一、喂维生素C能提高公猪精液质量(论文文献综述)
徐冰冰[1](2021)在《基于多组学联合分析对内蒙古绒山羊精液抗冻性的研究》文中提出内蒙古绒山羊是我国重要的地方种质资源。优秀种公羊冷冻精液的生产推广,能够提高种公畜的利用效率,加速育种工作进程,为生产带来更高的经济效益。但内蒙古绒山羊冷冻精液活力不稳定,情期受胎率低,解冻后精液品质具有明显的个体抗冻性差异。为了建立一种高效的内蒙古绒山羊精液冷冻保存体系,本研究以内蒙古绒山羊为研究对象,采集精液,利用统一的冷冻解冻程序进行精液抗冻性筛选,并将其分为高抗冻组(High Freezability,HF)和低抗冻组(Low Freezability,LF),初步评估精子和精浆对内蒙古绒山羊精液抗冻性的影响。对内蒙古绒山羊HF组和LF组精浆进行蛋白质组-代谢组学联合分析,鉴定精浆中影响精液抗冻性的可能因素,其次利用脂质组学分析方法对内蒙古绒山羊HF组与LF组解冻后精子进行脂质差异表征。主要研究结果如下:(1)内蒙古绒山羊精液在冷冻-解冻后呈现抗冻性的个体差异,HF组冷冻解冻后精子各项运动参数以及结构完整性均显着高于LF组。精子和精浆的差异会影响精液抗冻性。(2)利用TMT(Tandem mass tags)标记定量蛋白质组学分析技术,从蛋白水平检测到HF组和LF组精浆间差异显着表达的蛋白质115个,HF组精浆中上调的蛋白质44个,LF组中上调的蛋白质71个。差异蛋白质GO(Gene Ontology)功能富集到22个生物学过程,14个细胞组分,10个分子功能。通过KEGG(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes)通路分析,115个差异蛋白覆盖91条通路。差异表达蛋白中UQCRC1、DNAH1、APOA1、ADAM32、HTT、CADM1、STIP1是内蒙古绒山羊精液抗冻性的潜在生物标记。(3)利用非靶向代谢组学分析技术,从代谢水平检测HF组和LF组精浆间的差异,在正、负离子电离模式下均能很好地将HF组与LF组精浆区分,二者具有明显代谢差异。在正离子模式下鉴定到HF组与LF组间差异代谢物23种,在负离子模式下鉴定到HF组与LF组间差异代谢物18种,富集到17条代谢通路。变量权重值(Variable Importance for the Projection,VIP)最大的前15种差异代谢物是柠檬酸盐、Pro-Arg、酮异己酸、乙酰肉碱、L-谷氨酰胺、次黄嘌呤、L-焦谷氨酸、20-羟基-前列腺素F2a、15-酮-前列腺素E1、L-亮氨酸、酪胺、泛酸、油酸、L-苯丙氨酸和二氢胸腺嘧啶,这些代谢物可以作为内蒙古绒山羊精液抗冻性的潜在生物标记。(4)通过蛋白质组-代谢组学联合分析将得到的差异蛋白质和差异代谢物同时向KEGG通路投射,富集到11条通路,差异蛋白质和差异代谢物在矿物质吸收通路上显着富集,其中包含的差异蛋白为LOC102172488和FTH1,差异代谢物分别是L-谷氨酰胺、L-苯丙氨酸和L-亮氨酸。差异蛋白质TF与LOC102172488具有较高的序列一致性,且TF与FTH1均富集在矿物质吸收通路。TF与FTH1在HF组与LF组解冻后精子中均有表达,且LF组中TF蛋白的表达量显着高于HF组,HF组精子中FTH1蛋白的表达量显着高于LF组。检测HF组与LF组精浆中矿物离子的含量,发现HF组精浆中Fe2+、Zn2+、Ca2+、Mg2+、Cr3+含量显着高于LF组。说明Fe的转运、氧化及储存可能影响内蒙古绒山羊精液抗冻性,且精浆中Fe2+、Zn2+、Ca2+、Mg2+、Cr3+的浓度与精液抗冻性有关。(5)利用非靶向脂质组学分析内蒙古绒山羊HF组与LF组冷冻解冻后精子的脂质特征。在正、负离子电离模式下,HF组和LF组精子均能很好的区分,说明两者间存在差异显着的脂质特征。共鉴定到29个脂质亚类,1133个脂质分子,检测到显着差异脂质分子13个,分别其中3个属磷脂酰胆碱亚类(Phosphatidylcholine,PC),10个属甘油三酯亚类(Triglyceride,TG)。说明精子膜上PC分子和TG分子能够显着影响内蒙古绒山羊精子冷冻耐受性。本研究为阐明内蒙古绒山羊精液抗冻性调控机制,基于多组学联合分析分别研究精浆和精子对抗冻性的影响。发现精子和精浆中均存在影响精液抗冻性的因素,并筛选到精浆中影响精液抗冻性的潜在生物标记,且精浆中矿物质离子含量与抗冻性有关;精子的脂质差异是影响解冻后精子活力的关键。通过以上研究,期望对内蒙古绒山羊精液抗冻性有更好的认识,为提高解冻后精液品质,建立内蒙古绒山羊精液冷冻保存体系提供理论依据。
赵勇,沈伟,张宏福[2](2021)在《公猪营养与繁殖》文中进行了进一步梳理公猪的重要性越来越得到广泛的关注。尽管种公猪在猪群中占据比例不高,但是种公猪的繁殖性能可以直接影响母猪的妊娠率和产仔数,进而影响猪场的整体经济效益。公猪的精液品质是其繁殖力的基础,同时也是发挥公猪遗传性能的重要保障。文章综合了近年来国内外研究公猪营养对精液品质及繁殖力的调控,从膳食纤维、蛋白质及氨基酸、多不饱和脂肪酸、微量元素及维生素、植物提取物、有益菌群等方面分析了它们如何改善公猪精液品质,但是有关研究还很不完善、不系统。因此,需要根据种公猪不同品种、不同生长阶段、不同环境条件下对各类营养物质的需求来制定合理、合适的种公猪饲料配方,以期发挥种公猪的最大潜力和价值。
石武,任毅杰,赵梦洁,吕东良,刘卫东,胡建宏[3](2021)在《壳聚糖、维生素C及庆大霉素对猪精液保存效果的比较分析》文中研究表明随着猪人工授精技术的广泛应用,精液保存技术也迅速发展。为了提高猪精液常温保存的效果,本研究通过向猪精液常温保存稀释液中分别添加0.1 g/L壳聚糖、0.25 g/L庆大霉素、0.068 g/L维生素C,检测1~6 d的精子活力、质膜完整性、顶体完整性和凋亡水平,并与庆大霉素组和维生素C组进行比较。结果表明,在保存6 d后,三组的保存质量显着高于对照组(P<0.05),其中添加庆大霉素组的保存质量显着高于其他组(P<0.05),稀释液中添加壳聚糖组的保存质量显着高于维生素C组(P<0.05),维生素C组的顶体完整率在6 d与对照组无显着差异(P>0.05),而添加壳聚糖组6 d的精子活力、质膜完整率和顶体完整率达到61.67%、68.67%、72.67%。稀释液中添加壳聚糖组和添加庆大霉素组,两者之间在保存2 d内差异不显着(P>0.05)。壳聚糖组合庆大霉素组的质膜完整率和顶体完整率均高于对照组和维生素C添加组(P<0.05)。因此,稀释液中添加0.1 g/L的壳聚糖可达到庆大霉素等传统添加剂的效果,其有效保存时间可达到6 d。
石武[4](2020)在《壳聚糖、庆大霉素和维生素C对猪精液常温保存效果的研究》文中研究指明随着猪人工授精技术在生猪养殖业中的广泛应用,精液保存技术迅速发展。由于猪精子结构的特殊性,目前猪精液常温保存是人工授精最常用的保存方法。众所周知,细菌污染和氧化应激是精液常温保存所面临的两大重要障碍。目前的研究表明,在稀释液中加入适当的抗氧化剂可以有效防止精子的氧化损伤,从而提高常温保存的精液品质。然而随着抗生素的禁用,新的抗生素代替策略逐渐成为了研究热点。壳聚糖具有改善动物生长性能、增强机体免疫力、调节脂肪代谢、抗菌抑菌和抗氧化等多种生物学功能,被认为是具有广泛开发前景的绿色添加剂,但壳聚糖在精液保存方面的研究较少。因此,为了提高猪精液常温保存的效果,本研究结合前期研究基础,在猪精液常温保存稀释液中添加0.1 g/L壳聚糖,检测保存1~6 d的精子活力、质膜完整性、顶体完整性等,与0.25 g/L庆大霉素和0.068 g/L维生素C进行比较,并进行16S r DNA测序分析,研究壳聚糖的抗氧化性能与抗菌性能,以期对壳聚糖作为猪精液常温保存抗氧化剂的应用提供理论依据。本研究获得的主要结果如下:1.在猪精液常温保存稀释液中分别加入0.1 g/L壳聚糖、0.25 g/L庆大霉素、0.068g/L维生素C,常温保存6 d后,三组精液的保存质量显着高于对照组(P<0.05),其中稀释液中添加庆大霉素组的保存质量显着高于其他组(P<0.05),壳聚糖组的保存质量显着高于维生素C组(P<0.05)。稀释液中添加壳聚糖保存6 d的精子活力、质膜完整率和顶体完整率分别为61.67%、68.67%、72.67%,仅次于庆大霉素组,但均显着高于对照组(P<0.05)。同时,对照组精子凋亡细胞占比最高,稀释液中添加0.1 g/L的壳聚糖组和0.068 g/L的维生素C组的精子凋亡细胞占比仅次于对照组,而添加0.25g/L庆大霉素组的精子凋亡细胞占比最低。因此,稀释液中添加0.1 g/L的壳聚糖可达到庆大霉素等传统添加剂的效果,精子有效保存时间可达到6 d。2.在猪精液常温保存稀释液中添加0.1 g/L壳聚糖、0.25 g/L庆大霉素、0.068 g/L维生素C,对常温保存6 d后精子的相关抗氧化酶及凋亡情况进行检测发现,稀释液中添加0.1 g/L壳聚糖和维生素C组精子的T-AOC活性、GSH活性、SOD活性和CAT活性显着高于庆大霉素组和对照组(P<0.05),而MDA含量和ROS水平显着低于庆大霉素组和对照组(P<0.05)。虽然稀释液中添加0.1 g/L壳聚糖组和维生素C组之间差异不显着(P>0.05),但0.1 g/L壳聚糖组的精子T-AOC活性、GSH活性、SOD活性和CAT活性高于维生素C组,MDA含量和ROS水平低于维生素C组,稀释液中添加0.1 g/L壳聚糖组的保存效果显着优于对照组和庆大霉素组(P<0.05)。因此,在稀释液中添加0.1 g/L壳聚糖组的保存效果最佳,显着提升了精子的抗氧化性能。3.本研究分别从门、目、属三个水平上的微生物组成的变化来分析精液中微生物的种类及分布情况,发现精液中在门水平上占据主导地位的细菌主要包括变形菌门(Proteobacteria)、厚壁菌门(Firmicutes)和拟杆菌门(Bacteroidetes);在纲水平上占据主导地位的细菌主要包括γ-变形菌纲(Gammaproteobacteria)、梭菌纲(Clostridia)和α-变形菌纲(Gammaproteobacteria);在目水平上的优势菌种为肠杆菌目(Enterobacteriales)、假单胞菌目(Pseudomonadales)和梭菌目(Clostridiales),其中最为优势的是肠杆菌目,占总变形菌门的60%~80%。本研究结果表明稀释液中添加壳聚糖组和庆大霉素组精液中变形菌门(Proteobacteria)、肠杆菌目(Enterobacteriales)、假单胞菌目(Pseudomonadales)和沙雷氏菌属(Serratia)等的丰度显着低于其他组(P<0.05)。精液保存5 d后,16S r DNA测序结果表示稀释液中添加0.25 g/L庆大霉素和0.1 g/L壳聚糖相对于对照组来说变形菌门的含量显着下降(P<0.05),其中肠杆菌目和假单胞杆菌目的含量也相应下降,但有部分菌属的含量也有所上升,表明壳聚糖有类似庆大霉素的抗菌作用,且只对部分菌属有抑制作用。因此,本研究结果表明在猪精液常温保存稀释液中添加0.1 g/L壳聚糖能够显着提高精子常温保存后的精子活力、质膜完整率和顶体完整率、T-AOC、SOD、GSH和CAT活性,并显着降低MDA含量和ROS水平,且抗菌效果达到庆大霉素等传统抗生素的效果,表明在一定程度上可替代抗生素的使用,壳聚糖既具有抗氧化性能,又具有一定的抑菌性能,对于猪精液常温保存的研究具有重要意义。
魏宏逵,彭健[5](2020)在《公猪精液品质营养调控研究进展》文中认为优良的精液品质是发挥公猪遗传性能的重要保障。公猪的精液品质受多种因素影响。其中,精子膜中脂肪酸组成会影响精子膜的流动性和完整性,从而对精子活力产生重要影响。氧化应激是影响精液品质的另一个重要因素。通过营养调控可以有效地改善精子的脂肪酸组成,提高精液的抗氧化状态,改善精液品质。本文综述了近年来国内外的相关研究成果,从功能性脂肪酸、氨基酸、维生素、矿物元素及植物提取物等方面分析了改善公猪精液品质的营养调控措施,阐述了营养调控在改善精液品质中的可行性和具体措施,旨在为生猪繁殖研究人员及养猪生产企业生产公猪优质精液提供理论依据和方案参考。
孙思怡[6](2020)在《冻亡精子及其溶出物对17℃保存猪精子质量的影响》文中提出人工授精作为一种重要的繁殖技术,其在畜牧生产及濒危动物保护等多个领域得到了广泛应用。鉴于人工授精技术的成熟性和众多优点,近年来在畜牧生产中使用人工授精的比例急剧增加,在养猪业中尤为明显。目前,养猪业中使用17℃保存猪精液子较为常见,研究多围绕稀释液配方的改良开展,如添加抗氧化剂以及精子质膜保护剂等方面。然而,关于保存过程中的死亡精子及渗出物的不利因素的探究较少。本试验通过对比各试验组保存效果的差异,探究冻亡精子及其溶出物对17℃保存猪精子质量的影响,以期为后续17℃保存及冷冻保存相关研究提供理论依据。本试验分为两部分,每部分各设计5个试验组。试验A按待测精子数分别添加不同比例冻亡精子(即对照组、A1、A2、A3、A4:添加0、10%、25%、50%、75%冻亡精子),试验B按待测精液体积分别添加不同比例冻亡精子溶出物(即对照组、B1、B2、B3、B4:添加0、10%、25%、50%、75%冻亡精子溶出物)。将各试验组置于17℃环境下保存,在不同的时间检测猪精子活率、平均路径速度等精子质量参数以及精液中p H值、T-AOC,MDA含量、线粒体活性、质膜完整率。试验研究结果包括以下几个方面:(1)对照组的精子活率、平均路径速度、直线速度、曲线速度等精子质量参数均显着优于A4组(P<0.05)。对照组与A1组的精子活率之间差异不显着(P<0.05)。对照组与A1组、A2组的平均路径速度、直线速度、曲线速度之间差异不显着(P<0.05)。综合试验数据说明50%、75%冻亡精子对猪精子的运动参数有显着不利影响,10%和25%的冻亡精子对猪精子的运动参数无显着不利影响。(2)A3组和A4组的精子活力、T-AOC、线粒体活性、质膜完整率显着低于对照组(P<0.05),MDA含量显着高于对照组(P<0.05)。对照组与A1组、A2组之间差异不显着(P<0.05)。综合试验数据说明50%和75%冻亡精子对猪精子的活力、T-AOC、线粒体活性、质膜完整率均有显着不利影响。(3)B3组和B4组的精子活率显着低于对照组(P<0.05),B2组、B3组和B4组的平均路径速度、直线速度、曲线速度显着低于对照组(P<0.05)。综合试验数据说明50%和75%冻亡精子溶出物对猪精子的活率有显着不利影响,25%、50%和75%冻亡精子溶出物对猪精子平均路径速度、直线速度均有不利影响。(4)B3组和B4组的精子活力、T-AOC、线粒体活性、质膜完整率显着低于对照组(P<0.05),MDA含量显着高于对照组(P<0.05)。对照组与B1组、B2组之间差异不显着(P<0.05)。综合试验数据说明50%和75%冻亡精子溶出物对猪精子的活力、T-AOC、线粒体活性、质膜完整率均有不利影响。当冻亡精子及其溶出物的添加量达到25%时,开始对精子保存产生不利影响,当达到50%开始冻亡精子及其溶出物氧化代谢产生大量氧化物,各指标均出现极为显着的差异。本试验通过探究冻亡精子及其溶出物对精子质量的影响,以期为猪精液17℃保存及冷冻保存相关研究提供新思路,为后续找到并切断影响精子保存质量的途径提供前期数据支持,为更好地提高精子保存质量打下基础。
施文[7](2020)在《在稀释液中添加虾青素对鸡精液保存效果影响的研究》文中研究指明现代化种鸡养殖场为了减少公鸡的饲养数量、提高配种受精率和生产效率,普遍采用人工授精技术辅助鸡场繁殖。然而,人工采集出来的精液随着保存时间的延长,精液活性氧(ROS)水平升高,精子发生氧化应激,最终导致其活力下降甚至凋亡,直接影响受精率。许多研究表明,具备较好抗氧化损伤能力的稀释液可以有效降低精子的氧化损伤水平,有助于保持精子活力。因此,本研究在鸡的精液稀释液中添加不同浓度的虾青素——一种较强的天然抗氧化剂,对低温或常温保存后的精子进行了一系列的检测,包括精子活力、畸形率、顶体和头尾部质膜完整率、ATP含量、乳酸脱氢酶(LDH)活性、总抗氧化能力(T-AOC)、ROS,丙二醛(MDA)水平、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、过氧化氢酶(CAT)和受精率等;并将得到最佳浓度虾青素稀释液后与添加番茄红素(0.2mg/m L)稀释液进行比较,为改进鸡精液稀释液、提高种鸡人工授精效率奠定基础。本研究主要结果如下:首先,在低温保存(4℃)条件下,精液稀释液中添加虾青素可提高贮藏精液质量,虾青素组精子活力(0.20μg/m L,20.73±0.95%)、顶体完整率、头尾质膜完整率、LDH活性和ATP含量均高于对照组(P<0.05);0.35μg/m L虾青素添加组中精液的精子畸形率在第5d时高于对照组(P<0.05),T-AOC、ROS、SOD、CAT、GSH-PX和MDA指标均优于对照组。0.20μg/m L虾青素添加组的受精率最高(63.25±4.42%)。其次,在常温(25~30℃)条件下,虾青素组的精子活力(0.20μg/m L,19.13±2.26%)、顶体完整率、头尾部质膜完整率、LDH活性和ATP含量均高于对照组(P<0.05);虾青素添加组中的精液T-AOC、ROS和MDA指标较优(P<0.05);在0.20μg/m L虾青素添加组中的精液SOD、GSH-PX和CAT指标最优(P<0.05)。使用采出后稀释的精液进行人工授精,0.20μg/m L虾青素添加组的受精率最高(93.23±4.80%)。最后,本研究使用0.20μg/m L虾青素稀释液与0.2mg/m L番茄红素稀释液进行比较,结果显示在低温条件下保存5d的虾青素添加组中精液的精子质膜完整率高于番茄红素组(P<0.05),但CAT活性低于番茄红素组。两组精子活力、顶体完整率,T-AOC、ROS指标均无显着差异。在常温条件下保存2d的虾青素添加组中精液的精子活力(21.43±4.83%)、顶体、质膜完整率,T-AOC均高于番茄红素组(P<0.05),CAT活性低于番茄红素组。两组精子ROS水平均无显着差异。综上所述,公鸡精液稀释液中添加的虾青素可以增强精液的抗氧化性,进而提升精液质量,本研究结果表明当虾青素的最佳添加浓度为0.20μg/m L,精子质量和受精率均有提高。与添加0.2 mg/m L番茄红素稀释液相比,添加0.20μg/m L虾青素稀释液在精子质膜完整性和T-AOC等参数优于前者,对精液保存效果更好。本研究结果将为虾青素作为强抗氧化剂在鸡精液保存稀释液中的应用提供理论依据。
张凌蛟[8](2020)在《表没食子儿茶素没食子酸酯对猪精液常温保存效果的研究》文中研究表明人工授精技术是生猪养殖中的关键环节,需要高质量的常温保存精液,而常温保存稀释液对精液品质具有很大影响,影响精液品质的诸多因素之一就是过量活性氧(Reactive oxygen species,ROS)的产生。过量的ROS产生会导致精子氧化应激,造成细胞器及质膜损伤甚至损害精子DNA,影响精子的受精能力以及人工授精后母猪的繁殖性能。目前的研究表明,在稀释液中加入适当的抗氧化剂可以有效防止精子的氧化损伤,从而提高常温保存的精液品质。因此,本试验通过在猪精液常温保存稀释液中添加天然抗氧化剂——表没食子儿茶素没食子酸酯(Epigallocatechin gallate,EGCG),并通过对17℃常温保存的第1~5 d的猪精子活率、质膜完整率、顶体完整率,总抗氧化能力(T-AOC)、丙二醛(MDA)含量、活性氧(ROS)含量、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)以及ATP含量、线粒体膜电位(MMP)和琥珀酸脱氢酶(SDH)活性等指标进行测定,研究EGCG的抗氧化性能,分析稀释液中添加EGCG对常温保存猪精液品质的影响,以期对EGCG作为猪精液常温保存抗氧化剂的应用提供理论依据。本试验主要获得以下研究结果:1.猪精液常温保存稀释液中添加不同浓度的(10μmol/L、20μmol/L、30μmol/L、40μmol/L和50μmol/L)EGCG,对猪精液常温保存均有积极的保护作用。当稀释液中添加20μmol/L和30μmol/L EGCG时可以达到最佳效果,且两组之间无显着差异(P>0.05),添加20μmol/L EGCG组精液17℃保存第5 d的精子活率、质膜完整率及顶体完整率分别达到78.36%、74.17%和63.09%,显着高于对照组和其余处理组(P<0.05);但是,稀释液中添加50μmol/L EGCG组精子活率与对照组相比无显着差异(P>0.05)。稀释液中添加10μmol/L与40μmol/L EGCG组相比,精子活率无显着差异(P>0.05)。2.在猪精液常温保存稀释液中添加不同浓度的EGCG均能够提高精子T-AOC、SOD、CAT活性,降低MDA含量和ROS水平,且与对照组相比差异显着(P<0.05)。稀释液中添加20μmol/L EGCG处理组精子T-AOC、SOD、CAT活性显着高于其他组(P<0.05),MDA含量和ROS水平显着低于其他组(P<0.05)。50μmol/L EGCG处理组的ROS水平和CAT活性与对照组相比无显着差异(P>0.05),但能够显着提高T-AOC和SOD活性,降低MDA含量(P<0.05)。在30、40和50μmol/L EGCG处理组间,精子T-AOC活性、MDA含量和SOD活性相比差异不显着(P>0.05)。另外,在稀释液中添加EGCG常温保存1 d后,其保存效果与对照组相比差异显着(P<0.05),但保存第3 d与第5 d之间的效果差异不显着(P>0.05)。因此,EGCG在猪精液常温保存稀释液中的最佳浓度为20μmol/L,其有效保存时间可达到5 d。3.在猪精液常温保存稀释液中添加EGCG能够不同程度的增强精子的线粒体功能和能量代谢。但是,随着EGCG添加量的增加精液保存效果反而下降。稀释液中添加20μmol/L EGCG保存效果最好,常温保存第5 d时精子的ATP含量、线粒体膜电位、SDH活性分别达到4.4μmol/m L、3.1ΔΨm和69.2 U/m L,均显着高于对照组(P<0.05)。与20μmol/L EGCG处理组相比,EGCG浓度为30μmol/L时精子线粒体膜电位及保存1 d、5 d的SDH活性均无显着差异(P>0.05),ATP含量和保存3 d的SDH活性均显着低于20μmol/L EGCG组(P<0.05),但均优于对照组(P<0.05)。当EGCG浓度为10μmol/L时,保存5 d时精子SDH活性与对照组无显着差异(P>0.05),而ATP含量、线粒体膜电位以及保存1 d和3 d的SDH活性均高于对照组(P<0.05)。当EGCG浓度为50μmol/L时,SDH活性和保存1 d、5 d精子ATP含量与40μmol/L EGCG处理组相比无显着差异(P>0.05),线粒体膜电位及保存3 d的精子ATP含量与其他处理组相比差异显着(P<0.05),并且均优于对照组(P<0.05)。因此,本研究证明在猪精液常温保存稀释液中添加EGCG可以有效提高精液保存质量,且最佳浓度为20μmol/L。稀释液中添加EGCG能够显着提高精子常温保存后的精子活率、质膜完整率、顶体完整率、T-AOC、SOD活性、CAT活性、ATP含量、线粒体膜电位及SDH活性,降低MDA含量和ROS水平。稀释液中添加一定浓度的EGCG对精子有积极的作用,对猪精液常温保存的研究具有重要的意义。
孙琳琳[9](2020)在《褪黑素对猪精液常温保存效果的研究》文中研究表明随着人工授精技术在养猪行业中的大规模普及,猪精液的合理稀释与保存越来越重要。目前运用于猪人工授精的精液通常为常温保存的猪精液。而猪精液随着保存时间的延长,除了自身营养物质逐渐消耗以外,精子内活性氧自由基(ROS)会逐渐累积。过量的ROS会氧化损伤精子的结构和功能,进而导致精液品质的降低。因此,在实践生产中,需要外源添加抗氧化剂提高猪精液的抗氧化能力,进而有效减少过量ROS引起的精子氧化应激反应。褪黑素具有很强的抗氧化作用,是目前已知的最有效的抗氧化物之一,常用于精子的保存。本实验在猪精液的稀释液中添加不同浓度的褪黑素,并运用计算机辅助精子分析系统(CASA)、多功能酶标仪、荧光显微镜、蛋白质免疫印迹等实验技术,检测分析17℃保存条件下精子的活力、质膜完整率、顶体完整率、线粒体膜电位、ATP含量、活性氧含量(ROS)、脂质过氧化损伤(LPO)、总抗氧化能力(T-AOC)、凋亡蛋白的表达情况等,探究褪黑素对猪精液常温保存效果的影响,筛选出最适的添加浓度。主要研究结果如下:1.褪黑素能够改善常温保存精液的保存效果。在猪精液常温保存稀释液中添加0.01μM、0.1μM、1μM、10μM、100μM的褪黑素,检测常温保存精子的活力、质膜完整率、顶体完整率。实验结果表明0.1μM褪黑素添加组的精子活力、质膜完整率、顶体完整率显着高于对照组(p<0.05)。2.褪黑素在猪精液常温保存中能够发挥抗氧化作用。在猪精液常温保存稀释液中添加0.1μM的褪黑素,检测常温保存精子的线粒体膜电位、ATP含量、活性氧自由基(ROS)水平、脂质过氧化(LPO)损伤水平、精子总抗氧化能力(T-AOC)。实验结果表明添加0.1μM褪黑素能够显着降低精子内氧自由基(ROS)水平、脂质过氧化(LPO)损伤水平(P<0.05),显着提高精子的线粒体膜电位、ATP含量及精子总抗氧化能力(p<0.05),说明褪黑素能通过自身的抗氧化能力对猪精子起到保护作用。此外,褪黑素在猪精液常温保存过程中能够发挥抗凋亡作用,在常温保存稀释液中添加0.1μM褪黑素,能够有效降低凋亡蛋白Cleaved Caspase-3以及Cytochrome C的表达量(p<0.05),使精子的凋亡现象得到缓解。3.在甲萘醌诱导的氧化应激模型实验中,检测精子活力、质膜完整率、线粒体膜电位、ATP含量、精子内活性氧自由基(ROS)水平以及精子总抗氧化能力(T-AOC)。实验结果发现添加0.1μM褪黑素处理后,精子活力、质膜完整率、线粒体膜电位、ATP含量以及精子总抗氧化能力(T-AOC)显着高于甲萘醌处理组(p<0.05),并且精子内活性氧自由基(ROS)水平也显着低于甲萘醌处理组(p<0.05),进一步说明褪黑素能够发挥抗氧化作用而保护猪精子。由以上结论可知:一方面,褪黑素能够发挥抗氧化作用保护常温保存的猪精子,并且其最适添加浓度为0.1μM;另一方面,褪黑素在猪精液的常温保存过程中可能发挥抗凋亡作用。因此,在猪精液常温保存稀释液中添加褪黑素有利于提高精子的品质,延长精液的保存时长。
朱振东[10](2020)在《猪精子能量代谢的调控机理研究》文中指出随着养猪业的规模化、专业化、集约化管理程度增加,人工授精技术的推广应用越来越广泛。猪人工授精技术对于提高生猪生产、促进优良种公猪利用率及加快遗传育种改良进程具有重要意义。猪人工授精技术使用的精液为15~17oC条件下保存的液态稀释精液。液态稀释精液的保存效果是制约猪人工授精技术发展的重要因素之一。精子运动的维持依赖于自身的能量供应。糖酵解和氧化磷酸化途径是体细胞广泛存在的重要能量代谢途径。细胞对能量代谢途径的选择取决于其微环境的能量代谢底物类型。精子在精浆和子宫液中做直线运动及在输卵管液中做超活化运动,即精子的代谢参与精子运动的调控。但是精子代谢对精子运动的调节作用及机制尚不清楚。通过探究精子代谢而改良稀释液成份对建立高效的猪精液保存稀释液配方具有重要意义。因此,本研究从精子代谢入手,探究精子氧化磷酸化途径及其相关作用因子在维持精子直线运动中的调控机制。本研究首先利用低糖模型探究糖酵解和氧化磷酸化供能方式对精子运动的影响,并检测精子运动轨迹变化及线粒体的转录翻译。其次,通过低糖稀释液模型及精子线粒体功能分析探究氧化磷酸化副产物活性氧(reactive oxygen species,ROS)对精子运动的损伤机制。此外,通过检测精子的谷胱甘肽合成及磷酸戊糖途径探究精子自身如何维持精子线粒体氧化磷酸化的运转。本研究主要取得如下结果:(1)精子在高糖液稀释液中做圆圈运动或类圆圈运动;降低稀释液中的葡萄糖含量促进猪精子直线运动。低糖稀释液通过激活精子线粒体活性、进而促进线粒体合成ATP(adenosine triphosphate)。精子直线运动的能量来源主要依靠线粒体合成的ATP。(2)猪精子在低糖稀释液的体外孵育过程中,精子存在线粒体基因的转录与翻译。线粒体翻译抑制剂处理结果揭示精子线粒体的转录与翻译参与了精子运动的调控。精子线粒体转录翻译主要通过影响线粒体功能,进而影响线粒体ATP的合成而调控精子的运动。(3)低糖稀释液在促进精子线粒体氧化磷酸化供能的同时也产生大量的副产物ROS,过量的ROS会氧化损伤精子的功能、降低精子的直线运动能力。(4)ROS主要氧化损伤精子线粒体蛋白转录系统及线粒体ATP合成系统。研究发现,随着胞内ROS含量的增加,精子线粒体呼吸链蛋白MT-ND1(NADPH dehydrogenase subunits 1)、MT-ND6(NADPH dehydrogenase subunits 6)和线粒体转录因子POLRMT(mitochondrial RNA polymerase)、TFAM(mitochondrial transcription factor-A)的4-HNE(4-hydroxynonenal)修饰增加,即MT-ND1、MT-ND6、POLRMT和TFAM的氧化损伤增加。并且,精子线粒体DNA也受到ROS的攻击而被氧化损伤。(5)在低糖稀释液中外源添加线粒体靶向抗氧化剂PQQ(pyrroloquinoline quinone)和Co Q10(coenzyme Q10)可以维持精子的直线运动,但是当线粒体翻译被抑制的情况下,添加这两种抗氧化剂均不能挽救精子的运动,说明PQQ和Co Q10不能有效减缓ROS对呼吸链上的蛋白MT-ND1和MT-ND6的氧化损伤。这主要是由于呼吸链上的蛋白更近于ROS产生的位点。PQQ和Co Q10主要通过保护线粒体的转录系统(POLRMT和TFAM)而维持线粒体的转录与翻译,进而为呼吸链上的来源于线粒体转录翻译蛋白(如MT-ND1和MT-ND6等)的周转提供新蛋白,维持线粒体ATP的合成,提高精子的直线运动。(6)猪精浆中存在合成谷胱甘肽(glutathione,GSH)的氨基酸底物,其中蛋氨酸、甘氨酸、谷氨酸、丝氨酸含量较高,半胱氨酸含量较低。在低糖稀释液中添加蛋氨酸、甘氨酸、谷氨酸及丝氨酸可以促进精子合成GSH,并缓解精子的氧化损伤而维持精子的直线运动。猪精子存在利用蛋氨酸合成GSH的途径,精子存在由蛋氨酸合成GSH途径所涉及的蛋白酶CBS(cystathionine beta synthase)、CTH(cystathionase)、GCLC(glutamate-cysteine ligase)和GSS(glutathione synthetase);并且蛋白酶CBS和CTH含量随着精子氧化应激程度的增加而增加,GCLC和GSS蛋白酶含量则未发生显着变化。说明氧化应激可以诱导精子合成CBS和CTH蛋白酶,进而利用蛋氨酸合成GSH而减缓ROS诱导的氧化损伤。(7)氧化应激激活精子的ERK1/2-e IF4E-RSK信号通路。随着精子胞内ROS含量的增加,精子内的p-ERK1/2、p-RSK、p-e IF4E水平增加,这也揭示了精子可以通过自身氧化还原平衡系统减少ROS的氧化损伤。(8)精子的磷酸戊糖途径(pentose phosphate pathway,PPP)参与精子的直线运动调控。无糖稀释液不能持久维持精子的直线运动,而20%葡萄糖稀释液中则可以持久维持精子直线运动。低糖稀释液中的葡萄糖进入合成NADPH的PPP途径,未进入糖酵解供能途径。精子衣康酸修饰是调节其葡萄糖代谢重编程的关键因子。低糖稀释液可以促进三羧酸循环产生中间代谢产物衣康酸,衣康酸对精子糖酵解途径的ALDOA(aldolase A)酶进行修饰,使其失活,进而降低精子的糖酵解途径,使葡萄糖进入PPP途径,参与NADPH的合成,进而参与自身氧化还原稳态的调控。综上所述,本研究探究了精子代谢对直线运动的调控作用。发现精子直线运动主要受线粒体氧化磷酸化供能调控;氧化磷酸化副产物ROS主要氧化损伤精子线粒体转录翻译系统和能量合成系统;精子自身通过调节谷胱甘肽合成和磷酸戊糖途径而调节其胞内氧化还原平衡稳态,进而维持精子的高速直线运动。本研究发现为高效猪精液保存稀释液的研发提供理论依据,并为高效猪人工授精技术体系的建立奠定基础。
二、喂维生素C能提高公猪精液质量(论文开题报告)
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、喂维生素C能提高公猪精液质量(论文提纲范文)
(1)基于多组学联合分析对内蒙古绒山羊精液抗冻性的研究(论文提纲范文)
摘要 |
abstract |
缩略语表 |
1 引言 |
1.1 山羊精液冷冻保存 |
1.2 影响精液抗冻性的因素 |
1.2.1 精浆 |
1.2.2 精子 |
1.2.3 冷冻保存程序 |
1.2.4 营养因素 |
1.3 蛋白质组学 |
1.3.1 TMT标记定量蛋白质组学概况 |
1.3.2 蛋白质组学在雄性生殖中的应用 |
1.4 代谢组学 |
1.4.1 非靶向代谢组学概况 |
1.4.2 代谢组学在雄性生殖中的应用 |
1.5 脂质组学 |
1.5.1 脂质组学概况 |
1.5.2 脂质组学在雄性生殖中的应用 |
1.6 研究目的与意义 |
1.7 技术路线图 |
2 研究一内蒙古绒山羊精液抗冻性筛选 |
2.1 材料与方法 |
2.1.1 主要试剂与仪器 |
2.1.2 试验动物 |
2.1.3 精液采集与稀释液配置 |
2.2 精液冷冻保存及抗冻性筛选 |
2.2.1 个体抗冻性的分类 |
2.2.2 去除精浆后的内蒙古绒山羊精液冷冻保存效果的影响 |
2.2.3 交换精浆后的内蒙古绒山羊精液冷冻保存效果的影响 |
2.3 精子质量检测 |
2.3.1 精子运动性能检测 |
2.3.2 精子结构完整性检测 |
2.3.3 冷冻精液的人工输精 |
2.3.4 数据分析 |
2.4 结果 |
2.4.1 绒山羊精液抗冻性的分类 |
2.4.2 去除精浆对精子抗冻性的影响 |
2.4.3 交换精浆对精子抗冻性的影响 |
2.5 讨论 |
2.5.1 抗冻性对内蒙古绒山羊精液冷冻保存效果的影响 |
2.5.2 抗冻性对去除精浆后的内蒙古绒山羊精液冷冻保存效果的影响 |
2.5.3 抗冻性对交换精浆后的内蒙古绒山羊精液冷冻保存效果的影响 |
2.6 小结 |
3 研究二基于TMT标记定量蛋白质组学对内蒙古绒山羊精浆抗冻性的研究 |
3.1 试验材料 |
3.1.1 试验样品 |
3.1.2 主要仪器与分析软件 |
3.1.3 主要试剂和耗材 |
3.2 试验方法 |
3.2.1 蛋白质提取和肽段裂解 |
3.2.2 SDS-PAGE电泳 |
3.2.3 FASP酶解 |
3.2.4 TMT标记 |
3.2.5 High pH Reversed-Phase肽段分级 |
3.2.6 高效液相色谱-质谱分析(LC-MS/MS) |
3.2.7 蛋白质鉴定和定量分析 |
3.2.8 生物信息学分析 |
3.3 结果 |
3.3.1 蛋白质提取质控评价 |
3.3.2 质谱稳定性与重复性质控结果 |
3.3.3 蛋白质鉴定结果 |
3.3.4 差异表达蛋白质筛选 |
3.3.5 差异表达蛋白质聚类分析(Clustering) |
3.3.6 差异表达蛋白质Gene Ontology(GO)功能富集分析 |
3.3.7 差异表达蛋白质KEGG通路富集分析 |
3.4 讨论 |
3.5 小结 |
4 研究三基于非靶向代谢组学对内蒙古绒山羊精浆抗冻性的研究 |
4.1 试验材料 |
4.1.1 试验样品 |
4.1.2 主要仪器和试剂 |
4.2 试验方法 |
4.2.1 样品预处理方法 |
4.2.2 色谱-质谱分析 |
4.2.3 数据处理 |
4.3 结果 |
4.3.1 试验质量控制 |
4.3.2 数据分析 |
4.3.3 显着性差异代谢物筛选 |
4.3.4 差异代谢物聚类分析 |
4.3.5 差异代谢物KEGG通路分析 |
4.4 讨论 |
4.5 小结 |
5 研究四蛋白质组-代谢组联合分析内蒙古绒山羊精浆抗冻性相关生物标记 |
5.1 材料与方法 |
5.1.1 试验样品 |
5.1.2 主要试剂与仪器 |
5.1.3 蛋白质组和代谢组联合分析 |
5.1.4 Western Blot实验步骤 |
5.1.5 精浆矿物质离子检测 |
5.2 结果 |
5.2.1 差异蛋白质和差异代谢物KEGG通路整合分析 |
5.2.2 FTH1 蛋白和TF蛋白的Western Blot结果 |
5.2.3 内蒙古绒山羊精浆中矿物质离子浓度检测 |
5.3 讨论 |
5.4 小结 |
6 研究五基于非靶向脂质组学对内蒙古绒山羊精子抗冻性的研究 |
6.1 试验材料 |
6.1.1 试验样品 |
6.1.2 实验仪器和试剂 |
6.2 试验方法 |
6.2.1 样本预处理方法 |
6.2.2 色谱-质谱分析 |
6.2.3 数据分析 |
6.3 结果 |
6.3.1 试验质量控制 |
6.3.2 脂类化合物鉴定数量 |
6.3.3 脂质亚类(Lipid class)水平分析 |
6.3.4 脂质分子(Lipid species)水平分析 |
6.4 讨论 |
6.5 小结 |
7 结论、创新点及展望 |
7.1 结论 |
7.2 创新点 |
7.3 展望 |
致谢 |
参考文献 |
附录 |
作者简介 |
(2)公猪营养与繁殖(论文提纲范文)
引言 |
1 碳水化合物(膳食纤维) |
2 蛋白质和氨基酸 |
3 脂肪酸(多不饱和脂肪酸) |
4 微量元素和维生素 |
5 植物提取物 |
6 有益菌 |
7 展望 |
(3)壳聚糖、维生素C及庆大霉素对猪精液保存效果的比较分析(论文提纲范文)
1 材料与方法 |
1.1 试验动物与精液采集 |
1.2 精液处理与保存 |
1.3 猪精液精子活力的检测 |
1.4 猪精液质膜完整率的检测 |
1.5 猪精液顶体完整率的检测 |
1.6 猪精子凋亡水平的检测 |
1.7 数据处理 |
2 结果与分析 |
2.1 壳聚糖、庆大霉素及维生素C对猪精子活力的影响 |
2.2 壳聚糖、庆大霉素及维生素C对猪精子质膜完整率的影响 |
2.3 壳聚糖、庆大霉素及维生素C对猪精子顶体完整率的影响 |
3 讨论 |
4 结论 |
(4)壳聚糖、庆大霉素和维生素C对猪精液常温保存效果的研究(论文提纲范文)
摘要 |
ABSTRACT |
第一章 文献综述 |
1.1 猪人工授精技术研究概况 |
1.2 猪精液常温保存技术研究概况 |
1.3 影响猪精液常温保存的环境因素 |
1.3.1 温度 |
1.3.2 pH |
1.3.3 渗透压 |
1.3.4 稀释倍数 |
1.3.5 微生物 |
1.4 猪精液常温保存稀释液成分 |
1.4.1 营养物质 |
1.4.2 缓冲物质 |
1.4.3 抗生素 |
1.4.4 抗氧化物质 |
1.4.5 壳聚糖的抗氧化及抑菌性能研究进展 |
1.5 猪精液品质评估常规指标 |
1.5.1 精子活力 |
1.5.2 精子密度 |
1.5.3 顶体完整性 |
1.5.4 质膜完整性 |
1.5.5 抗氧化能力 |
1.6 本研究的目的和意义 |
1.6.1 本研究的目的 |
1.6.2 本研究的意义 |
试验研究 |
第二章 壳聚糖、维生素C及庆大霉素对猪精液常温保存效果的比较分析 |
2.1 材料与方法 |
2.1.1 主要试剂 |
2.1.2 主要仪器设备 |
2.1.3 稀释液配制 |
2.1.4 试验动物与精液采集 |
2.1.5 精液处理与保存 |
2.1.6 精液质量检测 |
2.1.7 数据处理 |
2.2 结果与分析 |
2.2.1 壳聚糖、庆大霉素及维生素C对猪精子活力的影响 |
2.2.2 壳聚糖、庆大霉素及维生素C对猪精子质膜完整率的影响 |
2.2.3 壳聚糖、庆大霉素及维生素C对猪精子顶体完整率的影响 |
2.2.4 壳聚糖、庆大霉素及维生素C对猪精子凋亡的影响 |
2.3 讨论 |
2.4 小结 |
第三章 壳聚糖、庆大霉素及维生素C对猪精液常温保存抗氧化能力的影响 |
3.1 材料与方法 |
3.1.1 主要试剂 |
3.1.2 主要仪器设备 |
3.1.3 稀释液配制 |
3.1.4 试验动物与精液采集 |
3.1.5 精液处理与保存 |
3.1.6 测定指标 |
3.1.7 数据处理 |
3.2 结果与分析 |
3.2.1 壳聚糖、庆大霉素及维生素C对常温保存猪精液中T-AOC活性的影响 |
3.2.2 壳聚糖、庆大霉素及维生素C对常温保存猪精液中MDA含量的影响 |
3.2.3 壳聚糖、庆大霉素及维生素C对常温保存猪精液中GSH、CAT和 SOD活性的影响 |
3.2.4 壳聚糖、庆大霉素及维生素C对对常温保存猪精液中ROS水平的影响 |
3.3 讨论 |
3.4 小结 |
第四章 壳聚糖、维生素C及庆大霉素对猪精液常温保存抗菌能力的影响 |
4.1 材料与方法 |
4.1.1 主要试剂 |
4.1.2 稀释液配制 |
4.1.3 试验动物与精液采集 |
4.1.4 精液处理与保存 |
4.1.5 精液样品16SrDNA测序 |
4.1.6 数据处理 |
4.2 结果与分析 |
4.2.1 常温保存猪精液中微生物测序结果及OTU聚类 |
4.2.2 常温保存猪精液中微生物多样性分析 |
4.2.3 常温保存猪精液中微生物群落结构分析 |
4.2.4 处理组间微生物差异物种分析 |
4.3 讨论 |
4.4 小结 |
结论与创新点 |
参考文献 |
附录 |
致谢 |
个人简历 |
(5)公猪精液品质营养调控研究进展(论文提纲范文)
1 公猪精液品质营养调控研究概貌 |
2 精子生成特点、膜结构特征及与精液品质调控的关系 |
3 n-3 PUFAs对公猪精液品质的调控 |
4 氨基酸对公猪精液品质的调控 |
5 微量元素对公猪精液品质的调控 |
6 维生素对公猪精液品质的调控 |
7 植物提取物对公猪精液品质的调控 |
8 培育模式对公猪精液品质的调控 |
9 小结 |
(6)冻亡精子及其溶出物对17℃保存猪精子质量的影响(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
引用缩写符号说明 |
第一章 文献综述 |
1.1 猪精子的17℃保存 |
1.1.1 影响猪精子17℃保存的理化因素 |
1.1.2 影响猪精子17℃保存的微生物因素 |
1.1.3 死精子对猪精子体外保存的影响 |
1.1.4 猪精子稀释剂添加物的研究 |
1.2 精子质量检测常用指标 |
1.2.1 精子的活率 |
1.2.2 线粒体活性 |
1.2.3 质膜完整率 |
1.2.4 总抗氧化能力 |
1.2.5 丙二醛含量 |
第二章 冻亡精子对17℃保存猪精液精子质量的影响 |
2.1 材料与方法 |
2.1.1 试验仪器 |
2.1.2 试验主要试剂 |
2.1.3 试验方法 |
2.1.4 试验设计 |
2.1.5 数据统计分析 |
2.2 结果与分析 |
2.2.1 冻亡精子对17℃保存猪精子运动参数的影响 |
2.2.2 冻亡精子对17℃保存猪精液渗透压的影响 |
2.3 讨论 |
2.4 小结 |
第三章 冻亡精子对17℃保存猪精子生化指标、线粒体活性及质膜完整率的影响 |
3.1 材料与方法 |
3.1.1 试验仪器 |
3.1.2 试验材料 |
3.1.3 试验方法 |
3.1.4 试验设计 |
3.1.5 数据统计分析 |
3.2 结果与分析 |
3.2.1 冻亡精子对17℃保存猪精液精子活力及pH的影响 |
3.2.2 冻亡精子对17℃保存猪精子T-AOC和 MDA含量的影响 |
3.2.3 冻亡精子对17℃保存猪精液精子线粒体活性及质膜完整率的影响 |
3.3 讨论 |
3.3.1 冻亡精子对17℃保存猪精液精子活力及pH的影响 |
3.3.2 冻亡精子对17℃保存猪精子T-AOC和 MDA含量的影响 |
3.3.3 冻亡精子对17℃保存猪精液精子线粒体活性及质膜完整率的影响 |
3.4 小结 |
第四章 冻亡精子溶出物对17℃保存猪精子质量的影响 |
4.1 材料与方法 |
4.1.1 试验仪器 |
4.1.2 试验主要试剂 |
4.1.3 试验方法 |
4.1.4 试验设计 |
4.1.5 数据统计分析 |
4.2 结果与分析 |
4.2.1 冻亡精子溶出物对17℃保存猪精子运动参数的影响 |
4.2.2 冻亡精子溶出物对17℃保存猪精液渗透压的影响 |
4.3 讨论 |
4.4 小结 |
第五章 冻亡精子溶出物对17℃保存猪精子生化指标、线粒体活性及质膜完整率的影响 |
5.1 材料与方法 |
5.1.1 试验仪器 |
5.1.2 试验主要试剂 |
5.1.3 试验方法 |
5.1.4 试验设计 |
5.1.5 统计方法 |
5.2 结果与分析 |
5.2.1 冻亡精子溶出物对17℃保存猪精液精子活力及pH的影响 |
5.2.2 冻亡精子溶出物对17℃保存猪精子T-AOC和 MDA含量的影响 |
5.2.3 冻亡精子溶出物对17℃保存猪精液精子线粒体活性及质膜完整率的影响 |
5.3 讨论 |
5.3.1 冻亡精子溶出物对17℃保存猪精液精子活力及pH的影响 |
5.3.2 冻亡精子溶出物对17℃保存猪精子T-AOC和 MDA含量的影响 |
5.3.3 冻亡精子溶出物对17℃保存猪精液精子线粒体活性及质膜完整率的影响 |
5.4 小结 |
第六章 结论 |
参考文献 |
致谢 |
附图 |
作者简历 |
(7)在稀释液中添加虾青素对鸡精液保存效果影响的研究(论文提纲范文)
摘要 |
ABSTRACT |
第一章 综述 |
前言 |
1.1 鸡人工授精的发展现状 |
1.2 公鸡精液保存技术现状 |
1.2.1 公鸡精液低温保存技术现状 |
1.2.2 公鸡精液常温保存技术现状 |
1.2.3 影响公鸡精液保存的条件 |
1.3 公鸡精液保存稀释液成分 |
1.3.1 能量物质 |
1.3.2 缓冲物质 |
1.3.3 抗生素 |
1.4 抗氧化剂 |
1.4.1 抗氧化剂在精液稀释液中的应用 |
1.4.2 虾青素 |
1.5 鸡精子质量检测 |
1.5.1 鸡精子活力 |
1.5.2 鸡精液抗氧化性 |
1.5.3 鸡精子质膜完整性 |
1.5.4 鸡精子顶体完整性 |
1.5.5 鸡精子畸形率 |
1.5.6 鸡精子能量代谢 |
1.6 精子受精能力 |
1.7 研究目的及意义 |
第二章 在稀释液中添加虾青素对鸡精液低温保存效果的影响 |
前言 |
2.1 试验材料 |
2.1.1 试验材料 |
2.1.2 主要仪器及耗材 |
2.1.3 主要试剂的配制 |
2.2 试验方法 |
2.2.1 试验设计 |
2.2.2 试验精液保存 |
2.2.3 精液测定指标 |
2.3 试验结果与分析 |
2.3.1 低温保存条件下稀释精液中精子活力分析 |
2.3.2 低温保存条件下稀释精液中精子顶体完整率分析 |
2.3.3 低温保存条件下稀释精液中精子质膜完整率分析 |
2.3.4 低温保存条件下稀释精液精子畸形率分析 |
2.3.5 低温保存条件下稀释精液能量代谢分析 |
2.3.6 低温保存条件下稀释精液抗氧化能力分析 |
2.3.7 低温保存条件下稀释精液受精率结果分析 |
2.4 讨论 |
2.5 小结 |
第三章 虾青素对鸡精液常温保存效果的影响 |
前言 |
3.1 试验材料 |
3.1.1 实验材料 |
3.1.2 主要仪器及耗材 |
3.1.3 主要试剂的配制 |
3.2 试验方法 |
3.2.1 试验设计 |
3.2.2 精液保存 |
3.2.3 精液测量指标 |
3.3 试验结果与分析 |
3.3.1 常温保存条件下稀释精液中精子活力分析 |
3.3.2 常温保存条件下稀释精液中精子顶体完整率分析 |
3.3.3 常温保存条件下稀释精液中精子质膜完整率分析 |
3.3.4 常温保存条件下稀释精液精子畸形率分析 |
3.3.5 常温保存条件下稀释精液能量代谢分析 |
3.3.6 常温保存条件下稀释精液抗氧化能力分析 |
3.3.7 常温保存条件下稀释精液受精成功率检测 |
3.4 讨论 |
3.5 小结 |
第四章 稀释液中添加虾青素与番茄红素对鸡精液保存效果的比较 |
前言 |
4.1 试验材料 |
4.1.1 实验材料 |
4.1.2 主要仪器及耗材 |
4.1.3 主要试剂的配制 |
4.2 试验方法 |
4.2.1 试验设计 |
4.2.2 精液测量指标 |
4.3 试验结果与分析 |
4.3.1 低温(4℃)保存条件下试验结果与分析 |
4.3.2 常温(25~30℃)保存条件下试验结果与分析 |
4.4 讨论 |
4.5 小结 |
结论与创新点 |
结论 |
创新点 |
参考文献 |
致谢 |
攻读学位期间发表论文情况 |
(8)表没食子儿茶素没食子酸酯对猪精液常温保存效果的研究(论文提纲范文)
摘要 |
ABSTRACT |
文献综述 |
第一章 猪精液常温保存研究进展 |
1.1 猪人工授精技术的研究概况 |
1.2 猪精液常温保存技术研究进展 |
1.3 影响猪精液保存效果的因素 |
1.3.1 季节与温度 |
1.3.2 稀释倍数 |
1.3.3 pH |
1.3.4 渗透压 |
1.3.5 活性氧 |
1.3.6 微生物 |
1.4 猪精液常温保存稀释液成分 |
1.4.1 稀释剂和营养剂 |
1.4.2 保护剂 |
1.4.3 其他添加剂 |
1.5 抗氧化剂研究进展 |
1.5.1 酶类抗氧化剂 |
1.5.2 维生素类氧化剂 |
1.5.3 多糖类氧化剂 |
1.5.4 其他氧化剂 |
1.6 猪精液质量评定常用指标 |
1.6.1 畸形率 |
1.6.2 精子活率与活力 |
1.6.3 质膜完整率 |
1.6.4 顶体完整率 |
1.6.5 线粒体功能状态 |
1.6.6 抗氧化能力 |
1.7 本研究的目的和意义 |
1.7.1 本研究的目的 |
1.7.2 本研究的意义 |
试验研究 |
第二章 表没食子儿茶素没食子酸酯对猪精液常温保存效果的影响 |
2.1 材料与方法 |
2.1.1 试验材料 |
2.1.2 试验方法 |
2.1.3 精液质量检测 |
2.2 结果与分析 |
2.2.1 EGCG对常温保存猪精子活率的影响 |
2.2.2 EGCG对猪精液常温保存精子质膜完整率的影响 |
2.2.3 EGCG对常温保存猪精子顶体完整率的影响 |
2.3 讨论 |
2.4 小结 |
第三章 表没食子儿茶素没食子酸酯对常温保存猪精液酶活性的影响 |
3.1 材料与方法 |
3.1.1 试验材料 |
3.1.2 试验方法 |
3.1.3 测定指标 |
3.1.4 统计分析 |
3.2 结果与分析 |
3.2.1 EGCG对常温保存猪精液中T-AOC活性的影响 |
3.2.2 EGCG对常温保存猪精液中MDA含量的影响 |
3.2.3 EGCG对常温保存猪精液中ROS水平的影响 |
3.2.4 EGCG对猪精液常温保存SOD活性的影响 |
3.2.5 EGCG对常温保存猪精液中CAT活性的影响 |
3.3 讨论 |
3.4 小结 |
第四章 EGCG对猪精液常温保存精子线粒体功能及能量代谢的影响 |
4.1 材料与方法 |
4.1.1 试验材料 |
4.1.2 试验方法 |
4.1.3 测定指标 |
4.1.4 统计分析 |
4.2 结果与分析 |
4.2.1 EGCG对常温保存猪精子ATP含量的影响 |
4.2.2 EGCG对常温保存猪精子MMP的影响 |
4.2.3 EGCG对常温保存猪精子SDH活性的影响 |
4.3 讨论 |
4.4 小结 |
结论与创新点 |
参考文献 |
附录 |
致谢 |
个人简历 |
(9)褪黑素对猪精液常温保存效果的研究(论文提纲范文)
基金 |
摘要 |
ABSTRACT |
第一章 猪精液保存的研究进展 |
1.1 国内外猪人工授精技术的研究概况 |
1.2 猪精液常温保存研究进展 |
1.3 影响猪精液常温保存效果的因素 |
1.3.1 种公猪精液品质 |
1.3.2 渗透压和pH |
1.3.3 稀释方法 |
1.3.4 微生物 |
1.3.5 活性氧 |
1.4 抗氧化剂研究进展 |
1.4.1 酶促类抗氧化剂 |
1.4.2 非酶促类抗氧化剂 |
1.5 褪黑素的研究进展 |
1.5.1 褪黑素的合成与释放 |
1.5.2 褪黑素的抗氧化作用 |
1.5.3 褪黑素在精子保存中的运用 |
1.6 猪精液品质常用检测指标 |
1.6.1 精子活率 |
1.6.2 精子质膜完整率 |
1.6.3 精子顶体完整率 |
1.6.4 精子线粒体活性 |
1.6.5 抗氧化相关指标 |
1.7 研究目的及意义 |
1.7.1 研究目的 |
1.7.2 研究意义 |
第二章 褪黑素对猪精液常温保存效果的研究 |
2.1 材料与方法 |
2.1.1 试验材料 |
2.1.2 实验方法 |
2.1.3 精子质量检测 |
2.1.4 数据处理与统计分析 |
2.2 结果与分析 |
2.2.1 褪黑素对常温保存猪精子活力的影响 |
2.2.2 褪黑素对常温保存猪精子质膜完整率的影响 |
2.2.3 褪黑素对常温保存猪精子顶体完整率的影响 |
2.3 讨论 |
2.4 小结 |
第三章 褪黑素对常温保存猪精液的抗氧化作用 |
3.1 材料与方法 |
3.1.1 试验材料 |
3.1.2 试验方法 |
3.1.3 精液指标检测 |
3.1.4 数据处理与统计分析 |
3.2 结果与分析 |
3.2.1 褪黑素对常温保存猪精子线粒体膜电位的影响 |
3.2.2 褪黑素对常温保存猪精子内ATP含量的影响 |
3.2.3 褪黑素对常温保存猪精子内ROS水平的影响 |
3.2.4 褪黑素对常温保存猪精子脂质过氧化损伤程度的影响 |
3.2.5 褪黑素对常温保存猪精子总抗氧化能力(T-AOC)的影响 |
3.2.6 褪黑素对常温保存猪精子凋亡的影响 |
3.3 讨论 |
3.4 小结 |
第四章 褪黑素在猪精液氧化损伤模型中的抗氧化作用 |
4.1 材料与方法 |
4.1.1 试验方法 |
4.1.2 精液指标检测 |
4.1.3 数据处理与统计分析 |
4.2 结果与分析 |
4.2.1 褪黑素对氧化损伤模型中精子活力及质膜完整率的影响 |
4.2.2 褪黑素对氧化损伤模型中精子线粒体膜电位、ATP含量的影响 |
4.2.3 褪黑素对氧化损伤模型中精子内ROS含量、T-AOC的影响 |
4.3 讨论 |
4.4 小结 |
结论及创新点 |
结论 |
创新点 |
附录 |
参考文献 |
致谢 |
个人简历 |
(10)猪精子能量代谢的调控机理研究(论文提纲范文)
摘要 |
ABSTRACT |
主要符号对照表 |
文献综述 |
第一章 猪精子保存研究进展 |
1.1 猪人工授精技术的研究进展 |
1.2 猪精液和精子 |
1.2.1 猪精囊腺、前列腺及尿道球腺的生理特点 |
1.2.2 精子发生 |
1.2.3 公猪精液的特点 |
1.2.4 猪精子的生理结构特点 |
1.2.5 猪精浆成份特点 |
1.3 精子在雌性生殖道内的迁移 |
1.3.1 子宫颈、子宫与精子的互作 |
1.3.2 输卵管与精子的互作 |
1.4 猪精液保存的主要方式 |
1.4.1 常温保存 |
1.4.2 冷冻保存 |
1.5 常温保存稀释液 |
1.5.1 猪精液常温稀释液种类介绍 |
1.5.2 稀释液的营养成份 |
1.5.3 稀释液的pH |
1.5.4 稀释液的渗透压 |
1.5.5 稀释液抗生素的使用 |
1.6 精子质量检测方法 |
1.6.1 精子运动指标分析 |
1.6.2 质膜完整 |
1.6.3 顶体完整 |
1.6.4 线粒体活性 |
1.6.5 精子的脂质过氧化检测 |
第二章 精子能量代谢研究进展 |
2.1 精子糖酵解途径研究 |
2.1.1 糖酵解供能 |
2.1.2 糖酵解与精子功能的关系 |
2.2 精子线粒体氧化磷酸化 |
2.2.1 精子线粒体的特征及功能 |
2.2.2 精子线粒体氧化磷酸化供能途径 |
2.2.3 精子线粒体呼吸链复合物 |
2.3 精子糖酵解与氧化磷酸化代谢途径的关系 |
第三章 精子ROS氧化损伤研究进展 |
3.1 ROS的种类 |
3.2 ROS的来源 |
3.2.1 精液ROS的内源来源 |
3.2.2 精液ROS的外源来源 |
3.3 精子ROS的产生 |
3.4 ROS对精子的影响 |
3.4.1 ROS有利于促进精子功能 |
3.4.2 ROS对精子的不利影响 |
3.5 抗氧化剂的应用 |
3.5.1 酶类抗氧化剂 |
3.5.2 非酶类抗氧化剂 |
3.5.3 胺类激素物质 |
3.6 研究目的与意义 |
试验部分 |
第四章 线粒体氧化磷酸化对猪精子运动方式的调节 |
4.1 材料和方法 |
4.1.1 主要仪器设备 |
4.1.2 主要材料和试剂 |
4.2 试验步骤 |
4.2.1 试验动物及其饲养 |
4.2.2 猪精液采集 |
4.2.3 猪精液稀释处理 |
4.2.4 猪精液孵育处理 |
4.2.5 猪精子运动分析 |
4.2.6 猪精子质膜完整指标检测 |
4.2.7 流式细胞分析猪精子线粒体活性 |
4.2.8 线粒体基因在猪精子上的表达分析 |
4.2.9 猪精子ATP含量分析 |
4.2.10 猪精子线粒体蛋白的免疫荧光分析 |
4.2.11 Western Blotting检测猪精子线粒体蛋白在孵育过程的表达变化 |
4.3 结果与分析 |
4.3.1 利用不同梯度浓度葡萄糖的Modena液孵育精子而探究精子直线运动与葡萄糖含量的关系 |
4.3.2 线粒体呼吸链复合物I抑制剂鱼藤酮降低精子的直线运动、线粒体活性及ATP含量 |
4.3.3 猪精子线粒体基因转录与翻译 |
4.3.4 线粒体翻译抑制剂CRP呈浓度依赖性抑制线粒体翻译而降低精子的直线运动 |
4.3.5 线粒体翻译抑制剂CRP呈时间依赖性抑制线粒体翻译而降低精子的直线运动 |
4.3.6 细胞质翻译抑制剂(CHX)和核转录抑制剂(AMNT)不影响猪精子的直线运动方式 |
4.4 讨论 |
4.5 小结 |
第五章 低糖稀释产生的ROS对猪精子的损伤机理研究 |
5.1 材料和方法 |
5.1.1 仪器 |
5.1.2 主要试剂 |
5.1.3 相关抗体 |
5.1.4 相关试剂配制 |
5.2 试验步骤 |
5.2.1 试验动物及其饲养 |
5.2.2 猪精液采集 |
5.2.3 猪精液稀释处理 |
5.2.4 猪精液孵育处理 |
5.2.5 猪精子运动指标检测 |
5.2.6 流式细胞术分析猪精子线粒体活性 |
5.2.7 DNA分离和长链PCR扩增 |
5.2.9 猪精子ATP含量分析 |
5.2.10 猪精子线粒体ROS含量分析 |
5.2.11 猪精子线粒体蛋白的免疫荧光分析 |
5.2.12 Western Blotting检测猪精子蛋白在孵育过程的表达变化 |
5.3 结果与分析 |
5.3.1 低糖稀释液稀释后在孵育过程中精子的运动形式 |
5.3.2 低糖应激对精子损伤的机理 |
5.3.3 PQQ和 Co Q10 处理降低精子ROS含量,减少线粒体蛋白损伤,并增加线粒体膜电位、ATP含量和精子直线运动 |
5.3.4 在线粒体翻译抑制剂D-氯霉素(CRP)处理下,PQQ和 Co Q10 不能增加线粒体蛋白含量及精子直线运动 |
5.3.5 在低糖稀释液中添加PQQ或 Co Q10 会增强精子的线粒体基因转录与翻译 |
5.3.6 细胞质翻译抑制剂(CHX)和核转录抑制剂(AMNT)不影响精子的TFAM和POLRMT水平 |
5.4 .讨论 |
5.5 小结 |
第六章 精子谷胱甘肽合成系统调控精子运动 |
6.1 材料和方法 |
6.1.1 主要仪器设备 |
6.1.2 主要材料和试剂 |
6.2 试验步骤 |
6.2.1 试验动物及其饲养 |
6.2.2 猪精液采集 |
6.2.3 猪精液稀释处理 |
6.2.4 猪精液孵育处理 |
6.2.5 精浆氨基酸的分析 |
6.2.6 猪精子运动指标检测 |
6.2.7 流式细胞分析猪精子线粒体活性 |
6.2.8 精子总谷胱甘肽含量 |
6.2.9 精子ROS检测 |
6.2.10 猪精子CBS、CTH、GCLC、GSS基因的表达分析 |
6.2.11 猪精子ATP含量分析 |
6.2.12 Western Blotting检测 |
6.3 结果与分析 |
6.3.1 猪精浆中的GSH合成底物(氨基酸)与精液品质关系 |
6.3.2 在低糖稀释液中添加蛋氨酸会促进猪精子的直线运动 |
6.3.3 抑制谷胱甘肽的合成会降低精子的直线运动 |
6.3.4 低糖稀释液激活精子翻译合成CBS和 CTH限制酶而利用Met合成GSH |
6.3.5 氧化应激诱导精子利用蛋氨酸合成GSH相关蛋白酶的合成 |
6.3.6 氧化应激激活精子的ERK1/2/ e IF4E/RSK信号通路,合成相关蛋白酶,从而利用蛋氨酸合成GSH而缓解ROS对精子氧化损伤 |
6.4 讨论 |
6.5 小结 |
第七章 磷酸戊糖途径参与猪精子运动的调控 |
7.1 材料和方法 |
7.1.1 主要仪器设备 |
7.1.2 主要材料和试剂 |
7.2 试验步骤 |
7.2.1 试验动物及其饲养 |
7.2.2 猪精液采集 |
7.2.3 猪精液稀释处理 |
7.2.4 猪精液孵育处理 |
7.2.5 猪精子运动指标检测 |
7.2.6 流式细胞分析猪精子线粒体活性 |
7.2.7 精子还原型总谷胱甘肽与氧化谷胱甘肽的比值检测 |
7.2.8 精子总NADPH含量及NADPH/NADP+的比值检测 |
7.2.9 精子ALDOA活性检测 |
7.2.10 精子G6PD活性检测 |
7.2.11 精子总衣康酸修饰检测 |
7.2.12 GS/MS检测精子和精液中的衣康酸 |
7.2.13 精子ROS检测 |
7.2.14 猪精子质膜完整指标检测 |
7.2.15 猪精子ATP含量分析 |
7.2.16 Western Blotting |
7.3 结果与分析 |
7.3.1 葡萄糖对精子运动的影响 |
7.3.2 猪精子存在NADPH的磷酸戊糖途径合成系统 |
7.3.3 G6PD活性抑制剂(6-AN)抑制精子磷酸戊糖途径,调节精子直线运动 |
7.3.4 精子衣康酸修饰抑制糖酵解途径,促进磷酸戊糖途径 |
7.4 讨论 |
7.5 小结 |
结论 |
本研究创新点 |
后续研究工作 |
参考文献 |
致谢 |
个人简历 |
四、喂维生素C能提高公猪精液质量(论文参考文献)
- [1]基于多组学联合分析对内蒙古绒山羊精液抗冻性的研究[D]. 徐冰冰. 内蒙古农业大学, 2021
- [2]公猪营养与繁殖[J]. 赵勇,沈伟,张宏福. 猪业科学, 2021(05)
- [3]壳聚糖、维生素C及庆大霉素对猪精液保存效果的比较分析[J]. 石武,任毅杰,赵梦洁,吕东良,刘卫东,胡建宏. 畜牧兽医杂志, 2021(03)
- [4]壳聚糖、庆大霉素和维生素C对猪精液常温保存效果的研究[D]. 石武. 西北农林科技大学, 2020
- [5]公猪精液品质营养调控研究进展[J]. 魏宏逵,彭健. 动物营养学报, 2020(10)
- [6]冻亡精子及其溶出物对17℃保存猪精子质量的影响[D]. 孙思怡. 黑龙江八一农垦大学, 2020(09)
- [7]在稀释液中添加虾青素对鸡精液保存效果影响的研究[D]. 施文. 广西大学, 2020(07)
- [8]表没食子儿茶素没食子酸酯对猪精液常温保存效果的研究[D]. 张凌蛟. 西北农林科技大学, 2020
- [9]褪黑素对猪精液常温保存效果的研究[D]. 孙琳琳. 西北农林科技大学, 2020(02)
- [10]猪精子能量代谢的调控机理研究[D]. 朱振东. 西北农林科技大学, 2020