导读:本文包含了复性人工分子伴侣论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:蛋白复性,分子伴侣,小分子伴侣,人工分子伴侣
复性人工分子伴侣论文文献综述
张金玲[1]（2009）在《分子伴侣及小分子伴侣、人工分子伴侣与蛋白复性》一文中研究指出据统计,目前上市的蛋白药物中42%以大肠杆菌作为表达系统[1],该表达系统具有操作简单,生长时间短、成本低、产量高等优点被广泛应用,但是该表达系统存在的最大问题是表达产物往往为不可溶的、无生物活性的包涵体,需要经过变性-复性及进一步的纯化才能获得高纯度的(本文来源于《临床合理用药杂志》期刊2009年17期）
王新华,胡敬东,孔娜,李宏梅,赵宏坤[2]（2009）在《人工分子伴侣系统辅助鸡IL-18重组蛋白复性过程中研究的影响因素》一文中研究指出将重组原核表达质粒pGEX-mChIL-18转化宿主细胞大肠杆菌BL21(DE3),并用IPTG于37℃诱导培养获得表达。表达的包涵体经超声波破碎、洗涤后以6 mol/L的盐酸胍溶解,使蛋白彻底变性。然后按照试验设计,考察不同浓度组成的人工分子伴侣体系对不同浓度鸡IL-18重组蛋白复性率的影响。试验结果表明,利用人工分子伴侣系统辅助鸡IL-18重组蛋白的复性存在最佳的条件,优化该条件能够提高该融合蛋白的复性率,且产物都具有良好的生物学活性,为鸡IL-18重组蛋白的进一步应用研究奠定了基础。(本文来源于《中国兽医学报》期刊2009年07期）
王新华,胡敬东,孔娜,李宏梅,赵宏坤[3]（2008）在《人工分子伴侣辅助鸡白细胞介素18重组蛋白的复性》一文中研究指出目的:研究表面活性剂十六烷基叁甲基溴化铵(CTAB)和β-环糊精(β-CD)组成的人工分子伴侣系统辅助鸡IL-18重组蛋白的复性,以提高鸡IL-18重组蛋白复性率,获得更多具有良好活性的蛋白。方法:将重组原核表达质粒pGEX-mChIL-18转化宿主细胞大肠杆菌BL21(DE3),并用IPTG于37℃诱导培养获得表达。表达产物主要以包涵体的形式存在。包涵体经超声波破碎、洗涤后以6mol/L的盐酸胍溶解,使蛋白彻底变性,然后利用人工分子伴侣系统辅助蛋白复性。复性产物经透析纯化后,利用淋巴细胞增殖试验来检测其活性。结果:经SDS-PAGE分析表明,表达产物是与ChIL-18重组蛋白相符的Mr约44000的蛋白条带。利用人工分子伴侣系统辅助复性,鸡IL-18重组蛋白获得了42·54%复性率。鸡淋巴细胞增殖试验表明,表达产物对鸡淋巴细胞具有明显诱导增殖作用。结论:人工分子伴侣系统能够较好地辅助鸡IL-18重组蛋白复性,获得较高的复性率。其产物具有良好的生物学活性,为下一步鸡IL-18重组蛋白的应用研究奠定了试验基础。(本文来源于《细胞与分子免疫学杂志》期刊2008年04期）
张秦铭[4]（2008）在《人工分子伴侣—离子交换色谱法辅助还原变性蛋白质的复性》一文中研究指出高效且廉价的蛋白质复性方法的研究一直是生物工程下游技术中的一个热点。本文将离子交换色谱法(ion exchange chromatograpby,IEC)与人工分子伴侣法(artificial molecular chaperon,AMC)相结合,发展了人工分子伴侣-离子交换色谱法(AMC-IEC),以脲变性/二硫苏糖醇还原溶菌酶(lysozyme)为模型蛋白,研究该方法用于蛋白复性的效率,并将此方法应用于重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)的复性。本论文包括以下几个部分:1.文献综述:对研究蛋白质复性的意义、蛋白复性方法及蛋白折迭液相色谱法、重组人粒细胞集落刺激因子分离纯化等方面进行了综述。共包括文献97篇。2.人工分子伴侣-离子交换色谱法复性还原变性溶菌酶:将IEC和AMC相结合,发展了AMC-IEC,并用于脲变性/二硫苏糖醇还原溶菌酶的复性,对流动相中脲浓度、流动相中β-CD浓度、流动相pH、流动相流速、去垢剂与溶菌酶摩尔比、去垢剂种类等进行了优化。与AMC和IEC相比,在实验考察的初始蛋白浓度范围内,AMC-IEC所得的活性回收率更高,同时,该方法对初始浓度很高的还原变性溶菌酶能得到较高的活性回收率。当溶菌酶的初始浓度高达200 mg/mL时,其活性回收率仍能达到63%。另外,在AMC-IEC复性过程中,色谱柱的使用寿命比通常IEC方法更长。实验结果表明这种方法是一种高效和廉价的蛋白复性方法。3.一步人工分子伴侣-离子交换色谱法辅助还原变性溶菌酶的复性:以月桂酰基肌氨酸钠(Sodium Lauroyl Sarcosine,Sarkosyl,SLS)作为蛋白变性剂,发展了一步人工分子伴侣-离子交换色谱法,对还原变性溶菌酶进行了复性研究。对流动相中脲浓度,流动相中β-环糊精(β-CD)浓度,流动相pH,流动相流速等复性条件进行了优化。结果表明,当流动相中脲浓度为3.0 mol/L,β-CD浓度为8 mmol/L,流动相pH为8.0并且流速为1 mL/min时,活性回收率最高。4.人工分子伴侣-离子交换色谱法复性重组人粒细胞集落刺激因子:用不同提取方式对rhG-CSF包涵体进行了溶解,结果表明,用2%Sarkosyl溶液能很好的溶解rhG-CSF包涵体。以β-CD为剥离剂,采用一步AMC-IEC和AMC-IEC对Sarkosyl溶解的rhG-CSF进行了复性,结果表明这两种方法所得蛋白质量回收率相当,且远高于IEC方法所得质量回收率。(本文来源于《西北大学》期刊2008-04-01）
张秦铭,王超展,王骊丽,耿信笃[5]（2007）在《人工分子伴侣-离子交换色谱法对还原变性溶菌酶的复性》一文中研究指出在众多的蛋白质复性方法中,蛋白折迭液相色谱法(protein folding liquid chromatography,PFLC) 是发展较快的复性方法之一。它的优点在于能够使蛋白质吸附于固定相之上,相应的减小了蛋白分子间的疏水相互作用,从而达到了抑制聚集,提高活性回收率的目的。同时在复性过程中,目标蛋白还可以与杂质进行分离,实现了蛋白复性与纯化同时进行的目的。人工分子伴侣(artificial(本文来源于《大连国际色谱学术报告会和展览会文集》期刊2007-06-01）
程晓玲,柴红[6]（2005）在《人工分子伴侣复性体系辅助溶菌酶复性的研究》一文中研究指出研究了人工分子伴侣复性体系中各种因素对溶菌酶复性效果的影响。当缓冲液浓度为23 mmol/L、pH值为8.1、以半胱氨酸为二硫键重排剂时,对人工分子伴侣辅助复性效果较佳。人工分子伴侣体系(CTAB、β-CD和Cysteine)的复性率比只加Cysteine的体系提高约40%,比添加β-CD和Cysteine的体系提高约20%。同时发现当溶菌酶浓度较高时,增加盐酸胍浓度可以提高蛋白质的复性率。(本文来源于《现代化工》期刊2005年S1期）
张晓栓,吴荣贵,李能刚[7]（2005）在《人工分子伴侣对重组内抑素的复性探讨》一文中研究指出目的 初步探讨 pH、Tris-HCl浓度、十二烷基硫酸钠 (SDS)与 β-环糊精 (β -CD)浓度的比值叁者变化对重组内抑素复性的影响。方法 根据人工分子伴侣对重组蛋白质的复性机理 ,采用人工分子伴侣方法应用于重组内抑素的复性。结果 通过优化后确定了其最佳复性时条件为 :pH为 8 0 ,Tris -HCl浓度为 10 0mM ,SDS∶β -CD为 1∶4 ,复性回收率可达89 %。结论 该方法经过条件优化之后完全可行(本文来源于《齐鲁药事》期刊2005年02期）
程晓玲[8]（2005）在《人工分子伴侣体系辅助溶菌酶复性的研究》一文中研究指出如何对包含体蛋白进行正确的体外折迭,以期能够获得高浓度、高收率的活性蛋白产品是蛋白质工业化应用的瓶颈。为此本文对模型蛋白溶菌酶进行了研究。首先考察了盐酸胍、DTT、变性时间对变性过程中自由巯基数、残余活力及稀释复性率叁个参数的影响。当溶菌酶浓度为15mg/mL时得出变性条件是6M盐酸胍,5mM DTT, 在36℃及100 rpm摇床中60min能够彻底还原变性,且复性效果最好。复性液中DTT的存在对复性效果没有影响。接着研究了去污剂十六烷基叁甲基溴化铵(CTAB)和β-环糊精(β-CD)的人工分子伴侣体系对变性-还原溶菌酶的氧化复性效果。相继考察了各种因素对复性率的影响。结果发现,溶菌酶最佳的复性操作条件为:pH值8. 1,半胱氨酸作二硫键重排剂,浓度为1-2mM,CTAB与β-CD的最佳的复性浓度分别为0. 6-1. 2mM和30mg/1. 5mL。此外复性率随酶浓度的升高有所降低。最后,在β环糊精的基础上合成了固态环糊精β-CDP,其大小在50-200μm之间,呈无色透明状。β-CDP对溶菌酶的复性效果由于受到固液传质的影响,对于溶菌酶浓度为50pμg/mL时只达到40%的复性率,但重复利用率较好。为人工分子伴侣的固定化研究和复性应用打下了基础。(本文来源于《浙江大学》期刊2005-02-01）
复性人工分子伴侣论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
将重组原核表达质粒pGEX-mChIL-18转化宿主细胞大肠杆菌BL21(DE3),并用IPTG于37℃诱导培养获得表达。表达的包涵体经超声波破碎、洗涤后以6 mol/L的盐酸胍溶解,使蛋白彻底变性。然后按照试验设计,考察不同浓度组成的人工分子伴侣体系对不同浓度鸡IL-18重组蛋白复性率的影响。试验结果表明,利用人工分子伴侣系统辅助鸡IL-18重组蛋白的复性存在最佳的条件,优化该条件能够提高该融合蛋白的复性率,且产物都具有良好的生物学活性,为鸡IL-18重组蛋白的进一步应用研究奠定了基础。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
复性人工分子伴侣论文参考文献
[1].张金玲.分子伴侣及小分子伴侣、人工分子伴侣与蛋白复性[J].临床合理用药杂志.2009
[2].王新华,胡敬东,孔娜,李宏梅,赵宏坤.人工分子伴侣系统辅助鸡IL-18重组蛋白复性过程中研究的影响因素[J].中国兽医学报.2009
[3].王新华,胡敬东,孔娜,李宏梅,赵宏坤.人工分子伴侣辅助鸡白细胞介素18重组蛋白的复性[J].细胞与分子免疫学杂志.2008
[4].张秦铭.人工分子伴侣—离子交换色谱法辅助还原变性蛋白质的复性[D].西北大学.2008
[5].张秦铭,王超展,王骊丽,耿信笃.人工分子伴侣-离子交换色谱法对还原变性溶菌酶的复性[C].大连国际色谱学术报告会和展览会文集.2007
[6].程晓玲,柴红.人工分子伴侣复性体系辅助溶菌酶复性的研究[J].现代化工.2005
[7].张晓栓,吴荣贵,李能刚.人工分子伴侣对重组内抑素的复性探讨[J].齐鲁药事.2005
[8].程晓玲.人工分子伴侣体系辅助溶菌酶复性的研究[D].浙江大学.2005