卤代醇脱卤酶论文-童超迪

卤代醇脱卤酶论文-童超迪

导读:本文包含了卤代醇脱卤酶论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:R-2-卤代酸脱卤酶,脂肪酶,X射线衍射晶体法,分子动力学模拟

卤代醇脱卤酶论文文献综述

童超迪[1](2018)在《R-2-卤代酸脱卤酶DehDIV-R和脂肪酶PaL的结构与功能研究》一文中研究指出X射线衍射晶体学是解析生物大分子结构的重要技术手段之一,广泛用于酶的叁维结构解析。通过解析酶以及酶/小分子复合物的晶体结构,结合分子动力学的研究,可以获取酶与小分子的相互作用机制,并在分子水平上探究酶结构与功能的关系,为进一步对酶的理性改造提供结构依据。DehDIV-R是本实验室发现的R-2-卤代酸脱卤酶,产自假单胞菌ZJU6,能专一性地水解R-2-氯丙酸,具有重要的应用前景。目前关于R-2-卤代酸脱卤酶的晶体结构报道较少,对于其底物立体选择性研究也仅仅在R,S-2-卤代酸脱卤酶的结构基础上间接进行解释。本文通过多步层析法制备得到高纯度的DehDIV-R蛋白,采用悬滴气相扩撒法,在0.1 mol/HEPES(pH 7),12%PEG 6000,0.2 mol/l MgC12,8mmol/LCHAPS条件下获得高质量晶体,并在上海同步辐射光源收集到一套分辨率为2.35 A的数据,采用CCP4 online服务器分子置换法解析得到DehDIV-及的晶体结构。基于结构分析的结果显示,DehDIV-R是由多个α螺旋组成的假二聚体结构,且活性中心Asp205与Asn131形成氢键,有利于Asp205活化水分子。接着,基于DehDIV-R与R-2-氯丙酸以及与S-2-氯丙酸的分子对接结构,经限制性分子动力学模拟计算,推测活化的水分子的氧原子与R-或S-2-氯丙酸的Cα之间的距离以及角度上的差异导致了 DehDIV-R的底物立体选择性。PaL是本实验室发现的脂肪酶,来自产碱假单胞菌CGMCC4405,能拆分d,1-薄荷醇丙酸酯生成光学纯的1-薄荷醇,具有重要的应用前景。但将PaL用于拆分四对外消旋的薄荷醇丙酸酯时,非对映体选择性较低,因此需要探究其手性识别机制从而为下一步理性改造提供指导。前期解析得到PaL的晶体结构,但其催化叁联体处于不合理位置——His302位于酶分子表面。本文尝试采用多种方式来获得催化叁联体位置合理的PaL结构,最终通过粗粒化分子动力学模拟计算,发现His302多次进出活性口袋,并最终通过常规分子动力学模拟计算优化得到了结构合理的PaL。基于上述结构,通过分子对接与分子动力学模拟计算来探究PaL非对映体选择性较低的原因。结果表明脂肪酶催化过渡态时,四对外消旋薄荷醇丙酸酯C1处的手性影响了 His302质子化的氢原子与底物羟基氧原子之间氢键的形成,从而决定了其能否被水解。然而PaL仅能识别C1处的手性,而对于C2和C5处的手性无法识别,导致其非对映体选择性较差,因此无法专一性地水解1-薄荷醇丙酸酯。(本文来源于《浙江大学》期刊2018-05-04)

王馥丽,裴承新,黄启斌,蒋辉,习海玲[2](2016)在《卤代烷烃脱卤酶的芽胞表面展示技术研究》一文中研究指出芥子气和α-卤代有机物有很强的细胞毒性,能对机体造成伤害,严重威胁到国家安全和公共安全。卤代烷烃脱卤酶(EC3.8.1.5)催化芥子气和α-卤代有机物水解具有作用快、条件温和、无腐蚀性等优点。但卤代烷烃脱卤酶在实际应用中仍面临一些技术难题,如对温度及pH变化敏感、贮存稳定性较差、酶的分离纯化造成生产成本增加等。芽胞表面展示技术能够保持展示蛋白在复杂条件下的生物活性,有效提升展示蛋白的贮存稳定性,而且构建的重组芽胞易收集,生产成本低廉,已在疫苗制备、生物催化等领域展现出良好的应用前景,目前尚未发现有关芽胞展示卤代烷烃脱卤酶的报道。本研究拟对枯草芽胞杆菌芽胞表面展示卤代烷烃脱卤酶的工作展开研究,以获得可在复杂环境下发挥催化作用、贮存稳定性高、生产成本低的功能芽胞。本论文的研究对于卤代烷烃脱卤酶的实际应用具有重要意义,对于防化领域和公共安全领域的发展也起到积极的推动作用。(本文来源于《中国化学会第30届学术年会摘要集-第二十八分会:化学生物学》期刊2016-07-01)

王金玉[3](2016)在《定向进化提高卤代醇脱卤酶HHDH的催化活性》一文中研究指出利用卤代醇脱卤酶催化(3R,5印-6-氯-3,5-二羟基已酸叔丁酯的脱卤氰化反应,制备(3R,5R)-6-氰基-3,5-二羟基已酸叔丁酯具有重要的意义,后者作为他汀类药物制备的关键手性中间体,其合成已经成为生物催化与转化领域研究的热点,具有良好的发展潜力和应用前景。本文采用易错PCR定向进化卤代醇脱卤酶HHDH,构建突变基因文库。以(3R,5S)-6-氯-3,5-二羟基已酸叔丁酯为底物,经过初筛和复筛得到活力明显提高的突变酶:W86R/R87P,A82M/W86R, A82T/W86R和V84T/W86R,其催化活力分别是原始蛋白的1.81、1.80、2.27和2.42倍。由于获得的阳性突变子上均含有相同的突变点W86R,因此构建了W86R单点突变酶HHDH_R,发现其比活是原始酶的3.75倍。动力学研究表明HHDH_R的Vmax值和Km值分别是263μM/min和4.5 mM,HHDH的Vmax值和Km值分别是249 μM/min和6.82 mM。通过分子模拟和对接发现,在W86突变成Arg之后,酶与底物之间的亲和力增加,空间位阻减小,提高了催化效率。随后根据文献报道并结合分子模拟得到的突变位点信息,利用饱和突变改造HHDH的86’位点及一些关键氨基酸残基。得到的阳性突变子有W86I,W86L和W86V,比活分别是原始蛋白的9.42,7.25和6.96倍,W86A的比活力仅是HHDH的3.3倍。其中突变酶W86I的比活最高,为0.65 U/mg,Vmax值和Km值分别是328μM/min和3.85 mM。对突变酶W86I同源建模和分子模拟发现进化酶的活化能下降,空间位阻减小,突变位点柔性的增加均导致酶活力的增加。同时空间位阻和氢键作用可以很好的解释其他几个特殊位点突变酶的活力降低和消失。最后对影响转化的助溶剂因素进行了研究,以及产酶条件优化和发酵工艺考察与优化,使酶活提高至14.21 U/L。(本文来源于《浙江大学》期刊2016-05-05)

习海玲,刘昌财,问县芳,陈立坤[4](2015)在《卤代烷烃脱卤酶及其对芥子气的降解研究进展》一文中研究指出芥子气(2,2’-二氯乙基硫醚,HD)是一种糜烂性毒剂,具强烈的细胞毒作用,能使皮肤和各种组织起泡、糜烂和坏死.近年来,发现多种微生物酶具催化降解HD功能,其中,卤代烷烃脱卤酶(Haloalkane dehalogenases,HLDs)(EC3.8.1.5)能够降解HD产生无毒的硫二甘醇,且催化水解的效果最好,成为环境友好地消除HD关注的焦点.本文重点综述具较高水解HD活性HLDs,包括Lin B、Dha A和Dmb A等的发现与进化关系、立体结构、底物特异性和催化水解特征的最新研究成果,以及这些酶在降解HD领域当前和未来潜在的应用.分析表明这些HLDs虽然归属于同一进化亚家族,但具不同的底物特异性;而这些HLDs一致的催化叁元体空间结构决定了它们分享类似的SN2亲核取代催化水解HD的反应机制.此外,针对现有HLDs在应用方面存在的如催化水解效率有待提高、稳定性差等诸多问题,提出通过分子生物学、基因工程和固相化修饰等技术加以解决.(本文来源于《应用与环境生物学报》期刊2015年05期)

王亚月,冯延宾,薛松[5](2015)在《2-卤代酸脱卤酶分类及构效关系分析》一文中研究指出2-卤代酸脱卤酶是催化2-卤代酸脱卤水解产生相应的2-羟基羧酸化合物的一类酶。该类酶不仅可用于环境中含卤化合物的的降解,因其较好的立体选择性且水解过程中无需添加还原力,故在生物催化转化领域中有重要应用价值。根据氨基酸序列同源性分析2-卤代酸脱卤酶被分为Group I与Group II两种类型。Group I类酶包括了具有立体(本文来源于《2015年中国化工学会年会论文集》期刊2015-10-17)

王金玉,吴坚平,徐刚,杨立荣[6](2015)在《卤代醇脱卤酶高效表达体系的构建和优化》一文中研究指出β-羟基腈是医药与化工行业中的重要中间体,其中一种重要的代表就是6-氰基-3,5-二羟基己酸叔丁酯,它是合成阿托伐他汀的关键手性中间体。利用卤代醇脱卤酶催化6-氯-3,5-二羟基己酸叔丁酯的脱卤上氰基反应,能够制备获得6-氰基-3,5-二羟基己酸叔丁酯,相对于化学合成法,具有明显的优势。但该酶的催化效率不(本文来源于《2015中国酶工程与糖生物工程学术研讨会论文摘要集》期刊2015-08-21)

冯峰,胡蝶,余涛,曾妍,邬敏辰[7](2015)在《新型卤代醇脱卤酶基因的克隆、序列分析及表达》一文中研究指出卤代醇脱卤酶可以催化合成具有光学纯的环氧化物及β-取代醇等高价值手性药物中间体。作者所在实验室利用宏基因组技术从无锡新区工业集中地污染土壤中筛选了一段编码基因Y,经测序知其片段包含有765 bp的核苷酸,编码254个氨基酸。经Blast软件分析,其氨基酸序列与来自根癌土壤杆菌(Agrobacterium tumefaciens)的卤代醇脱卤酶Hhe C同源性为81%,且含有卤代醇脱卤酶类的保守催化叁联体Ser132-Thr145-Arg149。推测其属于卤代醇脱卤酶Hhe C类,命名为Sy Hhe C。根据大肠杆菌Escherichia coli BL21的密码子偏爱性,对基因Y进行密码子优化和人工合成,命名为Syhhe C,构建重组表达质粒p ET28a-Syhhe C,转化感受态E.coli BL21,表达产物经镍柱亲和层析后获得电泳纯的重组卤代醇脱卤酶re Sy Hhe C。SDS-PAGE分析,re Sy Hhe C的相对分子质量为34 000。以2-溴-1-(4-硝基苯基)-乙醇为底物,re Sy Hhe C催化底物产生2-(4-硝基苯基)环氧乙烷的比活性为5.2 U/mg。(本文来源于《食品与生物技术学报》期刊2015年05期)

李安章,邵宗泽[8](2015)在《微生物卤代烷烃脱卤酶研究进展》一文中研究指出卤代烷烃脱卤酶是降解卤代脂肪族化合物的关键酶类,在各种地理环境中的不同微生物中广泛存在,在生物降解和工业生产等方面具有重要的应用价值。目前已经生化鉴定了20个卤代烷烃脱卤酶。近些年来对这些酶的酶学特征、蛋白质结构和系统进化进行了详细的研究。同时,为满足应用实践的需求还对卤代烷烃脱卤酶进行了蛋白质工程改造研究。本文将对卤代烷烃脱卤酶研究的一些新的进展进行综述。(本文来源于《微生物学报》期刊2015年04期)

李安章,邵宗泽[9](2014)在《柴油食烷菌B-5及其卤代烷烃脱卤酶DadA对卤代化合物的降解》一文中研究指出【目的】柴油食烷菌(Alcanivorax dieselolei)B-5是重要的石油降解菌。为研究其对卤代化合物的降解范围和降解机制,【方法】以不同的卤代化合物作为唯一碳源,观察菌株B-5在其中的生长情况;通过多重序列比对、系统发育分析和叁维结构同源建模,分析该菌株基因组内一个假定的卤代烷烃脱卤酶(Haloalkane dehalogenase,HLD)DadA;利用大肠杆菌异源表达、纯化DadA,并测定了其对46个卤代底物的酶活。【结果】菌株B-5能够利用C3-C18链长范围的多种卤代化合物为唯一碳源生长;在系统进化树中,DadA相对独立于其他HLD-II亚家族成员,但具有典型的HLD-II亚家族的催化五联体残基;DadA确实具有脱卤活性,但该酶特异性高,底物范围明显小于其他已鉴定的HLDs,仅对1,2,3-叁溴丙烷、1,2-二溴-3-氯丙烷和2,3-二氯-1-丙烯有脱卤酶活。【结论】因为DadA对很多B-5菌株可以利用做碳源的卤代底物没有脱卤酶活,所以推测B-5菌中可能还有其他脱卤酶参与了卤代烷烃的降解。菌株B-5及其卤代烷烃脱卤酶DadA在卤代烷烃污染物的生物降解方面具有应用潜力。(本文来源于《微生物学报》期刊2014年09期)

陈少云[10](2013)在《氧化还原酶—卤代醇脱卤酶多酶法合成手性β-羟基腈》一文中研究指出多酶法生物合成被称为第叁代生物催化,包括体外的多酶法和体内的多酶法。它已经被广泛应用于手性化学品的不对称合成,包括级联反应和偶联反应,如辅酶的原位再生等。手性p-羟基腈是医药与化工行业中的重要中间体。目前,用于制备手性p-羟基腈的生物催化方法主要有两种:动力学拆分和不对称合成。其中,采用氧化还原酶-卤代醇脱卤酶多酶法催化的级联反应,能以价格相对便宜的潜手性的卤代酮为出发底物,不对称合成手性p-羟基腈,理论转化率可达到100%,具有明显的优势。然而,目前这方面的研究都是在体外进行的。由于不同酶的适宜催化条件不同,致使该工艺的转化效率不高。另外,体外的多酶法催化需要人为添加昂贵的辅因子,如NAD(P)+等,增加了反应的成本,且需要对各个酶分别表达和纯化,过程也较麻烦。由于体内的多酶法不需要分别表达和纯化酶蛋白,且容易实现辅酶的原位再生,既能简化操作过程,也能降低反应成本。而且,细胞的稳态内环境还有利于酶的稳定,使不同的酶能在同一个细胞内更好地发挥功能。因此,采用体内的多酶法,能够弥补体外多酶法的不足,进一步提高生物催化级联反应或偶联反应的效率。本文通过氧化还原酶和卤代醇脱卤酶在Escherichia coli中的共表达,首次使用一菌多酶法,以卤代酮为出发底物,制备手性β-羟基腈。该方法操作方便,底物较便宜,转化率可达100%,部分产物ee值大于99%。并通过引入辅酶再生酶和多酶共表达策略的优化,实现了辅酶NADPH和NADH的高效原位再生,并使Eco_RBH多酶体系中各酶的活力达到平衡,有效提高了多酶体系的催化效率。同时,首次揭示了卤代醇脱卤酶HHDH活力受COBE(4-氯乙酰乙酸乙酯)抑制的机理:COBE与HHDH活性中心的Ser132和Tyr145结合,占据了该酶的催化活性位点。该抑制作用为竞争性可逆抑制。基于以上抑制机理,通过突变筛选,获得了阳性突变株F136V/W249F,其COBE半抑制浓度是HHDH(wild-type)酶的20倍。另外,首次以6-氯3,5-二羰基己酸叔丁酯为底物,经过叁步酶促反应,合成了阿托伐他汀的关键中间体——(3R,5R)6-氰基-3,5-二羟基己酸叔丁酯。一、利用源于Lactobacillus kefiri DSM 20587的醇脱氢酶AdhR和AdhS具备的不同选择性,结合源于Agrobacterium radiobacter AD1的卤代醇脱卤酶HheC,构建了两个氧化还原酶-卤代醇脱卤酶组合的一菌双酶体系AdhR-HheC和AdhS-HheC,并以4-氯乙酰乙酸乙酯为模型底物,一锅法制备了手性的4-氰基-3-羟基丁酸乙酯(HN)。两个体系具有相反的选择性。在此基础上,通过研究AdhR和AdhS的辅酶再生,引入葡萄糖脱氢酶GdhBS和甲酸脱氢酶FdhCB,按照不同共表达策略(单质粒或双质粒),分别建立了两个一菌多酶体系AdhR-GdhBS-HheC和AdhS-FdhCB-HheC,并实现了多酶的均衡表达。与一菌双酶体系相比,一菌多酶体系的羰基还原活力得到了提高。再利用催化活力较高的卤代醇脱卤酶HHDH(F136V/W249F)替换两个一菌多酶体系中的HheC,提高了脱卤氰化的反应活力,构建了工程菌Eco_RBH和Eco_SFH。前者催化COBE底物到R)-HN的级联反应,第一步反应活力195 U/L,第二步反应活力184 U/L;后者催化COBE底物到(R)-HN的级联反应,第一步反应活力18.1 U/L,第二步反应活力107 U/L。考察了工程菌Eco_RBH和Eco_SFH的4℃储藏稳定性,37℃操作稳定性及重复利用稳定性,发现一菌多酶的全细胞体系比粗酶液体系具有更好的稳定性,且可以被重复利用。分析了HheC、HHDH、AdhR和AdhS酶的底物谱。在此基础上,利用一菌多酶体系Eco_RBH成功制备两个手性p-羟基腈产品:(R)-HN和(S)-3-羟基苯丙腈。两者ee值都大于99%。利用一菌多酶体系Eco_SFH成功制备两个手性p-羟基腈产品:(回-HN和(R)-3-羟基苯丙腈。前者ee值为60.2%,前者ee值为93.2%。二、克隆表达了卤代醇脱卤酶HHDH。测得该酶催化(S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯((S)-CHBE)反应的比活力为3408 U/g,催化(R)-CHBE反应的比活力为3712 U/g。发现HHDH受COBE活力抑制严重,COBE对HHDH的半抑制浓度约为10μM。进而研究了HHDH受COBE活力抑制动力学。结果表明,该抑制作用是竞争性的可逆抑制。通过分子模拟分析和计算,揭示了COBE抑制HHDH的机理:COBE分子能结合到HHDH的活性中心,并与Ser132和Tyr145形成氢键,阻碍反应底物与酶催化残基的结合。结合能计算结果也表明,COBE与HHDH的结合能力较强,超过了反应底物(S)-CHBE。通过在HHDH活性中心附近和底物通道入口处的氨基酸,分别进行饱和定点突变。筛选得到两个阳性突变体W249L和F136L。在249位和136位氨基酸同时引入饱和定点突变,筛选得到了一个阳性突变体F136V/W249F。 COBE对突变体F136V/W249F的半抑制浓度约为200μM,是HHDH (wild-type)的20倍。叁、在摇瓶中对工程菌Eco_RBH的发酵培养基进行了优化,使用工业级的培养基替换了LB培养基。利用工业级培养基,在摇瓶中对工程菌Eco_RBH的发酵表达条件进行了优化。优化后工程菌Eco_RBH的第一步反应活力为857.9 U/L,同时第二步反应活力为932.3 U/L,约为LB培养基中催化活力的4倍。然后,研究了工程菌Eco RBH在15L发酵罐上的高密度发酵工艺。通过补料分批发酵,使菌体干重达到20.44g/L,第一步反应活力为8620 U/L,第二步反应活力为8587 U/L,约为摇瓶培养最佳催化活力的10倍。研究了工程菌Eco_RBH催化反应时,温度和pH值等因素的影响。结果表明,最佳的反应温度为30℃,最佳的反应pH值为7.0。研究了工程菌Eco_RBH在提高底物浓度时的催化反应。以高密度发酵所得Eco_RBH菌体为催化剂(细胞负载量为20 g干细胞/L),投入100 mM的COBE反应,2h后可以被完全转化为(R)-HN。而投入100 mM的2-氯苯乙酮反应,1h后可以被完全转化为(S)-3-羟基苯丙腈。四、利用工程菌BL21_pACYCDuet-AdhR,以6-氯-3,5-二羰基己酸叔丁酯为底物,合成了(S)-6-氯-5-羟基-3羰基己酸叔丁酯。产物ee值大于99%。催化活力约为12 U/L。利用源于Candidia magnoliae的羰基还原酶Cr和葡萄糖脱氢酶GdhBS,构建工程菌BL21_pACYCDuet-CB,以(S)-6-氯-5-羟基-3羰基己酸叔丁酯为底物,合成了(3R,5S)6-氯-3,5-二羟基己酸叔丁酯。产物de值约98.2%。催化活力约为35 U/L。利用AdhR、Cr和GdhBS,构建了工程菌Eco_RCB,并成功用于以6-氯-3,5-二羰基己酸叔丁酯为底物,制备他汀类药物的关键中间体(3R,5S)6-氯-3,5-二羟基己酸叔丁酯的反应,催化活力约为11 U/L。利用卤代醇脱卤酶HHDH,构建了工程菌Eco H,并成功用于制备他汀类药物的关键中间体(3R,5R)6-氰基-3,5-二羟基己酸叔丁酯的反应。该步反应活力约为21.4 U/L。(本文来源于《浙江大学》期刊2013-12-10)

卤代醇脱卤酶论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

芥子气和α-卤代有机物有很强的细胞毒性,能对机体造成伤害,严重威胁到国家安全和公共安全。卤代烷烃脱卤酶(EC3.8.1.5)催化芥子气和α-卤代有机物水解具有作用快、条件温和、无腐蚀性等优点。但卤代烷烃脱卤酶在实际应用中仍面临一些技术难题,如对温度及pH变化敏感、贮存稳定性较差、酶的分离纯化造成生产成本增加等。芽胞表面展示技术能够保持展示蛋白在复杂条件下的生物活性,有效提升展示蛋白的贮存稳定性,而且构建的重组芽胞易收集,生产成本低廉,已在疫苗制备、生物催化等领域展现出良好的应用前景,目前尚未发现有关芽胞展示卤代烷烃脱卤酶的报道。本研究拟对枯草芽胞杆菌芽胞表面展示卤代烷烃脱卤酶的工作展开研究,以获得可在复杂环境下发挥催化作用、贮存稳定性高、生产成本低的功能芽胞。本论文的研究对于卤代烷烃脱卤酶的实际应用具有重要意义,对于防化领域和公共安全领域的发展也起到积极的推动作用。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

卤代醇脱卤酶论文参考文献

[1].童超迪.R-2-卤代酸脱卤酶DehDIV-R和脂肪酶PaL的结构与功能研究[D].浙江大学.2018

[2].王馥丽,裴承新,黄启斌,蒋辉,习海玲.卤代烷烃脱卤酶的芽胞表面展示技术研究[C].中国化学会第30届学术年会摘要集-第二十八分会:化学生物学.2016

[3].王金玉.定向进化提高卤代醇脱卤酶HHDH的催化活性[D].浙江大学.2016

[4].习海玲,刘昌财,问县芳,陈立坤.卤代烷烃脱卤酶及其对芥子气的降解研究进展[J].应用与环境生物学报.2015

[5].王亚月,冯延宾,薛松.2-卤代酸脱卤酶分类及构效关系分析[C].2015年中国化工学会年会论文集.2015

[6].王金玉,吴坚平,徐刚,杨立荣.卤代醇脱卤酶高效表达体系的构建和优化[C].2015中国酶工程与糖生物工程学术研讨会论文摘要集.2015

[7].冯峰,胡蝶,余涛,曾妍,邬敏辰.新型卤代醇脱卤酶基因的克隆、序列分析及表达[J].食品与生物技术学报.2015

[8].李安章,邵宗泽.微生物卤代烷烃脱卤酶研究进展[J].微生物学报.2015

[9].李安章,邵宗泽.柴油食烷菌B-5及其卤代烷烃脱卤酶DadA对卤代化合物的降解[J].微生物学报.2014

[10].陈少云.氧化还原酶—卤代醇脱卤酶多酶法合成手性β-羟基腈[D].浙江大学.2013

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