导读:本文包含了间质微血管论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:结肠癌,Dickkopf-3,组织芯片,免疫组化
间质微血管论文文献综述
杨子荣,刘城,丁丽敏,张孟,于庆功[1]（2019）在《Dickkopf-3在结肠癌间质微血管和肿瘤细胞中的表达及其临床意义》一文中研究指出目的探讨Dickkopf-3(DKK-3)在结肠癌间质微血管内皮细胞和肿瘤细胞中的表达及其临床意义。方法采用人体组织芯片技术和免疫组织化学SP法检测133例人结肠癌组织和10例人非癌结肠黏膜组织中DKK-3的表达,并分析其与结肠癌临床病理特征的关系。结果 DKK-3在结肠癌间质微血管内皮细胞和肿瘤细胞中表达阳性率分别为72.93%(97/133)和41.35%(55/133)。DKK-3在10例非癌结肠黏膜组织间质微血管内皮细胞中均不表达,而在正常组织细胞中8例表达为阳性。结肠癌间质微血管内皮细胞中DKK-3的表达与其分化程度相关(P<0.05),而与性别、年龄、TNM分期、浸润深度及淋巴结转移无关(P>0.05)。结肠癌肿瘤细胞中DKK-3的表达与其TNM分期、浸润深度及淋巴结转移相关(P<0.05),而与性别、年龄及分化程度无关(P>0.05)。结论 DKK-3在结肠癌肿瘤细胞中的低表达与结肠癌的TNM分期、浸润深度及淋巴结转移相关,可能作为一种新的肿瘤分期和判断预后的标志物,有望成为结肠癌治疗的新靶点。DKK-3在结肠癌间质微血管内皮细胞和肿瘤细胞中不同的表达模式提示DKK-3可能在两者中具有不同的功能,这有待进一步的研究。(本文来源于《中国实验诊断学》期刊2019年03期）
秦越[2]（2018）在《肺腺癌间质中癌相关成纤维细胞、微血管密度、淋巴管密度的表达水平与患者生存预后的分析》一文中研究指出研究目的:本文主要研究肺腺癌间质中被α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)染色的肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)与肿瘤间质中微血管密度(MVD)、淋巴管密度(LVD)的关系,及CAFs对肺腺癌患者总生存期(OS)和无进展生存期(PFS)的影响。研究方法:本研究共选择125例肺腺癌标本作为研究对象,均来自于2010年1月1日到2011年6月31日于青岛市市立医院胸外科行肺切除术的患者,所有患者术前未经辅助治疗,且术后均有明确的病理学诊断。操作中标本破坏3例,失访及随访信息缺乏病人29例,最终实际入选93例,其中男性为60例,女性为33例。按照国际抗癌联盟(UICC)制定的肿瘤分期标准将93例患者进行TNM分期,I期27例,Ⅱ期35例,Ⅲ期31例。以α-SMA标记CAFs,D2-40标记LVD,CD34标记MVD。所选病例的组织切片分别进行鼠抗人α-SMA单克隆抗体、鼠抗人原始造血细胞(CD34)单克隆抗体、鼠抗人D2-40单克隆抗体的免疫组织化学法染色。首先两名病理科医师采用双盲法分别计数,出现两名医师所得结果不一致时,请第叁名病理科主任医师重新计数。将CAFs样本按其密度分为CAFs富集组和CAFs缺乏组,随机选取5张染色后的切片,每张切片于镜下随机选取5个400倍视野进行拍照,分别计数样本中阳性细胞个数及间质细胞个数,α-SMA+细胞个数占总间质细胞个数的百分比称阳性率,阳性率大于等于40%定义为CAFs富集组,即CAFs密集分布在肿瘤上皮组织且与肺腺癌组织无明显边界;小于40%定义为CAFs缺乏组,即CAFs分散在整个肿瘤区域。对于微血管的要求定义为细胞胞质或胞膜染色后呈现的黄色细颗粒,且与周边环境内肿瘤细胞及结缔组织成分有明显分界,即为阳性表达。定位明确、染色明显,有平均10个以上细胞染色的组织切片视为阳性,而染色弱或未成功染色者为阴性。对于淋巴管的要求定义为由内皮细胞形成腔隙状、条状等单独或成簇状的棕黄染色管腔,且与周边其他组织存在有较为明确界限的,即为淋巴管。通过D2—40阳性着色的单个或成簇内皮细胞计数为1个淋巴管,管腔<8个红细胞大小按1条淋巴管计数。以上两者分别确定3个最密集的着色区域,并通过高倍镜视野进行计数从而使评估更精确,计数结果取3个视野的均值来确定LVD、MVD值,分辨不清或颜色模糊的细胞不计数。相差10%以上重新计数。在本研究中对所选取的所有93例术后患者进行规范的密切的跟随访查,所有病人随访至死亡或疾病进展并使用统计学方法来评估其生存率。本研究中全部数据采用SPSS 20.0软件进行数据处理,应用卡方检验、Logistic回归统计分析临床病理参数与免疫组化染色结果间的相关性,Kaplan-Meier法、Cox比例风险模型分别用于进行单因素、多因素生存分析,通过Log-rank检验来比较生存率差异。P<0.05为差异有统计学意义。结果:α-SMA的表达主要定位于细胞浆和细胞膜内,以50%作为分界点,93例肺腺癌患者中CAFs丰富组即α-SMA高表达组为72例,CAFs贫乏组即α-SMA低表达组为21例;肺腺癌间质内α-SMA、MVD、LVD的表达与肺腺癌患者的年龄、肿瘤大小、分化程度、临床分期及是否有转移明显相关,差异有统计学意义(P<0.05);与肺腺癌患者的性别、肿瘤部位、吸烟史均无明显相关,差异无统计学意义(P>0.05);肺腺癌患者间质内α-SMA高表达组的MVD、LVD相比较于间质内α-SMA低表达组的MVD高,LVD与MVD之间存在相关性,此差异存在统计学意义(P﹤0.05)。肺腺癌患者中,CAFs缺乏组的3年生存率为64.5%,大大高于CAFs富集组(41.9%);年龄、临床分期、α-SMA、CD34、D2-40、肿瘤直径、分化程度、淋巴结是否转移对肺腺癌患者OS有影响,差异有统计学意义(P<0.05);而性别、吸烟史、肿瘤部位对其OS影响不大(P>0.05)。Cox多因素生存分析结果示:临床分期为OS的独立预后因素,其差异有统计学意义(P<0.05)。结论及意义:本研究表明肺腺癌间质中CAFs、LVD、MVD叁者之间相互影响,且与肺腺癌患者的预后呈明显负相关。肺腺癌间质内的CAFs是肺腺癌患者不良预后的重要影响因素,在肺腺癌的发生、发展及转移等方面起到了重要作用。(本文来源于《青岛大学》期刊2018-05-19）
李卫卫,王晓红,马宏[3]（2018）在《UUO幼年大鼠肾间质微血管损伤趋势及其相关分子特征》一文中研究指出目的:探讨单侧输尿管结扎模型(UUO)幼年大鼠肾间质纤维化过程中局部微血管损伤趋势及其特征分子血小板反应蛋白(TSP-1)与血管内皮生长因子(VEGF)组织定位表达和时相表达的趋势、潜在的病理意义,并评价用血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)苯那普利干预的效应。方法:制备单侧输尿管结扎模型(UUO模型);分为正常对照组、UUO模型组、UUO模型治疗组;以术后第1、2、3、4周为时间点,取病变肾脏石蜡包埋并切片;HE染色评价肾组织常规病理变化,免疫组化方法检测大鼠肾组织CD34、TSP-1、VEGF的表达。用SPSS13.0统计软件进行统计学处理。结果:随试验时间的延长,CD34及VEGF在UUO模型组肾组织中表达量及面积显着减少(P<0.01),TSP-1在UUO模型组肾组织中表达量及面积显着增加(P<0.01),干预组这种变化趋势明显减缓。结论:在幼年大鼠梗阻性肾间质纤维化进展中,存在着肾间质微血管的损伤,这种损伤可能与VEGF和TSP-1对肾小管周围毛细血管调控作用失衡有关。早期应用ACEI干预可有效延缓肾间质纤维化的进程。(本文来源于《中国中西医结合肾病杂志》期刊2018年02期）
王子杰[4]（2018）在《肾微血管内皮细胞转分化在移植肾间质纤维化形成中的作用及肝细胞生长因子的干预研究》一文中研究指出背景:肾移植是治疗终末期肾病的最佳方法。然而,随着外科技术及新型免疫抑制剂的不断发展,肾移植术后远期移植肾的存活率并未得到显着提升。慢性移植肾失功(Chronic allograft dysfunction,CAD)是影响远期移植肾存活率的主要因素,而慢性移植肾间质纤维化是引起CAD的决定性因素,但其机制尚不完全清楚。血管内皮细胞向间充质细胞转分化(Endothelial-to-mesenchymal transition,End MT)近来被证实可引起多种组织纤维化形成。本研究探讨了肾微血管End MT在慢性移植肾间质纤维化形成中的作用及分子机制,以及肝细胞生长因子(Hepatocyte growth factor,HGF)对其的影响和可能机制。方法:首先,从脐带中提取原代人脐静脉内皮细胞(Human umbilical vein endothelial cells,HUVECs),采用倒置显微镜下细胞形态观察和CD31间接免疫荧光染色的方法鉴定该细胞。其次,使用重组人转化生长因子-β1(Transforming growth factor-β1,TGF-β1)细胞因子体外刺激原代HUVECs,采用蛋白质印迹法(Western Blot assay)法和实时荧光定量聚合酶链反应(Quantitative real-timepolymerase chain reaction,q RT-PCR)法检测与肾微血管End MT过程相关标志物【α-平滑肌肌动蛋白(α-smoothing muscular actin,α-SMA),血管内皮钙粘蛋白(VE-Cadherin),CD31和胶原蛋白-Ⅰ(Collagen-Ⅰ)】的表达,并用酶联免疫吸附实验、细胞划痕实验和细胞侵袭实验探究其对内皮细胞功能的影响。接下来,采用各种特异性细胞内信号转导通路抑制剂探索TGF-β1体外诱导肾微血管End MT过程的相关机制,并在诊断为CAD患者的移植肾组织中进一步验证上述实验结果。最后,为探索HGF在移植肾间质纤维化形成过程中的作用及可能机制,我们采用HGF和/或TGF-β1体外刺激原代HUVECs和人肾小球内皮细胞(Human umbilical vein endothelial cells,HRGECs)株,收集细胞,采用Western Blot法与q RT-PCR法检测肾微血管End MT过程相关标志物的表达;并采用酶联免疫吸附实验、细胞划痕和细胞侵袭实验探究其对内皮细胞功能的影响。并采用各种特异性细胞内信号转导通路抑制剂预处理细胞,探索HGF对TGF-β1诱导肾微血管End MT过程影响的相关机制。此外,本研究还在同种异体肾移植大鼠慢排模型中验证上述实验结果。结果:TGF-β1在原代HUVECs细胞中显着提高α-SMA和Collagen-Ⅰ的表达,显着抑制VE-Cadherin和CD31的表达,且这一现象呈现浓度和时间依赖性;TGF-β1还可显着提升HUVECs细胞分泌细胞外基质的能力以及细胞迁徙和侵袭的能力。进一步体外实验表明,TGF-β1可通过激活TGF-β/Smad和Akt/m TOR/p70S6K信号通路诱导HUVECs发生End MT现象,而这一分子机制在人移植肾间质纤维化的肾组织中也得到了证实。此外,给予HGF处理则可在HUVECs和HRGECs两种血管内皮细胞中显着抑制由TGF-β1介导的End MT过程,且这种作用也呈现出浓度依赖性方式;HGF还可显着减轻由TGF-β1诱导的血管内皮细胞分泌细胞外基质、细胞迁徙和侵袭能力增强的现象;且进一步体外实验表明HGF是通过抑制TGF-β/Smad和Akt/m TOR/p70S6K信号通路活性进而发挥其抑制TGF-β1诱导的肾微血管End MT进程这一作用的。而且,在同种异体大鼠肾移植慢排模型中,我们的研究也证实HGF质粒可通过上述机制显着抑制移植肾间质纤维化的发生,进而延缓CAD的发生与发展。结论:肾微血管End MT过程存在于慢性移植肾间质纤维化发生和CAD发展过程中,并起到重要作用:TGF-β1可通过激活TGF-β/Smad和Akt/m TOR/p70S6K信号通路诱导肾微血管End MT发生,进而参与慢性移植肾间质纤维化的发生和发展;而HGF则可通过抑制TGF-β/Smad和Akt/m TOR/p70S6K信号通路活性阻断由TGF-β1介导的肾微血管End MT过程,从而减缓慢性移植肾间质纤维化及CAD的发生发展。(本文来源于《南京医科大学》期刊2018-01-01）
杨子萱[5]（2017）在《IgG4相关肾小管间质肾炎合并血栓性微血管病肾损伤1例》一文中研究指出患者男性,62岁,因无明显诱因胸闷、心悸入院。入院后血压范围180/100~200/130 mmHg。实验室检查:血红蛋白浓度74 g/L,血肌酐1 067μmol/L,尿素氮46.2 mmol/L,白蛋白33.9 g/L,尿蛋白定量587 mg/24 h,尿微量白蛋白127 mg/L,尿微量白蛋白/尿肌酐19.9 mg/mL,乳酸脱氢酶LDH 261 U/L;血Ig M 0.10 g/L,IgA、IgG正常;自身抗体谱、(本文来源于《临床与实验病理学杂志》期刊2017年12期）
邹晋[6]（2017）在《自噬对缺氧诱导心脏微血管内皮细胞间质转分化和梗死后心肌纤维化的调控及机制》一文中研究指出第一部分自噬对缺氧诱导的心肌微血管内皮细胞间质转分化的调节及机制目的:1、研究缺氧对人心脏微血管内皮细胞(human cardiac microvascular endothelial cells,HCMECs)间质转分化(endothelial-to-mesenchymal transition,EndMT)及自噬的影响;2、研究自噬对缺氧诱导的HCMECs EndMT的影响及具体机制。方法:1、探究缺氧状态下对HCMECs EndMT的影响。实验主要分为2组(1)control组:常氧(21%O2、5%CO2、74%N2,37℃)条件下培养HCMECs3天;(2)hypoxia组:缺氧(1%O2、5%CO2、74%N2,37℃)条件下培养HCMECs3天,分别对两组细胞进行如下实验:⑴光学显微镜下观察两组细胞形态学变化;⑵RT-PCR测定各组细胞中CD31、E-cadherin、αSMA、FSP-1及Snail mRNA相对表达水平;⑶Western blot测定两组细胞CD31、E-Cadherin、ɑSMA、FSP-1、Snail蛋白表达水平;⑷双重免疫荧光染色观察CD31、αSMA及FSP-1表达变化及并对CD31+αSMA+/FSP+双阳性细胞(说明正在发生EndMT的细胞)和CD31-SMA+/FSP+细胞(说明已经发生EndMT的细胞)计数分析。2、探究缺氧状态下HCMECs自噬水平的变化。⑴HCMECs缺氧3天内LC3蛋白的表达动态变化,通过Western blot法测定HCMECs缺氧0,2,4,6,12,24,48,72 h处LC3表达变化;⑵将细胞分为以下4组:(1)control组:常氧条件下培养HCMECs;(2)氯喹(Chloroquine,CQ)(20μm)组:常氧条件下加入氯喹处理HCMECs 8小时;(3)hypoxia组:缺氧条件下培养HCMECs 6小时;(4)hypoxia+CQ(20μm)组:常氧条件用氯喹处理HCMECs 2小时,缺氧培养6小时;Western blot法分别测定各组LC3表达变化;⑶转染GFP-LC3质粒的HCMECs在缺氧3天内GFP-LC3表达动态变化,通过激光共聚焦观察HCMECs缺氧0,2,6,12,24,36,48,72 h处GFP-LC3表达变化。3、探究缺氧状态下自噬对HCMECs EndMT的影响及相关机制。实验主要分为以下5组(1)control组:常氧条件下培养HCMECs 3天;(2)hypoxia组:缺氧条件下培养HCMECs 3天;(3)hypoxia+雷帕霉素(rapmycin,rap)(100nm)组:雷帕霉素预处理细胞2小时,后将HCMECs置于缺氧条件下培养3天;(4)hypoxia+3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA)(5mm)组:3-MA预处理细胞2小时,后将HCMECs置于缺氧条件下培养3天;(5)hypoxia+CQ(20μm)组:氯喹预处理细胞2小时,后将HCMECs置于缺氧条件下培养3天。分别对各组细胞进行如下实验:⑴双重免疫荧光染色观察CD31及αSMA表达变化并对CD31+αSMA+双阳性细胞和CD31-SMA+细胞计数分析;激光共聚焦显微镜下观察Snail及LC3在HCMECs的共定位;⑵RT-PCR测定各组细胞中CD31、E-Cadherin、αSMA、FSP-1、Snail、TGFβ2、Smad2及Smad3的mRNA表达水平并比较分析;⑶Western blot测定各组细胞中CD31、E-cadherin、αSMA、FSP-1、Snail、LC3、beclin1、TGFβ2、Smad2、p-Smad2、Smad3及p-Smad3蛋白表达并比较分析。结果1、缺氧诱导HCMECs发生EndMT:⑴光学显微镜可见:control组HCMECs保持典型的铺路石或鹅卵石样内皮细胞样外观;而缺氧状态下细胞逐渐呈纺锤型样变化,且随时间变化愈明显。⑵RT-PCR结果显示:与control组相比,hypoxia组HCMECs的CD31、E-cadherin mRNA表达下降,而αSMA、FSP-1及Snail mRNA表达升高(P<0.05)。⑶Western blot结果显示:与control组相比,hypoxia组HCMECs的CD31、E-cadherin蛋白表达下降,而αSMA、FSP-1及Snail蛋白表达升高(P<0.05)。⑷双重免疫荧光染色结果显示:与control组相比,hypoxia组HCMECs中CD31表达逐渐减弱,αSMA/FSP-1强度逐渐增强,CD31+αSMA+/FSP+双阳性细胞明显增加甚至出现CD31-SMA+/FSP+细胞(P<0.05)。2、缺氧诱导HCMECs发生EndMT:⑴Western blot结果显示:当HCMECs缺氧培养3天时,在4小时处LC3-I向LC3-II转化增加,12至24小时达高峰,随着缺氧时间延长略有下降(P<0.05)。⑵western blot结果示:相比于control组,hypoxia组和CQ组LC3 II增加,氯喹使缺氧状态下LC3 II增加更显着(P<0.05)。⑶GFP-LC3斑点聚集试验结果示:当HCMECs缺氧培养3天时,GFP-LC3荧光表达在约4-6小时开始开始由弥撒分布向聚集颗粒状转变,12小时至24小时这种聚集状态升至高峰,随着缺氧时间延长这种聚集改变下降,但仍高于对照组水平(P<0.05)。3、缺氧状态下自噬对HCMECs EndMT的影响及相关机制:⑴双重免疫荧光染色结果显示:相比hypoxia组,hypoxia+rap组CD31表达强度增加,αSMA表达强度下降,而hypoxia+3-MA/CQ组CD31表达强度进一步下调,αSMA表达强度进一步增加。相比control组,hypoxia组Snail和LC3表达强度增加;相比hypoxia组,hypoxia+rap组LC3表达强度进一步增加和Snail表达强度下降,hypoxia+3-MA组LC3表达强度下降和Snail表达强度增加,hypoxia+CQ组LC3和Snail表达强度都进一步增加(P<0.05)。⑵RT-PCR结果显示:相比hypoxia组,hypoxia+rap组TGFβ2、smad2、smad3及Snail mRNA表达未见明显改变,CD31、E-cadherin mRNA表达上调,αSMA、FSP-1表达下调(P<0.05),hypoxia+3-MA/CQ组TGFβ2、smad2、smad3及Snail mRNA表达未见明显改变,CD31、E-cadherin mRNA表达下降,αSMA、FSP-1表达上调(P<0.05)。⑶Western blot结果显示:雷帕霉素增加了缺氧状态下自噬相关蛋白LC3,beclin1的表达,抑制了缺氧诱导的CD31、E-cadherin的下调及αSMA、FSP-1、Snail的上调,3-MA和氯喹抑制了缺氧状态下自噬的发生,进一步促进了缺氧引起的CD31、E-cadherin的下调及αSMA、FSP-1、Snail的上调(P<0.05)。缺氧状态下,TGFβ2、p-smad2和p-smad3表达上调(P<0.05);相比hypoxia组,缺氧联合雷怕霉素、3-MA或氯喹后TGFβ2、p-smad2和p-smad3表达均未见明显改变。结论1、缺氧能同时诱导HCMECs发生EndMT及自噬;2、缺氧可通过激活TGF-β信号通路引起EndMT;3、缺氧诱导的自噬对内皮细胞具有保护性作用,可通过促进Snail降解抑制EndMT。第二部分自噬对心肌梗死后EndMT及心肌纤维化的调节及机制目的:探讨在急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)后,通过干预自噬水平抑制EndMT进而减少心肌纤维化的的可行性。方法:取10周龄SD大鼠随机分为以下4组(1)Sham组:不对大鼠冠状动脉前降支进行结扎处理,余处理同AMI组;(2)AMI组:对大鼠冠状动脉前降支进行结扎处理;(3)AMI+rap(2 mg/kg/day):对大鼠冠状动脉前降支进行结扎处理,随即腹腔注射雷帕霉素,每天一次,持续14天;(4)AMI+3-MA(15 mg/kg/day):对大鼠冠状动脉前降支进行结扎处理,随即腹腔注射3-MA,每天一次,持续14天;分别对各组大鼠在各时间点进行如下实验:⑴心肌梗死14天后心脏彩超观察各组大鼠LVEF、LVFS、LVIDd及LVIDs变化并比较分析;⑵心肌梗死14天后Masson’s trichrome染色检测各组大鼠心肌胶原纤维化面积并比较分析;⑶心肌梗死7天后Western blot测定各组大鼠左室心肌梗死区域CD31、αSMA、COL1、LC3、beclin1的表达水平及比较分析;⑷心肌梗死7天后对左室心肌梗死区域双重免疫荧光染色观察CD31+αSMA+双阳性细胞及血管内皮细胞LC3的表达水平。结果:⑴大鼠心脏彩超结果显示:SD大鼠心肌梗死14天后,LVIDd、LVIDs扩大,LVEF、LVFS减低;雷帕霉素抑制心肌梗死后LVIDd、LVIDs的扩大及LVEF、LVFS减低(P<0.05);3-MA并不能改善心肌梗死后心功能。⑵Masson’s trichrome染色结果显示:SD大鼠心肌梗死14天后,左室梗死区域纤维化显着;雷帕霉素显着减少心肌梗死后心肌纤维化面积;3-MA显着增加心肌梗死后心肌纤维化面积(P<0.05)。⑶左室心肌梗死区域western blot结果显示:LC3-II在心肌梗死后1天内显着上升,而后表达逐渐减低;心肌梗死7天后,CD31表达下降,αSMA、COL1表达增加,LC3、beclin1未见明显改变;雷帕霉素增加了LC3及beclin1的表达,显着抑制了心肌梗死后的CD31表达下降和αSMA、COL1表达增加;3-MA降低了LC3及beclin1的表达,进一步促进了心肌梗死后的CD31表达下降和αSMA、COL1表达增加(P<0.05)。⑷左室心肌梗死区域双重免疫荧光染色结果显示:CD31+/αSMA+双阳性细胞在心肌梗死后第7天明显上升,雷帕霉素可明显减少心肌梗死后CD31+/αSMA+双阳性细胞,3-MA可增加心肌梗死后CD31+/αSMA+双阳性细胞(P<0.05);心肌梗死后CD31阳性内皮细胞LC3表达变化改变不明显,雷帕霉素可增加心肌梗死后CD31阳性内皮细胞LC3表达水平,3-MA可减低心肌梗死后CD31阳性内皮细胞LC3表达水平(P<0.05)。结论:EndMT促进了心肌梗死后的心肌纤维化,而提高心肌梗死后的自噬水平可抑制EndMT,减轻心肌纤维化,改善心功能。(本文来源于《南昌大学》期刊2017-05-31）
鞠延玲,朱国伟,赵旭,臧雪莲[7]（2016）在《miR-330-5p负性调控ADAM17基因抑制人心脏微血管内皮细胞的间质转化》一文中研究指出目的探讨人心脏微血管内皮细胞(HCMEC)间质转化(EndMT)过程中miR-330-5p和ADAM17基因的表达,阐明miR-330-5p对EndMT的影响。方法培养HCMEC,应用TGF-β1诱导后,利用免疫荧光化学检测CD31和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)在细胞中的表达。运用生物信息学方法对miR-330-5p和ADAM17基因的配对关系进行预测。脂质体2000转染miR-330-5p模拟物后,Real-time PCR检测miR-330-5p、ADAM17和α-SMA mRNA的表达,Western blotting检测ADAM17和α-SMA蛋白的表达。结果光镜下可见诱导后细胞由鹅卵石形态变为长梭形,免疫荧光化学显示诱导前有强烈的CD31表达,诱导后出现α-SMA的高表达。生物信息学软件TargetScan和miRanYda显示miR-330-5p和ADAM17基因二者靶向配对良好。Real-time PCR和Western blotting检测结果均表明过表达miR-330-5p能够降低ADAM17和α-SMA mRNA及蛋白的表达。结论 miR-330-5p通过下调人心脏微血管内皮细胞中ADAM17基因的表达,进而抑制TGF-β1诱导的EndMT。(本文来源于《贵州医药》期刊2016年10期）
张香子,吴润国,朴虎雄,玄云泽[8]（2016）在《术前间质化学治疗对口腔鳞状细胞癌环氧酶2、血管内皮生长因子表达及微血管密度的影响》一文中研究指出[目的]探讨术前间质化学治疗对口腔鳞状细胞癌环氧酶2(COX-2)、血管内皮生长因子(VEGF)表达及微血管密度(MVD)的影响.[方法]选择2001年—2009年间接受治疗的高分化口腔鳞状细胞癌患者30例,分为术前静脉化学治疗组(15例)和间质化学治疗组(15例),采用免疫组织化学法检测两组COX-2,VEGF表达水平和MVD值变化.[结果]术前间质化学治疗组COX-2,VEGF表达水平及MVD值明显低于术前静脉化学治疗组(P<0.05),COX-2,VEGF阴性组MVD值明显低于COX-2,VEGF阳性组(P<0.05).[结论]术前间质化学治疗和静脉化学治疗均可能通过抑制COX-2,VEGF及MVD表达从而起到减少肿瘤新生血管生成的作用,间质化学治疗较静脉化学治疗作用更为明显.(本文来源于《延边大学医学学报》期刊2016年02期）
刘艳华[9]（2016）在《以RUNX3为靶点干预低氧诱导人心脏微血管内皮细胞间质转分化》一文中研究指出目的:1、研究低氧对人心脏微血管内皮细胞(HCMECs)间质转分化的影响;2、HCMECs间质转分化过程中TGF-β信号通路及Notch信号通路的变化;3、RUNX3敲减对HCMECs的功能及间质转分化的影响及具体机制。方法:1、研究低氧对HCMECs间质转分化的影响。实验分组Normoxia组:常氧(21%O2、5%CO2、74%N2,37℃)条件下培养HCMECs;Hypoxia组:低氧(1%O2、5%CO2、94%N2,37℃)培养HCMECs,两组细胞分别于培养1天、4天、5天(用H1、H4、H5表示)。进行如下实验:⑴光学显微镜下观察各组细胞形态学变化;⑵免疫荧光双标染色,在荧光显微镜下观察CD31、αSMA强度变化及CD31+/αSMA+双阳性细胞(代表正在发生间质转分化的内皮细胞),并计数分析;⑶RT-PCR法测定各组细胞中CD31、VE-cadherin、αSMA及FSP-1m RNA含量并比较。2、研究低氧诱导HCMECs间质转分化过程中TGF-β及Notch信号通路的变化,RUNX3敲减对HCMECs的功能及间质转分化的影响。实验分组Control组:常氧条件下培养HCMECs。Hypoxia组:低氧条件下培养HCMECs 4天。RUNX3组:常氧条件下培养HCMECs,铺板过夜后转染RUNX3-RNAi慢病毒,低氧培养4天。GFP组:常氧条件下培养HCMECs,铺板过夜后转染空载体慢病毒,低氧培养4天。各组细胞进行如下实验:⑴免疫荧光双标染色,在荧光显微镜下观察CD31、αSMA强度变化及CD31+/αSMA+双阳性细胞(代表正在发生间质转分化的内皮细胞),并计数分析;⑵应用Transwell迁移实验对各组HCMECs迁移能力进行检测;⑶应用小管形成实验对各组HCMECs血管新生能力进行检测并比较;⑷RT-PCR法测定各组细胞中CD31、VE-Cadherin、αSMA、FSP-1、RUNX3、TGF-β1、Smad2、Smad3、Notch-1、Hes1、Hey1、Slug、Snail的m RNA含量并比较;⑸Western blot法测定各组细胞中CD31、VE-Cadherin、αSMA、FSP-1、RUNX3、Notch-1、Hes1、Hey1、Slug、Snail、Smad2/3、p-Smad2/3蛋白含量并比较。结果:1、低氧对HCMECs间质转分化的影响:⑴光学显微镜可见:与Normoxia组比较,Hypoxia组HCMECs细胞逐渐出现形态学变化,失去了铺路石样或鹅卵石样结构,逐渐呈长梭形或纺锤形生长。⑵免疫双标荧光染色结果显示:随着低氧时间延长,Hypoxia组HCMECs中CD31强度逐渐减弱,αSMA强度逐渐增强,其中H4组CD31+/αSMA+双阳性细胞最多(P<0.01)。⑶RT-PCR结果显示:Hypoxia组HCMECs中CD31、VE-cadherin的m RNA表达降低,αSMA、FSP-1的m RNA表达升高(P<0.05)。2、敲减RUNX3基因对HCMECs间质转分化的影响:⑴免疫双标荧光染色结果显示:与GFP组相比,RUNX3组HCMECs中的CD31强度增强,αSMA强度减弱。⑵RT-PCR及Western Blot结果显示:与Hypoxia组相比,RUNX3组细胞的CD31、VE-Cadherin的m RNA及蛋白表达上调而αSMA、FSP-1 m RNA及蛋白表达下调(P<0.05)。3、敲减RUNX3基因对HCMECs功能的影响:⑴小管形成实验结果显示:低氧促进HCMECs血管成型,而RUNX3敲减后进一步促进血管成型(P<0.05)。⑵Transwell迁移实验结果显示:低氧促进HCMECs迁移,RUNX3敲减后部分抑制了HCMECs迁移能力(P<0.05)。4、HCMECs间质转分化过程中TGF-β信号通路的变化:⑴RT-PCR结果显示:低氧激活了TGF-β信号通路,Hypoxia组的TGF-β1、Smad2、Smad3的m RNA表达水平均增高,差异有统计学意义(P<0.05)。RUNX3敲减后TGF-β1m RNA表达水平进一步增高,而Smad2、Smad3的m RNA表达水平均下调,差异有统计学意义(P<0.05)。⑵Western Blot检测显示:低氧促进Smad2/3、p-Smad2/3蛋白表达(P<0.05);RUNX3敲减后是Smad2/3、P-smad2/3蛋白表达均下调(P<0.05),且p-Smad2/3下降比例更大(P<0.05)。5、HCMECs间质转分化过程中Notch信号通路的变化:RT-PCR及Western Blot检测结果显示:低氧同时激活了Notch信号通路,Hypoxia组的Notch-1、Slug、Snail、Hes1、Hey1 m RNA及蛋白的表达上调,差异有统计学意义(P<0.05)。RUNX3敲减后Notch-1上调更明显,内皮间质转分化主要转录因子Slug、Snail均不同程度下调,同时Hes1、Hey1的表达水平明显下调,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:1、低氧能诱导HCMECs发生间质转分化,同时促进血管新生及细胞迁移;2、TGF-β信号通路及Notch信号通路均上调,提示两信号通路在低氧诱导HCMECs间质转分化过程中起重要作用;3、RUNX3低表达减轻低氧诱导HCMECs间质转分化,RUNX3低表达部分抑制了TGF-β信号通路及Notch信号通路,RUNX3可能为TGF-β信号通路及Notch信号通路下游的共同靶点。(本文来源于《南昌大学》期刊2016-05-01）
黄俊,张明霞,黄江燕,万欢[10]（2015）在《1型糖尿病大鼠心肌纤维化中微血管内皮细胞间质转分化的鉴定》一文中研究指出目的鉴定链脲佐菌素(STZ)诱导的1型糖尿病大鼠心肌纤维化中是否发生了心肌微血管内皮细胞-间质转分化。方法 STZ诱导大鼠心肌纤维化,12 w超声心动图检测大鼠心功能指标,VG染色观察心肌组织胶原含量变化,免疫组化鉴定心肌组织中微血管内皮细胞间质转分化。结果心脏超声提示实验组大鼠左室前后壁厚度(LVWT)、左室舒张末期内径(LVEDD)、左室收缩末期内径(LVESD)明显大于对照组,左室射血分数(LVEF)和左室短轴缩短率(FS)明显小于对照组(P<0.05)。心肌VG染色实验组粉红色胶原组织增多,而对照组仅有少许红色胶原组织表达。心肌免疫组化染色观察,实验组与对照组CD31、α-平滑肌肌动蛋白(SMA)均表达阳性,但实验组CD31表达减弱(P<0.05)、微血管壁α-SMA表达增强(P<0.05)。免疫酶双染技术检测,对照组微血管内皮被染为棕黄色,实验组微血管内皮红色染色较强,而棕黄色较弱。结论 STZ诱导的1型糖尿病大鼠心肌纤维化过程中发生了心肌微血管内皮细胞-间质转分化。(本文来源于《中国老年学杂志》期刊2015年23期）
间质微血管论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
研究目的:本文主要研究肺腺癌间质中被α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)染色的肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)与肿瘤间质中微血管密度(MVD)、淋巴管密度(LVD)的关系,及CAFs对肺腺癌患者总生存期(OS)和无进展生存期(PFS)的影响。研究方法:本研究共选择125例肺腺癌标本作为研究对象,均来自于2010年1月1日到2011年6月31日于青岛市市立医院胸外科行肺切除术的患者,所有患者术前未经辅助治疗,且术后均有明确的病理学诊断。操作中标本破坏3例,失访及随访信息缺乏病人29例,最终实际入选93例,其中男性为60例,女性为33例。按照国际抗癌联盟(UICC)制定的肿瘤分期标准将93例患者进行TNM分期,I期27例,Ⅱ期35例,Ⅲ期31例。以α-SMA标记CAFs,D2-40标记LVD,CD34标记MVD。所选病例的组织切片分别进行鼠抗人α-SMA单克隆抗体、鼠抗人原始造血细胞(CD34)单克隆抗体、鼠抗人D2-40单克隆抗体的免疫组织化学法染色。首先两名病理科医师采用双盲法分别计数,出现两名医师所得结果不一致时,请第叁名病理科主任医师重新计数。将CAFs样本按其密度分为CAFs富集组和CAFs缺乏组,随机选取5张染色后的切片,每张切片于镜下随机选取5个400倍视野进行拍照,分别计数样本中阳性细胞个数及间质细胞个数,α-SMA+细胞个数占总间质细胞个数的百分比称阳性率,阳性率大于等于40%定义为CAFs富集组,即CAFs密集分布在肿瘤上皮组织且与肺腺癌组织无明显边界;小于40%定义为CAFs缺乏组,即CAFs分散在整个肿瘤区域。对于微血管的要求定义为细胞胞质或胞膜染色后呈现的黄色细颗粒,且与周边环境内肿瘤细胞及结缔组织成分有明显分界,即为阳性表达。定位明确、染色明显,有平均10个以上细胞染色的组织切片视为阳性,而染色弱或未成功染色者为阴性。对于淋巴管的要求定义为由内皮细胞形成腔隙状、条状等单独或成簇状的棕黄染色管腔,且与周边其他组织存在有较为明确界限的,即为淋巴管。通过D2—40阳性着色的单个或成簇内皮细胞计数为1个淋巴管,管腔<8个红细胞大小按1条淋巴管计数。以上两者分别确定3个最密集的着色区域,并通过高倍镜视野进行计数从而使评估更精确,计数结果取3个视野的均值来确定LVD、MVD值,分辨不清或颜色模糊的细胞不计数。相差10%以上重新计数。在本研究中对所选取的所有93例术后患者进行规范的密切的跟随访查,所有病人随访至死亡或疾病进展并使用统计学方法来评估其生存率。本研究中全部数据采用SPSS 20.0软件进行数据处理,应用卡方检验、Logistic回归统计分析临床病理参数与免疫组化染色结果间的相关性,Kaplan-Meier法、Cox比例风险模型分别用于进行单因素、多因素生存分析,通过Log-rank检验来比较生存率差异。P<0.05为差异有统计学意义。结果:α-SMA的表达主要定位于细胞浆和细胞膜内,以50%作为分界点,93例肺腺癌患者中CAFs丰富组即α-SMA高表达组为72例,CAFs贫乏组即α-SMA低表达组为21例;肺腺癌间质内α-SMA、MVD、LVD的表达与肺腺癌患者的年龄、肿瘤大小、分化程度、临床分期及是否有转移明显相关,差异有统计学意义(P<0.05);与肺腺癌患者的性别、肿瘤部位、吸烟史均无明显相关,差异无统计学意义(P>0.05);肺腺癌患者间质内α-SMA高表达组的MVD、LVD相比较于间质内α-SMA低表达组的MVD高,LVD与MVD之间存在相关性,此差异存在统计学意义(P﹤0.05)。肺腺癌患者中,CAFs缺乏组的3年生存率为64.5%,大大高于CAFs富集组(41.9%);年龄、临床分期、α-SMA、CD34、D2-40、肿瘤直径、分化程度、淋巴结是否转移对肺腺癌患者OS有影响,差异有统计学意义(P<0.05);而性别、吸烟史、肿瘤部位对其OS影响不大(P>0.05)。Cox多因素生存分析结果示:临床分期为OS的独立预后因素,其差异有统计学意义(P<0.05)。结论及意义:本研究表明肺腺癌间质中CAFs、LVD、MVD叁者之间相互影响,且与肺腺癌患者的预后呈明显负相关。肺腺癌间质内的CAFs是肺腺癌患者不良预后的重要影响因素,在肺腺癌的发生、发展及转移等方面起到了重要作用。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
间质微血管论文参考文献
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标签：结肠癌; Dickkopf-3; 组织芯片; 免疫组化;