导读:本文包含了脂类水解酶论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:地衣芽孢杆菌,羽毛脂质,角蛋白,脂类水解酶
脂类水解酶论文文献综述
李爽[1]（2017）在《角蛋白降解菌地衣芽孢杆菌CP-16脂类水解酶的研究》一文中研究指出家禽羽毛富含角蛋白是一种丰富的蛋白质资源,因其组成与结构的特殊性难于被动物消化利用。羽毛表层覆盖致密的疏水脂质层,形成羽毛与外界环境物质接触的屏障。内层为富含大量二硫键、氢键、疏水基团,结构稳定、不易降解的角蛋白。破坏羽毛表层脂质,增加蛋白酶与角蛋白结合,可加快羽毛降解速度。本论文通过对羽毛高效降解菌株地衣芽孢杆菌(B.licheniformis)CP-16脂类水解酶对羽毛表层脂质水解的研究,探究脂类水解酶与角蛋白酶协同关系及其在微生物降解角蛋白中的作用。B.licheniformis CP-16脂类水解酶基因在大肠杆菌中表达。在Uniprot中搜集B.licheniformis中脂类水解酶的3个酶蛋白核酸序列,根据序列设计引物,以B.licheniformis CP-16基因组DNA为模板,扩增脂类水解酶基因L-4,L-6,L-7,大小分别为747 bp,783 bp,897 bp。成功构建载体pET-22b-L-4、pET-22b-L-6、pET-22b-L-7。在大肠杆菌中表达、纯化,获得3种重组酶蛋白。重组酶L-4、L-6、L-7酶学性质研究。重组酶L-4的最适pH为6.5,最适温度为50℃,在pH 6.5~9.5、温度低于55℃的范围内酶活稳定,Fe~(2+)、Na~+、Mn~(2+)、Ca~(2+)(10 mmol/L)对其活性有促进作用。该酶在甲醇和二甲基亚砜(DMSO)中保存,活性可保留85%、97%,但其它有机溶剂的抑制作用明显。重组酶L-6的最适pH为7.5,最适温度为45℃,pH稳定性和温度稳定性相对较差,Zn~(2+)、Cu~(2+)、Fe~(3+)(10 mmol/L)对酶活性有明显的抑制作用,其他金属离子对酶活性无影响。该酶在甲醇和DMSO中活性可保留69%、61%。重组酶L-7的最适pH为6.0,最适温度为50℃,pH稳定性和温度稳定性均与L-4基本一致,Fe~(2+)、Mg~(2+)、Mn~(2+)、Ba~(2+)(10 mmol/L)对酶活性具有促进作用,在DMSO中活性无损失。脂类水解酶基因L-4、L-7在巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)中的表达及其应用。对两种酶学性质较好的脂类水解酶基因进行优化,构建了野生型(pPICZαA-PL-4、pPICZαA-PL-7)和优化型(pPICZαA-PL-4-opt、pPICZαA-PL-7-opt)4种质粒,经限制性内切酶SacI线性化后电转化入毕赤酵母X-33。优化后二者酶活分别提高了38.09%,12.16%。对优化后重组酶PL-4-opt,PL-7-opt制备冻干粉,酯酶酶活分别为1.42 U/g、37.85 U/g,脂肪酶酶活分别为85.26 U/g、213.16U/g。重组酶PL-4-opt,PL-7-opt预处理天然羽毛底物,促进角蛋白酶K对底物的水解作用,促进率分别为4.32%、19.30%。脂类水解酶降解羽毛表层脂质,提高角蛋白酶水解羽毛角蛋白的效率。(本文来源于《中国农业科学院》期刊2017-05-01）
王巧煌[2]（2016）在《米根霉脂类水解酶基因的克隆、表达及性质研究》一文中研究指出脂类水解酶是一种能够催化酯类化合物水解和合成的一类酶,广泛应用于食品、洗涤剂、材料合成等领域。米根霉来源的脂类水解酶具有良好的1、3位置专一性和立体选择性,在酯类物质制备、生物柴油生产及手性物质的合成中具有很高的应用价值。本研究从米根霉中克隆出12个脂类水解酶基因,并对其进行了生物信息学分析;实现了其中6个基因在毕赤酵母中的分泌表达,对重组酶进行了初步的酶学性质研究;并对其中两个重组酶进行了纯化和详细的酶学性质研究。主要研究结果如下:1、以米根霉基因组DNA或cDNA为模板,共克隆出12个具有完整开放读码框的米根霉脂类水解酶基因,其所编码的蛋白氨基酸数目为210～502,与NCBI数据库中已知脂类水解酶的最高一致性范围为35～100%。2、将以上12个基因分别构建毕赤酵母的pPICZa-C表达载体,并将其电转入毕赤酵母X33中进行诱导和酶活测定;其中基因rol-428、rol-9852、rol-9898、rol-14195、rol-14186和rol-9910能够成功表达;对这6个重组酶的粗酶性质进行测定,结果如下:其最适作用底物分别为pNPC16、pNPC10、pNPC4、pNPC8、pNPC8、pNPC8,最适反应pH为7.5～9.5,最适反应温度为20～40℃,在0℃均具有一定的酶活力;在这6个重组酶中,rRol-9852的酶活最高,其次是rRol-9898。3、大量诱导重组酶rRol-9852,并对其进行分离纯化和酶学性质研究。结果如下:rRol-9852的最适作用底物为pNPC1o,比活为451.82 U/mg;最适反应pH为7.5,最适反应温度为20℃,在0℃时仍有23%左右的酶活力,在pH6.0～9.0和温度≤45℃时较稳定;在最适条件下,rRol-9852对底物pNPC10的Km为0.375 mmol/L,Vmax为560.54 μmol/(mg.min),且低浓度的甲醇、丙叁醇、Li+、Ag+、Ca2+、Ni2+、EDTA 对其具有一定的激活作用。4、大量诱导重组酶rRol-9898,并对其进行分离纯化和酶学性质研究。结果如下:rRol-9898的最适作用底物为pNPC4,比活为117.90U/mg;最适反应pH为8.0,最适反应温度为20℃,在0℃时仍有25%左右的酶活力,在pH6.0～8.0和温度≤35℃时较稳定;在最适条件下,rRol-9898对底物pNPC4的Km为1 mmol/L,Vmax为357.14μmol/(mg·min),且对低浓度的丙醇、丙酮、丙叁醇、Li+、Ag+、K+、Ca2+、Ni2+、Cu2+、EDTA具有一定的抗性。本课题从米根霉中克隆出12个脂类水解酶基因,并在毕赤酵母中实现其中6个基因的表达,初步性质研究表明这6个重组酶的酶学性质具有较大的差异。该研究可为米根霉脂类水解酶的深入研究及其后续的工业应用奠定基础。(本文来源于《福州大学》期刊2016-06-01）
曹远林,彭友良,李振岐[3]（2000）在《活性氧和脂类酰基水解酶与稻瘟病菌侵染稻叶中糖脂减少的关系研究》一文中研究指出植物—病原互作中出现的过敏性反应、茉莉酸及其甲酯的合成和植保素积累在植物的抗病反应中具有重要意义.已有的资料表明,活性氧和脂氧合酶对膜脂的过氧化和脱酯化作用与植物的抗病反应有关,但是对体内的膜脂的降解作用,脂类酰基水解酶活性的诱导和脂氧合酶的底物来源等研究却很少.稻叶受非亲性稻瘟菌的侵染后,引起全脂尤其是糖脂的减少,同时(本文来源于《第五届全国自由基生物学与自由基医学学术讨论会论文摘要汇编》期刊2000-10-01）
脂类水解酶论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
脂类水解酶是一种能够催化酯类化合物水解和合成的一类酶,广泛应用于食品、洗涤剂、材料合成等领域。米根霉来源的脂类水解酶具有良好的1、3位置专一性和立体选择性,在酯类物质制备、生物柴油生产及手性物质的合成中具有很高的应用价值。本研究从米根霉中克隆出12个脂类水解酶基因,并对其进行了生物信息学分析;实现了其中6个基因在毕赤酵母中的分泌表达,对重组酶进行了初步的酶学性质研究;并对其中两个重组酶进行了纯化和详细的酶学性质研究。主要研究结果如下:1、以米根霉基因组DNA或cDNA为模板,共克隆出12个具有完整开放读码框的米根霉脂类水解酶基因,其所编码的蛋白氨基酸数目为210～502,与NCBI数据库中已知脂类水解酶的最高一致性范围为35～100%。2、将以上12个基因分别构建毕赤酵母的pPICZa-C表达载体,并将其电转入毕赤酵母X33中进行诱导和酶活测定;其中基因rol-428、rol-9852、rol-9898、rol-14195、rol-14186和rol-9910能够成功表达;对这6个重组酶的粗酶性质进行测定,结果如下:其最适作用底物分别为pNPC16、pNPC10、pNPC4、pNPC8、pNPC8、pNPC8,最适反应pH为7.5～9.5,最适反应温度为20～40℃,在0℃均具有一定的酶活力;在这6个重组酶中,rRol-9852的酶活最高,其次是rRol-9898。3、大量诱导重组酶rRol-9852,并对其进行分离纯化和酶学性质研究。结果如下:rRol-9852的最适作用底物为pNPC1o,比活为451.82 U/mg;最适反应pH为7.5,最适反应温度为20℃,在0℃时仍有23%左右的酶活力,在pH6.0～9.0和温度≤45℃时较稳定;在最适条件下,rRol-9852对底物pNPC10的Km为0.375 mmol/L,Vmax为560.54 μmol/(mg.min),且低浓度的甲醇、丙叁醇、Li+、Ag+、Ca2+、Ni2+、EDTA 对其具有一定的激活作用。4、大量诱导重组酶rRol-9898,并对其进行分离纯化和酶学性质研究。结果如下:rRol-9898的最适作用底物为pNPC4,比活为117.90U/mg;最适反应pH为8.0,最适反应温度为20℃,在0℃时仍有25%左右的酶活力,在pH6.0～8.0和温度≤35℃时较稳定;在最适条件下,rRol-9898对底物pNPC4的Km为1 mmol/L,Vmax为357.14μmol/(mg·min),且对低浓度的丙醇、丙酮、丙叁醇、Li+、Ag+、K+、Ca2+、Ni2+、Cu2+、EDTA具有一定的抗性。本课题从米根霉中克隆出12个脂类水解酶基因,并在毕赤酵母中实现其中6个基因的表达,初步性质研究表明这6个重组酶的酶学性质具有较大的差异。该研究可为米根霉脂类水解酶的深入研究及其后续的工业应用奠定基础。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
脂类水解酶论文参考文献
[1].李爽.角蛋白降解菌地衣芽孢杆菌CP-16脂类水解酶的研究[D].中国农业科学院.2017
[2].王巧煌.米根霉脂类水解酶基因的克隆、表达及性质研究[D].福州大学.2016
[3].曹远林,彭友良,李振岐.活性氧和脂类酰基水解酶与稻瘟病菌侵染稻叶中糖脂减少的关系研究[C].第五届全国自由基生物学与自由基医学学术讨论会论文摘要汇编.2000