导读:本文包含了猿猴病毒抗原论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:人脐静脉内皮,SV40,反转录-聚合酶链反应,免疫组织化学
猿猴病毒抗原论文文献综述
冯海凉,王春景,顾蓓,杨振丽,刘玉琴[1]（2013）在《猿猴病毒40T抗原转化的人脐静脉内皮细胞系PUMC-HUVEC-T1的建立》一文中研究指出目的建立猿猴病毒40(SV40)T抗原转化的人脐静脉内皮细胞(HVUEC)模型,为内皮研究提供可利用资源。方法分离人脐静脉内皮细胞,原代培养。感染含有SV40大T、小T抗原的慢病毒,连续传代培养。对感染后的HUVEC,RT-PCR检测大T的表达,免疫细胞化学检测vWF、CD31、CD34的表达及结合凝集素能力,透射电镜观察内皮细胞的超微结构,Matrigel检测管状成型,进行染色体核型分析,皮下接种BABL/c-nu裸鼠检测致瘤性,PCR法进行种属鉴定及支原体检测,短串联重复序列(STR)检测鉴定细胞身份。结果转化后的人脐静脉内皮细胞命名为PUMC-HUVEC-T1,扁平多角状,汇合时典型铺路石排列,体外传代40代以上(1∶3～4);细胞中有SV40LT mRNA的表达;vWF、CD31、CD34表达均阳性,可结合荆豆凝集素-1(UEA-1);电镜可见WP小体;不同代数细胞核型正常稳定,裸鼠体内接种不成瘤。PUMC-HUVEC-T1种属鉴定为人源性,STR结果与原代HUVEC一致,无支原体的污染,国家实验细胞资源共享平台收藏。结论建立了易获得、背景清楚、质量可靠的SV40 T抗原转化的HUVEC细胞系PUMC-HUVEC-T1。(本文来源于《解剖学报》期刊2013年02期）
王庆,李道传,刘彩霞,李志芳,肖勇梅[2]（2012）在《miR-27a在猿猴病毒小T抗原诱导支气管上皮细胞恶性转化中的作用》一文中研究指出目的:检测猿猴病毒40(simian virus 40,SV40)小T抗原(small T antigen,ST)诱导人支气管上皮细胞(human bronchialepithelial cell,HBE)恶性转化中miRNAs的表达谱,寻找与细胞转化相关的miRNAs。方法:选择HBE、HBER和HBERST细胞株,提取总RNA,利用miRNA芯片和实时荧光定量PCR技术检测和验证永生化HBE、HBER和HBERST细胞中差异表达的miRNAs。通过细胞生长曲线检测、细胞周期分析、细胞克隆形成试验等确证与SV40 ST诱导HBE细胞恶性转化相关的miRNAs。结果:在HBE、HBER和HBERST细胞856个miRNA的表达谱中筛选出6个与SV40 ST诱导细胞转化相关的miRNA,2个表达上调(miR-20a和miR-27a).4个表达下调(let-7d,let-7f,miR-1246和miR-3746)。抑制miR-27a能减缓HBERST细胞的增殖速度(P<0.01),延长细胞在G0～G1期的停留时间(P<0.01)和降低HBERST细胞在软琼脂上形成克隆的数目(P<0.01)。结论:miR-27a的异常表达参与了SV40ST诱导的HBE细胞恶性转化。(本文来源于《癌变·畸变·突变》期刊2012年01期）
王庆,李道传,刘彩霞,李志芳,肖永梅[3]（2010）在《miR-27a在猿猴病毒小T抗原诱导支气管上皮细胞恶性转化中的功能》一文中研究指出背景猿猴病毒40(Simianvirus 40,SV40)早期DNA序列区编码的小T抗原(small T antigen,ST)是诱导人类细胞恶性转化的关键蛋白,然而目前为止其作用机制尚未完全阐明。目的检测SV40 ST诱导支气管上皮细胞(HBE)恶性转化中miRNAs的表达谱,揭示miRNAs在肿瘤发生发展中的作用及其机制。方法:利用慢病毒载体在Ras高表达的HBE细胞(HBER)中导入SV40小T抗原获得具有成瘤表型的转化细胞(HBERST),通过miRNA芯片和实时荧光定量PCR技术检测和验证HBER和HBERST细胞中表达差异的miRNAs分子。利用细胞增殖、细胞周期分析,软琼脂和裸鼠成瘤试验等筛查与SV40小T抗原诱导HBE细胞恶性转化相关的miRNAs,并采用TargetScan软件预测其可能调控的靶基因,然后采用双荧光报告基因系统,蛋白印迹和siRNA等技术对相关靶基因进行验证。结果:在2组细胞856个miRNA的表达谱中筛选出6个表达差异显着的miRNA,2个表达上调,4个表达下调。抑制SV40小T抗原诱导后高表达的miR-27a能减缓HBERST细胞的增殖速度,延长细胞在G_0-G_1期的停留时间和降低HBERST细胞在软琼脂上形成克隆的数目。进一步的研究显示,高表达miR-27a诱导HBE细胞成瘤的作用是通过抑制细胞周期相关的抑癌基因—泛素化连接酶7(F-box/WD repeat-containing protein 7,FBXW7)所介导的。结论:miR-27a通过调控抑癌基因FBXW7介导了SV40小T抗原诱导的HBE细胞恶性转化。(本文来源于《广东省环境诱变剂学会、广东省预防医学会卫生毒理专业委员会2010年学术会议资料汇编》期刊2010-12-10）
常海,邓军,郝飞,杨希川,钟白玉[4]（2008）在《猿猴病毒40T抗原介导永生化黑素细胞对其核型、HLA-DR和hTERT表达的影响》一文中研究指出目的:观察猿猴病毒40T(SV40T)抗原介导黑素细胞(melanocyte,MC)永生化对染色体核型、人白细胞抗原-DR(humanleucocyte antigen-DR,HLA-DR)和人端粒酶反转录酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)表达的影响。方法:利用SV40T抗原基因和真核表达载体PEGFP,经SofastTM阳离子聚合物转染至体外培养的第4代MC细胞,使其永生化,通过G418筛选,滤纸片法挑选单一克隆。对培养至第15代的永生化细胞进行染色体分析,免疫组化方法检测HLA-DR和hTERT蛋白的表达,反转录(RT)-PCR检测hTERT mRNA表达,以人黑素瘤A375细胞株为对照。结果:SV40T抗原介导的永生化黑素细胞具有正常的二倍体,HLA-DR和hTERT的表达未受影响,均为阴性,同时也未检测到hTERT mRNA的表达。结论:①转化的MC染色体为正常核型、HLA-DR的表达不受体外长期传代培养和SV40T抗原的影响;②SV40T抗原不通过上调端粒酶反转录酶活性途径介导细胞永生化,同时也说明该转化细胞不易向恶性转化。(本文来源于《临床皮肤科杂志》期刊2008年06期）
肖镜,付瑞,贺争鸣[5]（2007）在《猿猴疱疹病毒B糖蛋白D的表达及抗原性的探讨》一文中研究指出目的表达猴B病毒糖蛋白D(BVgD)并对其抗原性进行初步研究。方法应用体外原核表达BVgD,继而进行Ni离子亲和层析纯化。采用Western blotting对蛋白抗原性进行分析,评估其抗原潜力。结果完成了对BVgD的小量表达和纯化。Western blotting结果表明表达出的重组蛋白BVgD具有特异性结合猴B病毒抗体的能力。结论BVgD重组蛋白具有良好的抗原性,与HSV-1抗体无交叉反应。具有进一步开发的潜力,也为BVgD免疫原性等方面的进一步研究提供了条件。(本文来源于《中国实验动物学报》期刊2007年06期）
边昶,赵葵,童国新,朱永良,陈鹏[6]（2005）在《端粒酶催化亚单位和猿猴病毒40大T抗原致人脐静脉内皮细胞永生化》一文中研究指出目的 用端粒酶催化亚单位(hTERT)和猿猴病毒 40大T抗原(SV40大T)异位表达建立永生化人脐静脉内皮细胞系。方法 构建含有hTERT和SV40大TcDNA片段的逆转录病毒载体,转染人原代脐静脉内皮细胞,连续传代培养。通过细胞免疫组织化学观察、Westernblot分析hTERT和SV40大T抗原表达、PCR ELISA检测端粒酶活性、ELISA分析内皮特异性E 选择素和RT PCR测定内皮细胞脂肪酶进行细胞形态学和功能学鉴定。结果 转染的人脐静脉内皮细胞为扁平多角形,呈单层铺路石状镶嵌排列。有Ⅷ因子、SV40大T、hTERT表达、E 选择素和内皮细胞脂肪酶表达阳性。转染细胞中端粒酶活性经测定在第 12代时为 0 36, 在第 50代时为 0 38, 而对照的原代细胞在第 1代时为 1 12,第 3代时仅为 0 06。结论 导入外源性端粒酶催化亚单位和SV40大T抗原能使人脐静脉内皮细胞永生化,保持内皮细胞性状不改变。(本文来源于《中华心血管病杂志》期刊2005年02期）
猿猴病毒抗原论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:检测猿猴病毒40(simian virus 40,SV40)小T抗原(small T antigen,ST)诱导人支气管上皮细胞(human bronchialepithelial cell,HBE)恶性转化中miRNAs的表达谱,寻找与细胞转化相关的miRNAs。方法:选择HBE、HBER和HBERST细胞株,提取总RNA,利用miRNA芯片和实时荧光定量PCR技术检测和验证永生化HBE、HBER和HBERST细胞中差异表达的miRNAs。通过细胞生长曲线检测、细胞周期分析、细胞克隆形成试验等确证与SV40 ST诱导HBE细胞恶性转化相关的miRNAs。结果:在HBE、HBER和HBERST细胞856个miRNA的表达谱中筛选出6个与SV40 ST诱导细胞转化相关的miRNA,2个表达上调(miR-20a和miR-27a).4个表达下调(let-7d,let-7f,miR-1246和miR-3746)。抑制miR-27a能减缓HBERST细胞的增殖速度(P<0.01),延长细胞在G0～G1期的停留时间(P<0.01)和降低HBERST细胞在软琼脂上形成克隆的数目(P<0.01)。结论:miR-27a的异常表达参与了SV40ST诱导的HBE细胞恶性转化。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
猿猴病毒抗原论文参考文献
[1].冯海凉,王春景,顾蓓,杨振丽,刘玉琴.猿猴病毒40T抗原转化的人脐静脉内皮细胞系PUMC-HUVEC-T1的建立[J].解剖学报.2013
[2].王庆,李道传,刘彩霞,李志芳,肖勇梅.miR-27a在猿猴病毒小T抗原诱导支气管上皮细胞恶性转化中的作用[J].癌变·畸变·突变.2012
[3].王庆,李道传,刘彩霞,李志芳,肖永梅.miR-27a在猿猴病毒小T抗原诱导支气管上皮细胞恶性转化中的功能[C].广东省环境诱变剂学会、广东省预防医学会卫生毒理专业委员会2010年学术会议资料汇编.2010
[4].常海,邓军,郝飞,杨希川,钟白玉.猿猴病毒40T抗原介导永生化黑素细胞对其核型、HLA-DR和hTERT表达的影响[J].临床皮肤科杂志.2008
[5].肖镜,付瑞,贺争鸣.猿猴疱疹病毒B糖蛋白D的表达及抗原性的探讨[J].中国实验动物学报.2007
[6].边昶,赵葵,童国新,朱永良,陈鹏.端粒酶催化亚单位和猿猴病毒40大T抗原致人脐静脉内皮细胞永生化[J].中华心血管病杂志.2005
标签：人脐静脉内皮; SV40; 反转录-聚合酶链反应; 免疫组织化学;