朱龙宝:成团泛菌苯丙氨酸氨基变位酶的性质表征及用于合成β-苯丙氨酸论文

朱龙宝:成团泛菌苯丙氨酸氨基变位酶的性质表征及用于合成β-苯丙氨酸论文

本文主要研究内容

作者朱龙宝,杨瑾,葛飞,陶玉贵,宋平(2019)在《成团泛菌苯丙氨酸氨基变位酶的性质表征及用于合成β-苯丙氨酸》一文中研究指出:克隆来源于Pantoea agglomerans的苯丙氨酸氨基变位酶基因(pam),构建表达载体,转入大肠杆菌中进行异源表达,采用亲和层析制备电泳纯的重组酶(PaPAM),用于催化合成β-苯丙氨酸。结果表明:成功克隆得到基因pam,长度为1626bp,编码541个氨基酸长度的PaPAM,构建了大肠杆菌表达载体pET28a-pam,转入E.coliBL21中经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,镍柱亲和层析纯化获得电泳纯的重组PaPAM。MS和NMR表征结果表明,重组PaPAM能异构化a-苯丙氨酸为β-苯丙氨酸,在最适条件下(30℃、pH 9、1.5 mol/L NH4+),酶活力达到2.5 kU/g,在30~50℃、pH 8~10下PaPAM具有较高的稳定性,金属离子Na+、Mg2+、Ca2+、Fe3+对PaPAM的活性影响较小,表面活性剂SDS和Triton100对PaPAM有较强抑制作用,在最佳反应条件下,底物的转化率达到92%。

Abstract

ke long lai yuan yu Pantoea agglomeransde ben bing an suan an ji bian wei mei ji yin (pam),gou jian biao da zai ti ,zhuai ru da chang gan jun zhong jin hang yi yuan biao da ,cai yong qin he ceng xi zhi bei dian yong chun de chong zu mei (PaPAM),yong yu cui hua ge cheng β-ben bing an suan 。jie guo biao ming :cheng gong ke long de dao ji yin pam,chang du wei 1626bp,bian ma 541ge an ji suan chang du de PaPAM,gou jian le da chang gan jun biao da zai ti pET28a-pam,zhuai ru E.coliBL21zhong jing yi bing ji -β-D-liu dai ban ru tang gan (IPTG)you dao biao da ,nie zhu qin he ceng xi chun hua huo de dian yong chun de chong zu PaPAM。MShe NMRbiao zheng jie guo biao ming ,chong zu PaPAMneng yi gou hua a-ben bing an suan wei β-ben bing an suan ,zai zui kuo tiao jian xia (30℃、pH 9、1.5 mol/L NH4+),mei huo li da dao 2.5 kU/g,zai 30~50℃、pH 8~10xia PaPAMju you jiao gao de wen ding xing ,jin shu li zi Na+、Mg2+、Ca2+、Fe3+dui PaPAMde huo xing ying xiang jiao xiao ,biao mian huo xing ji SDShe Triton100dui PaPAMyou jiao jiang yi zhi zuo yong ,zai zui jia fan ying tiao jian xia ,de wu de zhuai hua lv da dao 92%。

论文参考文献

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  • 论文详细介绍

    论文作者分别是来自精细化工的朱龙宝,杨瑾,葛飞,陶玉贵,宋平,发表于刊物精细化工2019年03期论文,是一篇关于成团泛菌论文,苯丙氨酸氨基变位酶论文,苯丙氨酸论文,基因克隆论文,异源表达论文,生物工程论文,精细化工2019年03期论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自精细化工2019年03期论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。

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