环介导等温扩增反应论文-张贺伟

环介导等温扩增反应论文-张贺伟

导读:本文包含了环介导等温扩增反应论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:猪轮状病毒,流行病学调查,分离,鉴定

环介导等温扩增反应论文文献综述

张贺伟[1](2015)在《猪轮状病毒的分离鉴定及其环介导等温扩增反应检测方法的建立》一文中研究指出轮状病毒(Rotavirus)作为一种重要的肠道微生物,能造成多种小动物和新生婴幼儿腹泻。PoRV与PEDV、TGEV并称为引起腹泻的叁大病毒。目前,在世界上许多国家和地区均发现轮状病毒可引起相关腹泻疾病,对农业带来了巨大的经济损失。本实验室自2013年到2014年,在全国不同省市和地区采集腹泻样品362份,进行流行病学调查,检测结果显示,362份样品中,PEDV的阳性样品数为223份,阳性率为61.6%,TGEV的阳性样品数为2份,阳性率为0.55%;PoRV的阳性样品数为8份,阳性率为2.2%;PKV的阳性样品数为66份,阳性率为18.23%。将来自江苏省某发病猪场的轮状病毒阳性样品处理并与20ug/mL胰酶等体积混合后接种至MA-104细胞上,盲传8代,细胞出现变圆、拉网、脱落等病变。PCR及测序结果显示为猪轮状病毒,命名为JS株。叁次蚀斑克隆纯化后测定TCID50为10-6.875/mL,中和试验用病毒的最佳稀释倍数为150倍,并建立抗体检测方法。JS分离株的VP4基因型与P[7]基因型同源性最高,VP7基因型与G[9]基因型同源性最高。根据A群轮状病毒最新分类方法,JS分离株属于P[7]G[9]型。采用环介导等温扩增技术,建立了一种快速检测轮状病毒的实验方法。结果显示,当反应体系中甜菜碱浓度为0.8M,镁离子浓度为2mM,最佳反应温度为63℃时反应60min,扩增可达最佳效果。且该方法特异性良好,灵敏度为RT-PCR的100倍。可用于现场检测,具有良好的应用前景。(本文来源于《中国农业科学院》期刊2015-06-01)

杨劲,王娟,吴南屏,孟忠华,吕杭军[2](2012)在《一种改进型的环介导等温扩增反应》一文中研究指出背景环介导等温扩增(LAMP)是一种新近发展的快速、准确、经济的核酸检测技术,其特征表现在使用具链置换特性的聚合酶,以及特异的引物设计。迄今,此项技术己广泛应用于病原体、突变、甲基化等检测。LAMP技术的核心,其多引物对的设计对靶序列的选择要求较高。以HCV为例,HCV5'非翻译区(本文来源于《2012年浙江省医学微生物与免疫学及医学病毒学学术年会暨革兰阴性菌感染论坛论文集》期刊2012-09-14)

杨劲,王娟,吴南屏,孟忠华,吕杭军[3](2012)在《一种改进型的环介导等温扩增反应》一文中研究指出背景环介导等温扩增(LAMP)是一种新近发展的快速、准确、经济的核酸检测技术,其特征表现在使用具链置换特性的聚合酶,以及特异的引物设计。迄今,此项技术已广泛应用于病原体、突变、甲基化等检测。LAMP技术的核心,其多引物对的设计对靶序列的选择要求较高。以HCV为例,HCV5'非翻译区(本文来源于《2012年浙江省医学会肝病、感染病学学术年会暨浙江省感染科医师学术年会论文集》期刊2012-08-17)

吴青青,周超,牟颖[4](2012)在《低浓度SYBR Green Ⅰ在环介导等温扩增反应中的应用》一文中研究指出目的环介导等温扩增(Loop-mediated IsothermalAmplification,LAMP)是Notomi等于2000年开发出的一种新颖的恒温核酸扩增技术,循环置换扩增实现对靶序列的放大,不需要PCR仪。其显着特点是特异性高、耗时短、等温高效、易于检测,可通过肉眼观察或在扩增产物中加入荧光染料进行高灵敏度检测。LA肝的扩增效率极高,扩增产物的DNA数量比PCR产物高很多,能(本文来源于《中华医学会第七次全国中青年检验医学学术会议论文汇编》期刊2012-05-03)

黄思佳,解庭波,严家新[5](2011)在《环介导等温扩增反应的原理及应用》一文中研究指出环介导等温扩增反应(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)是日本学者Notomi于2000年在NucleicAcids Res杂志上公开的一种新的基因诊断技术,该法操作简便,扩增效率及灵敏度高,已广泛应用于食品、临床、农业等领域,有望成为主流的基因诊断方法。本文对LAMP的反应特征及原理、优缺点、临床应用作一综述。(本文来源于《中国生物制品学杂志》期刊2011年12期)

李美霞,张庆利,黄倢,刘利平[6](2011)在《海藻糖对冷冻干燥的环介导等温扩增反应混合物的保护效果》一文中研究指出环介导等温扩增技术由于其独特的优点,近年来被大量应用于病原生物的检测中。但是在实际生产应用中,环介导等温扩增反应混合物存在着多种成分需在低温下储存,不能反复冻融;且在贮存和运输过程中保存期限较短等缺点。为了解决这些问题,我们用冷冻干燥的方法处理环介导等温扩增反应混合物,并通过在混合物中添加不同量海藻糖(5%,10%,15%)的方法保护混合物的酶活性。试验结果表明:15%海藻糖组在冷冻干燥过程中以及之后的储存过程中都表现出最好的保护效果。在4℃储藏条件下,反应混合物的保存时间从1个月增加到至少3个月;在25℃储藏条件下,反应混合物的保存时间从12d增加到至少3个月;37℃下混合物保存期限延长1倍。在冷冻干燥的环介导等温扩增反应混合物中添加适量海藻糖有助于延长混合物的保存时间,适当提高储藏温度。该结果可为生产大规模的商品化LAMP检测试剂盒提供依据。(本文来源于《渔业科技创新与发展方式转变——2011年中国水产学会学术年会论文摘要集》期刊2011-11-15)

徐灵艳[7](2011)在《小型微流控芯片—环介导等温扩增反应实时浊度检测系统研制》一文中研究指出传染病一直都是一个让人望而生畏的字眼,尤其是近几年新发的传染病如SARS、禽流感等疾病,目前仍然缺乏切实可行的有效方案来快速准确地诊断这些疾病。传染病的快速诊断要解决的根本问题就是寻找快速、准确、简易的检测传染病病毒的方法。而以病毒核酸为基础的分子生物学方法发展迅猛,尤其是2000年的环介导等温扩增法的问世,备受瞩目。它只需在恒温条件下保温几十分钟,就可以完成核酸扩增反应,确定目的基因的存在与否。它具有简便、快速、灵敏等诸多优点,问世不久就被广泛应用在疾病诊断、食品成分分析及环境监测等领域,被预测为最有潜力应用于传染病临床快速检测的工具之一。本文建立的是一个用于检测环介导等温扩增反应的基于LabVIEW的小型实时浊度测量系统。成功地在微流控芯片上实现了环介导等温扩增反应的实时浊度检测,将微纳尺度的环介导等温扩增反应与虚拟仪器相结合,促进了环介导等温扩增反应检测的自动化程度,目前国内外还未见类似的报道。设计的光纤微流控芯片检测系统更是创造性地解决了常规光学元件组成的微流控检测系统体积庞大难以实现小型化的难题。在微流控芯片上实现LAMP反应的实时浊度检测的研究对于人类的传染病诊断领域意义重大,有望使很多传染性疾病能够及早的被发现与治疗;同时小型化,价格低廉,自动化程度高的仪器也比较容易推广与应用。(本文来源于《浙江大学》期刊2011-05-01)

郝晓鹏[8](2008)在《环介导的等温扩增反应检测CK-19基因在乳腺癌哨兵淋巴结的表达》一文中研究指出目的:建立一种更敏感、客观、快速的检测哨兵淋巴结转移的方法,以提高乳腺癌患者的生活质量。方法:①通过美蓝染色法获取乳腺癌患者的哨兵淋巴结,并采用传统的组织病理学方法检测其转移情况②将乳腺癌细胞系和淋巴瘤细胞系采用环介导的等温扩增反应检测CK-19基因的表达情况,观察其是否表达CK-19基因,证明该反应是否可以区分上皮来源和淋巴来源的细胞系。③将术中所取哨兵淋巴结均匀分成a、b、c、d四份,ac常规送病理检查,bd制成细胞匀浆,进行环介导的等温扩增反应,样品的RT-LAMP扩增之后的产物经凝胶电泳,观察其电泳条带,每一次检测设乳腺癌细胞系为阳性对照,淋巴瘤细胞系为阴性对照。并与病理结果进行对比。结果:①34例患者中成功获取哨兵淋巴结共80枚,其中病理检测结果为阳性的15例。②乳腺癌细胞系和淋巴瘤细胞系经环介导的等温扩增反应后,乳腺癌细胞系得到特征性阳性电泳条带,而淋巴瘤细胞系均为阴性,说明该反应可以很好的区分乳腺癌细胞和淋巴瘤细胞。③十个病理结果为阳性的哨兵淋巴结,经环介导的等温扩增技术扩增CK-19基因,均得到特征性电泳条带,与病理结果完全吻合,符合率100%。结论:通过本实验我们看出LAMP反应可以高效、快速、准确的对乳腺癌哨兵淋巴结进行检测。同时还可以检测整个淋巴结组织的转移情况,因而采用该方法进行哨兵淋巴结转移的检测具有非常良好的应用前景。(本文来源于《中国人民解放军军事医学科学院》期刊2008-05-15)

环介导等温扩增反应论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

背景环介导等温扩增(LAMP)是一种新近发展的快速、准确、经济的核酸检测技术,其特征表现在使用具链置换特性的聚合酶,以及特异的引物设计。迄今,此项技术己广泛应用于病原体、突变、甲基化等检测。LAMP技术的核心,其多引物对的设计对靶序列的选择要求较高。以HCV为例,HCV5'非翻译区

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

环介导等温扩增反应论文参考文献

[1].张贺伟.猪轮状病毒的分离鉴定及其环介导等温扩增反应检测方法的建立[D].中国农业科学院.2015

[2].杨劲,王娟,吴南屏,孟忠华,吕杭军.一种改进型的环介导等温扩增反应[C].2012年浙江省医学微生物与免疫学及医学病毒学学术年会暨革兰阴性菌感染论坛论文集.2012

[3].杨劲,王娟,吴南屏,孟忠华,吕杭军.一种改进型的环介导等温扩增反应[C].2012年浙江省医学会肝病、感染病学学术年会暨浙江省感染科医师学术年会论文集.2012

[4].吴青青,周超,牟颖.低浓度SYBRGreenⅠ在环介导等温扩增反应中的应用[C].中华医学会第七次全国中青年检验医学学术会议论文汇编.2012

[5].黄思佳,解庭波,严家新.环介导等温扩增反应的原理及应用[J].中国生物制品学杂志.2011

[6].李美霞,张庆利,黄倢,刘利平.海藻糖对冷冻干燥的环介导等温扩增反应混合物的保护效果[C].渔业科技创新与发展方式转变——2011年中国水产学会学术年会论文摘要集.2011

[7].徐灵艳.小型微流控芯片—环介导等温扩增反应实时浊度检测系统研制[D].浙江大学.2011

[8].郝晓鹏.环介导的等温扩增反应检测CK-19基因在乳腺癌哨兵淋巴结的表达[D].中国人民解放军军事医学科学院.2008

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