聚泛素链论文-孔一夫

聚泛素链论文-孔一夫

导读:本文包含了聚泛素链论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:Lys48位链接泛素链,Lys27位链接泛素链,泛素衍生物,蛋白质化学合成

聚泛素链论文文献综述

孔一夫[1](2018)在《多聚泛素链及泛素衍生物的化学合成研究》一文中研究指出蛋白质泛素化作为一类作用方式复杂且作用结果多样的重要蛋白质翻译后修饰,几乎参与了真核生物的所有生命活动。诸如蛋白质降解、细胞的分裂、生长、细胞间的信号转导、细胞的运动及凋亡等。前人发展了多种获取泛素化蛋白的合成策略。酶法由于缺乏特异性的酶系统而无法获取某些泛素化蛋白。蛋白质体外化学合成凭借其能够在原子尺度精准构筑蛋白质的优势,为获取精确尺寸,不同连接类型的泛素链提供了有效的途径,但合成步骤繁琐、工作量大。为解决上述问题,前人提出了一类基于化学连接反应构筑非天然异肽键泛素链的方法。然而,该策略需要首先对泛素片段进行化学改造,且连接反应效率较低。此外,绝大部分模拟异肽键与真实体系结构差别较大。基于此,发展一种新策略用于高效获取性质均一的泛素链具有重要的科学意义。本文研究工作利用蛋白质化学合成技术,围绕泛素链及泛素衍生物的化学合成展开研究。第一个工作,我们首先通过小分子与蛋白片段巯基间的Thiol-ene偶联实现辅基与泛素片段间的高效装载,然后通过自然化学连接反应将装载有辅基的泛素片段与泛素酰肼进行连接,实现了泛素链的高效合成,克服了之前的大分子与大分子之间偶联效率低的问题。通过该方法,我们高效合成了K48、K27位链接类型二泛素链。第二个工作,我们发展了一种可以高效快速地合成泛素探针Ub-AMC的新方法。Ub-AMC作为一种泛素探针目前已被广泛应用于去泛素化酶酶活测定、去泛素化酶抑制剂高通量筛查。然而,目前合成Ub-AMC的方法主要有化学全合成和片段连接法。这二种方法都有合成步骤繁琐、工作量大、成本高的缺陷,基于此,我们发展一种可以高效便捷的合成百毫克级的Ub-AMC新方法,并通过去泛素化酶酶解实验验证了合成的泛素探针可以很好的应用于DUB酶活动力学性质探究及DUB抑制剂的筛查。(本文来源于《合肥工业大学》期刊2018-03-01)

韩永卿,李容,高晋兰,缪时英,王琳芳[2](2013)在《人睾丸组织TRIM69蛋白具有催化多聚泛素链形成的活性》一文中研究指出目的验证人源TRIM69蛋白是否具有催化多聚泛素链形成的活性。方法把人源TRIM69基因构建到原核细胞表达载体中,经过转化、诱导、表达和纯化获得TRIM69纯化蛋白,通过细胞外泛素化实验分析其是否具有催化多聚泛素链形成的活性;另外构建了TRIM69基因的全长、RING结构域的点突变、以及RING结构域截短序列的真核细胞表达载体,瞬时转染293T细胞或稳定表达泛素的HeLa细胞株,通过免疫沉淀结合免疫印迹方法检测其是否具有催化多聚泛素链形成的活性。结果泛素化分析实验表明TRIM69具有催化多聚泛素链形成的活性并且其活性依赖于它的RING结构域。结论成功鉴定了人源TRIM69蛋白具有催化多聚泛素链形成的活性,为进一步证明其是一个新的E3泛素连接酶提供依据。(本文来源于《基础医学与临床》期刊2013年01期)

聚泛素链论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

目的验证人源TRIM69蛋白是否具有催化多聚泛素链形成的活性。方法把人源TRIM69基因构建到原核细胞表达载体中,经过转化、诱导、表达和纯化获得TRIM69纯化蛋白,通过细胞外泛素化实验分析其是否具有催化多聚泛素链形成的活性;另外构建了TRIM69基因的全长、RING结构域的点突变、以及RING结构域截短序列的真核细胞表达载体,瞬时转染293T细胞或稳定表达泛素的HeLa细胞株,通过免疫沉淀结合免疫印迹方法检测其是否具有催化多聚泛素链形成的活性。结果泛素化分析实验表明TRIM69具有催化多聚泛素链形成的活性并且其活性依赖于它的RING结构域。结论成功鉴定了人源TRIM69蛋白具有催化多聚泛素链形成的活性,为进一步证明其是一个新的E3泛素连接酶提供依据。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

聚泛素链论文参考文献

[1].孔一夫.多聚泛素链及泛素衍生物的化学合成研究[D].合肥工业大学.2018

[2].韩永卿,李容,高晋兰,缪时英,王琳芳.人睾丸组织TRIM69蛋白具有催化多聚泛素链形成的活性[J].基础医学与临床.2013

标签:;  ;  ;  ;  

聚泛素链论文-孔一夫
下载Doc文档

猜你喜欢