何华华:Pfu DNA聚合酶在大肠杆菌Rosetta(DE3)中的表达及快速纯化论文

何华华:Pfu DNA聚合酶在大肠杆菌Rosetta(DE3)中的表达及快速纯化论文

本文主要研究内容

作者何华华,胡晓韵,王婷,喻婵(2019)在《Pfu DNA聚合酶在大肠杆菌Rosetta(DE3)中的表达及快速纯化》一文中研究指出:来源于Pyrococcus furiosus COM1菌的Pfu DNA聚合酶具有保真性高、延伸速度快、热稳定性强等特点,能够提高PCR反应过程中的扩增效率,减少错误碱基掺入率.以大肠杆菌Rosetta(DE3)为重组细胞,利用一种快速表达纯化方法,让Pfu DNA聚合酶的表达纯化过程变得更加简便,并维持其高活性.结果表明,Pfu DNA聚合酶在大肠杆菌Rosetta(DE3)中能够进行大量表达,同时60℃高温水浴能有效去除杂蛋白,简化纯化步骤及提高Pfu DNA聚合酶纯度.经过一系列纯化步骤处理后,Pfu DNA聚合酶仍然能够保持较好的酶活,且在100μL PCR反应体系中,加入4μL的1 mg/mL Pfu DNA聚合酶液效果最佳.

Abstract

lai yuan yu Pyrococcus furiosus COM1jun de Pfu DNAju ge mei ju you bao zhen xing gao 、yan shen su du kuai 、re wen ding xing jiang deng te dian ,neng gou di gao PCRfan ying guo cheng zhong de kuo zeng xiao lv ,jian shao cuo wu jian ji can ru lv .yi da chang gan jun Rosetta(DE3)wei chong zu xi bao ,li yong yi chong kuai su biao da chun hua fang fa ,rang Pfu DNAju ge mei de biao da chun hua guo cheng bian de geng jia jian bian ,bing wei chi ji gao huo xing .jie guo biao ming ,Pfu DNAju ge mei zai da chang gan jun Rosetta(DE3)zhong neng gou jin hang da liang biao da ,tong shi 60℃gao wen shui yu neng you xiao qu chu za dan bai ,jian hua chun hua bu zhou ji di gao Pfu DNAju ge mei chun du .jing guo yi ji lie chun hua bu zhou chu li hou ,Pfu DNAju ge mei reng ran neng gou bao chi jiao hao de mei huo ,ju zai 100μL PCRfan ying ti ji zhong ,jia ru 4μLde 1 mg/mL Pfu DNAju ge mei ye xiao guo zui jia .

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  • 论文详细介绍

    论文作者分别是来自湖北大学学报(自然科学版)的何华华,胡晓韵,王婷,喻婵,发表于刊物湖北大学学报(自然科学版)2019年03期论文,是一篇关于聚合酶论文,亲和层析论文,检测论文,湖北大学学报(自然科学版)2019年03期论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自湖北大学学报(自然科学版)2019年03期论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。

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