物化学两个方面证实了DIPP-Val-Phe-R具有诱导K562细胞凋亡的活性。 凋亡机理研究表明：DIPP-Val-Phe-R是通过线粒体依赖的通路诱导K562细胞凋亡。在凋亡过程中，化合物的作用上调促凋亡蛋白Bax的表达，下调抗凋亡蛋白Bcl-2和Bcl-XL的表达，由此改变了线粒体渗透转运孔（PTP），导致线粒体膜电位（MMP）下降、膜的通透性增大和细胞内活性氧生成的减少，进一步造成细胞色素c（Cyto c）从线粒体释放到细胞质中，从而激活下游的caspase-9和caspase-3，启动线粒体调控的凋亡通路，诱导K562细胞凋亡。这一系列事件表明DIPP-Val-Phe-R是通过线粒体路径启动细胞凋亡的，而且调控Bcl-2家族蛋白和诱导线粒体功能异常可能是其引起细胞凋亡发生的主要作用机理。 综上所述，DIPP-Val-Phe-R是通过线粒体途径诱导K562细胞凋亡。
杨杰[4]（2005）在《N-磷肽甲酯对K562细胞凋亡活性的影响及机理研究》文中认为磷在生命科学中扮演着十分重要的角色,它不仅是生命体的结构组成部分,而且是调节生命体新陈代谢等重要生理生化功能的基本元素。本文对具有诱导肿瘤细胞凋亡活性的N-磷肽甲酯进行了构效关系的研究,并对促凋活性最好的化合物诱导K562细胞凋亡的机理进行了较深入的探讨。以（DIPP-Leu）2-LysOMe、（DIPP-Trp）2-LysOMe两种N-磷肽甲酯为模型化合物,研究其类似物对K562细胞增殖抑制活性的影响,构效关系表明:氨基酸构型和磷酯结构均对化合物的细胞增殖抑制活性有较大影响。含L型氨基酸的N-磷肽甲酯活性高于含D型氨基酸的,其中赖氨酸构型的改变对化合物活性的影响最大;含二异丙氧基磷酯结构的化合物活性最高,改变磷酯结构中烷氧链的长度,化合物对K562细胞增殖抑制活性急剧下降。凋亡机理研究表明:（DIPP-L-Leu）2-L-LysOMe是通过线粒体依赖的通路诱导K562细胞凋亡。在凋亡早期,化合物的作用上调促凋亡蛋白Bax的表达,下调抗凋亡蛋白Bcl-2和Bcl-xL的表达,由此改变了线粒体渗透转运孔（PTP）,导致线粒体膜电位（MMP）下降、膜的通透性增大,造成细胞色素c （Cyto c）从线粒体释放到细胞质中,从而激活下游的caspase-9和caspase-3,启动线粒体调控的凋亡通路,诱导K562细胞凋亡。此外,该化合物还能导致细胞内Ca2+浓度升高,以及活性氧（ROS）产生,这与细胞凋亡的生化指标相符。这一系列事件表明（DIPP-L-Leu）2-L-LysOMe是通过线粒体路径启动细胞凋亡的,而且调控Bcl-2家族蛋白和诱导线粒体功能异常可能是其引起细胞凋亡发生的主要作用机理。
刘峰,蒋宇扬,刘世英,王凯,曹健,赵玉芬[5]（2005）在《二异丙基磷酰化二肽甲酯通过线粒体途径诱导K562细胞凋亡》文中指出背景与目的:蛋白质和多肽的磷酰化在生命活动中具有重要的作用,研究发现部分磷酰化肽有抑制肿瘤细胞增殖的活性,但其具体机理还不清楚。本研究探讨二异丙基磷酰化二肽甲酯[（O,O鄄diisopropylphosphoryl鄄L鄄tryptophan）2鄄L鄄lysinemethylester,（DIPP鄄L鄄Trp）2鄄L鄄Lys鄄OCH3]诱导K562细胞凋亡的作用及其可能的机制。方法:AnnexinV鄄FITC和PI双染法检测（DIPP鄄L鄄Trp）2鄄L鄄Lys鄄OCH3诱导的K562细胞凋亡。以罗丹明123（Rhodamine123）及2蒺,7蒺鄄二氯荧光素乙二酯（2蒺,7蒺鄄dichlorofluoresceindiacetate,DCFH鄄DA）为细胞染色剂,采用流式细胞术检测以不同浓度（DIPP鄄L鄄Trp）2鄄L鄄Lys鄄OCH3处理后K562细胞线粒体膜电位（Δψm）和活性氧（reactiveoxygenspecies,ROS）的变化。结果:50μg/ml（DIPP鄄L鄄Trp）2鄄L鄄Lys鄄OCH3作用细胞24h,AnnexinV鄄FITC和PI双染检测表明,有61.9%的细胞出现早期凋亡现象。Rhodamine123染色发现93.6%的细胞线粒体膜电位强度下降,随着化合物作用时间的延长,Δψm下降的细胞逐步增加到95.8%,同时DCFH鄄DA处理24h后97.6%的细胞ROS生成下降,ROS下降的细胞比例从18.1%增加到97.6%。结论:（DIPP鄄L鄄Trp）2鄄L鄄Lys鄄OCH3能诱导K562细胞凋亡,并且可能与细胞线粒体Δψm下降和ROS生成减少有
杜伟,蒋宇扬,牛艳玲,刘峰,曹胜利,马丽,赵玉芬[6]（2003）在《二异丙氧基磷酰化亮赖叉肽甲酯诱导K562细胞凋亡》文中研究表明为寻找能特异性诱导肿瘤细胞凋亡的小分子诱导剂,研究了二异丙氧基磷酰化亮赖叉肽甲酯（（DIPP-L-Leu）2-L-Lys-OCH3）对K562细胞的促凋亡作用。合成了（DIPP-L-Leu）2-L-Lys-OCH3,通过质谱、磷谱、氢谱和碳谱进行结构鉴定。通过MTT比色实验得到:该样品对K562细胞的半抑制浓度为22.66μmol.L-1。AO荧光染色、DNA琼脂糖凝胶电泳和Annexin -FITC/PI双染实验表明:该样品对K562细胞的增殖抑制作用是通过诱导细胞凋亡实现的。Caspase活性分析实验证明该样品是通过线粒体途径启动细胞凋亡。
二、二异丙氧基磷酰化亮赖叉肽甲酯诱导K562细胞凋亡（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、二异丙氧基磷酰化亮赖叉肽甲酯诱导K562细胞凋亡（论文提纲范文）
（1）N-磷酰化二肽甲酯和金属离子的相互作用（论文提纲范文）
| 1 实验部分 |
| 1.1 试剂及仪器 |
| 1.2 实验方法 |
| 2 结果与讨论 |
| 3 结论 |
（2）N-磷酰化肽酯及小肽与氨基酸相互作用的ESI-MS研究（论文提纲范文）
| 1 实验部分 |
| 1.1 仪器与试剂 |
| 1.2 质谱分析条件 |
| 1.3 样品制备 |
| 2 结果与讨论 |
| 2.1 实验所用氨基酸的分类 |
| 2.2 相互作用的质谱分析 |
| 3 结 论 |
（3）N-磷酰肽衍生物诱导K562细胞凋亡及其机理的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 主要符号对照表 |
| 第1章 引言 |
| 1.1 课题的背景和意义 |
| 1.2 细胞凋亡 |
| 1.2.1 细胞凋亡的概念和生物学意义 |
| 1.2.2 细胞凋亡的形态学和生物化学特征 |
| 1.3 细胞凋亡的检测方法 |
| 1.3.1 形态学检测 |
| 1.3.2 琼脂糖凝胶电泳 |
| 1.3.3 流式细胞术 |
| 1.4 细胞凋亡的分子机理 |
| 1.4.1 哺乳动物的细胞凋亡机制 |
| 1.4.2 死亡环 |
| 1.4.3 Caspase家族蛋白与细胞凋亡 |
| 1.4.4 线粒体在细胞凋亡中的主导作用 |
| 1.4.5 凋亡过程中线粒体膜电位的改变 |
| 1.4.6 活性氧与细胞凋亡 |
| 1.4.7 细胞色素c在凋亡中的作用 |
| 1.4.8 Bcl-2家族蛋白在细胞凋亡中的作用 |
| 1.5 磷酰肽 |
| 1.5.1 磷与磷酰肽在生命中的作用 |
| 1.5.2 磷酰肽诱导细胞凋亡 |
| 1.6 硕士论文的主要内容 |
| 1.6.1 N—磷酰化二肽衍生物的合成 |
| 1.6.2 N—磷酰化二肽衍生物对K562细胞增殖抑制活性的影响 |
| 1.6.3 DIPP-L-Val-L-Phe-R诱导细胞凋亡活性的研究 |
| 1.6.4 DIPP-L-Val-L-Phe-R诱导细胞凋亡途径的探讨 |
| 第2章 N-磷酰化二肽衍生物的合成 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 材料与方法 |
| 2.2.1 试剂 |
| 2.2.2 仪器 |
| 2.2.3 实验方法 |
| 2.3 实验结果 |
| 2.3.1 DIPPH |
| 2.3.2 N-磷酰-L-氨基酸 |
| 2.3.3 L-氨基酸甲酯盐酸盐 |
| 2.3.4 N-磷酰肽甲酯 |
| 2.3.5 N-磷酰化二肽 |
| 2.3.6 N-磷酰化二肽衍生物 |
| 2.4 讨论 |
| 第3章 N-磷酰肽衍生物对K562细胞增殖抑制活性研究 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 材料与方法 |
| 3.2.1 药品及试剂 |
| 3.2.2 实验仪器 |
| 3.2.3 样品液的配制 |
| 3.2.4 细胞培养 |
| 3.2.5 实验方法 |
| 3.3 实验结果 |
| 3.3.1 N-磷酰化二肽衍生物的细胞增殖抑制活性筛选结果 |
| 3.3.2 N-磷酰化二肽衍生物的细胞增殖抑制活性IC_(50)测定结果 |
| 3.3.3 DIPP-Val-Phe-R对K562细胞抑制作用的量效和时效关系 |
| 3.4 讨论 |
| 第4章 DIPP-Val-Phe-R诱导K562细胞凋亡活性的研究 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 材料与方法 |
| 4.2.1 试剂 |
| 4.2.2 仪器 |
| 4.2.3 实验方法 |
| 4.3 实验结果 |
| 4.3.1 Hoechst33258染色检测DIPP-Val-Phe-R对细胞核的影响 |
| 4.3.2 碘化丙啶染色检测DIPP-Val-Phe-R对细胞周期的影响 |
| 4.3.3 AnnexinV-FITC和PI双染检测DIPP-Val-Phe-R对细胞膜的影响 |
| 4.4 讨论 |
| 第5章 DIPP-Val-Phe-R诱导K562细胞凋亡途径的探讨 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 材料与方法 |
| 5.2.1 药品及试剂 |
| 5.2.2 实验仪器 |
| 5.2.3 样品液的配制 |
| 5.2.4 实验方法 |
| 5.3 实验结果 |
| 5.3.1 DIPP-Val-Phe-R对线粒体膜电位(MMP)的影响 |
| 5.3.2 DIPP-Val-Phe-R对活性氧(ROS)生成的影响 |
| 5.3.3 DIPP-Val-Phe-R诱导K562细胞凋亡caspase活性检测结果 |
| 5.3.4 DIPP-Val-Phe-R的作用导致细胞色素c(Cyto c)的释放 |
| 5.3.5 DIPP-Val-Phe-R对Bcl-2家族蛋白的影响 |
| 5.4 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 发表文章目录 |
| 致谢 |
（4）N-磷肽甲酯对K562细胞凋亡活性的影响及机理研究（论文提纲范文）
| 第1章 引言 |
| 1.1 课题的背景和意义 |
| 1.2 肿瘤与细胞凋亡 |
| 1.3 细胞凋亡 |
| 1.3.1 细胞凋亡的概念及生物学意义 |
| 1.3.2 细胞凋亡的形态学和生物化学特征 |
| 1.3.3 细胞凋亡的生物化学机制 |
| 1.3.4 细胞凋亡的信号转导途径 |
| 1.3.5 线粒体在细胞凋亡中的主导作用 |
| 1.3.6 凋亡过程中线粒体膜电位的改变 |
| 1.3.7 活性氧与细胞凋亡 |
| 1.3.8 细胞色素c 在凋亡中的作用 |
| 1.3.9 Bcl-2 家族蛋白在细胞凋亡中的作用 |
| 1.3.10 Ca~(2+)与细胞凋亡 |
| 1.4 磷酰肽 |
| 1.4.1 磷与磷酰肽在生命中的作用 |
| 1.4.2 磷酰肽诱导细胞凋亡 |
| 1.5 硕士论文的主要内容 |
| 1.5.1 N-磷酰肽甲酯的合成 |
| 1.5.2 N-磷酰肽甲酯结构对K562 细胞增殖抑制活性的影响 |
| 1.5.3 (DIPP-L-Leu)2-L-LysOMe 诱导 K562 细胞凋亡途径的探讨 |
| 第2章 N-磷酰肽甲酯的合成 |
| 2.1 本章引论 |
| 2.2 材料与方法 |
| 2.2.1 试剂 |
| 2.2.2 仪器 |
| 2.2.3 实验方法 |
| 2.3 实验结果 |
| 2.3.1 DIPPH |
| 2.3.2 N-(O, O’-二异丙氧基)磷酰-D/L-氨基酸 |
| 2.3.3 D/L-氨基酸甲酯盐酸盐 |
| 2.3.4 N~α, N~ε-二(N-(O, O’-二异丙氧基)磷酰-D/L-赖氨酸甲酯 |
| 2.3.5 氢亚磷酸酯 |
| 2.3.6 N~α, N~ε-二(N-(O, O’-二烷氧基)磷酰-L-亮氨酸)-L-赖氨酸甲酯 |
| 2.4 讨论 |
| 第3章 N-磷肽甲酯结构对K562 细胞增殖抑制活性的影响 |
| 3.1 本章引论 |
| 3.2 材料与方法 |
| 3.2.1 药品及试剂 |
| 3.2.2 实验仪器 |
| 3.2.3 样品液的配制 |
| 3.2.4 细胞培养 |
| 3.2.5 MTT 法细胞增殖抑制活性筛选 |
| 3.2.6 MTT 法细胞增殖抑制活性IC_(50) 测定 |
| 3.3 实验结果 |
| 3.3.1 细胞增殖抑制活性筛选结果 |
| 3.3.2 细胞增殖抑制活性 IC_(50) 测定结果 |
| 3.4 讨论 |
| 第4章 (DIPP-L-Leu)_2-L-LysOMe 诱导K562 细胞凋亡途径的探讨 |
| 4.1 本章引论 |
| 4.2 材料与方法 |
| 4.2.1 药品及试剂 |
| 4.2.2 实验仪器 |
| 4.2.3 样品液的配制 |
| 4.2.4 实验方法 |
| 4.3 实验结果 |
| 4.3.1 (DIPP-L-Leu)_2-L-LysOMe 对线粒体膜电位(MMP)的影响 |
| 4.3.2 (DIPP-L-Leu)2-L-LysOMe 对活性氧(ROS)生成的影响 |
| 4.3.3 (DIPP-L-Leu)2-L-LysOMe 的作用导致细胞色素 c(Cyto c)的释放 |
| 4.3.4 (DIPP-L-Leu)2-L-LysOMe 对 Bcl-2 家族蛋白的影响 |
| 4.3.5 (DIPP-L-Leu)2-L-LysOMe 诱导的凋亡过程中 Ca2+浓度的变化情况 |
| 4.4 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 声明 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 |
（6）二异丙氧基磷酰化亮赖叉肽甲酯诱导K562细胞凋亡（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材 料 |
| 1.2 (DIPP-L-Leu) 2-L-Lys-OCH3的合成 |
| 1.3 细胞培养 |
| 1.4 四咪唑盐 (MTT) 比色实验 |
| 1.5 AO染色实验 |
| 1.6 DNA琼脂糖凝胶电泳分析 |
| 1.7 AnnexinⅤ-FITC/PI双染实验 |
| 1.8 Caspase活性分析实验 |
| 2 实验结果 |
| 2.1 (DIPP-L-Leu) 2-L-Lys-OCH3的合成 |
| 2.2 细胞增殖抑制率 |
| 2.3 细胞凋亡的特征 |
| 2.4 Caspase活性分析实验 |
| 3 讨 论 |
四、二异丙氧基磷酰化亮赖叉肽甲酯诱导K562细胞凋亡（论文参考文献）
- [1]N-磷酰化二肽甲酯和金属离子的相互作用[J]. 强黎明,刘若雨,曹书霞,卢奎. 南阳师范学院学报, 2010(09)
- [2]N-磷酰化肽酯及小肽与氨基酸相互作用的ESI-MS研究[J]. 强黎明,杨柳,曹书霞,卢奎,赵玉芬. 分析测试学报, 2009(11)
- [3]N-磷酰肽衍生物诱导K562细胞凋亡及其机理的研究[D]. 宇小青. 沈阳药科大学, 2006(01)
- [4]N-磷肽甲酯对K562细胞凋亡活性的影响及机理研究[D]. 杨杰. 清华大学, 2005(08)
- [5]二异丙基磷酰化二肽甲酯通过线粒体途径诱导K562细胞凋亡[J]. 刘峰,蒋宇扬,刘世英,王凯,曹健,赵玉芬. 癌症, 2005(04)
- [6]二异丙氧基磷酰化亮赖叉肽甲酯诱导K562细胞凋亡[J]. 杜伟,蒋宇扬,牛艳玲,刘峰,曹胜利,马丽,赵玉芬. 清华大学学报(自然科学版), 2003(12)