导读:本文包含了豚鼠巩膜成纤维细胞论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:转化生长因子-β,α-平滑肌肌动蛋白,细胞增殖,近视
豚鼠巩膜成纤维细胞论文文献综述
张兰兰,刘琼,于健,唐晓娟,徐静[1](2016)在《转化生长因子-β(TGF-β)影响豚鼠巩膜成纤维细胞增殖和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的研究》一文中研究指出目的本研究探讨转化生长因子-β(transforming growth factor,TGF-β)体外刺激豚鼠巩膜成纤维细胞,观察豚鼠巩膜成纤维细胞增殖和α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)的表达。方法原代培养豚鼠巩膜成纤维细胞并鉴定,MTT法检测豚鼠巩膜成纤维细胞的增殖,培养液分别加入20 ng·m L-1TGF-β1、TGF-β2、TGF-β3,分别于12 h、24 h、48 h、72 h,Real-time PCR检测α-SMA mRNA,Western-blotting和免疫荧光化学法检测其蛋白表达。结果与对照组相比,TGF-β1、TGF-β2和TGF-β3促进豚鼠巩膜成纤维细胞增殖,呈剂量依赖性(P<0.05),其中TGF-β1促进豚鼠巩膜成纤维细胞增殖作用最强(P<0.05);TGF-β1、TGF-β2和TGF-β3均增加α-SMA的表达(均为P<0.001),TGF-β3促进α-SMA表达作用最强(P<0.001)。结论 TGF-β通过调控细胞外基质合成参与调控巩膜组织重塑。(本文来源于《眼科新进展》期刊2016年11期)
刘琼,张兰兰,于健[2](2015)在《TGF β/smad3信号通路调控豚鼠巩膜成纤维细胞合成胶原蛋白和表达α-SMA》一文中研究指出目的:探讨TGFβ/smad3信号通路在豚鼠巩膜成纤维细胞合成胶原蛋白和表达α-SMA的调控作用。方法:原代培养豚鼠成纤维细胞并鉴定。构建siRNA-smad3慢病毒载体并体外转染。实验分4组,siRNA-smad3转染组,空病毒对照组,正常对照组,分别于上述3组加入TGFβ,培养48h后,realtime PCR检测COL1和α-SMA(本文来源于《第十五届国际眼科学学术会议;第十五届国际视光学学术会议;第二届国际角膜塑形学术论坛学术论文集》期刊2015-03-26)
朱子诚,柯根杰,温跃春,顾起宏,孙冰[3](2012)在《AG490对豚鼠巩膜成纤维细胞生长的影响》一文中研究指出目的研究α-氰基-(3,4-羟基)-N-苄苯乙烯胺(AG490)对体外培养的豚鼠巩膜成纤维细胞(guinea pig scleral fibroblast,GSF)生长状态的影响。方法选取原代培养传3-4代的GSF用于实验,应用台盼蓝染色、四甲基偶氮唑盐比色法和流式细胞仪检测和观察不同浓度(0μmol·L-1、15μmol·L-1、25μmol·L-1、50μmol·L-1、75μmol·L-1)AG490对体外培养的GSF生存活力和细胞增殖力以及细胞周期的影响。结果 15μmol·L-1、25μmol·L-1AG490对体外培养的GSF干预48h,细胞存活率为94.6%和94.1%,与0μmol·L-1AG490(95.5%)比较差异均无统计学意义(均为P>0.05);且均未见促进或抑制细胞增殖能力的作用,与0μmol·L-1AG490组比较差异亦均无统计学意义(t=3.91、3.89,均为P>0.05)。25μmol·L-1AG490作用GSF细胞48h后,G1期和S期细胞百分比及细胞增殖指数与0μmol·L-1AG490比较差异均无统计学意义(均为P>0.05)。结论一定浓度范围(≤25μmol·L-1)的AG490对正常GSF的存活率和增殖能力及细胞周期没有明显影响,提示AG490作为一种特异性的阻断JAK2/Stat3信号转导通路的酪氨酸酶受体抑制剂,对正常生理情况下的细胞(几乎没有Stat3磷酸化形式存在)没有明显的毒副作用。(本文来源于《眼科新进展》期刊2012年06期)
陈博宇[4](2012)在《豚鼠实验性近视眼巩膜成纤维细胞的力学特性变化及其与色素上皮细胞和部分细胞因子关系的研究》一文中研究指出目的:建立豚鼠镜片诱导型近视眼模型(Lens induced myopia, LIM),观察前部及后极部视网膜色素上皮(Retinal pigment epithelial cells, RPE)细胞及巩膜成纤维(Scleral fibroblasts, SF)细胞的生长周期变化,观察RPE细胞和SF细胞内基质金属蛋白酶(matrix metallopeptidase2, MMP-2)、转化生长因子-β2(transforming growth factor-beta2, TGF-(32)和碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor, bFGF)的表达变化;观察外源性转化生长因子(TGF-β2)对豚鼠眼球前部及后极部SF细胞生长周期的影响,观察TGF-β2对豚鼠眼球前部及后极部SF细胞基质金属蛋白酶(MMP-2)、转化生长因子-β2受体(Transforming Growth Factor-β receptor type2, TβR II)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)衣达的影响;结合TGF-β2对细胞力学特性的影响,观察SF细胞的力学特性变化。方法:取出生后2周龄的豚鼠30只(60只眼)雌雄不限,分为A、B、C叁组,每组10只,随机选取一只眼为实验眼(LIM眼),对侧眼为自身对照眼(Self-control, SC眼)。实验眼采用离焦点方法,用-10.00D凹透镜诱导成近视眼模型。 A、B、C叁组试验眼-10.00D凹透镜诱导时间分别为6天、15天、30天。实验前后检测每组豚鼠双眼屈光状态,用A超测双眼眼轴长度。另取5只(10眼)豚鼠不作任何干预,作为正常对照眼(Norma-contro, NC组)。细胞酶消化法原代培养豚鼠眼球前部及后极部RPE细胞,并传2代。免疫细胞化学法鉴定培养的细胞,利用免疫细胞化学法、荧光定量PCR (Q-PCR)法和Western Blot法对每组实验眼和对照眼前部及后极部RPE细胞的TGF-β2、bFGF的表达进行半定量及定量检测;用流式细胞仪检测每组实验眼和对照眼前部及后极部RPE细胞的生长周期。结果用SPSS13.0统计软件进行统计分析。组织块培养法培养豚鼠眼球前部及后极部SF细胞,并传2代。免疫细胞化学法鉴定培养的细胞,免疫细胞化学法、荧光定量PCR (Q-PCR)法和Western Blot法对每组实验眼和对照眼前部及后极部SF细胞MMP-2、 TGF-β2、 bFGF的表达进行半定量及定量检测;用流式细胞仪检测每组实验眼和对照眼前部及后极部SF细胞的生长周期;利用细胞微管吸吮的方法测定每组实验眼和对照眼前部及后极部SF细胞的力学特性。结果用SPSS13.0统计软件进行统计分析。用组织块培养法培养豚鼠后极部SF细胞并传2代,免疫细胞化学法鉴定培养的细胞。将不同质量浓度的TGF-β2(分别为0、1、10、100ng/ml)加入无血清DMEM中作用24h,利用免疫细胞化学法、荧光定量PCR (Q-PCR)法和Western Blot法对每组实验眼和对照眼后极部SF细胞MMP-2、 TβRⅡ、bFGF的表达进行半定量及定量检测;用流式细胞仪检测每组后极部SF细胞的生长周期;用细胞微管吸吮的方法测定各组实验眼和对照眼SF细胞的力学特性。结果用SPSS13.0统计软件进行统计分析。结果:1RPE细胞和SF细胞中TGF-β2、 bFGF、 MMP-2的表达:免疫细胞化学、荧光定量PCR (Q-PCR)及Western Blot去结果显示:①A、B、C叁组实验眼和对照眼前部及后极部RPE、 SF细胞均有TGF-β2的表达,叁组实验眼前部及后极部与自身对照眼相应前部及后极部比较,实验眼中TGF-β2的阳性率高于自身对照眼(P<0.05)。实验眼中前部RPE细胞、前部SF细胞于15天阳性率增高,30天阳性率最高;后极部RPE和SF细胞于6天阳性率开始增高,至15天阳性率最高,以后保持较高的阳性率(P<0.05);30天时后极部RPE细胞、SF细胞TGF-β2的阳性率明显低于同期前部RPE细胞、SF细胞阳性率(P<0.05);叁组自身对照眼自身前部及后极部RPE、 SF细胞TGF-β2阳性率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。②A、B、C叁组实验眼和对照眼前部及后极部RPE细胞、SF细胞均有bFGF的表达,实验眼前部及后极部与自身对照眼相应前部及后极部比较,实验眼中bFGF的阳性率低于自身对照眼,差异有显着统计学意义(P<0.05)。而且,随着诱导时间的延长,A、B、C叁组实验眼的阳性率逐渐降低,差异有显着统计学意义(P<0.05), A、 B、 C叁组自身对照眼的阳性率不变,差异无统计学意义(P>0.05);实验眼和自身对照眼各组自身前部及后极部比较,差异无统计学意义(P>0.05)。③A、B、C叁组实验眼和对照眼前部及后极部SF细胞均有MMP-2的表达,实验眼前部及后极部与自身对照眼相应前部及后极部比较,(LIM组)实验眼中MMP-2的阳性率高于自身对照眼(P<0.05)。实验眼中前部SF细胞于15天阳性率增高,30天阳性率最高;后极部SF细胞于6天阳性率开始增高,至15天阳性率最高,以后保持较高的阳性率(P<0.05);30天时后极部SF细胞MMP-2阳性率仍明显低于同期前部SF细胞阳性率(P<0.05);各组自身对照眼自身前部及后极部SF细胞MMP-2阳性率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。2TGF-β2对SF细胞MMP-2.TβRⅡ、bFGF表达的影响免疫细胞化学、荧光定量PCR(Q-PCR)及Western Blot法结果显示:实验眼0ng/ml TGF-β2组与对照眼0ng/ml TGF-β2组比较,实验眼MMP-2的阳性率明显增高,差异有统计学意义(P<0.05)。实验眼和对照眼SF细胞在TGF-β2浓度为10ng/ml时MMP-2的阳性率最高(P<0.05)。实验眼0ng/ml TGF-β2组与对照眼0ng/ml TGF-β2组比较,实验眼TβR Ⅱ的阳性率明显增高,差异有统计学意义(P<0.05)。实验眼和对照眼SF细胞随着TGF-β2浓度的增高TβRⅡ的阳性率越来越高。经统计学分析SF细胞阳性率和TGF-β2浓度有明显的相关性。(P>0.05)。实验眼0ng/ml TGF-β2组与对照眼0ng/ml TGF-β2组比较,实验眼bFGF的阳性率明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。实验眼和对照眼SF细胞随着TGF-β2浓度的增高bFGF的阳性率变化无明显统计学意义(P>0.05)。3流式细胞仪检测细胞生长周期结果:A、B、C叁组实验眼后极部RPE细胞、SF细胞于诱导6天后,G0/G1期细胞百分比明显升高,S期百分比明显下降,15天时G0/G1期细胞百分比继续升高,S期百分比继续下降。但到30天时G0/G1期细胞百分比又有所降低,S期百分比又有所升高,与对照组相比差异仍有统计学意义(P<0.05)。A、B、C叁组实验眼前部RPE细胞、SF细胞于诱导15天后,G0/G1期细胞百分比才开始明显升高,S期百分比明显降低,与对照眼相比差异有统计学意义(P<0.05),但到30天时G0/G1期细胞百分比又有所降低,S期百分比又有所升高,与对照眼相比差异仍有统计学意义(P<0.05)。A、B、C叁组实验眼相同诱导时间前部RPE细胞、SF细胞与后极部RPE细胞、SF细胞比较,两者差异有统计学意义(P<0.05)。4细胞超微结构变化A、B、C叁组实验眼后极部RPE细胞、SF细胞于诱导6天后,胞核外形不规则,胞质水中,胞浆内线粒体较多而小、部分线粒体水肿,粗面内质网扩张、内质网及核糖体等细胞器均减少,细胞界膜不清,部分界膜消失。A、B、C叁组实验眼前部RPE细胞、SF细胞于诱导15天后,始见细胞核外形不规则,胞质水肿,胞浆内线粒体较多而小、部分线粒体水肿,粗面内质网扩张、内质网及核糖体等细胞器均减少,细胞界膜不清,部分界膜消失。5细胞力学研究结果(1)透镜诱导后巩膜成纤维细胞自身力学特性改变①不同诱导时间实验眼前部SF细胞力学特性比较及统计学分析实验眼前部SF细胞平衡杨氏模量、表观黏性6天组与15天组比较差异无统计学意义(P>0.05),30天组与6天组、15天组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。②不同诱导时间实验组后极部SF细胞力学特性比较及统计学分析实验眼后极部SF细胞平衡杨氏模量、表观黏性15天组与30天组比较差异无统计学意义(P>0.05),6天组与15天组、30天组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。③不同诱导时间自身对照眼前部及后极部SF细胞力学特性比较及统计学分析在诱导6天、15天、30天时,自身对照眼前部与后极部SF细胞平衡杨氏模量、表观黏性结果比较,差异无统计学意义(P>0.05);两两比较差异均无统计学意义(P>0.05)。④各组实验眼的SF细胞力学特性与各组对照眼比较,论是平衡杨氏模量还是细胞表观黏性,实验眼前部于30天时与自身对照眼前部比较均增高,其差异有统计学意义(P<0.05);实验眼后极部于15天、30天时与自身对照眼后极部比较均增高,其差异有统计学意义(P<0.05)。⑤经统计学分析:各诱导时间段自身对照眼巩膜细胞的杨氏模量、细胞表观黏性均与实验眼巩膜细胞的杨氏模量、细胞表观黏性有显着统计学差异(P<0.05)。(2)TGF-β2对SF细胞的力学特性变化的影响实验眼0ng/ml TGF-β2组与对照眼O ng/ml TGF-β2组比较,实验眼SF细胞的平衡杨氏模量、黏弹性参数明显升高,二者之间差异有统计学意义(P<0.05)。实验眼与对照眼在TGF-β2作用下,0ng/ml组与1ng/ml组、10ng/ml组比较,细胞的平衡杨氏模量、黏弹性参数差异均有统计学意义(P<0.05)。实验眼和对照眼培养细胞的平衡杨氏模量、黏弹性参数与TGF-β2的质量浓度均呈正相关(r=0.743、r=0.533;r=0.654、r=0.576),实验眼和对照眼中的0ng/ml组与100ng/ml组比较,SF细胞的平衡杨氏模量、黏弹性参数差异均无统计学意义(P>0.05)。实验眼1ng/ml组、10ng/ml组与对照眼1ng/ml组、10ng/ml组比较,SF细胞的平衡杨氏模量、黏弹性参数之间差异有统计学意义(P<0.05):实验眼100ng/ml组与对照眼100ng/ml组比较,SF细胞的平衡杨氏模量、黏弹性参数差异无统计学意义(P>0.05)。结论:1LIM模型可使RPE及SF细胞TGF-β2及MMP-2表达上调,并且表达水平存在时间和部位上的差异;同时使bFGF表达下调,但不存在明显的时间和部位上的差异。2LIM模型及TGF-β2刺激均可诱导RPE及SF细胞增殖抑制。3TGF-β2刺激可诱导RPE及SF细胞超微结构变化,同时上调MMP-2及TβRⅡ的表达,但对bFGF表达无明显作用。4LIM模型可使SF细胞平衡杨氏模量及粘弹性参数明显升高,产生“硬化”现象,且前部与后极部细胞发生变化的时间存在差异。5低浓度TGF-β2刺激可降低SF细胞的平衡杨氏模量及粘弹性参数。(本文来源于《河北医科大学》期刊2012-04-01)
王红,高蕾,王静,陈敏,张林娜[5](2011)在《碱性成纤维细胞生长因子对紫外线诱导豚鼠巩膜细胞凋亡的影响及其与凋亡抑制基因bcl-2的相关性研究》一文中研究指出目的探讨碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)对紫外线(ultraviolet,UVA)诱导的巩膜细胞凋亡的影响及其对凋亡抑制的发生机制。方法用组织块培养法培养豚鼠后极部巩膜细胞。利用紫外线诱导细胞凋亡模型,将培养的巩膜细胞分为对照组(无UVA光照)、单纯UVA组(仅暴露于UAA照射),并于UVA照射前加不同剂量的bFGF(UVA+10μg/L bFGF组,UVA+20μg/L bFGF组,UVA+40μg/L bFGF组)。以流式细胞仪检测细胞凋亡,以RT-PCR法和Western-blot技术测定B细胞淋巴瘤-白血病-2基因(B-cell lymphoma/leukemia 2,bcl-2)的表达。结果组织培养后1~2周开始有细胞长出,3~4周融合,免疫荧光鉴定细胞为巩膜成纤维细胞。流式细胞仪检测显示,bFGF能够抑制UVA诱导的巩膜细胞凋亡,对巩膜细胞有保护作用,且bFGF浓度高于20μg/L时抑制作用更加显着;RT-PCR法、Western-blot检测显示,UVA能够引起凋亡抑制基因bcl-2表达下调,但bFGF能够抑制UVA的下调作用,且随着bFGF浓度的升高其抑制效果逐渐增强,巩膜细胞bcl-2基因的表达也逐渐增加。结论外源性bFGF能够通过上调凋亡抑制基因bcl-2的表达而抑制巩膜细胞的凋亡。(本文来源于《环境与健康杂志》期刊2011年12期)
张兰兰,于健,吴炳义,刘琼,汤明芳[6](2011)在《慢病毒介导绿色荧光蛋白基因转染豚鼠巩膜成纤维细胞的实验研究》一文中研究指出目的观察慢病毒载体转染豚鼠巩膜成纤维细胞的有效性及对细胞活性的影响。方法转染组用慢病毒携带绿色荧光蛋白(lentiviral mediated green fluorescent protein,Lenti-GFP)转染豚鼠巩膜成纤维细胞,对照组加入空白培养液,转染组按最佳感染复数(multiplicity of infection,MOI)为50、100、200、400加入Lenti-GFP,转染2d、3d、4d、5d、6d和7d后,在倒置显微镜下观察绿色荧光蛋白表达情况,流式细胞仪检测转染效率,MTT法检测病毒对细胞增殖的影响。结果 Lenti-GFP转染细胞后48h可以看见绿色荧光;在同一MOI值下,随时间延长转染效率增高,第5天达到高峰;在MOI为400,转染5d时转染效率达82.86%;转染5d行MTT检测显示:MOI为50~400时,同一转染时间各组IOD值与对照组比较,差异均无统计学意义(均为P>0.05)。结论慢病毒载体可以在体外稳定而有效地转染豚鼠巩膜成纤维细胞,且不影响细胞活性,是巩膜成纤维细胞理想的基因转染载体。(本文来源于《眼科新进展》期刊2011年12期)
牟丽丽,刘桂香,王玲,韩明磊,高岩[7](2011)在《TIMP-2基因转染豚鼠巩膜成纤维细胞基质金属蛋白酶2及其抑制剂表达》一文中研究指出目的观察转染基质金属蛋白酶2抑制剂(tissue inhibitor of matrix metalloproteinase2,TIMP-2)基因的豚鼠巩膜成纤维细胞不同时间增生能力及基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase2,MMP-2)和TIMP-2的表达,探讨基因治疗近视的可行性。方法随机选取叁色健康豚鼠,组织块法体外培养原代巩膜成纤维细胞,免疫组织化学法进行波形蛋白的鉴定,取第3~6代细胞进行实验。分子克隆构建携带TIMP-2基因的真核表达载体,转染豚鼠巩膜成纤维细胞,MTT法观察转染后12h、24h、48h、3d、5d、7d细胞增生能力。提取总RNA,二步法逆转录-聚合酶链反应检测MMP-2mRNA及TIMP-2mRNA的表达水平。结果豚鼠巩膜成纤维细胞原代、传代培养生长良好,波形蛋白鉴定阳性。转染3d、5d、7d TIMP-2基因转染组成纤维细胞的增生速度分别为0.6724±0.0092、0.7963±0.0060、0.8462±0.0064,明显快于正常对照组成纤维细胞(0.5810±0.0120、0.6525±0.0072、0.7129±0.0132),差异均具有显着统计学意义(均为P<0.01)。转染48h MMP-2mRNA表达即开始减少,转染3d时表达明显减少,达到最低,除转染12h与24h之间外,转染组与正常对照组、各转染不同时间组间MMP-2mRNA表达差异均有统计学意义(均为P<0.05)。TIMP-2mRNA表达在转染48h时即开始增加,除12h与24h外,转染组与正常对照组、各转染不同时间组间TIMP-2mRNA表达差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论转染TIMP-2基因对豚鼠巩膜成纤维细胞有促增生作用,TIMP-2基因转染豚鼠巩膜成纤维细胞抑制MMP-2mRNA的表达,可在一定程度上阻止近视发展中巩膜组织的丢失与重塑。(本文来源于《眼科新进展》期刊2011年11期)
陈博宇,王超英,马景学,陈维毅,安英杰[8](2011)在《TGF-β_2对豚鼠实验性近视眼后极部巩膜成纤维细胞的增殖和超微结构的影响》一文中研究指出目的明确转化生长因子β2(TGF-β2)对豚鼠镜片诱导型近视眼后极部巩膜成纤维细胞的增殖和超微结构的影响。方法选择2周龄豚鼠10只,随机选取一只眼(实验组)用镜片诱导法制备近视动物模型,对侧眼为自身对照组。造模30 d后对两组进行屈光度和眼轴检测。培养豚鼠后极部巩膜成纤维细胞。将每只眼培养的细胞分为空白对照及TGF-β21、10、100 ng/ml浓度组,用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测各组光吸收值(OD)和细胞增殖的程度;利用电镜观察TGF-β210 ng/ml时细胞的超微结构并对结果进行统计分析。结果凹透镜诱导后实验组屈光度和眼轴与诱导前比较差异均有统计学意义(P<0.05);实验组和自身对照组TGF-β2 100 ng/ml时OD值与空白对照比较差异无统计学意义(P>0.05),TGF-β2 1、10 ng/ml和空白对照两两比较差异有统计学意义(P<0.05),同浓度TGF-β2组间OD值和增殖率比较差异无统计学意义(P>0.05)。不同浓度TGF-β2时细胞增殖率组内比较差异有统计学意义(P<0.05)。在10 ng/ml TGF-β2作用下巩膜成纤维细胞核外形不规则,粗面内质网扩张,细胞器减少,细胞界膜不清,部分界膜消失。结论 TGF-β2可有效地抑制豚鼠巩膜成纤维细胞的增长,其中10 ng/ml的刺激作用最强,可使细胞的超微结构发生变化。(本文来源于《临床误诊误治》期刊2011年09期)
陈博宇,王超英,安慧琴,马景学,陈维毅[9](2011)在《豚鼠早期实验性近视眼巩膜成纤维细胞前部及后极部MMP-2 mRNA及蛋白表达变化的研究》一文中研究指出目的研究豚鼠早期实验性近视眼巩膜成纤维细胞(guineapig scleral fibroblast,GSF)前部及后极部基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase 2,MMP-2)的改变,探索近视的发病机制。方法 2周龄豚鼠30只作为实验组,另外再随机选取5只(10眼)正常2周龄豚鼠不作任何干预,作为正常对照眼。选取任意眼戴-10.00DS凹透镜,分别饲养6d、15d、30d后除去镜片,验光及测眼轴长度确定近视形成后,采用组织块培养法培养豚鼠的前部及后极部GSF,利用免疫细胞化学、实时荧光定量PCR、Western blot蛋白印迹法检测前部及后极部GSF中MMP-2表达变化。结果 MMP-2的表达定位于细胞浆和细胞核。实验组中前部GSF饲养15d阳性表达率较高,30d阳性表达率最高;后极部GSF饲养6d表达率开始较高,至15d阳性表达率最高,以后保持较高的阳性表达率,各诱导时间点之间两两比较,差异均有统计学意义(均为P<0.05);自身对照组各组自身前部及后极部比较,差异均无统计学意义(均为P>0.05)。结论体外培养的豚鼠GSF稳定表达MMP-2 mRNA及其蛋白,且前部GSF于诱导15d开始阳性表达率较高,后极部GSF于诱导6d开始阳性表达率较高,后极部GSF较前部表达明显增多。(本文来源于《眼科新进展》期刊2011年09期)
陈博宇,安慧琴,王超英,马景学,陈维毅[10](2011)在《TGF-β_2对豚鼠实验性近视眼后极部巩膜成纤维细胞MMP-2表达的影响》一文中研究指出目的明确转化生长因子β2(transforming growth factor-β2,TGF-β2)对豚鼠镜片诱导型近视眼后极部巩膜成纤维细胞基质金属蛋白酶(matrix metallo proteinase,MMPs)表达的影响。方法选择2周龄已脱离母乳喂养的豚鼠12只,随机选取12只中各一眼用镜片诱导法制备近视动物模型(实验组),对侧眼不予任何处理(自身对照组)。30 d后采用组织块培养法培养豚鼠后极部巩膜成纤维细胞,并传2代。将每只眼(两组24只眼)培养出的细胞分别分为空白对照组、1 ng/mlTGF-β2组、10 ng/ml TGF-β2组、100 ng/ml TGF-β2组,利用实时荧光定量聚合酶链反应、western-blot蛋白印迹法对各组细胞MMP-2、MMP-2mRNA进行定量分析。结果经30 d镜片诱导,实验组诱导出(-6.70±1.93)D的相对近视,眼轴相对延长(1.53±0.31)mm,实验前后比较差异有统计学意义(P<0.05)。实验组中空白对照组与自身对照组中空白对照组比较,MMP-2、MMP-2mRNA表达量增高,差异有统计学意义(P<0.05)。TGF-β2浓度为10 ng/ml时实验组和自身对照组细胞MMP-2、MMP-2mRNA的表达量最高,与本组其他浓度比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论凹透镜诱导可引起豚鼠明显轴性近视,TGF-β2能有效刺激MMP-2的表达。(本文来源于《临床误诊误治》期刊2011年06期)
豚鼠巩膜成纤维细胞论文开题报告
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
目的:探讨TGFβ/smad3信号通路在豚鼠巩膜成纤维细胞合成胶原蛋白和表达α-SMA的调控作用。方法:原代培养豚鼠成纤维细胞并鉴定。构建siRNA-smad3慢病毒载体并体外转染。实验分4组,siRNA-smad3转染组,空病毒对照组,正常对照组,分别于上述3组加入TGFβ,培养48h后,realtime PCR检测COL1和α-SMA
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
豚鼠巩膜成纤维细胞论文参考文献
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