本文主要研究内容
作者高雪（2019）在《PCV2感染与免疫血清IgG、IgM抗体变化特征研究及其ELISA检测方法的建立》一文中研究指出：猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)感染会引起机体免疫功能紊乱、免疫抑制,多种病原继发感染和混合感染,给养猪业造成极大的损失。PCV2持续性感染导致猪群的血清抗体阳性率居高不下,接种疫苗产生的抗体与自然感染产生的抗体无法有效区分,这是目前疫苗免疫防控面临的最大挑战。鉴于此,本研究通过监测猪群中IgG和IgM抗体的动态变化规律,发现PCV2特异性IgM抗体的存在时间和存在状态在区分疫苗免疫和病毒感染方面发挥重要作用,基于此,分别建立了基于SPG的检测PCV2 IgG抗体的捕获ELISA和以抗猪IgM多抗为捕获抗原的检测PCV2 IgM抗体的捕获ELISA方法,综合两种抗体诊断方法的判定结果可为判断猪群感染状态和疫苗接种时机提供科学指导。研究内容可分为以下三个部分:1.分析PCV2感染和免疫后猪群产生的IgG和IgM抗体消长规律利用PCV2商品化灭活疫苗和细胞分离毒株分别免疫和感染抗体阴性猪,接种后定期采集外周血并分离血清,进口试剂盒INGEZIM IgG/IgM Kit检测血清样品。通过监测抗体的消长变化,发现免疫和感染后IgM抗体首先产生,随后转变为IgG抗体,且持续存在;人工感染PCV2细胞毒产生的IgM存在时间为20-30 d,自然感染(感染组的阳性对照)产生的IgM持续55 d,而接种灭活疫苗的免疫组IgM的存在时间不超过14 d。PCV2 IgM抗体产生特点可以优化免疫程序,区分病毒感染和疫苗免疫,首先免疫前应该避开IgM抗体阳性期;免疫后若IgM抗体变为阴性,在下次接种疫苗之前若检测结果为阳性,那么必定出现了新一轮的PCV2感染,此时不建议追加免疫。2.基于SPG建立检测PCV2 IgG的捕获ELISA通过比较SPA、SPG和PPL三种免疫球蛋白结合蛋白作为捕获抗原、HRP标记的PCV2 Cap作为二抗的捕获法ELISA,确定SPG为包被抗原,优化反应条件,绘制ROC曲线确定临界值(cut-off point,cut-off值)为0.61,此时对应的敏感性和特异性分别为93.9%和90.3%。187例临床样本的检测结果显示,该方法与商业化的INGEZIM Circovirus IgG Kit的总符合率为96.23%。3.建立捕获ELISA检测PCV2 IgM抗体以兔抗猪native IgM高免血清做包被抗原,HRP标记的R2346作为二抗,建立检测猪抗PCV2IgM抗体的ELISA方法。优化该方法的最佳反应条件后,绘制ROC曲线判定cut-off值为0.492,对应的敏感性和特异性分别为96.7%和97.2%;检测田间血清样品IgM与INGEZIM IgM Kit试剂盒符合率为92.7%。本研究分别建立检测PCV2 IgG和IgM抗体的捕获ELISA,为优化疫苗免疫程序、PCV2的早期快速诊断和区分病毒感染和疫苗免疫提供了简单有效的途径,为进一步控制PCV2在猪场中的流行传播提供了可靠依据。
Abstract
zhu yuan huan bing du 2xing (Porcine circovirus type 2,PCV2)gan ran hui yin qi ji ti mian yi gong neng wen luan 、mian yi yi zhi ,duo chong bing yuan ji fa gan ran he hun ge gan ran ,gei yang zhu ye zao cheng ji da de sun shi 。PCV2chi xu xing gan ran dao zhi zhu qun de xie qing kang ti yang xing lv ju gao bu xia ,jie chong yi miao chan sheng de kang ti yu zi ran gan ran chan sheng de kang ti mo fa you xiao ou fen ,zhe shi mu qian yi miao mian yi fang kong mian lin de zui da tiao zhan 。jian yu ci ,ben yan jiu tong guo jian ce zhu qun zhong IgGhe IgMkang ti de dong tai bian hua gui lv ,fa xian PCV2te yi xing IgMkang ti de cun zai shi jian he cun zai zhuang tai zai ou fen yi miao mian yi he bing du gan ran fang mian fa hui chong yao zuo yong ,ji yu ci ,fen bie jian li le ji yu SPGde jian ce PCV2 IgGkang ti de bu huo ELISAhe yi kang zhu IgMduo kang wei bu huo kang yuan de jian ce PCV2 IgMkang ti de bu huo ELISAfang fa ,zeng ge liang chong kang ti zhen duan fang fa de pan ding jie guo ke wei pan duan zhu qun gan ran zhuang tai he yi miao jie chong shi ji di gong ke xue zhi dao 。yan jiu nei rong ke fen wei yi xia san ge bu fen :1.fen xi PCV2gan ran he mian yi hou zhu qun chan sheng de IgGhe IgMkang ti xiao chang gui lv li yong PCV2shang pin hua mie huo yi miao he xi bao fen li du zhu fen bie mian yi he gan ran kang ti yin xing zhu ,jie chong hou ding ji cai ji wai zhou xie bing fen li xie qing ,jin kou shi ji he INGEZIM IgG/IgM Kitjian ce xie qing yang pin 。tong guo jian ce kang ti de xiao chang bian hua ,fa xian mian yi he gan ran hou IgMkang ti shou xian chan sheng ,sui hou zhuai bian wei IgGkang ti ,ju chi xu cun zai ;ren gong gan ran PCV2xi bao du chan sheng de IgMcun zai shi jian wei 20-30 d,zi ran gan ran (gan ran zu de yang xing dui zhao )chan sheng de IgMchi xu 55 d,er jie chong mie huo yi miao de mian yi zu IgMde cun zai shi jian bu chao guo 14 d。PCV2 IgMkang ti chan sheng te dian ke yi you hua mian yi cheng xu ,ou fen bing du gan ran he yi miao mian yi ,shou xian mian yi qian ying gai bi kai IgMkang ti yang xing ji ;mian yi hou re IgMkang ti bian wei yin xing ,zai xia ci jie chong yi miao zhi qian re jian ce jie guo wei yang xing ,na me bi ding chu xian le xin yi lun de PCV2gan ran ,ci shi bu jian yi zhui jia mian yi 。2.ji yu SPGjian li jian ce PCV2 IgGde bu huo ELISAtong guo bi jiao SPA、SPGhe PPLsan chong mian yi qiu dan bai jie ge dan bai zuo wei bu huo kang yuan 、HRPbiao ji de PCV2 Capzuo wei er kang de bu huo fa ELISA,que ding SPGwei bao bei kang yuan ,you hua fan ying tiao jian ,hui zhi ROCqu xian que ding lin jie zhi (cut-off point,cut-offzhi )wei 0.61,ci shi dui ying de min gan xing he te yi xing fen bie wei 93.9%he 90.3%。187li lin chuang yang ben de jian ce jie guo xian shi ,gai fang fa yu shang ye hua de INGEZIM Circovirus IgG Kitde zong fu ge lv wei 96.23%。3.jian li bu huo ELISAjian ce PCV2 IgMkang ti yi tu kang zhu native IgMgao mian xie qing zuo bao bei kang yuan ,HRPbiao ji de R2346zuo wei er kang ,jian li jian ce zhu kang PCV2IgMkang ti de ELISAfang fa 。you hua gai fang fa de zui jia fan ying tiao jian hou ,hui zhi ROCqu xian pan ding cut-offzhi wei 0.492,dui ying de min gan xing he te yi xing fen bie wei 96.7%he 97.2%;jian ce tian jian xie qing yang pin IgMyu INGEZIM IgM Kitshi ji he fu ge lv wei 92.7%。ben yan jiu fen bie jian li jian ce PCV2 IgGhe IgMkang ti de bu huo ELISA,wei you hua yi miao mian yi cheng xu 、PCV2de zao ji kuai su zhen duan he ou fen bing du gan ran he yi miao mian yi di gong le jian chan you xiao de tu jing ,wei jin yi bu kong zhi PCV2zai zhu chang zhong de liu hang chuan bo di gong le ke kao yi ju 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自中国农业科学院的高雪，发表于刊物中国农业科学院2019-07-05论文，是一篇关于猪圆环病毒型论文,免疫球蛋白论文,免疫球蛋白论文,酶联免疫吸附试验论文,感染和免疫论文,中国农业科学院2019-07-05论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自中国农业科学院2019-07-05论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
标签：猪圆环病毒型论文; 免疫球蛋白论文; 酶联免疫吸附试验论文; 感染和免疫论文; 中国农业科学院2019-07-05论文;