本文主要研究内容
作者李海娟,徐玲玲（2019）在《在噬热栖热菌中开发无需筛选标记的基因敲除手段》一文中研究指出：噬热栖热菌（Thermus thermophilus）是多倍体,在基因敲除过程中,可形成同时含有突变型和野生型等位基因的杂合子,在无选择压力下,杂合子会转化成只含有其中一种等位基因的纯合子。利用此原理,在T. thermophilus中开发了一种新的基因无痕敲除手段,基本方案是:将目的基因的上下游DNA序列克隆到pUC18载体后转化T. thermophilus,将转化混合物涂布在无筛选的平板上;混合池法提取96个单菌落的基因组DNA,PCR鉴定出含有突变型等位基因的菌株;将该杂合型突变菌株在无筛选条件下培养后（使杂合子纯合化）涂板,通过PCR法从单菌落中鉴定出纯合的基因无痕敲除突变株。利用该系统成功敲除了T. thermophilus的TTC03400341基因,获得突变体的概率达到了10-2。该方法最显著优点是无需任何筛选标记、能在野生型遗传背景下使用。
Abstract
shi re qi re jun （Thermus thermophilus）shi duo bei ti ,zai ji yin qiao chu guo cheng zhong ,ke xing cheng tong shi han you tu bian xing he ye sheng xing deng wei ji yin de za ge zi ,zai mo shua ze ya li xia ,za ge zi hui zhuai hua cheng zhi han you ji zhong yi chong deng wei ji yin de chun ge zi 。li yong ci yuan li ,zai T. thermophiluszhong kai fa le yi chong xin de ji yin mo hen qiao chu shou duan ,ji ben fang an shi :jiang mu de ji yin de shang xia you DNAxu lie ke long dao pUC18zai ti hou zhuai hua T. thermophilus,jiang zhuai hua hun ge wu tu bu zai mo shai shua de ping ban shang ;hun ge chi fa di qu 96ge chan jun la de ji yin zu DNA,PCRjian ding chu han you tu bian xing deng wei ji yin de jun zhu ;jiang gai za ge xing tu bian jun zhu zai mo shai shua tiao jian xia pei yang hou （shi za ge zi chun ge hua ）tu ban ,tong guo PCRfa cong chan jun la zhong jian ding chu chun ge de ji yin mo hen qiao chu tu bian zhu 。li yong gai ji tong cheng gong qiao chu le T. thermophilusde TTC03400341ji yin ,huo de tu bian ti de gai lv da dao le 10-2。gai fang fa zui xian zhe you dian shi mo xu ren he shai shua biao ji 、neng zai ye sheng xing wei chuan bei jing xia shi yong 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自江西农业大学学报的李海娟,徐玲玲，发表于刊物江西农业大学学报2019年03期论文，是一篇关于噬热栖热菌论文,多倍体论文,基因无痕敲除手段论文,江西农业大学学报2019年03期论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自江西农业大学学报2019年03期论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
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