导读:本文包含了脂肪成体干细胞论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:尿失禁,压力性,间质干细胞,胶原
脂肪成体干细胞论文文献综述
耿鹏,宋红娟,刘亚玲,栾晓梅,黄辉[1]（2015）在《脂肪源成体干细胞移植治疗压力性尿失禁的实验研究》一文中研究指出目的通过注射脂肪来源的间充质干细胞至压力性尿失禁(SUI)大鼠,观察大鼠近端尿道尿动力学变化,为其治疗SUI提供实验依据。方法分离、培养雌性SD大鼠脂肪源间充质干细胞,行CD44、CD45、CD90、CD105、CD34免疫荧光检测。细胞经过10μmol/L 5-Aza诱导后采用Western blot方法测定细胞中α-SMA、Desmin、Myosin的表达。以双侧阴部神经阻断的方法,制备大鼠尿失禁模型后将大鼠模型分为3组。Ⅰ组:注射0.2 ml胶原;Ⅱ组:注射0.1 ml胶原和0.1 ml间充质干细胞(1×106/ml)。Ⅲ组为对照组,注射0.2 ml IMDM培养液。2周后大鼠进行最大膀胱容量和漏尿点压力检测。组间差异比较采用t检验。结果流式细胞仪检测显示细胞表达间充质干细胞标志CD44、CD90和CD105,但不表达造血干细胞标志蛋白CD34。细胞在10μmol/L的5-Aza诱导后7 d表达α-SMA、Desmin和Myosin。在大鼠尿失禁模型,胶原组的最大膀胱容量大于对照组[(1.65±0.21)ml vs(1.40±0.12)ml,P=0.035];ADSC组的最大膀胱容量大于胶原组[1.73±0.26)ml vs(1.65±0.21)ml,P=0.042]。胶原组的最大漏尿点压力大于对照组[(41.2±5.2)mm H2O vs(32.2±3.9)mm H2O,P=0.015];ADSC组的最大漏尿点压力大于胶原组[(50.6±6.1)mm H2O vs(41.2±5.2)mm H2O,P<0.05]。结论诱导后的间充质干细胞注射鼠近端尿道后能提高大鼠漏尿点压力和膀胱最大容量,可能成为治疗压力性尿失禁的有效方法。(本文来源于《中华细胞与干细胞杂志(电子版)》期刊2015年03期）
李勇,李宾公,李哲,张健,曾明辉[2]（2013）在《hHCN2基因转染的脂肪组织来源的成体干细胞可分化为起搏样细胞》一文中研究指出目的大鼠脂肪来源的成体干细胞(ADSC)转染人超极化激活环核苷酸门控离子通道-2(hHCN2)基因,观察其作为起搏细胞的可行性。方法取生长良好的ADSC转染hHCN2基因,通过RT-PCR、Western blot分析、免疫荧光技术检测hHCN2基因及蛋白的表达,用膜片钳技术检测细胞的电生理特征并记录其内向电流。将转染hHCN2基因的ADSC与心室肌细胞共培养,观察其对心室肌细胞自发性搏动的影响。结果 hHCN2基因修饰的大鼠ADSC能表达较强的hHCN2基因及蛋白,还能够产生超级化激活内向离子流。将其与心室肌细胞共培养,能使心室肌细胞的自发性搏动明显增快增强。结论将hHCN2基因转染ADSC能够使其分化为具有起搏功能的起搏样细胞,为进一步优化生物起搏器的研究提供了材料。(本文来源于《细胞与分子免疫学杂志》期刊2013年09期）
李勇[3]（2013）在《利用脂肪来源成体干细胞构建生物起搏器的初步研究》一文中研究指出第一部分：ADSCs的分离、培养、鉴定及NRG-1/ErbB通路的检测目的：分离、培养及鉴定大鼠脂肪来源成体干细胞（ADSCs），并检测其NRG-1/ErbB信号通路的表达。方法：用I型胶原酶消化及贴壁法培养获取ADSCs。用免疫荧光测定其表面抗原CD44、CD90、CD105、CD31的表达，流式细胞仪测定表面抗原CD29、CD45、CD90的表达鉴定其干细胞特性。取鉴定后的叁代ADSCs通过RT-PCR及ELISA检测其是否表达NRG-1/ErbB信号通路。结果：培养的ADSCs贴壁良好、生长迅速，免疫荧光提示其表达间充质干细胞特征性表面抗原CD44，CD90，CD105，不表达内皮细胞相关抗原CD31，流式细胞仪检测进一步证实其CD29、CD90阳性率96％以上，极低表达阴性标志物CD45。RT-PCR检测出大鼠ADSCs表达NRG-1及ErbB2、ErbB3、ErbB4，ELISA发现ADSCs培养上清液中含有神经调节蛋白-1（NRG-1）。结论：培养的大鼠ADSCs表达间充质干细胞相关表面抗原及完整的NRG-1/ErbB信号通路。第二部分：干预NRG-1/ErbB通路对ADSCs向类窦房结细胞分化的影响目的：探讨在ADSCs向心肌样细胞分化的一定时期内，通过干预NRG-1/ErbB通路调控其向类窦房结样细胞或工作肌样细胞分化的可行性。方法：取鉴定后的叁代大鼠ADSCs加入含10μmol/L5-氮胞苷（5-aza）和10μg/LbFGF的成心肌诱导培养基处理24小时后,在Transwell板中将其与乳鼠心肌细胞间接接触共培养，构建ADSCs心肌样分化模型,并通过RT-PCR及免疫荧光检测心肌相关基因、蛋白的表达，验证该模型。在ADSCs心肌样分化过程中干预NRG-1/ErbB通路分叁组实验，包括AG1478组（在共培养的第5-11天取出共培养的乳鼠心肌细胞，间断加入至终浓度为10μmol/L的ErbB受体拮抗剂AG1478，每次处理时间为12小时）；NRG-1组（在与AG1478组的相同时间取出共培养的乳鼠心肌细胞，添加至终浓度为100μg/L的外源性NRG-1）；对照组（只加5-aza及共培养诱导，实验条件同AG1478组）；另取正常培养的ADSCs为空白对照组。诱导3周左右，通过qRT-PCR检测各组NKx2.5、HCN4、TBX3、TBX2mRNA，Westernbloting检测TBX3蛋白，全细胞膜片钳技术检测各组动作电位特征。结果：通过RT-PCR及免疫荧光检测到ADSCs加5-aza及共培养诱导3周后表达心脏早期转录因子Nkx2.5及肌钙蛋白，而ADSCs空白组不表达。在其心肌样分化过程中，AG1478组起搏相关基因（HCN4、TBX3、TBX2）的表达明显强于对照组及NRG-1组（P＜0.05），TBX3蛋白也强于对照组（P＜0.05），并能检测到窦房结样动作电位。而NRG-1组Nkx2.5的表达高于对照组及AG1478组（P＜0.05），并能检测到心室肌样动作电位。结论：在大鼠ADSCs向心肌样细胞分化的一定时间内，干预内源性的NRG-1/ErbB通路可提高起搏相关基因及蛋白的表达，而添加外源性NRG-1则能提高工作肌细胞相关基因的表达。第叁部分：用HCN2基因修饰的ADSCs构建生物起搏器目的：将起搏基因之一的人超极化激活环核苷酸门控离子通道-2（hHCN2）基因转染于大鼠ADSCs上，观察其作为起搏细胞的可行性。方法：取鉴定后的叁代大鼠ADSCs转染人HCN2基因，通过qRT-PCR、Westernblot分析、免疫荧光技术检测hHCN2mRNA及蛋白的表达，用膜片钳技术检测其电生理特征并记录其内向电流。将转染hHCN2基因的ADSCs与乳鼠心室肌细胞直接接触共培养，观察其对心室肌细胞自发性搏动的影响。结果：hHCN2基因修饰的大鼠ADSCs能表达较强的hHCN2基因及蛋白，并能检测到超极化激活的内向阳离子电流。将其与心室肌细胞共培养，能使心室肌细胞的自发性搏动明显增快增强（P<0.05）。结论：将hHCN2基因转染ADSCs能够使其分化为具有起搏电流的起搏样细胞，能够进一步优化生物起搏器的研究。(本文来源于《南昌大学》期刊2013-06-01）
陈强,杨在亮,张波,王正国,朱佩芳[4]（2009）在《阶段性胚胎抗原-1、OCT-4、颗粒酶B在脂肪成体干细胞中的表达》一文中研究指出目的探索脂肪成体干细胞中是否表达胚胎时期标志蛋白SSEA-1,OCT-4,GRB。方法先将C57小鼠脂肪用Ⅰ型胶原酶消化,然后采用直接贴壁法,培养获得的细胞。取第3代生长状态稳定、形态均一的细胞进行成脂、成骨诱导分化,同时观察所培养的第叁代细胞表达胚胎时期标志蛋白(本文来源于《第七届全国创伤学术会议暨2009海峡两岸创伤医学论坛论文汇编》期刊2009-09-25）
陈强,杨在亮,孙士锦,张波,王正国[5]（2009）在《阶段性胚胎抗原-1,OCT-4,颗粒酶B在脂肪成体干细胞中的表达》一文中研究指出目的:探索脂肪成体干细胞中是否表达胚胎时期标志蛋白SSEA-1,OCT-4,GRB.方法:先将C57小鼠脂肪用I型胶原酶消化,然后采用直接贴壁法,培养获得的细胞.取第3代生长状态稳定、形态均一的细胞进行成脂、成骨诱导分化,同时观察所培养的第3代细胞表达胚胎时期标志蛋白SSEA-1,OCT-4,GRB的情况.结果:通过该培养方法,可以获得稳定的细胞群体,并能成功进行成骨、成脂诱导分化;免疫荧光化学检测显示叁种胚胎时期出现的特殊蛋白均有不同程度的表达.结论:脂肪来源的成体干细胞中表达胚胎时期的产物,这种特性可能与干细胞的多向分化特性有关系.(本文来源于《第四军医大学学报》期刊2009年16期）
李大鹏,王季石[6]（2008）在《脂肪成体干细胞的体外表达及对CD34~+造血干/祖细胞增殖、分化的影响》一文中研究指出目的:(1)C57BL/6小鼠ADAS细胞体外培养传代的表达:(2)ADAS细胞与CD34~+造血干/祖细胞共同孵育时对CD34+造血干/祖细胞增殖、分化的影响,并检测其中的细胞因子分泌,探讨可能的分子机制。方法:取供鼠皮下与腹股沟脂肪组织,消化离心后体外培养,培养扩(本文来源于《贵州省2008年血液学年会论文汇编》期刊2008-10-01）
李大鹏,王季石[7]（2008）在《小鼠脂肪成体干细胞的体外培养》一文中研究指出目的:从C57BL/6雄性供者小鼠的脂肪组织中提取ADAS细胞,进行体外培养传代并以RT-PCR检测其造血细胞因子的表达情况方法:C57BL/6雄性小鼠,体重20～25 g。取供鼠皮下或腹股沟脂肪组织,将抽取的脂肪用磷酸盐缓冲液(PBS)反复冲洗,加入等体积0.1 %Ⅰ型胶原酶(Worthington公司),37℃恒温摇床消化1 h,离心(300 rpm,10 min),弃去上清。按标准方法进行细胞计数(使用血细胞计数器),接种于100mm培养皿.加入含10%胎牛血清(Fetal Bovine Serun,FBS)DMEM培养液,48 h后换液。第7～14 d,细胞80%汇合时,以0.25%胰酶消化,1:3传代。培养扩增至第3代,免疫组化、电镜等形态学观察,以标记的单抗结合流式细胞仪鉴定细胞表面分子(如HLA-Ⅰ、Ⅱ,CD13、CD29、CD105、CD144、CD45、CD34等)和纯度。结果:①原代培养显示培养的脂肪间充质干细胞2 d左右开始贴壁, 7 d左右可达90%融合,基本上为梭形成纤维样细胞形态。②生长曲线显示,小鼠脂肪干细胞在1—3代增值能力较强,以第1代细胞最强,10代以后增殖能力减弱,细胞生长进入平台期。经消化传代后的第1、3、10代细胞均经历24～48 h的潜伏期,此后为3～5 d对数生长期,逐渐进入生长平台期。14代以前具有活跃的增殖能力。(脂肪干细胞标志CD105,CD44呈阳性表达,而造血干细胞标志CD34阴性表达。结论:成功地建立了一种分离培养小鼠脂肪间充质干细胞的方法,其生长稳定、增殖较快,为以后进行相关的脂肪干细胞研究提供参考。(本文来源于《贵州省2008年血液学年会论文汇编》期刊2008-10-01）
李建伟[8]（2008）在《BrdU标记示踪脂肪成体干细胞成骨分化的实验研究》一文中研究指出因创伤、肿瘤切除、感染等原因引起的骨缺损和骨不连是骨科临床上常见的问题,也是治疗上比较棘手的问题。近些年来,随着组织工程技术的迅速兴起与发展,试图通过骨组织工程来解决上述问题已逐渐成为研究的热点。骨组织工程技术主要包括种子细胞、支架材料、细胞因子等要素。其中种子细胞的来源是骨组织工程中首先需要解决的问题,并且是保证骨组织工程能够进一步深入发展的前提。获取一种功能良好、来源充足的理想种子细胞已成为目前骨组织工程研究和发展的迫切任务之一。在本课题中,我们选择了一种新型来源的种子干细胞—脂肪成体干细胞。通过用BrdU标记脂肪成体干细胞,体外成骨诱导,然后植入体内,示踪其在体内的分化行为,从而探讨脂肪成体干细胞作为种子细胞在骨组织工程中广泛应用的可行性。目的:从兔脂肪组织中分离出脂肪成体干细胞(ADASCs),体外进行原代及传代培养后,用BrdU进行标记,观察BrdU对ADASCs生长增殖状况的影响,探索BrdU用于标记脂肪成体干细胞的可行性。如果可行,那用BrdU标记ADASCs,体外成骨方向诱导后,植入体内,示踪ADASCs在体内的分化行为,从而探讨ADASCs作为种子细胞在骨组织工程中广泛应用的可行性。方法:1. BrdU体外标记ADASCs从成年新西兰大白兔颈背部成功获取脂肪组织,剥离剪碎后用Ⅰ型胶原酶消化,得到ADASCs。分离培养ADASCs,第叁代ADASCs融合约50%时,加入终浓度25μmol/L的BrdU孵育48h,BrdU免疫组化染色,检测标记情况。然后通过显微镜下形态学观察、台盼蓝排斥试验、MTT试验,观测BrdU对ADASCs生长增殖状况的影响。2. BrdU标记示踪脂肪成体干细胞体内成骨分化在确定BrdU可以用于标记ADASCs的基础上,将BrdU标记过的ADASCs体外向成骨方向诱导分化培养,通过碱性磷酸酶Gomori改良钙钴法染色、茜素红钙结节染色、Ⅰ型胶原免疫组化染色鉴定ADASCs成骨分化情况。然后将BrdU标记后诱导分化培养2周的ADASCs与兔松质骨载体(rabbit cancellous bone,RCB)复合,并通过扫描电镜观察ADASCs在RCB上的生长情况,在成骨诱导培养基中共培养7天后,植入ADASCs所属的自体兔肌袋内。分别于4周、8周、12周后取材,切片HE染色观察新骨生成情况;切片BrdU免疫组化染色观察ADASCs在体内的分化及成骨情况,探讨ADASCs作为种子细胞在骨组织工程中广泛应用是否可行。结果:1.BrdU加入ADASCs中孵育48h后,通过细胞爬片BrdU免疫组化染色结果显示:BrdU可以成功标记ADASCs,标记率为(82.3±8.6)%。显微镜下观察BrdU标记后的ADASCs与未标记的ADASCs生长形态基本一致。台盼蓝排斥试验结果显示:BrdU标记后的ADASCs,活细胞率为(94.4±1.5)%;未标记的ADASCs,活细胞率为(95.2±1.2)%;两者并无显着性差异(P>0.05),说明BrdU对细胞的活性基本没有影响。MTT试验结果显示:BrdU标记后的ADASCs与未标记ADASCs在各时间点均无显着性差异(P>0.05),两者的生长增殖趋势基本一致。2.BrdU标记后的ADASCs向成骨方向诱导培养后,碱性磷酸酶Gomori改良钙钴法染色、茜素红钙结节染色、Ⅰ型胶原免疫组化染色结果均呈阳性,说明向成骨方向诱导成功。ADASCs与RCB复合后,扫描电镜观察ADASCs呈良好相容性生长。取材HE染色结果显示:4周无明显成骨,8周及12周有较明确的新骨生成;切片BrdU免疫组化染色结果显示:新骨生成处有染色阳性细胞,说明先前标记的ADASCs植入体内后可以形成新骨。结论:BrdU用于标记ADASCs是完全可行的,并且是比较理想的手段和方法,因此,BrdU完全可以用于标记示踪ADASCs植入体内后的分化行为。ADASCs体外成骨诱导后,植入体内能够继续维持向成骨方向分化,进一步形成新骨。这样就肯定和明确了ADASCs在体内的成骨能力,从而为ADASCs作为种子细胞在骨组织工程中的广泛应用提供了坚实的理论依据。(本文来源于《第四军医大学》期刊2008-04-01）
郎钧渊,王季石,方琴[9]（2007）在《脂肪成体干细胞的生物学特性及其对造血干/祖细胞体外扩增的支持作用》一文中研究指出目的：探讨脂肪成体干细胞(ADSC)的生物学特征及其对造血干/祖细胞体外扩增的支持作用。方法：用胶原酶消化脂肪组织,差速离心后, 贴壁培养分离脂肪来源贴壁细胞,细胞形态学观察；用流氏细胞仪分析其免疫表型特征；用 real time PCR 检测各种细胞因子的 mRNA 的表达；在成软骨细胞诱导培养条件下诱导细胞分化,并用 RT—PCR 方法检测分化后细胞原胶原Ⅱ型基因的表达。采用分阶段共培养法观察脂肪来源贴壁细胞对 CD34~+细胞体外扩增的支持作用。(本文来源于《第11次中国实验血液学会议论文汇编》期刊2007-11-01）
李建伟,胡蕴玉,魏义勇,彭华志,白建萍[10]（2007）在《BrdU体外标记脂肪成体干细胞的实验研究》一文中研究指出目的探讨5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)标记脂肪成体干细胞(adipose-derived adult stem cells,ADASCs)的可行性。方法将兔脂肪组织用I型胶原酶消化,分离培养ADASCs,第叁代ADASCs融合约50%时,加入终浓度25mol/L的BrdU孵育48h,BrdU免疫组化染色,检测标记情况。然后通过显微镜下形态学观察、台盼蓝排斥试验、MTT试验,观测BrdU对ADASCs生长增殖的影响。结果BrdU对ADASCs的生长增殖基本没有影响。结论BrdU标记ADASCs可行且较理想。μ(本文来源于《中国骨肿瘤骨病》期刊2007年05期）
脂肪成体干细胞论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的大鼠脂肪来源的成体干细胞(ADSC)转染人超极化激活环核苷酸门控离子通道-2(hHCN2)基因,观察其作为起搏细胞的可行性。方法取生长良好的ADSC转染hHCN2基因,通过RT-PCR、Western blot分析、免疫荧光技术检测hHCN2基因及蛋白的表达,用膜片钳技术检测细胞的电生理特征并记录其内向电流。将转染hHCN2基因的ADSC与心室肌细胞共培养,观察其对心室肌细胞自发性搏动的影响。结果 hHCN2基因修饰的大鼠ADSC能表达较强的hHCN2基因及蛋白,还能够产生超级化激活内向离子流。将其与心室肌细胞共培养,能使心室肌细胞的自发性搏动明显增快增强。结论将hHCN2基因转染ADSC能够使其分化为具有起搏功能的起搏样细胞,为进一步优化生物起搏器的研究提供了材料。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
脂肪成体干细胞论文参考文献
[1].耿鹏,宋红娟,刘亚玲,栾晓梅,黄辉.脂肪源成体干细胞移植治疗压力性尿失禁的实验研究[J].中华细胞与干细胞杂志(电子版).2015
[2].李勇,李宾公,李哲,张健,曾明辉.hHCN2基因转染的脂肪组织来源的成体干细胞可分化为起搏样细胞[J].细胞与分子免疫学杂志.2013
[3].李勇.利用脂肪来源成体干细胞构建生物起搏器的初步研究[D].南昌大学.2013
[4].陈强,杨在亮,张波,王正国,朱佩芳.阶段性胚胎抗原-1、OCT-4、颗粒酶B在脂肪成体干细胞中的表达[C].第七届全国创伤学术会议暨2009海峡两岸创伤医学论坛论文汇编.2009
[5].陈强,杨在亮,孙士锦,张波,王正国.阶段性胚胎抗原-1,OCT-4,颗粒酶B在脂肪成体干细胞中的表达[J].第四军医大学学报.2009
[6].李大鹏,王季石.脂肪成体干细胞的体外表达及对CD34~+造血干/祖细胞增殖、分化的影响[C].贵州省2008年血液学年会论文汇编.2008
[7].李大鹏,王季石.小鼠脂肪成体干细胞的体外培养[C].贵州省2008年血液学年会论文汇编.2008
[8].李建伟.BrdU标记示踪脂肪成体干细胞成骨分化的实验研究[D].第四军医大学.2008
[9].郎钧渊,王季石,方琴.脂肪成体干细胞的生物学特性及其对造血干/祖细胞体外扩增的支持作用[C].第11次中国实验血液学会议论文汇编.2007
[10].李建伟,胡蕴玉,魏义勇,彭华志,白建萍.BrdU体外标记脂肪成体干细胞的实验研究[J].中国骨肿瘤骨病.2007