导读:本文包含了钙调磷酸酶基因亚基论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:重组人钙调磷酸酶B亚基,食蟹猴,重复给药毒性试验,免疫原性
钙调磷酸酶基因亚基论文文献综述
李学鸿,张晓钿,黄裕昌,李娥,刘莹[1]（2018）在《基因工程抗癌新药重组人钙调磷酸酶B亚基对食蟹猴重复给药毒性研究》一文中研究指出目的:本研究主要评价食蟹猴静脉多次注射基因工程抗癌新药重组人钙调磷酸酶B亚基(rh CNB)的安全性,为临床设计人用剂量及临床不良反应的监测提供参考依据。方法:将40只健康食蟹猴,随机分为4组:辅料对照组和供试品低、中、高剂量组(给药剂量分别为10,30和90 mg·kg-1),每组10只,雌雄各半,雌性无孕。采用静脉滴注给药途径,每天给药1次,连续给药2周后停药1周,再进行下一周期的给药,共重复给药26周,恢复期8周。试验期间进行各项毒理学指标测定。结果:rh CNB对食蟹猴静脉滴注重复给药观察,免疫原性检测结果显示给药后动物体内出现了特异性免疫反应,呈明显的剂量-效应关系,停药后抗体阳性率明显减少。除上述反应外,不同时间段,各剂量组动物一般症状、体重、摄食量、血液和血生化、外周血和骨髓象、心电图、体温和尿液分析等各项检查均未见与受试物相关的改变。供试品给药剂量组对食蟹猴各重要生命器官结果也未见明显毒性损伤及病理改变。后续进行了免疫原性补充试验,各给药组抗体检测结果为阳性的血清,其中和抗体的检测结果为阴性。说明该供试品所拟定的人日用剂量1~2.7mg·kg-1(60~160 mg·d-1),毒性较小。结论:食蟹猴重复静脉滴注rh CNB 6个月,除了免疫原性检测动物体内出现了特异性免疫反应外,对其余观察指标未见明显影响;试验动物各重要生命器官也无明显毒性损伤及毒性病理改变,NOAEL为90 mg·kg-1。临床使用时应需要关注供试品有可能引起的免疫原性反应。(本文来源于《中国新药杂志》期刊2018年16期）
薛庆贺,刘芃,康振生,郭军[2]（2017）在《小麦类钙调磷酸酶亚基B蛋白基因TaCBL4的功能分析》一文中研究指出类钙调磷酸酶亚基B蛋白(calcineurin B-1ike protein,CBL)作为一类钙离子结合蛋白,通过与一类蛋白激酶(CBL-interacting protein kinase,C1PK)结合,在钙信号依赖的生理生化过程中发挥作用。CBL基因在植物非生物胁迫上的重要作用已经得到广泛的证实,然而关于其在生物胁迫上的作用知之甚少。本研究通过对小麦基因组中CBL家族基因的鉴定并利用RT-:PCR,在条锈菌诱导的小麦叶片中克隆得到小麦CBL家族中的一个基因,命名为TaCBL4。并利用qRT-PCR技术、亚细胞定位技术及病毒介导的基因沉默技术(Virus-Induced Gene silence,VIGS)分析了其功能特性。结果显示,TaCBL4可编码219-姐的氨基酸序列,包含4个保守的EF手结构。与水稻、拟南芥的CBL蛋白具有高度相似性,其中与水稻OsCBL4相似性达88.28%。亚细胞定位实验表明TaCBL4的分布在整个小麦细胞中,即为细胞质、细胞膜和细胞核。定量分析表明,在小麦与条锈菌亲和与非亲和互作的过程中,TaCBL4均受到条锈菌的诱导表达。通过VIGS技术沉默TaCBL4后发现小麦的抗病性明显减弱,沉默植株接种条锈菌非亲和小种CYR23后,活性氧积累明显受到抑制。同时,病程相关蛋白基因TaPR1、TaPR2表达也受到了抑制。综上结果,TaCBL4可能通过调控活性氧积累参与了小麦对条锈菌的抗病过程。(本文来源于《中国植物病理学会2017年学术年会论文集》期刊2017-07-25）
刘亚静[3]（2017）在《苹果类钙调磷酸酶B亚基蛋白MdCBL3基因的克隆与功能鉴定》一文中研究指出植物在生长过程中经常会遇到高盐、干旱、水涝和低温等非生物逆境胁迫。植物感知到非生物胁迫后会产生一些防御机制从而避免伤害发生。植物CBL基因在植物响应逆境胁迫过程中发挥十分重要的作用。拟南芥中对CBL研究较多,CBL能够响应多种胁迫,尤其是盐胁迫,但在果树等木本植物中研究较少。本研究从‘嘎拉’苹果(Malus×domestica Borkh.‘Gala’)中克隆了一个CBL基因MdCBL3(序列号:MDP0000155124),并对其进行生物信息学分析,利用定量PCR技术检测其在不同组织和逆境条件下的表达水平。通过农杆菌介导法获得转基因苹果愈伤组织、拟南芥,并对转基因愈伤、拟南芥进行功能鉴定。旨在为进一步深入研究苹果CBL的功能奠定基础。具体研究工作和结果如下:1.克隆了苹果MdCBL3基因,其由852 bp碱基组成,编码284个氨基酸残基的多肽链。基因组结构分析表明MdCBL3基因位于1号染色体上,含有8个外显子和7个内含子。2.荧光定量PCR分析表明MdCBL3基因在苹果‘嘎拉’中的表达情况,发现MdCBL3基因在所有组织中都有表达,在根中表达量最高。3.蛋白同源比对分析显示,MdCBL3含有3个保守的EF手形结构域EF-hand calcium binding motif,与拟南芥AtCBL3蛋白序列类似,表明苹果CBL3与拟南芥CBL3具有较高的同源性。4.利用Plant Care数据库对MdCBL3进行启动子顺式作用元件的预测分析,MdCBL3启动子序列中存在低温、干旱、光、生长素、赤霉素、水杨酸、防御等响应元件。表明MdCBL3可能受低温、干旱、光、激素等多种环境的调控,通过参与复杂的的生物学过程来调控其特定的生长发育过程。5.荧光定量PCR分析MdCBL3基因在不同胁迫的响应,发现MdCBL3基因对盐、干旱、低温有一定的响应。6.构建MdCBL3表达载体并利用农杆菌介导法侵染苹果愈伤组织、野生型拟南芥。半定量和定量RT-PCR证明MdCBL3在苹果愈伤组织中过量表达,在拟南芥中得到异源表达。表型分析表明与野生型愈伤组织和拟南芥对照相比,在盐胁迫下转基因苹果愈伤和拟南芥生长更好,抗性更强。表明在苹果愈伤中过量表达MdCBL3,在拟南芥中异源表达MdCBL3能明显提高对盐胁迫的抗性。(本文来源于《山东农业大学》期刊2017-05-08）
周颐[4]（2016）在《小麦钙调磷酸酶B亚基类蛋白（CBL）的基因克隆及TaCBL1的功能研究》一文中研究指出小麦是全球广泛种植的主要农作物之一,各种自然灾害,如旱、涝、盐碱等环境的急剧变化以及病虫害,导致小麦大量减产。因此,提高抗逆性对于保证小麦产量具有非常积极的意义。在植物中,很多外界环境的刺激都会引起细胞内钙离子浓度发生变化,从而传递外界信息进入细胞内进而引起各种细胞内和细胞间发生响应的生理生化反应,调整自身适应外界坏境以求在严苛的自然环境中生存下来。作为钙离子信号的感受器,钙离子结合蛋白家族在植物信号转导和抗逆过程中发挥重要作用。目前,植物中已发现的钙离子结合蛋白主要有叁大类:钙调素(calmodulin,CaM)类蛋白、钙依赖蛋白激酶(calcium-dependent protein kinase,CDPK)以及钙调磷酸酶B类蛋白(calcineurin B-like protein,CBL)。本文旨在获得小麦CBL基因序列,检测其表达特性及亚细胞定位,以了解小麦CBL基因在抗逆中的作用,并对烟草进行遗传转化,进一步研究CBL的功能,为最终培育高抗性小麦奠定基础。本文主要获得的主要研究结果如下:(1)利用生物信息技术,将从数据库中获取的小麦CBL相关EST序列进行拼接,得到11条CBL基因序列(unigenes);利用分子生物学手段成功获得其中叁个包含完整ORF(Open Reading Frame)的CBL基因cDNA,所获得的基因所编码的蛋白质分别与水稻的CBL1、CBL3和CBL6高度同源,因此对应的基因被命名为TaCBL1、TaCBL3和TaCBL6。对蛋白质进行结构分析也发现,小麦中的CBL蛋白与拟南芥、水稻、杨树、玉米等植物中相应的CBL蛋白结构极其相似。(2)通过实时荧光定量RT-PCR(Real-time Quantitative PCR,qRT-PCR)技术,分析小麦多个部位的多个发育阶段中TaCBL1、TaCBL3和TaCBL6的基因表达情况,并检测了小麦幼苗在模拟的低温、干旱、高盐胁迫及外源脱落酸(abscisic acid,ABA)刺激下的基因表达变化。实验结果显示,一个TaCBL基因可以响应多种逆境,而一种逆境信号可以引起多个TaCBL基因的响应。(3)分别构建了TaCBL1-GFP、TaCBL3-GFP和TaCBL6-GFP融合蛋白的表达载体并转化洋葱表皮细胞,在细胞膜上均观察到了TaCBL1、TaCBL3和TaCBL6的GFP融合蛋白。(4)构建了pBI-TaCBL1载体,利用农杆菌介导的遗传转化方法转化烟草(Nicotiana tabacum L.cv.Samsun)。通过对T2代转基因烟草进行抗逆分析发现,过表达TaCBL1可以提高烟草植株的抗旱性。转基因烟草植株的水含量提高,细胞损伤减轻,并且抗氧化能力增强。以上实验结果证明了小麦TaCBL1、TaCBL3、TaCBL6蛋白具有CBL蛋白家族的典型结构特征,参与了小麦对于逆境信号的响应;过表达TaCBL1基因可以通过增加植物抗氧化能力抵御细胞损伤,从而提高了转基因烟草对于干旱环境的适应能力。以上实验结果为研究和了解CBL基因及蛋白家族的特征、功能及其参与调控信号通路的机制奠定了基础,并为寻找培育高抗性作物的途径提供了新的思路。(本文来源于《华中科技大学》期刊2016-05-01）
余义和,李秀珍,郭大龙,杨英军,李桂荣[5]（2016）在《葡萄类钙调磷酸酶B亚基蛋白基因VvCBL4的克隆与表达分析》一文中研究指出【目的】在京秀(Vitis vinifera‘Jingxiu’)葡萄中克隆类钙调磷酸酶B亚基蛋白基因Vv CBL4及其启动子,分析Vv CBL4的表达特性与逆境胁迫的关系。【方法】用RACE技术克隆Vv CBL4的全长,实时荧光定量PCR检测Vv CBL4在不同逆境下的表达;用同源克隆技术获得Vv CBL4的启动子,在烟草叶片中瞬时表达分析Vv CBL4启动子的活性。【结果】Vv CBL4全长为959 bp,ORF为642 bp,编码213个氨基酸,具有3个EF手钙结合结构域。Vv CBL4在根部表达量最高,其次是果实。Vv CBL4的转录本能对干旱、低温和盐胁迫处理快速做出响应。Vv CBL4启动子富含与逆境响应相关的顺式作用元件。干旱、低温和盐胁迫处理能够增强启动子活性。【结论】获得Vv CBL4及其启动子序列,Vv CBL4的表达能对逆境胁迫做出响应,Vv CBL4启动子的活性受逆境胁迫诱导,说明Vv CBL4在葡萄逆境胁迫反应中具有重要的作用。(本文来源于《果树学报》期刊2016年04期）
单艳菊,宋迟,束婧婷,刘宏祥,徐文娟[6]（2015）在《钙调磷酸酶催化亚基A基因(PPP3CA)在不同品种鸭发育早期肌肉中的表达及其与肌纤维特性的相关性》一文中研究指出钙调磷酸酶催化亚基A(protein phosphatase 3 catalytic A,PPP3CA)是PPP3C在骨骼肌中的主要亚型,在肌纤维分化中起重要作用。为研究PPP3CA基因在不同品种鸭(Anas platyrhynchos domestica)发育早期肌肉中的表达规律及其与肌纤维特性的相关性,本研究选用生长速度差异较大的金定鸭和高邮鸭,采用实时荧光定量PCR检测鸭13、17、21、25和27胚龄及7日龄胸肌和腿肌中PPP3CA m RNA的表达水平。结果表明,两鸭种同一肌肉组织中PPP3CA m RNA的表达表现出显着的时间特异性,而品种和性别效应并不显着。两鸭品种胸肌和腿肌中PPP3CA m RNA的表达模式虽不同,但均是在13胚龄(13embryonic day,E13 d)时最高,且在出雏后7日龄时极显着高于27胚龄(出雏前)(P<0.01)。胸肌中PPP3CA m RNA在21胚龄时显着低于其他各胚龄或日龄(P<0.01);腿肌中PPP3CA m RNA在21胚龄时表达量较高,27胚龄时降到最低,且极显着低于其他各胚龄或日龄(P<0.01)。相关性分析结果显示,两鸭品种腿肌PPP3CA m RNA表达量与本研究前期检测的肌纤维类型、直径、面积和密度等肌纤维特性呈现不同程度的线性相关;两鸭品种胸肌和腿肌PPP3CA m RNA表达量与均与本研究前期检测的类胰岛素生长因子(insulin-like grow factor-Ⅰ,IGF-Ⅰ)m RNA表达量呈显着的正相关(P<0.05或P<0.01)。初步推测鸭发育早期骨骼肌中PPP3与肌纤维类型和肌纤维生长发育密切相关,与IGF-Ⅰ可能共同参与了对骨骼肌生长发育的调节。本研究结果将有助于了解PPP3在鸭肌肉早期发育中的作用,并为改良鸭肉品质提供理论依据。(本文来源于《农业生物技术学报》期刊2015年02期）
李慧,李刚波,丛郁,常有宏,蔺经[7]（2013）在《杜梨类钙调磷酸酶B亚基蛋白基因PbCBL2的克隆和功能初探》一文中研究指出类钙调磷酸酶B亚基蛋白(Calcineurin B-like protein,CBLs)是植物中一类重要的钙离子传感器,参与调控植物生长发育及逆境胁迫响应过程。为了探明杜梨CBLs家族成员PbCBL2的序列特征和表达模式,以杜梨(Pyrus betulaefolia Bunge)幼苗为试材,运用EST搜索结合RACE技术、染色体步移法对PbCBL2的cDNA、DNA和启动子进行克隆,采用半定量RT-PCR和原核表达研究该基因在非生物胁迫下的表达模式。结果表明,PbCBL2基因cDNA序列长681bp,编码一个含有226个氨基酸残基的蛋白。基因组DNA序列长1927bp,包括8个外显子和7个内含子,启动子序列包含光反应元件、厌氧诱导必需顺式作用元件、赤霉素反应元件和水杨酸响应顺式作用元件。PbCBL2编码的多肽具有植物类钙调磷酸酶B亚基蛋白结合Ca2+所必需的4个EF手型结构和1个典型的植物钙调磷酸酶A亚基结合位点。未经处理的杜梨幼苗(对照)根和叶中未检测到PbCBL2的表达,PbCBL2的表达受NaCl、PEG6000、甘露醇和ABA诱导上调。PbCBL2转入大肠杆菌BL21(DE3)后,能够明显减轻NaCl、甘露醇和PEG6000对该菌株的生长抑制。PbCBL2基因具备植物CBLs基因家族的固有特征,对盐碱、干旱、渗透胁迫和ABA处理均存在转录响应,大肠杆菌转入该基因后能够提高对盐胁迫和渗透胁迫的耐受能力。(本文来源于《园艺学报》期刊2013年08期）
李慧,丛郁,常有宏,蔺经,盛宝龙[8]（2012）在《杜梨类钙调磷酸酶B亚基蛋白PbCBL10基因的克隆和表达特性研究》一文中研究指出【目的】为了探明杜梨类钙调磷酸酶B亚基蛋白(Calcineurin B-like protein,CBL)基因的序列特征和表达特点,【方法】以杜梨幼苗为试材,运用同源克隆和半定量RT-PCR对PbCBL10基因进行克隆和表达分析。【结果】结果表明,PbCBL10基因编码区cDNA长度为801 bp,编码的多肽由266个氨基酸组成。该多肽预测的等电点为4.56,估计的相对分子质量为30.45 ku。其对应基因组DNA序列长1 983 bp,包括9个外显子和8个内含子。通过PSORT进行亚细胞定位分析发现PbCBL10蛋白位于质膜上的几率最大。PbCBL10基因编码的多肽具有4个钙离子结合域EF手形结构和1个钙调磷酸酶A亚基结合位点。PbCBL10与番茄SlCBL10(NP_001239045)和拟南芥AtCBL10(NP_195026)蛋白间的同源性较高,分别为82%和77%,并与AtCBL10亲缘关系最近。PbCBL10基因在杜梨幼苗根、茎和叶片中均为诱导型表达,50~200 mmol.L-1CaCl2、20μmol.L-1ABA、100 mmol.L-1NaCl、10%(w/v)PEG6000或180 mmol.L-1甘露醇处理后其表达量明显上调。【结论】PbCBL10基因具备植物CBL基因家族的固有特征,能够响应胞内钙浓度变化,对ABA、盐碱、干旱和渗透胁迫均存在转录响应。(本文来源于《果树学报》期刊2012年04期）
李慧,丛郁,常有宏,蔺经,盛宝龙[9]（2011）在《杜梨类钙调磷酸酶B亚基蛋白基因克隆及胁迫表达》一文中研究指出Ca~(2+)作为最基本的第二信使,几乎参与了植物生长、发育和逆境胁迫应答的所有过程。类钙调磷酸酶B亚基蛋白(Calcineurin B-like protein,CBL)是植物中一类重要的钙离子传感器,在钙信号的传递转导过程中起着重要的调控作用。杜梨原产中国,为梨生产栽培中普遍应用的砧木,具备抗寒、抗旱、耐涝、耐盐碱等综合抗性,是梨属植物重要的抗性种质资源。克隆获得CBL基因序列,并研究该基因对不同胁迫的转录响应,可为阐明Ca~(2+)介导的杜梨抗逆过程提供重要信息。(本文来源于《中国园艺学会2011年学术年会论文摘要集》期刊2011-10-19）
贾娇,邢继红,李志勇,董金皋[10]（2010）在《灰葡萄孢钙调磷酸酶β亚基基因及启动子的克隆与序列分析》一文中研究指出采用EST标签法快速克隆灰葡萄孢钙调磷酸酶β亚基(cnb)基因的cDNA和DNA序列,通过基因步行技术扩增得到cnb启动子序列,运用生物信息学技术进行基因序列分析发现cnb基因含有4个外显子和3个内含子,最大开放阅读框为525 bp(GenBank登录号ABN54442),编码174个氨基酸,分子量为19.75 kD,等电点为4.28;预测蛋白含约59.77%的α螺旋,7.47%的β转角,4.60%的延伸串,28.16%的不规则卷曲;含有4个高度保守"EF-hand"Ca2+结合区域和几个转录调控元件,如EFI,AP-2,NF-kB和Sp1等。Southern blotting表明,cnb基因在灰葡萄孢基因组中含有1个拷贝。(本文来源于《河北农业大学学报》期刊2010年06期）
钙调磷酸酶基因亚基论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
类钙调磷酸酶亚基B蛋白(calcineurin B-1ike protein,CBL)作为一类钙离子结合蛋白,通过与一类蛋白激酶(CBL-interacting protein kinase,C1PK)结合,在钙信号依赖的生理生化过程中发挥作用。CBL基因在植物非生物胁迫上的重要作用已经得到广泛的证实,然而关于其在生物胁迫上的作用知之甚少。本研究通过对小麦基因组中CBL家族基因的鉴定并利用RT-:PCR,在条锈菌诱导的小麦叶片中克隆得到小麦CBL家族中的一个基因,命名为TaCBL4。并利用qRT-PCR技术、亚细胞定位技术及病毒介导的基因沉默技术(Virus-Induced Gene silence,VIGS)分析了其功能特性。结果显示,TaCBL4可编码219-姐的氨基酸序列,包含4个保守的EF手结构。与水稻、拟南芥的CBL蛋白具有高度相似性,其中与水稻OsCBL4相似性达88.28%。亚细胞定位实验表明TaCBL4的分布在整个小麦细胞中,即为细胞质、细胞膜和细胞核。定量分析表明,在小麦与条锈菌亲和与非亲和互作的过程中,TaCBL4均受到条锈菌的诱导表达。通过VIGS技术沉默TaCBL4后发现小麦的抗病性明显减弱,沉默植株接种条锈菌非亲和小种CYR23后,活性氧积累明显受到抑制。同时,病程相关蛋白基因TaPR1、TaPR2表达也受到了抑制。综上结果,TaCBL4可能通过调控活性氧积累参与了小麦对条锈菌的抗病过程。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
钙调磷酸酶基因亚基论文参考文献
[1].李学鸿,张晓钿,黄裕昌,李娥,刘莹.基因工程抗癌新药重组人钙调磷酸酶B亚基对食蟹猴重复给药毒性研究[J].中国新药杂志.2018
[2].薛庆贺,刘芃,康振生,郭军.小麦类钙调磷酸酶亚基B蛋白基因TaCBL4的功能分析[C].中国植物病理学会2017年学术年会论文集.2017
[3].刘亚静.苹果类钙调磷酸酶B亚基蛋白MdCBL3基因的克隆与功能鉴定[D].山东农业大学.2017
[4].周颐.小麦钙调磷酸酶B亚基类蛋白（CBL）的基因克隆及TaCBL1的功能研究[D].华中科技大学.2016
[5].余义和,李秀珍,郭大龙,杨英军,李桂荣.葡萄类钙调磷酸酶B亚基蛋白基因VvCBL4的克隆与表达分析[J].果树学报.2016
[6].单艳菊,宋迟,束婧婷,刘宏祥,徐文娟.钙调磷酸酶催化亚基A基因(PPP3CA)在不同品种鸭发育早期肌肉中的表达及其与肌纤维特性的相关性[J].农业生物技术学报.2015
[7].李慧,李刚波,丛郁,常有宏,蔺经.杜梨类钙调磷酸酶B亚基蛋白基因PbCBL2的克隆和功能初探[J].园艺学报.2013
[8].李慧,丛郁,常有宏,蔺经,盛宝龙.杜梨类钙调磷酸酶B亚基蛋白PbCBL10基因的克隆和表达特性研究[J].果树学报.2012
[9].李慧,丛郁,常有宏,蔺经,盛宝龙.杜梨类钙调磷酸酶B亚基蛋白基因克隆及胁迫表达[C].中国园艺学会2011年学术年会论文摘要集.2011
[10].贾娇,邢继红,李志勇,董金皋.灰葡萄孢钙调磷酸酶β亚基基因及启动子的克隆与序列分析[J].河北农业大学学报.2010
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