导读:本文包含了香菇漆酶论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:香菇,漆酶,基因功能
香菇漆酶论文文献综述
颜莲莲,徐瑞平,边银丙,周雁[1]（2019）在《香菇漆酶基因Lelcc1、Lelcc4的功能分析》一文中研究指出真菌漆酶(EC1.10.3.2)除了参与木质素的降解,还与黑色素生成以及子实体的生长发育等生物学过程有关。香菇(Lentinula edodes)基因组分析表明该物种中存在14个漆酶基因,这些漆酶基因在香菇与深绿木霉对峙过程中具有不同的表达模式。本研究分别对Lelcc1和Lelcc4进行过表达或抑制表达开展这两个基因的功能研究,结果表明Lelcc1和Lelcc4的超量表达的菌株对深绿木霉的抗性较野生型(W1)菌株更强,而抑制表达这两个基因中的任意一个,抑制表达菌株对深绿木霉的抗性比野生型更弱。将深绿木霉菌丝块接种于含不同香菇菌株发酵液的固体培养基上,发现Lelcc1和Lelcc4过表达转化子的发酵液对木霉菌丝体生长和孢子萌发均具有抑制作用,而抑制表达转化子的发酵液则具有促进作用,由此推测提高Lelcc1或Lelcc4的表达水平可能产生抑制木霉菌丝生长和孢子萌发的代谢物质,从而提高香菇对深绿木霉的抗性。此外,对这些转化子进行代料栽培,在转色阶段发现Lelcc1和Lelcc4的过表达转化子比W1更容易转色,而Lelcc4被抑制表达后转化子的菌棒转色则更缓慢一些。通过对菌丝体内褐色物质的提取和鉴定,表明香菇菌丝体内产生的色素物质为黑色素。通过元素分析等一系列特征检测和外源添加黑色素合成抑制剂或前体物质,发现香菇可产生多种黑色素,并进一步对香菇黑色素进行了溶解性、稳定性和抗氧化性分析。另外,香菇黑色素对大肠杆菌生长具有明显的抑制作用,能有效的降低大肠杆菌的紫外线诱变致死率。由此推测Lelcc1和Lelcc4可能参与了菌棒的转色过程,共同影响菌丝中黑色素的积累,同时菌丝体内黑色素的积累可以提高菌丝体的抗杂菌和抗紫外损伤能力。(本文来源于《多彩菌物 美丽中国——中国菌物学会2019年学术年会论文摘要》期刊2019-08-03）
颜莲莲,徐瑞平,戴胜宏,王刚正,边银丙[2]（2019）在《过表达漆酶基因Lelcc1的香菇菌株构建及表型分析》一文中研究指出真菌漆酶(laccase)是一种多酚氧化酶,在真菌生长发育中具有重要作用。本研究采用根癌农杆菌介导转化的方法,以香菇Lentinulaedodes菌株W1为受体菌株,在Leactin基因启动子调控下过表达Lelcc1基因;对其中7个单拷贝插入的转化子进行qRT-PCR分析,7个Lelcc1基因表达量较出发菌株W1均上调了1.5–8倍。进一步分析了这7个转化子的遗传稳定性;挑取了3个稳定的转化子进行表型分析,主要包括不同培养基中的生长速度、代料栽培过程中菌棒转色程度、以及透射电镜观察菌丝细胞的超微结构。发现转化子和受体菌株W1的生长速度无显着差异,但代料栽培过程中转化子较W1转色更快,菌棒表面颜色更深;透射电镜观察菌丝细胞的超微结构发现在细胞壁厚度、细胞膜形态等方面,其中两个超量表达转化子与W1间存在显着差异。结果表明,香菇Lelcc1基因可能参与了转色过程中色素合成或积累,也可能与细胞壁形成有关。(本文来源于《菌物学报》期刊2019年06期）
陈小敏,吴海冰,向泉桔,曾先富,张小平[3]（2019）在《不同温度培养对香菇漆酶活性及转录表达的影响》一文中研究指出以香菇新808为材料,研究不同温度培养下漆酶活性及其基因表达调控特征.通过平板培养法测定4种温度(20℃、25℃、28℃和30℃)对香菇菌丝圈及氧化圈的影响,通过液体发酵测定漆酶活性,并采用qPCR技术检测漆酶同工酶基因的相对表达量.结果表明:不同温度条件下,漆酶的活性及转录表达存在明显差异.25℃培养条件下香菇菌丝圈及氧化圈最大,漆酶活性最强(114.11 U/mL);而30℃时的菌丝圈和氧化圈最小,漆酶活性低(47.52 U/mL).不同温度培养下漆酶同工酶基因出现差异性表达,以25℃为对照组,20℃培养条件下9个漆酶基因(Llac1-3、Llac5和Llac7-11)表达量上调,28℃处理下除Llac5和Llac7基因以外,其余8个漆酶基因表达量发生上调,而30℃处理组6个漆酶基因(Llac1-2、Llac4、Llac7-8和Llac10)表达量下调.表明20℃处理下有助于漆酶基因的表达,而30℃处理下则抑制了其同工酶基因的表达.(本文来源于《四川大学学报(自然科学版)》期刊2019年01期）
颜莲莲,徐瑞平,边银丙,戴胜宏,周雁[4]（2018）在《香菇两个漆酶基因的功能研究》一文中研究指出丝状真菌的漆酶(EC1.10.3.2)除了参与木质素的降解,还与活性氧清除、抗菌活性产生、黑色素生成以及子实体的生长发育等生物学过程有关。通过香菇(Lentinula edodes)基因组测序发现该物种中存在14个漆酶基因,这些漆酶基因在生长发育过程中具有不同的表达模式。本研究首先采用qRT-PCR方法,分析了这14个漆酶基因在受高温胁迫后、光周期处理、不同碳源培养和受深绿木霉(Trichoderma atroviride)侵染后的基因表达模式变化,结果表明,漆酶基因在应对不同环境胁迫时都表现出不同的表达模式,说明香菇漆酶家族在响应生物和非生物胁迫过程中存在功能分化。采用农杆菌介导的遗传转化方法,以武香1号(W1)为受体菌株,对这14个基因中的lcc1和lcc4基因开展基因功能研究。lcc1经超量表达后,转化子在不同碳源培养基上的生长速度与出发菌株无显着差异;而lcc4超量表达和抑制表达的菌株在这不同培养基上的生长速度与W1存在显着差异,说明lcc1和lcc4在菌丝利用不同碳源时存在功能分化。对这些转化子进行代料栽培,在转色阶段发现lcc1和lcc4的过表达转化子比W1更容易转色,而lcc4被抑制表达后转化子的菌棒转色则更缓慢一些。由此推测lcc1和lcc4可能参与了菌棒的转色过程,共同影响菌丝中黑色素的积累,但在菌丝吸收不同碳源时具有功能差异。(本文来源于《中国菌物学会2018年学术年会论文汇编》期刊2018-08-11）
肖冬来,张迪,林衍铨,杨菁[5]（2018）在《金属离子对香菇纤维素酶、漆酶和木质素过氧化物酶活性的影响》一文中研究指出测定了6种常见金属离子对香菇(Lentinula edodes)羧甲基纤维素酶、漆酶和木质素过氧化物酶活性的影响。结果表明,Na~+、K~+、Ca~(2+)、Mn~(2+)、Fe~(2+)、Mg~(2+)对香菇羧甲基纤维素酶活性具有激活作用,其中K~+激活效果最强;Fe~(2+)能明显抑制漆酶活性;Mn~(2+)、Ca~(2+)、K~+、Mg~(2+)和Fe~(2+)对木质素过氧化物酶活性有抑制作用,Na~+对木质素过氧化物酶活性具有激活作用。(本文来源于《中国食用菌》期刊2018年03期）
秦澎,李津,辜运富,曾先富,向泉桔[6]（2018）在《香菇生长发育过程中漆酶基因家族的转录表达》一文中研究指出香菇可分泌胞外漆酶降解木质素作为自身营养物质.为探究不同漆酶基因在香菇生长发育过程中的不同作用,采用RT-q PCR方法分析10个漆酶基因在香菇4个不同发育阶段(菌丝体、原基、幼小子实体和成熟子实体)的转录表达情况.结果显示,5个漆酶基因(Lelac1、Lelac3、Lelac5、Lelac8和Lelac9)的转录表达表现出差异性和发育阶段特异性,另外5个漆酶基因(Lelac2、Lelac4、Lelac7、Lelac10和Lelac11)只表现出差异性.Lelac2和Lelac3随着香菇的生长,其转录表达量持续上升,可能与成菇过程有关;Lelac1和Lelac7在菌丝体阶段大量表达,可能参与菌丝体的生长代谢;Lelac8在原基时期表达量显着高于其他时期,与原基分化有关.本研究表明漆酶基因在香菇不同发育阶段的转录表达存在差异,结果可为进一步阐明漆酶在香菇生长发育阶段的作用奠定基础.(本文来源于《应用与环境生物学报》期刊2018年02期）
孙瑞雪,杨萍,刘琦,李晓辉,姜文侠[7]（2015）在《虎皮香菇漆酶的发酵优化》一文中研究指出为制备食品级漆酶,以可用于食品的原料对虎皮香菇的漆酶发酵进行优化,考察培养条件、碳源、氮源及铜离子等因素对发酵产酶的影响。确定虎皮香菇产漆酶的发酵培养基为:果糖48 g/L,玉米粉12 g/L,胰蛋白胨9 g/L,NH_4H2_PO_41 g/L,KH_2PO_42 g/L,MgSO_4·7H_2O 0.25 g/L,CuSO_4·5H_2O 1 mmol/L;培养温度为30℃,初始p H自然,种龄3 d,接种量6%(体积比),装液量150 m L/500 m L叁角瓶,发酵1 d~4 d摇床转速为150 r/min,第4 d~11 d摇床转速为200 r/min,发酵液中漆酶活性达到462.59 U/m L,为优化前的26倍。(本文来源于《食品研究与开发》期刊2015年21期）
卢颖颖[8]（2012）在《香菇分子遗传图谱构建及漆酶活性QTL的定位》一文中研究指出以香菇(Lentinula edodes)的两个栽培品种武香1号和L205各自的单孢W26和L6进行杂交(W26×L6),获得的146个单孢作为遗传分离群体。运用SSR、Indel、 CAPS分子标记对香菇遗传分离群体进行PCR扩增分析：从151对SSR引物中筛选得到38对具有多态性条带的引物；在38对Indel引物中筛选得到17对具有较高多态性条带的引物；在83对CAPS引物中,则仅有1对引物具有较高的多态性。将本研究中筛选得到的56对引物,对本实验室前期构建的分子遗传连锁图进行标记加密。利用Joinmap作图软件进行数据分析,构建了一个包含有571个标记,11个连锁群的香菇分子遗传连锁图谱。图谱总长度为967cM,连锁群的大小在22cM～233cM之间,平均大小为87.9cM；标记间的距离在0～21cM,标记间的平均距离为1.87cM。本实验中筛选到有10个分子标记定位到连锁群中,其中SSR分子标记仅有一个,其余9个为Indel分子标记,其余46个分子标记则有可能位于端粒或着丝粒位置。本实验所构架的香菇高密度分子遗传连锁图谱在2cM、5cM、10cM以内,一个标记的覆盖度分别为80.1%、98.2%、99.9%。利用上述图谱对香菇漆酶活性进行QTL定位研究。结果表明,与香菇单核体漆酶酶活性相关的QTL共有7个,其中漆酶酶活性总平均值定位到两个QTL为qLac1和qLac2。qLacl位于LG3中约49.6cM处,贡献率为9.21%；qLac2位于LG6中约42.4cM处,贡献率为8.95%。这两个QTL均具有负的加性效应,总贡献率为18.16%。第5d的漆酶活性值定位到两个QTL位为q Lac5-1和q Lac5-2。q Lac5-1位于LG6中约40.6cM处,贡献率为9.73%；q Lac5-2则位于LG6中约48.4cM处,贡献率为9.04%。这两个QTL均具有负的加性效应,总贡献率为18.77%。第15d的漆酶活性值定位到一个QTL qLac15-1。qLac15-1位于LG7中约43.4cM处,具有正的加性效应,贡献率为11.51%。第20d的漆酶活性值定位到两个QTL为qLac20-1和qLac20-2. qLac20-1位于LG7中约35.0cM处,具有正的加性效应,贡献率为65.53%；qLac20-2则位于LG7中约57.7cM处,该QTL具有负的加性效应,贡献率为17.63%。利用SSR, Indel, CAPS分子标记对香菇分子遗传图谱进行了加密,获得了高密度分子遗传连锁图谱。香菇漆酶酶活性的相关QTL的定位,为今后香菇漆酶基因的精细定位,图位克隆、数量性状的定位和分子遗传育种等奠定了良好的基础。(本文来源于《华中农业大学》期刊2012-06-01）
戴耀虹,肖扬,卢颖颖,边银丙[9]（2011）在《香菇杂交子漆酶活性与菌丝体生长速度的相关性分析》一文中研究指出选择香菇(Lentinula edodes)6个亲本菌株配对形成4对杂交组合,获得87个杂交子,测定了杂交子及其亲本的漆酶活性和不同培养基质中菌丝体生长速度。采用加性—显性模型和MINQUE法对供试菌株4个数量性状进行广义遗传率、变异系数和相关性分析。结果表明,麦芽浸粉培养基上菌丝体长速的广义遗传率最高,其性状主要受遗传因素影响;漆酶活性变异系数最大,杂交子之间存在明显的差异性;木屑培养基上菌丝体长速与漆酶活性的表型及基因型相关系数均达到了极显着水平,表明可利用漆酶活性预测菌丝体在木屑培养基中的吃料能力。(本文来源于《海峡两岸第十届菌物学暨第叁届食药用菌学术研讨会论文摘要集》期刊2011-07-15）
周超[10]（2011）在《香菇漆酶基因在毕赤酵母中的表达及对叁苯甲烷类染料脱色的研究》一文中研究指出漆酶是一类含铜的多酚氧化酶,一般含有4个铜原子,这4个铜离子处于漆酶的活性部位,在催化氧化反应中起决定作用。漆酶能催化氧分子4个电子还原成水,并且伴随着一些酚类和芳香类底物的氧化。它是白腐真菌叁大木质素降解酶系统中的一种,由于其氧化底物时无需大量的H202作为辅助剂,且能把分子氧直接还原为水,不会造成二次污染的特点,使得它具有更大的潜在的工业价值,常被应用于环境有机污染物的降解、染料的脱色、造纸工业的漂白以及生物检测等领域。香菇作为一种白腐真菌,能够分泌出较多的漆酶,并对染料有脱色作用。但是香菇菌株在人工或者天然培养基上生长时漆酶合成水平仍然偏低,而且培养较为困难,发酵产物成分复杂,也不便于漆酶的大规模工业化制备。因此,开展真菌漆酶的基因克隆及在异源蛋白高效表达,是解决漆酶酶源短缺的重要途径。根据基因库香菇漆酶基因LeLcc1的序列(登录号：AB035409),并以提取的香菇cDNA为模板,设计7对引物采用定点突变技术克隆漆酶基因,同时消除基因内部的BamH I和Sac I位点及5'端18个氨基酸组成的自身分泌信号肽序列,得到编码500个氨基酸的1503 bp漆酶基因序列,并插入到表达载体pPIC9K的多克隆位点中,构建得到重组质粒pYM8837。表达质粒含有酿酒酵母α信号肽序列、克隆的LeLcc1基因以及终止子。重组质粒以BglⅡ线性化后电转化进GS115菌株。SDS-PAGE分析显示重组漆酶分子量大小约为62 KD,糖基化率为15.4%。纯化后的重组漆酶以ABTS为底物进行酶学性质研究,结果表明重组漆酶在最适pH 2.4,在30℃条件下比较稳定,这与野生型漆酶性质(Lcc1)不同,但是在其它酶学性质方面相似。它们的最适温度是45℃,金属离子如Ba2+、Ca2+、Zn2+和A13+对它们的活性都有抑制作用,潜在的抑制剂如DTT和NaN3能强烈的抑制它们的活性,蛋白质螯合剂—EDTA对它们活性仅有微弱的抑制作用。L-Alanine作为重组漆酶在毕赤酵母表达时维持pH稳定的添加剂,具有促进漆酶酶活的作用。另外对重组漆酶摇瓶发酵条件进行了初步研究,为下一步大规模的发酵提供参考。结果表明BMM培养基最佳的诱导条件添加终浓度为1.5%甲醇和0.2 mM Cu2+。我们研究了纯重组漆酶脱色孔雀石绿、结晶紫和亮绿,发现脱色效果不是很明显,且随着pH的上升染料脱色率在下降。ABTS是最常用的合成介体,我们对漆酶ABTS介体系统脱色染料条件进行了优化：孔雀石绿最佳的脱色条件是pH 2.4-3.0、温度是40℃和10μMABTS;结晶紫最佳脱色条件是pH 2.4-3.6、温度是45℃和10μMABTS;亮绿最佳脱色条件pH 3.0-4.0、温度是50℃和4μM。我们以孔雀石绿为底物从8种自然酚类化合物中,筛选出乙酰丁香酮和丁香醛是最有效的介体,它们18h后几乎能将孔雀石绿完全脱色,结晶紫和亮绿的脱色率也达到65%。pH和介体浓度对染料的脱色有影响,孔雀石绿和结晶紫最适pH是4.0,而亮绿的最适pH是3.6；叁种染料都是在介体/染料比例是6/1时达到最大脱色率。另外,HBT是一种最常见的漆酶合成介体,在本实验中发现对叁种染料的脱色都没有起到介导作用。(本文来源于《南京农业大学》期刊2011-05-01）
香菇漆酶论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
真菌漆酶(laccase)是一种多酚氧化酶,在真菌生长发育中具有重要作用。本研究采用根癌农杆菌介导转化的方法,以香菇Lentinulaedodes菌株W1为受体菌株,在Leactin基因启动子调控下过表达Lelcc1基因;对其中7个单拷贝插入的转化子进行qRT-PCR分析,7个Lelcc1基因表达量较出发菌株W1均上调了1.5–8倍。进一步分析了这7个转化子的遗传稳定性;挑取了3个稳定的转化子进行表型分析,主要包括不同培养基中的生长速度、代料栽培过程中菌棒转色程度、以及透射电镜观察菌丝细胞的超微结构。发现转化子和受体菌株W1的生长速度无显着差异,但代料栽培过程中转化子较W1转色更快,菌棒表面颜色更深;透射电镜观察菌丝细胞的超微结构发现在细胞壁厚度、细胞膜形态等方面,其中两个超量表达转化子与W1间存在显着差异。结果表明,香菇Lelcc1基因可能参与了转色过程中色素合成或积累,也可能与细胞壁形成有关。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
香菇漆酶论文参考文献
[1].颜莲莲,徐瑞平,边银丙,周雁.香菇漆酶基因Lelcc1、Lelcc4的功能分析[C].多彩菌物美丽中国——中国菌物学会2019年学术年会论文摘要.2019
[2].颜莲莲,徐瑞平,戴胜宏,王刚正,边银丙.过表达漆酶基因Lelcc1的香菇菌株构建及表型分析[J].菌物学报.2019
[3].陈小敏,吴海冰,向泉桔,曾先富,张小平.不同温度培养对香菇漆酶活性及转录表达的影响[J].四川大学学报(自然科学版).2019
[4].颜莲莲,徐瑞平,边银丙,戴胜宏,周雁.香菇两个漆酶基因的功能研究[C].中国菌物学会2018年学术年会论文汇编.2018
[5].肖冬来,张迪,林衍铨,杨菁.金属离子对香菇纤维素酶、漆酶和木质素过氧化物酶活性的影响[J].中国食用菌.2018
[6].秦澎,李津,辜运富,曾先富,向泉桔.香菇生长发育过程中漆酶基因家族的转录表达[J].应用与环境生物学报.2018
[7].孙瑞雪,杨萍,刘琦,李晓辉,姜文侠.虎皮香菇漆酶的发酵优化[J].食品研究与开发.2015
[8].卢颖颖.香菇分子遗传图谱构建及漆酶活性QTL的定位[D].华中农业大学.2012
[9].戴耀虹,肖扬,卢颖颖,边银丙.香菇杂交子漆酶活性与菌丝体生长速度的相关性分析[C].海峡两岸第十届菌物学暨第叁届食药用菌学术研讨会论文摘要集.2011
[10].周超.香菇漆酶基因在毕赤酵母中的表达及对叁苯甲烷类染料脱色的研究[D].南京农业大学.2011