导读:本文包含了爪蛙胚胎论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:TSA,HDAC1,非洲爪蛙,胚层分化
爪蛙胚胎论文文献综述
曹青,赵晓,康雅菲,徐西兵,刘浩[1]（2019）在《组蛋白去乙酰化修饰对非洲爪蛙胚胎发育及胚层分化的影响》一文中研究指出目的:探讨组蛋白乙酰化修饰对非洲爪蛙胚胎早期发育以及叁胚层分化的影响。方法:用400 nmol/L的曲古抑菌素A(trichostation A,TSA)处理2细胞时期的胚胎,观察胚胎发育的情况,并通过整体原位杂交的方法检测胚层标记基因的表达;通过显微注射组蛋白去乙酰化酶1(histone deacetylase 1,HDAC1)特异性的反义寡核苷酸(HDAC1MO)实现HDAC1基因的敲降,利用整体原位杂交检测胚层标记基因的表达。结果:TSA处理造成胚胎发育异常,TSA处理和敲降HDAC1影响胚层标记基因的表达。结论:组蛋白去乙酰化酶在胚胎早期发育的过程中参与胚层的分化。(本文来源于《南京医科大学学报(自然科学版)》期刊2019年08期）
程良平,石宇,周维涛,李廷玉[2]（2018）在《APP代谢通路关键基因在非洲爪蛙早期胚胎中的时空表达》一文中研究指出目的:Aβ的沉积是形成老年斑的主要原因,同时是阿尔茨海默病的主要病理标志物。Aβ形成来源于该病的主要致病基因淀粉样前体蛋白APP(Amyloid beta precursor protein;XB-GENE-479158;NCBI:Xl.8671),APP在非洲爪蛙早期胚胎时空表达图式目前还不清楚,之前的报道只在某些手术分离的组织中用RT-PCR的方法进行了研究,为进一步在爪蛙中研究这类基因在发育过程中的时空表达及可能的功能,展开了本研究。方法:本研究收集了第2期到第4期非洲爪蛙胚胎包括(卵裂期、囊胚期、原肠胚期、神经轴胚、尾牙期和蝌蚪期),通过整体胚胎原位杂交和半定量RT-PCR检测基因APP在胚胎发育不同时期的时空表达,用双荧光素酶报告基因系统检测APP启动子活性。结果:APP有2种主要的转录产物,短的693~694个氨基酸,长的有750~751个氨基酸,主要差别来自外显子7的可变剪切。其中短的剪切体是主要转录的产物,而长的一个剪切体则表现为持续的低表达。整胚的原位表达结果显示:在神经板阶段,APP主表达在孵化和黏液腺中。神经管闭合后,APP转录水平升高,在体细胞中胚层,前肾和背侧神经管中呈现高表达。在尾芽末期,APP在晶状体、端脑、松果体、间脑和背侧耳泡中表达。在蝌蚪期,APP主要在包括胰腺、胃和十二指肠在内的消化系统中高表达。结论:APP是一个母源性表达的基因,其时空表达分布的特异性预示其在相关部位发育过程中可能发挥重要作用,从而为研究阿尔茨海默病的关键致病基因在胚胎早期的所发挥的作用提供了新的路径。(本文来源于《重庆医科大学学报》期刊2018年06期）
林昊[3]（2017）在《去甲基酶KDM3A在爪蛙胚胎神经系统发育中的功能研究》一文中研究指出胚胎发育过程中,神经系统的决定与分化是一个复杂的过程。目前对于神经系统发育过程中涉及的信号通路和转录因子已经有了一定的研究。bHLH家族转录因子作为原神经基因中的一大类,在神经系统发育中起到了重要的作用。很多证据表明,Neurog2和Ascl1能够起始很多遗传通路从而促进神经元的决定和分化。然而,Neurog2和Ascl1激活靶基因的分子机制以及它们活性的差异还没有完全研究清楚。组蛋白的表观遗传学修饰能够在不改变基因序列的情况下,改变基因表达的开放状态和强度。越来越多的证据表明组蛋白的修饰状态对于胚胎发育过程的各个阶段都起到了重要的作用。在这篇论文中,我们以非洲爪蛙胚胎为研究对象,去研究神经元发育过程。我们发现组蛋白H3第9位赖氨酸的去甲基化酶KDM3A表达在中枢神经系统中。Neurog2在非洲爪蛙中的同源基因Ngnr1可以使用KDM3A作为它的共同激活因子。敲低KDM3A会干扰Ngnr1起始神经元基因的表达。相比之下,Ascl1激活tubb2b时却不依赖KDM3A的存在。在非洲爪蛙初级神经发生过程中,敲低KDM3A不会影响神经诱导或者Ngnr1表达,但是却会导致初级神经元的缺陷。生化分析发现Ngnr1可以通过C端和KDM3A发生相互作用。染色质免疫共沉淀方法发现Ngnr1依赖KDM3A去除神经元标记基因座上的H3K9me2抑制型标记。Ngnr1激活神经元基因表达时建立的激活型的组蛋白标记,例如H3K4me3和H3K27ac,也需要KDM3A的存在。十分有趣的是,我们发现Ascl1不能激活neurod1表达的原因至少部分可以归结为Ascl1不能招募KDM3A。此外,我们证明了Ngnr1结合神经元标记基因座的能力也依赖KDM3A存在。综上所述,我们的实验证明了Ngnr1可以招募KDM3A来激活神经元标记基因的表达,Ngnr1和Ascl1在起始神经元发育过程中的不同活性至少部分由于它们是否需要KDM3A。(本文来源于《清华大学》期刊2017-05-01）
高丽[4]（2016）在《Ascl1在非洲爪蛙胚胎早期发育中的功能研究》一文中研究指出胚层分化是胚胎早期发育中的重要事件,调控胚层分化的分子机制是发育生物学研究的重要问题。非洲爪蛙是研究母源因子调控胚层分化的经典模式生物。爪蛙中,富集在植物极的母源因子VegT,通过激活合子nodal相关基因和中内胚层调控因子,诱导中内胚层的形成,从而建立胚层在动植物极轴向上的分化模式;母源背方决定因子Wnt11b诱导组织中心的形成,决定胚胎背腹体轴,从而建立胚层在背腹轴向上的分化模式。爪蛙预定外胚层细胞在胚胎发育早期具有多潜能性,在体外能够响应诱导信号分化为中内胚层;然而在体内,外胚层分化成神经和表皮。研究表明,这群细胞具有自发分化成神经的潜能。因此,外胚层细胞如何获得神经分化潜能?中内胚层诱导信号如何被限定在植物半球?这都是值得研究的问题。Ascl1是果蝇achaete-scute复合体的同源蛋白。在脊椎和非脊椎动物的神经系统中,Ascl1是调控神经元分化的重要因子。在体外研究中,Ascl1能够将体细胞转分化成功能神经元。因此,Ascl1在神经发育中具有重要的功能。已有报道发现,Ascl1在爪蛙中有母源表达,但是Ascl1的母源功能并未有详细报道。在本论文中,我们通过过量表达和敲降母源Ascl1,发现Ascl1在爪蛙胚层决定和分化中具有重要的功能。首先,Ascl1异常表达导致胚胎原肠运动延迟、胚层分化缺陷以及体轴短小等表型。其次,Ascl1通过拮抗VegT的转录调控活性,从而抑制中内胚层基因的表达;然而,过量表达Ascl1并不影响Nodal/Activin信号在中内胚层分化中的调控功能。随后,我们发现Ascl1可以通过其N-端结构域与HDAC1相互作用,以依赖HDAC活性的方式,去除VegT靶基因启动子上的乙酰化修饰,从而抑制中内胚层基因的转录。此外,我们发现Ascl1蛋白N端和C端结构域具有不同的转录调控活性。最后,我们发现母源Ascl1在神经诱导、神经前体维持和神经分化过程中都具有重要的调控功能。综上所述,本研究揭示了母源Ascl1在胚胎早期胚层分化和神经生成过程中具有关键作用。Ascl1通过HDAC活性依赖的方式,抑制母源VegT对中内胚层基因的诱导;Ascl1是调控外胚层神经发育过程所必需的母源因子。本研究为更好的理解胚胎早期发育过程提供了重要线索。(本文来源于《清华大学》期刊2016-06-01）
高燕[5]（2015）在《赖氨酸去甲基化酶Kdm2a/Kdm2b通过调节核内β-Catenin的稳定性调控非洲爪蛙胚胎体轴的形成》一文中研究指出在脊椎动物早期胚胎发育的过程中,其背腹体轴、前后体轴、左右体轴的建立是整个生物个体发育进程中的重大事件,涉及到很多信号转导通路和相应的信号转导因子的精密调控,例如Wnt信号通路、BMP信号通路、Nodal信号通路、FGF信号通路等等。其中,Wnt信号的活性在胚胎生成过程中所形成的活性梯度对于整个机体体轴的建立起到了至关重要的作用：母源的Wnt信号会特化胚胎背前部的形成；合子的Wnt信号主要负责胚胎后部腹部化的形成。Wnt/β-Catenin信号通路在调节胚胎的形成,肿瘤形成,机体内环境的稳态,机体再生以及胚胎干细胞的多能性等方面发挥了重要的作用。许多类型的癌症和Wnt/β-Catenin信号活性的错误调控都是相互关联的,同样在在非洲爪蛙胚胎中母源的P-Catenin的缺失会使organizer和背部体轴都不能形成。β-Catenin稳定性的调节是调控Wnt/β-Catenin信号活性的一种主要机制,同时核内高水平的β-Catenin也作为一些肿瘤的不良病状预断。在没有Wnt蛋白激活的情况下,胞质内会形成由APC,GSK3,CK1和β-TrCP形成的降解复合体,其中CK1和GSK3会使β-Catenin的N末端的丝氨酸和苏氨酸残基磷酸化,随后β-Catenin会被泛素化,然后被蛋白酶体降解。在有Wnt蛋白激活的情况下,胞质内不能形成降解复合体,β-Catenin也不会被磷酸化,非磷酸化的即活化的β-Catenin随后会进入细胞核内和TCF/LEF转录因子形成转录激活复合体激活靶基因的转录。之前对于Wnt信号通路中β-Catenin在胞质内调节机制的研究已经很清楚了,但是对于其在核内的调节机制还不是很清楚。赖氨酸去甲基化酶(Kdm2a/Kdm2b)作为一类对组蛋白产生特异位点去甲基化的修饰酶,目前已有数据显示有一些酶会对非组蛋白产生修饰作用,调节它所作用的底物活性和稳定性,Kdm2a/Kdm2b所作用的底物范围可能远远不止于组蛋白。之前的研究已经说明Kdm2a/Kdm2b是在核内表达的蛋白,目前为止,人们对于Kdm2a和Kdm2b在机体内的生理学作用和它们是否参与调节早期胚胎体轴的形成,以及Kdm2a/Kdm2b调节早期胚胎体轴形成的作用机制尚未有明确的结论。在此,我们利用非洲爪蛙(Xenopus leavis)为动物模型,来研究这些问题。在本篇论文中,我们利用经典的模式动物非洲爪蛙重点阐述了赖氨酸去甲基化酶Kdm2a/Kdm2b通过调节Wnt信号通路中P-Catenin的稳定性来调控非洲爪蛙胚胎形成过程中前后体轴的形成。我们在非洲爪蛙胚胎里敲降Kdm2a/Kdm2b发现胚胎体轴严重缩短,头部和尾部发育缺陷,这些表型和已知研究报道的P-Catenin过度激活表型类似。敲降Kdm2a/Kdm2b同时注射Kdm2a/Kdm2b mRNA也可以拯救这些表型。另外,母源和合子的Wnt/β-Catenin靶基因的转录被上调了。进一步地,我们的研究揭示了在敲降Kdm2a/Kdm2b之后,非洲爪蛙早期胚胎的前部标志基因被上调,后部的标志基因被下调。除此之外,Kdm2a和Kdm2b还具有功能冗余和功能互补的作用。相应地,我们还发现在敲降Kdm2a/Kdm2b之后,胚胎内活化的β-Catenin的蛋白水平是上调的,同样利用荧光素酶报告基因分析出在胚胎中和HEK293T细胞中Wnt信号的活性也是增加的。另外检测活化的β-Catenin总甲基化水平也是被上调的。同时,在RKO细胞系中Kdm2a/Kdm2b在细胞核内抑制活化的β-Catenin活性且敲降Kdm2a/Kdm2b会增加原肠胚期P-Catenin的甲基化水平。所以,Kdm2a/Kdm2b可能通过去甲基化作用诱导细胞核里非磷酸化的P-Catenin的降解,从而影响了母源和合子的Wnt/β-Catenin信号,导致了Wnt/β-Catenin信号下游靶基因不同程度的改变,这无疑影响了非洲爪蛙早期胚胎体轴的形成。综上所述,我们的研究结果表明在非洲爪蛙胚胎里,赖氨酸去甲基化酶Kdm2a/Kdm2b对于体轴的形成起着至关重要的作用。这种作用可能是通过Kdm2a/Kdm2b的去甲基化作用诱导细胞核里非磷酸化的P-Catenin的降解,从而激活胚胎里母源和合子的Wnt/β-Catenin信号,导致Wnt/β-Catenin信号下游靶基因不同程度的改变,进而影响了非洲爪蛙早期胚胎体轴的形成。(本文来源于《南京大学》期刊2015-11-18）
孙冠妮[6]（2015）在《SCP3通过去除R-Smad抑制性磷酸化调控爪蛙胚胎胚层分化》一文中研究指出胚层分化是脊椎动物早期胚胎发育最重要的事件之一。在模式生物非洲爪蛙胚胎中,植物半球定位的母源性转录因子VegT激活合子Nodal/Activin配体基因的表达,进而形成由植物极向动物极递减的Nodal/Activin配体浓度梯度。这些梯度分布的配体激活细胞信号,形成由胚胎植物极向动物极递减的信号梯度,进而调控不同胚层的分化。在这一理论体系中,VegT的母源性表达确保其激活合子形态发生素基因的转录,而它的植物半球定位在空间上决定了胚层分化的方向性。然而,胚胎发育调控机制往往具有冗余性,除此之外,胚胎细胞自身是否也存在某种机制调控其在适当的时间、空间获得响应胞外信号的能力?在本课题中,为了进一步探究胚层分化的调控机制,我们借助高通量RNA-seq技术分析了沿着非洲爪蛙胚胎动物极-植物极轴向不对称分布的母源性转录本,发现了43个在植物极显着富集的转录本,并通过实时荧光定量PCR证实了12条尚未有明确功能报道的转录本的差异表达。在此基础上,通过在胚胎里显微注射mRNA和MO(morpholino),我们对这些转录本的功能进行了初步探索。其中,mRNA过表达和/或MO敲低导致胚胎原肠运动缺陷或滞后的转录本,作为可能调控胚层分化的候选者做进一步分析。磷酸酶SCP3(small C-terminal domain phosphatase 3)是在爪蛙胚胎植物半球富集的母源性因子之一。实验结果显示,SCP3是爪蛙胚胎胚层分化的必需因子,它能去磷酸化TGFβ信号通路下游关键信号因子R-Smad的抑制性磷酸化位点,从而正调控Nodal/Activin和BMP信号通路。相应地,我们发现在非洲爪蛙的受精卵里,R-Smad的这些抑制性磷酸化位点的磷酸化水平较高,并随着卵裂迅速降低,到MBT(midblastula transition)阶段降至很低水平。敲低母源性SCP3的表达能够削弱这些R-Smad抑制性位点的去磷酸化过程,并且阻碍信号通路的激活。我们还发现,与SCP3的植物半球富集一致,R-Smad在植物半球的去磷酸化更强烈一些。最后,我们在人源细胞系中证实,SCP3通过去磷酸化R-Smad的相应抑制性位点,正调控Nodal/Activin和BMP信号。综上,我们的研究发现,卵裂期的爪蛙胚胎中,R-Smad有一个去除抑制性磷酸化修饰的过程,而植物半球富集的母源磷酸酶SCP3通过解除这种抑制性磷酸化,为MBT之后调控胚层分化的Nodal/Activin和BMP信号激活做好准备。(本文来源于《清华大学》期刊2015-06-01）
袁芳,刘佳,李卉,袁栎[7]（2015）在《结蛋白对非洲爪蛙胚胎早期发育的影响》一文中研究指出目的 :探讨结蛋白对非洲爪蛙胚胎早期发育的影响。方法:利用实时定量RT-PCR和原位杂交方法检测结蛋白在胚胎发育各阶段的表达;通过显微注射特异性反义寡核苷酸进行敲降,利用原位杂交和实时定量RT-PCR方法检测各胚层标志基因表达的变化。结果:结蛋白低水平表达起始于囊胚期,自神经胚期起表达量增加,在随后的发育阶段持续高表达;结蛋白敲降导致胚孔闭合延迟,胚层相关标志基因的表达受抑制。结论:结蛋白自囊胚期起表达于非洲爪蛙胚胎发育各阶段,敲降结蛋白导致胚胎发育迟缓,胚层分化受抑。(本文来源于《南京医科大学学报(自然科学版)》期刊2015年04期）
曹青[8]（2014）在《Klf4基因在非洲爪蛙早期胚胎发育中的功能和转录调控的研究》一文中研究指出动物个体是由受精卵经过复杂的细胞分化过程形成的。在个体形成过程中,第一个至关重要的步骤是外胚层、中胚层和内胚层这叁个胚层的分化。叁个胚层的分化过程受到复杂的信号转导网络的精确调控。已有的很多研究发现Nodal/activin、FGF.、BMP和Wnt/β-catenin信号通路在调控胚层分化上起到非常重要的作用。这些信号通路在适当的位置和时间被激活对于胚胎的正常发育是非常重要的。在非洲爪蛙早期胚胎的发育过程中,植物极细胞中的母源转录因子VegT负责激活Nodal信号通路的配体基因Xnr1-6。Nodal配体随后启动Nodal信号通路从而激活中、内胚层分化基因,例如Xbra、Mix1、Mix2、Gsc、Mixer、 Milk、Sox17、GATA4-6等的表达。同时,内胚层特异表达的基因会抑制中胚层基因的表达,从而使中、内胚层的形成维持在各自特定的区域内。Nodal信号通路负责诱导中内胚层的形成,而母源的β-catenin信号通路则负责胚层沿腹背体轴形成适当的型式。在背部植物极细胞中,母源的β-catenin信号激活Siamois基因的表达。而转录因子Siamois进一步激活Noggin、Chordin、Cerberus、Dkk1、 Xnr3等基因在Spemann组织者中的表达。这些在Spemann组织者中的特异表达的基因编码的分泌蛋白在背部区域抑制Nodal/activin、BMP和Wnt信号通路,从而与腹部信号相互作用建立正确的体轴图式。胚胎分化发育的过程是一个伴随着多能性流失的过程,而多能性的维持又是由一些多能性因子来调控的。对哺乳动物的研究发现这些多能性因子主要有Oct4、Sox2、Nanog、cMyc和Klf4。这些多能性基因可能在早期胚胎发育中起着非常重要的作用。目前关于Klf4在早期胚胎发育中的作用还不是很清楚,非洲爪蛙是研究早期胚胎发育的非常重要的模式动物,因此在本篇论文中我们主要用非洲爪蛙的胚胎来探索Klf4基因在早期胚胎发育过程中的功能及其分子机制。Klf4是含有叁个锌指结构的转录因子,从斑马鱼到人类中都十分保守,其在在非洲爪蛙中的相关研究还没有。我们的研究首次报道了在非洲爪蛙中存在Klf4的同源蛋白。第一,我们检测了Klf4基因的时空表达谱,发现Klf4在母源和合子期均有表达,并且随着胚胎发育的过程呈现动态表达。第二,我们通过基因过表达和敲降的分析发现Klf4在早期胚胎发育的过程中起到了非常重要的作用。在胚胎中过表达Klf4导致中胚层的形成受到明显抑制,然而内胚层和神经外胚层的形成则受到了显着促进。我们利用反义寡核苷酸敲降内源的Klf4后发现叁个胚层的形成均受到了明显的抑制。过表达和敲降的结果提示我们Klf4在叁个胚层的诱导形成过程确实起到了至关重要的作用。第叁,进一步的研究我们发现Klf4可以调节Nodal/activin信号通路,并且为胚胎提供感受Nodal/activin信号的能力,从而作用于中内胚层的形成。第四,Klf4可以直接激活Dkk1、Cerberus和Noggin在Spemann组织者中的表达。这些基因编码的分泌蛋白可以抑制Nodal/activin、BMP和Wnt信号通路,从而促使胚胎发生前部化和背部化。第五,我们发现Wnt/β-catenin信号通路的下游转导因子TCF3和LEF1可以激活Klf4基因的转录。综上所述,我们的研究首次揭示了Klf4在非洲爪蛙早期胚胎发育中的功能和作用机制,同时我们也探索了Klf4基因的转录调控机制。我们的研究对于揭示早期胚胎发育这一精密过程的调控以及多能性基因在早期胚胎发育中的作用提供了很好的借鉴,加深对胚胎发育过程中调控机制的理解。由于Klf4在胚胎干细胞中的重要作用,我们的结果对于胚胎干细胞的研究也具有重要的借鉴价值。(本文来源于《南京大学》期刊2014-11-01）
张艳[9]（2014）在《泛素连接酶NEDD4L在爪蛙早期胚胎发育中的功能》一文中研究指出在脊椎动物早期胚胎发育过程中，体轴的形成涉及有序的细胞命运决定和分化，以及大规模细胞运动及组织形态建成事件。在原肠运动和神经运动发生时，背方中胚层和神经板能够进行自主性的汇聚延伸运动（convergent and extensionmovement, CE movement），导致胚胎由球形变成具有前后极性的棒状结构。大量的遗传学和细胞生物学分析结果表明，进化保守的Wnt/PCP信号通路在背方中胚层和神经组织进行的汇聚延伸运动中起决定性的作用，调控细胞的极性和迁移特性。Dishevelled（Dvl）作为Wnt/PCP信号通路的关键转导因子，对于参与汇聚延伸运动的细胞极性建立起着至关重要的作用。目前对Dvl活性调控的研究已有很多，但对于非经典Wnt信号通路中Dvl功能的调控机制还不清楚。NEDD4L是HECT E3泛素连接酶，它可以通过对不同的底物进行泛素化修饰参与调控神经元发育、离子通道的活性以及细胞极性建立等生理过程。虽然NEDD4L敲除小鼠在胚胎发育早期并没有出现异常，但是，我们利用爪蛙模式生物的功能研究结果表明NEDD4L在胚胎早期发育中具有重要功能。我们利用爪蛙胚胎模式系统研究NEDD4L功能的生理意义，功能缺失和过量表达实验结果表明，NEDD4L特异参与调控爪蛙胚胎背方中胚层的汇聚延伸运动；通过上下位关系分析实验确立了NEDD4L通过影响Dvl2蛋白调控中胚层组织的汇聚延伸运动，NEDD4L缺失导致的胚胎体轴弯曲缩短，Keller外植体和Nieuwkoop动物极帽不能伸长以及中胚层细胞极性丧失的表型都可以通过下调Dvl2的蛋白水平得到拯救；生化实验表明NEDD4L通过泛素化-蛋白酶体途径调控Dvl2蛋白的稳定性；最后在背方中胚层细胞中利用持续激活型的RhoA对NEDD4L缺失表型的拯救实验进一步验证了NEDD4L可以通过调控Dvl2蛋白水平影响其下游因子包括RhoA的活性来调控中胚层组织的汇聚延伸运动。另外在研究中，我们还发现NEDD4L可能调控FGF信号通路的活性参与调控了中胚层细胞命运的决定。总之，在爪蛙早期胚胎发育过程中，NEDD4L是一个调控汇聚延伸运动关键因子，它通过调节非经典Wnt信号通路中Dvl2蛋白稳定性来影响其下游包括RhoA在内的效应因子来调控发生汇聚延伸运动的细胞的极性建立，从而促使整体胚胎正常体轴的形成。本研究为进一步揭示汇聚延伸的分子机制，以及完善早期胚胎形态建成运动中调控细胞行为的信号通路机制提供新的研究线索。(本文来源于《清华大学》期刊2014-06-01）
程良平[10]（2014）在《发育与衰老相关疾病基因APP,BACE2在非洲爪蛙早期胚胎时空表达》一文中研究指出目的：研究发育与衰老相关疾病基因APP，BACE2在非洲爪蛙早期胚胎时空表达材料和方法：分子克隆构建质粒，胚胎原位杂交，RT-PCR定量分析，细胞培养与转染，蛋白表达检测，胚胎组织切片免疫荧光检测。结果：成功构建爪蛙APP，BACE2质粒克隆并转染细胞检测表达通过原位杂交和免疫荧光检测早期胚胎中APP和BACE2的表达图示并对APP进行了功能结构域分析，验证了BACE2基因水解Aβ的作用，进一步研究了RCAN1基因可能与APP的相互作用。结论：我们描述了APP和BACE2基因在爪蟾发育过程并比较了其在眼睛和大脑早期的时空表达图式。氨基酸序列的比对分析显示具有高度的保守。 RT-PCR分析表明，Xl.bace2和Xl.rcan1转录可以明显检测到从囊胚阶段到原肠胚后期阶段，其表达仍维持在较高水平，直到神经胚阶段。可以在stage30，40期和45期检测到这些基因的高表达。结果表明，在发育过程中，这些基因表达的检测主要是内源性蛋白表达。与以前的原位杂交和免疫组化数据，我们观察到这些基因的表达在多种组织和细胞类型，包括中枢和外周神经系统，神经视网膜，咽中胚层和内胚层和它们的衍生物（颅面结构，胸腺和气管），心血管系统（心脏流出道，颈动脉，脐船，窦房结与心房中隔），胃肠道系统（口腔上皮，胃，胰腺，肠系膜）。(本文来源于《重庆医科大学》期刊2014-05-01）
爪蛙胚胎论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:Aβ的沉积是形成老年斑的主要原因,同时是阿尔茨海默病的主要病理标志物。Aβ形成来源于该病的主要致病基因淀粉样前体蛋白APP(Amyloid beta precursor protein;XB-GENE-479158;NCBI:Xl.8671),APP在非洲爪蛙早期胚胎时空表达图式目前还不清楚,之前的报道只在某些手术分离的组织中用RT-PCR的方法进行了研究,为进一步在爪蛙中研究这类基因在发育过程中的时空表达及可能的功能,展开了本研究。方法:本研究收集了第2期到第4期非洲爪蛙胚胎包括(卵裂期、囊胚期、原肠胚期、神经轴胚、尾牙期和蝌蚪期),通过整体胚胎原位杂交和半定量RT-PCR检测基因APP在胚胎发育不同时期的时空表达,用双荧光素酶报告基因系统检测APP启动子活性。结果:APP有2种主要的转录产物,短的693~694个氨基酸,长的有750~751个氨基酸,主要差别来自外显子7的可变剪切。其中短的剪切体是主要转录的产物,而长的一个剪切体则表现为持续的低表达。整胚的原位表达结果显示:在神经板阶段,APP主表达在孵化和黏液腺中。神经管闭合后,APP转录水平升高,在体细胞中胚层,前肾和背侧神经管中呈现高表达。在尾芽末期,APP在晶状体、端脑、松果体、间脑和背侧耳泡中表达。在蝌蚪期,APP主要在包括胰腺、胃和十二指肠在内的消化系统中高表达。结论:APP是一个母源性表达的基因,其时空表达分布的特异性预示其在相关部位发育过程中可能发挥重要作用,从而为研究阿尔茨海默病的关键致病基因在胚胎早期的所发挥的作用提供了新的路径。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
爪蛙胚胎论文参考文献
[1].曹青,赵晓,康雅菲,徐西兵,刘浩.组蛋白去乙酰化修饰对非洲爪蛙胚胎发育及胚层分化的影响[J].南京医科大学学报(自然科学版).2019
[2].程良平,石宇,周维涛,李廷玉.APP代谢通路关键基因在非洲爪蛙早期胚胎中的时空表达[J].重庆医科大学学报.2018
[3].林昊.去甲基酶KDM3A在爪蛙胚胎神经系统发育中的功能研究[D].清华大学.2017
[4].高丽.Ascl1在非洲爪蛙胚胎早期发育中的功能研究[D].清华大学.2016
[5].高燕.赖氨酸去甲基化酶Kdm2a/Kdm2b通过调节核内β-Catenin的稳定性调控非洲爪蛙胚胎体轴的形成[D].南京大学.2015
[6].孙冠妮.SCP3通过去除R-Smad抑制性磷酸化调控爪蛙胚胎胚层分化[D].清华大学.2015
[7].袁芳,刘佳,李卉,袁栎.结蛋白对非洲爪蛙胚胎早期发育的影响[J].南京医科大学学报(自然科学版).2015
[8].曹青.Klf4基因在非洲爪蛙早期胚胎发育中的功能和转录调控的研究[D].南京大学.2014
[9].张艳.泛素连接酶NEDD4L在爪蛙早期胚胎发育中的功能[D].清华大学.2014
[10].程良平.发育与衰老相关疾病基因APP,BACE2在非洲爪蛙早期胚胎时空表达[D].重庆医科大学.2014