（浙江大学医学院附属第四医院病理科浙江金华322000）
【摘要】目的：分析Giemsa染色法以及中性红染色法显示幽门螺杆菌的效果情况。方法：收集2016年1月-2016年10月我科室胃镜活检诊断为慢性胃炎（活动性）的蜡块60个，将每个蜡块分别切片2张，分为两组，每组60张，分别实施改良Giemsa染色以及中性红染色。比较结果。结果：中性红染色的样本形状为弯曲状或短杆状，鲜红色，分布胃小凹以及腺腔内。改良Giemsa染色的样本形状为短杆状，S型，蓝色，分布为胃小凹中，一般呈现为聚集样或者鱼群样排列。改良Giemsa染色阳性率为86.67%，中性红染色阳性率为80.00%。组间数据存在显著差异，P＜0.05.(χ2=5.284）。结论：和中性红染色法相比，改良Giemsa染色法检查HP的特异性更高，对于基层医院而言，推荐使用改良Giemsa染色法进行HP检测。
【关键词】Giemsa染色法；中性红染色法；幽门螺杆菌；特异性；对比分析
【中图分类号】R446【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2017）26-0184-01
幽门螺杆菌（HP）大量存在于人类胃液中，为多种胃部疾病发生以及发展的重要致病因子[1]。特殊染色为准确性较高的染色方式。当前特殊染色方式有很多，其中以改良Giemsa染色及中性红染色的应用范围较为广泛。结合实际，本文全面分析上述两种染色方式在显示HP的情况进行全面比较，现报告如下。
1.资料与方法
1.1一般资料
选择2016年1月-2016年10月我科室60例胃粘膜活检组织标本为研究样本。炎症类型为：浅表性胃炎，慢性胃炎以及萎缩性胃炎。收集部位：胃窦，胃体以及十二指肠。
本实验所选择的标本均使用浓度为10%福尔马林固定，后常规脱水，包埋。切片厚度规格为4μm。
1.2方法
1.2.1染色液配置Giemsa染色液：100ml甘油、100ml甲醇，4.8gGiemsa染色料混合。
中性红染色液：1g中性红染色料、100ml无水乙醇混合。
1.2.2染色方法将每个标本蜡块分别切片分为2张，分为两组，每组60例。分别实施改良Giemsa染色以及中性红染色。详细为：
中性红染色：切片脱蜡至水，使用蒸馏水流水清洗2min，使用中性红染色液对组织进行染色，时间为5min，后使用蒸馏水二次清洗，切片60℃烤箱烤干之后，利用二甲苯中性树胶完成固定封存。
改良Giemsa染色：切片脱蜡至水，使用蒸馏水流水清洗2min,放入Giemsa染色液内浸染30min，后蒸馏水流水清洗多余染色液，并使用1%冰醋酸分化，直至显微镜下显示细胞核变蓝。细胞核结构可见时间大约30s[2]。后将切片60℃烤箱烤干之后，利用二甲苯中性树胶完成固定封存。
1.3观察指标
（1）分析两种染色方式显示HP的颜色和形状。
（2）分析两种染色方式的阳性率：在光镜下观察Hp的显示情况,以查见Hp菌体2条以上判定为阳性,2条以下为阴性。
1.4统计学原理
本实验使用SPSS21.0软件包，对计量资料使用t值计算，计数资料使用χ2计算，当P＜0.05.视为存在统计学差异。
2.结果
2.1两种染色方式显示HP的颜色和形状
中性红染色：样本形状为弯曲状或短杆状，鲜红色，分布胃小凹以及腺腔内。
改良Giemsa染色：样本形状为短杆状，S型，蓝色，分布为胃小凹中，一般呈现为聚集样或者鱼群样排列。
2.2两种染色方式的阳性率
Giemsa染色阳性率为86.67%，中性红染色阳性率为80.00%。组间数据存在显著差异，P＜0.05.（χ2=5.284）详情见表。
3.讨论
从1983年外国学者第一次发现HP之后，证实其和胃溃疡，十二指肠溃疡，慢性胃炎，黏膜相关淋巴瘤以及胃癌存在相关性[3]。HP有着组织学诊断灵敏度以及特异性高的特征，因此，临床诊断HP组织学法得到了广泛使用。实施组织切片法对胃粘膜样本进行检测，要经乙醇固定，石蜡包埋，切片以及染色等步骤，完成后，将组织切片放在高倍镜下，观察HP的结构和分布情况，使用这种方式，判断样本是否被HP感染。当前，这种方式为检测HP的金标准。和以往相比，最近几年接受胃粘膜组织活检病理检查例数显著增多，多种疾病治疗方案确定都依赖于HP检测结果，由此可见，寻找一个精准性强，价格实惠，结果可靠的检测方式，有着极高临床意义。
改良之后的Giemsa染色法，组织以及HP均为蓝色，在高倍镜下可清楚辨别HP，灵敏性较强，染色剂配置简单，且能够实现长期保存，这种方式操作简单。值得说明的是，在进行染色时，应当注意1%冰醋酸分化时长，如果没有严格控制，就会导致背景不清晰情况发生。倘若过度分化，HP颜色就会变浅，不方便观察。
而中性染色法所显示的HP为鲜红色，在高倍镜下形态结构相对清晰，操作简单，试剂来源方便，价格实惠。但就灵敏性来看，不如Giemsa染色法，且分化时间也需要严格掌握。
在本次实验的相关研究结果中可见，和中性红染色法相比，Giemsa染色法的灵敏性更高，组间数据存在显著差异，P＜0.05（χ2=5.284）。该项结论进一步证实，和中性红染色法相比，Giemsa染色法检查HP的灵敏性更高，对于基层医院而言，推荐使用Giemsa染色法进行HP检测。
【参考文献】
[1]唐锦玲，刘冲，缪琛，等.两种常用胃幽门螺杆菌特殊染色方法比较[J].江苏医药，2015，41(7):854-855.
[2]肖俏霞，尹庆和，林冬红，等.四联疗法与常规三联疗法对幽门螺杆菌首次根除失败患者炎症因子的影响以及疗效对比[J].中国中西医结合消化杂志，2015，23(5):366-368.
[3]张小明，李娜.标准三联疗法与序贯疗法治疗幽门螺杆菌阳性胃溃疡的疗效对比[J].现代消化及介入诊疗，2016，21(4):642-644.